Hari, Tanggal Tanggal
: Jumat, 14 Juni 2014
Dosen
: Nurlela, S.Si Adawiyah, S.Si
Asisten
: uady Hanie! "ia #ratiwi
PENGARUH KONSENTRASI KONSENTR ASI SUBSTRAT TERHADAP AKTIVITAS AKTIVITAS ENZIM
I.
Dasar Teori
Terda$at hu%ungan &uantitati! antara &onsentrasi su%strat dengan &e'e$atan rea&si en(im. #ada &onsentrasi &onsentrasi en(im yang teta$, $ening&atan $ening&atan &onsentrasi &onsentrasi su%strat su%strat a&an menai&an &e'e$atan rea&si en(im sam$ai men'a$ai &e'e$atan ma&simum )*ma&s+ yang teta$. Dengan mening&atnya S- ma&a &'e$atan rea&sia&an sema&in mening&at sam$ai &eadaan en(im telah enuh oleh su%strat. /onsentrasi su%strat S- $ada saat en(im men'a$ai setengah &e'e$atan ma&simumnya dise%ut teta$an i'haelisenten. /e'e$atan $em%entu&an S : &1 - S- 3 & 1 )t- S-+ SSedang&an &e'e$atan $enguraian S : & 1 S- 5 & 2 SDalam Dalam &eadaa &eadaan n setim%a setim%ang, ng, &eti&a &eti&a &e'e$a &e'e$atan tan $em%en $em%entu& tu&an an S sama sama dengan dengan &e'e$at &e'e$atan an $enguraiannya, ma&a : & 1 )t- S-+ S- 3 & 1 S- 5 & 2 S& 1 t- S- & 1 S- S- 3 )& 1 5 & 2+ S& 1 t- S- 3 )& 1 S- 5 & 1 5 & 2+ S-
[ ES ] =
[ ES ] =
k 1 [ Et ][ S ] k 1 [ S ] + k 1 + k 2
[ Et ][ S ] [ S ] +( k 1 +k 2 )/ k 1
Ji&a *o 3 &2 S-, ma&a : Vo=
Vo=
k 2 [ Et ][ S ]
[ S ] +( k 1 + k 2 )/ k 1 k 2 [ Et ][ S ]
( KM +[ S ] )
/m adalah &eteta$an i'haelisenten, yang %esarnya
Dengan mende!inisi&an *ma&s se%agai
k 2 [ Et ]
( k 1 + k 2 )/ k 1
, ma&a dida$at $ersamaan i'haelis
enten: Vo=
Ji&a
Vmaks [ S ]
[ S ] + KM ..................................................................................................................)1+
Vo=
Vmaks [ S ]
[ S ] + KM
1
ma&a
Vo
=
[ S ] + KM [S] = KM + Vmaks [ S ] Vmaks [ S ] Vmaks [ S ]
....................................)2+
II.
III.
Tujuan Percobaan engetahui !a&tor yang memengaruhi a&ti!itas en(im enentu&an nilai &m dan *ma&s Meo!e"o#i a. A"a !an Ba$an
Alat yang diguna&an adalah ta%ung rea&si, gelas &imia, 'orong, ra& ta%ung rea&si, water%ath dan $i$et u&ur.
6ahan yang diguna&an adalah larutan amilum 27, en(im amilase, larutan iodium dan $erea&si %enedi't. b. %ara &erja m$at ta%ung rea&si disia$&an. /emudian diisi masingmasing ta%ung dengan
larutan amilum 1ml, 2ml, 4ml dan 8ml. "alu, &e dalam masingmasing ta%ung, ditam%ah&an 1ml en(im amilase. Di'am$ur&an dengan %ai&, in&u%asi di dalam water %ath 9 0;. Setelah itu ui masingmasing ta%ung dengan $erea&si iodium setia$ 9 menit. Tentu&an wa&tu yang di%utuh&an sam$ai warna %iru tida& tam$a& )titi& a&romati&+. Tentu&an nilai *ma&s dan /m dari hasil $er'o%aan.
IV.
