Práctica 1. Factores Que Influyen en Las Separaciones Cromatográficas.

"r#ctica 1. $actores %e infl&en en las separaciones cro!ato'r#ficas.

Polaridad del disolvente

Disolvente

 Ac#Et

 Ac#Et1he2an  Ac#Et1he2an o (1)

 Ac#Et1he2an  Ac#Et1he2an o (-1')

Colorant e

Rf

Ro$o de %&' metilo  /afranina %&0 % Ro$o de %&* metilo  /afranina %&0 % Ro$o de %& metilo ' /afranina %&4 .

Volumen de muestra μ  Ancho l de banda (mm)  *

Concentración Concentración de Efecto de matriz la muestra μgm !

 Asimetr" a

Disolvent e

Rf



+o

,eC+

%&-% +a +aCl



*

.

/"

,e#3

%&- /acaros a

*

*

%

/"

3#

%&- 3#

 RESULTADOS ANÁLISIS DE RESULTADOS. 1.

las Efecto de la polaridad del disolvente: En las cromato5lacas 6 en los resultados de Rf7 se observa como el disolvente e$erce su efecto de 5olaridad ante los los anali analito tos7 s7 5or 5or cons consigu iguien iente7 te7 cuanto cuanto ma6or ma6or sea sea la 5olaridad del disolvente7 ma6or ser8 su ca5acidad 5ara desa desalo lo$a $arr 6 des5 des5la laza zarr un com5 com5ue uest sto o 5ola 5olarr de la su5erficie su5erficie estacionaria7 en cambio si el disolvente es menos m enos 5olar ser8 retenido 5or  la fase estacionaria& estacionaria& El acetato de etilo solo solo como disolvente disolvente e$erce 5olaridad 5olaridad de esta forma es 9uien alcanzo a eluir me$or7 sin embargo la mezcla acetato de etilo1he2ano etilo1he2ano (-1') al ser mas no 5olar 5olar 9ue 5olar tendr8 una ma6or ma6or retención 5or 5or la fase estacionaria 6 si elución ser8 menor&

2.

Efec Efecto to del del vol vol! !en en de de !est !estra ra apl aplic icad adaa1 En este e25erimento al no cambiar el disolvente la 5olaridad se mantiene contante 6 la elución ser8 igual en los tres 5unto 5untos s de a5lic a5licac ación ión del anal analito ito77 sin embarg embargo o el volum volumen en de cada cada 5unto 5unto ser8 ser8 diferente7 de esta forma si el volumen de la muestra es grande7 la su5erficie 9ue

#tros analitos

tendr8 interacción con la fase estacionaria ser8 m8s grande 6 al ir  disminu6endo el volumen la su5erficie de interracion se ira haciendo m8s 5e9ue:a&

(.

Efecto de la concentraci)n de la !estra: En la tabla7 as" como en la cromato5laca del e25erimento - se observa 9ue la mancha circular 5ertenece a la concentración de  mgm!7 las manchas coleadas del centro 6 de la derecha 5ertenecen a las concentraciones de . 6 mgm! res5ectivamente& Discutiendo 9ue a ma6or concentración de la muestra7 ma6or asimetr"a en la mancha7 esto es debido a 9ue a ma6or concentración de las mol;culas7 ;stas se 9uedaran retenidas en la fase estacionaria de manera desigual observ8ndose el
*. Efecto de !atri+ a, Efecto de la natrale+a del disolvente de la !estra: En este e25erimento se observa 9ue la mancha de la iz9uierda fue de color ro$o intenso7 la mancha de en medio fue de color ro$o 6 la de la derecha de color ro$o claro7 9ue corres5onden a las muestras de ro$o de metilo disueltas en ,eC+7 metanol 6 agua res5ectivamente7 esto es debido a 9ue el acetonitrilo es menos 5olar 9ue los otros dos disolventes haciendo 9ue este no interacciones mu6 bien con la fase móvil observ8ndose un color intenso7 como el agua es el disolvente m8s 5olar de los tres7 este interact>a con la fase móvil observ8ndose una mancha de color claro&

-, "resencia de otros analitos:  Al haber otros analitos en la muestra se 5resenta una
Conclusiones •

•

• •

Cuanto ma6or sea la 5olaridad del disolvente7 ma6or ser8 su ca5acidad 5ara desalo$ar 6 des5lazar un com5uesto 5olar de la su5erficie estacionaria7 !a anchura de la banda es directamente 5ro5orcional al volumen 9ue se administró& a ma6or concentración de la muestra7 ma6or asimetr"a en la mancha la interacción fase estacionaria@analito de5ende de la 5olaridad del analito

•

se 5resenta com5etencia en la alusión 5or la 5resencia de otros analitos

UESTIONARIO. a) Defina brevemente los siguientes t;rminos1

Tipos de interacciones !oleclares: nteracciones 9ue ha6 entre el analito con la fase móvil 6 fase estacionaria& Estas 5ueden ser1 5uentes de hidrógeno7 fuerzas de dis5ersión de !ondon7 fuerzas de Van der Baals7 etc&

Resolci)n: /e5aración entre dos bandas cromatogr8ficas& oeficiente de partici)n: Constante de e9uilibrio 9ue describe la distribución de un soluto entre dos fases&

Asi!etr/a de pico: Es la 5lasmación de la desviación del com5ortamiento de un soluto res5ecto al modelo teórico&

Efecto de !atri+: consiste en una disminución o aumento de la res5uesta instrumental del analito debido a la 5resencia de otros com5onentes& b) A5licaciones de la cromatograf"a en el an8lisis ambiental • •

 An8lisis de 5esticidas 5or cromatograf"a de gases detección 6o cuantificación de substancias diferentes en una diversidad de matrices& Estos an8lisis 5ueden ser hidrocarburos arom8ticos 5olinucleares (PA3s)7 com5uestos clorados mezclados en el aire7 agua 6 tierra&

c) ,ecanismos de se5aración en cromatograf"a Separaci)n por adsorci)n: diferente afinidad de los com5onentes de la muestra sobre la su5erficie de un sólido activo& (com5onentes con 5olaridad ba$a o media& Separaci)n por reparto:   diferente solubilidad en fases estacionaria 6 móvil (como5onentes con 5olaridad media o alta) Separaci)n por e0clsi)n: a ma6or masa molecular menor tiem5o de elución& Este m;todo 5ermite se5arar 5or tama:os moleculares siendo 5osible obtener incluso distribuciones de masas moleculares a distintos tiem5os de elución& Separaci)n por interca!-io i)nico: !as es5ecies cargadas negativamente se unen a la matriz sólida cargada 5ositivamente 6 son retenidas7 mientras 9ue las es5ecies 5ositivas son rechazadas& De esta manera en función de la carga las es5ecies se elu6en a distintos tiem5os dando lugar a la corres5ondiente se5aración& •

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ILIORA$3A o9u; Ricard& !a /electividad en An8lisis u"mico& ru5o de uimiometr"a 6 Cualimetr"a& Fniversidad Rovira i Virgili& %%4& P5 G Valc8rcel Cases ,7 ómez 3ens A& ?;cnicas Anal"ticas de /e5aración& Editorial Revert;& Es5a:a& 044& P5 -.'& Durst&h7arHel g&7 <uimica #rganica E25erimental=& Editorial Reverte& Es5a:a& %%'& P5 4htt51III&ibt&unam&m2com5uto5dfsmetcromatografiaJdeJgases&5df