Pemeriksaan Penunjang sistem kardiovaskulerDeskripsi lengkap
gratis
Deskripsi lengkap
pemeriksaan paruFull description
Deskripsi lengkap
pemeriksaan elisaFull description
RFFull description
Deskripsi lengkap
lpDeskripsi lengkap
adawsDeskripsi lengkap
pemeriksaan hemostatisDeskripsi lengkap
pemeriksaaan endoparasit telur
Pemeriksaan GinekologiDeskripsi lengkap
PEMERIKSAAN EKUITASDeskripsi lengkap
Deskripsi lengkap
Full description
Pemeriksaan GeneXpert
GeneXp GeneXpert ert MTB/RI MTB/RIF F adalah adalah suatu suatu alat uji yang yang menggu menggunak nakan an catrid catridge ge berdasarkan Nucleic Acid Amplification Test Test (NAAT) secara automatis untuk mendeteksi kasus TB dan resisten resistensi si riam!i riam!isin sin"" cocok cocok untuk untuk negara negara endemi endemis" s" (#$%" (#$%" &'a) &'a) dan da!at da!at dilaku dilakukan kan *ala *alau! u!un un sam!e sam!ell s!ut s!utum um hany hanyaa ml ($ake ($akeem em et al" &' &')+ )+ ,ji ,ji konkon-en ensi sion onal al untu untuk k mendiagnosa TB resisten %AT yang mengandalkan kultur bakteri dan uji ke!ekaan obat yang telah telah lama lama digu diguna naka kan n meru meru!a !aka kan n !ros !roses es yang lama lama dan dan tida tidak k !rak !raktis tis++ .ada .ada saat saat ada ada kemung kemungkin kinan an !asien !asien menerim menerimaa !engob !engobata atan n yang yang tidak tidak te!at" te!at" strain strain M. tuberculosis yang resisten obat da!at menyebar dan resistensi da!at menjadi lebih luas+ Meski! Meski!un un metode metode moleku molekuler ler yang yang telah telah ada sebelum sebelumnya nya untuk untuk mendia mendiagno gnosa sa TB resisten %AT" teta!i alat uji yang ada se!erti .R kon-ensional atau 0.A" memakai metode yang terlalu rumit untuk selalu dilakukan di negara berkembang+ 1am!el yang selalu di!roses dan 2NA yang diekst diekstrak raksi si menamb menambah ah kesuli kesulitan tan untuk untuk dilaku dilakukan kan karena karena sumber sumber daya daya manusia manusia kurang+ kurang+ GeneXpert " suatu !erangkat !latorm" yang diluncurkan oleh e!heid !ada tahun &''3 dan menyederhanakan uji molekuler yang terintegrasi dan automatis dengan !roses (!ersia!an sam!el" am!liikasi" dan deteksi) berdasarkan real real time time .R .R ,ji ,ji Xpert MTB/RIF MTB/RIF dikembangkan dikembangkan oleh Foundation for Inovative New Diagnostic (FIN2)" he!eid" Universit of Medicine and Dentistr of New !erse yang di!im!in oleh 2a-id Alland dengan !embiayaan dari National Institutes of "ealt# (NI$ (NI$)) Ameri Amerika ka 1erik 1erikat at dan dan t#e $ill and Melinda Gates Foundation+ Foundation+ Gene GeneXp Xper ertt sebag sebagai ai alat alat uji uji diag diagno nosti stik k TB dan dan resis resisten tensi si riam!isin terus mengalami !erkembangan diantaranya yaitu4 •
Mei &''54 FIN2 berkerjasama dengan he!eid untuk mengembangkan suatu alat uji diagnostik ce!at serta !raktis dilakukan yang da!at mendeteksi M. mendeteksi M. tuberculosis dan resistensi riam!isin dari sam!el s!utum+
•
A!ril &''64 uji ce!at baru" Xpert MTB/RIF" diterima %onformite &uropeene In 'itro Diagnostic (7 I82) mar(ing.