Hasi" !an Pe'ba$asan
Ta%ung
"arutan amilum
/ineti&a rea&si Titi& A&romati&
)det+ 1 1ml 80 2 2ml 10> 9 4ml 210 4 8ml >=> Ta%el 1. Hasil $engamatan titi& a&romatis en(im Per$iun#an Pen#enceran a'i"u' (aruan a'i"u' )'" *a . Na 3 *% . N% 1ml . 27 3 8 . N N 3 0,99 7 (aruan a'i"u' *'" *a . Na 3 *% . N% 2ml . 27 3 8 . N N 3 0,8 7 (aruan a'i"u' +'" *a . Na 3 *% . N% 4ml . 27 3 8 . N N 3 1,99 7 (aruan a'i"u' ,'" *a . Na 3 *% . N% 8ml . 27 3 8 . N N 3 27
1<S-
1<*
9,09 1,> 0,> 0,>
1=1,= 1>8, 1>,? 2?2,>
)-S/ (aruan a'i"u' )'" 0 1<S3 1<0,99 7 3 9,09 7 (aruan a'i"u' *'" 0 1<S3 1<0,8 7 3 1,> 7 (aruan a'i"u' +'" 0 1<S3 1<0,8 7 3 0,> 7 (aruan a'i"u' ,'" 0 1<S3 1<2 7 3 0,> 7 )-V/ (aruan a'i"u' )'" 1<* 3 t<&onsentrasi 1<* 3 80<0,99 3 1=1,= (aruan a'i"u' *'" 1<* 3 t<&onsentrasi 1<* 3 10><0,8 3 1>8, (aruan a'i"u' +'" 1<* 3 t<&onsentrasi 1<* 3 210<1,99 3 1>,? (aruan a'i"u' ,'" 1<* 3 t<&onsentrasi 1<* 3 >=><2 3 2?2,>
•
Gra1i& Hubun#an )-S/ !en#an )-V/
Grafk Hubungan 1/[S] Dengan 1/[V] 350 300 250 200
f(x) = - 22.97x + 230.42 R² = 0.16
1/[V] 150 100 50 0 0
0.5
1
1.5
2
1/[S]
Men#$iun# ni"ai K' !an V'a&s
@ 3 22,? 5 290,4 @ 3
1 Vo
a
=
b=
Km Vmaks
.
1
[S ]
1 Vmaks
230,4
=
1 Vmaks
Vmaks =0,0043
a=
Km Vmaks
−22,97 =
Km
0,0043
5 %
+
1 Vmaks
2.5
3
3.5
Km=−0,098
Pe'ba$asan
#er'o%aan &ali ini adalah $er'o%aan $engaruh &onsentrasi su%strat terhada$ a&tiBitas en(im. n(im yang diguna&an adalah en(im amilase yang ada $ada saliBa. Tuuan dari $er'o%aan ini adalah mengetahui !a&tor!a&tor yang mem$engaruhi a&tiBitas en(im dan menentu&an nilai *ma&s dan /m. #er'o%aan ini mengguna&an amilum 27 se%agai su%strat dengan umlah yang %er%eda%eda. 6erdasar&an $er'o%aan, sema&in tinggi &onsentrasinya ma&a sema&in tinggi titi& a&romati&nya. Sehingga lau rea&sinya sema&in %esar. #ada &onsentrasi en(im yang teta$, $ening&atan &onsentrasi su%strat a&an menai&an &e'e$atan rea&si en(im sam$ai men'a$ai &e'e$atan ma&simum )*ma&s+ yang teta$. Dengan mening&atnya S- ma&a &e'e$atan rea&si a&an sema&in mening&at sam$ai &eadaan en(im telah enuh oleh su%strat. Dari $er'o%aan terse%ut, da$at di%uat gra!i& hu%ungan antara 1<Sdengan 1<*. $ersamaan yang di$eroleh adalah y 3 22,? 5 290,4. Dari $ersamaan terse%ut, *ma&s adalah 0,0049 dan /m adalah 0,0?=. #er'o%aan ini mem%u&ti&an %ahwa &onsentrasi su%strat mem$engaruhi a&tiBitas en(im amilase. V.
Kesi'2u"an
6erdasar&an hasil $er'o%aan da$at disim$ul&an %ahwa : 1. a&tor!a&tor yang mem$engaruhi a&tiBitas en(im adalah &onsentrasi su%strat serta &onsentrasi en(im, suasana $H dan shuhu yang o$timum, dan &e%eradaan
VI.
inhi%itor. 2. Nilai *ma&s dan /m %erturutturut adalah 0,0049 dan 0,0?= . Da1ar Pusa&a o, #.. )1??1+. Food Enzymology Vol 2. lseBier A$$lied S'ien'e. "ondon. Caman, #. /.6. Sherrington. )1??4+. Ilmu Pangan, Pengantar Ilmu Pangan, Nutrisi dan Mikrobiologi. EniBersitas Cadah ada $ress. @ogya&arta. Sandra, Hermanto.2010. buku ajar biokimia. EFN Syari! Hidayatullah : Ja&arta