•
Mei &''64 berlangsungnya !enelitian yang dilakukan oleh FIN2+
•
1e!tember &''4 New &ngland !ournal of Medicine mem!ublikasi data9 &)pert Group merekomendasikan ke!ada #$% berdasarkan bukti ilmiah9 *"+,s -trategic and Tec#nical Advisor Group untuk TB melakukan !enelaahan bukti lebih lanjut dan membuat rekomendasi kebijakan !olitik+
2esember &'&4 1ejak a*al #$% merekomendasikan Xpert MTB/RIF" :: negara telah tersedia 655 alat GeneXpert dan +;6+6:' catridge Xpert MTB/RIF !ada sektor !ublik dengan harga yang lebih murah+ Teknologi yang didukung oleh #$% ini" !ada '
3'& mesin GeneXpert (yang terdiri dari := modul mesin) telah digunakan !ada ;; negara dari 3= negara yang memenuhi syarat untuk mem!eroleh mesin dan catridge dengan harga yang lebih murah *orld "ealt# +rganiation merekomendasikan !emakaian GeneXpert (e!heid) untuk menge-aluasi !asien tersangka TB M2R dan !asien dengan BTA negati Tuberkulosis !aru BTA negati dihubungkan dengan rendahnya hasil !engobatan" termasuk kematian yang disebabkan lamanya diagnosa atau tidak terdiagnosa Teknologi baru se!erti GeneXpert memberikan keuntungan untuk diagnosa a*al TB dan !enggunaan sistem diagnostik ini da!at meningkatkan diagnosa !asti secara ce!at untuk semua !asien dengan TB !aru 1istem GeneXpert terdiri dari alat GeneXpert " kom!uter dan disposible catridge Alat ini membersihkan" mengkonsentrasi dan mengam!liikasi (dengan ce!at" real time .R) dan mengidentiikasi target asam nukleat dalam gen M. tuberculosis dan memberikan hasil dari sam!el s!utum yang tidak !erlu di!roses hanya dalam *aktu kurang lebih & jam" dengan
minimal !enggunaan tangan+ GeneXpert MTB/RIF menggunakan catridge yang berisi semua elemen yang dibutuhkan untuk reaksi" termasuk reagen lop#ilied " li/uid buffer serta was# dan bekerja dengan cara menangka! bakteri setelah !roses !encucian kemudian 2NA bebas dan masuk ke c#amber !embuangan)+ GeneXpert MTB/RIF dirancang dengan sistem tertutu! untuk mengurangi atau mengeliminasi resiko kontaminasi am!likon+ 1ekali tertutu!" catridge jangan !ernah dibuka kembali oleh karena itu sebaiknya tidak membuka catridge jika belum sia! untuk memulai !emeriksaan GeneXpert MTB/RIF+ Masing>masing instrumen GeneXpert berisi 3 modul yang da!at diakses secara indi-idu+ ,kuran instrumen yang lain berisi antara >:& modul+ Masing>masing modul terdiri dari jarum suntik untuk mengambil atau mengeluarkan cairan" sebuah ultrasonik untuk melisiskan sel" sebuah t#ermoccler " dan optical sign untuk mendeteksi kom!onen+ -ingle use catridge berisi a) c#amber untuk menyim!an sam!el dan reagen" b) valve bod berisi sebuah plunger dan sringe barrel " c) sebuah sistem rotar valve untuk mengendalikan !ergerakan diantara c#amber " d) sebuah ruang untuk menangka!" menyatukan" mencuci" dan melisis sel" e) reagen lop#ilied real0time .R dan buffer !encuci dan ) tabung reaksi .R yang terintegrasi yang secara automatis diisi instrument ,ji GeneXpert MTB/RIF berdasarkan !rinsi! multi!leks" semi>nested /uantitative real0time .R dengan am!liikasi gen target rpo$ dan untuk meningkatkan sensiti-itas" GeneXpert MTB/RIF menggunakan molecular beacon dengan target gen rpo$. GeneXpert mendeteksi ; b! core region dari gen rpo$ yang dikode oleh lokasi akti en?im+ %ore region rpo$ terletak di sam!ing M. tuberculosis>urutan 2NA s!esiik+ %leh karena itu" sangat memungkinkan untuk mendeteksi M. tuberculosis dan resistensi riam!isin secara bersamaan dengan menggunakan teknologi .R+ Molecular beacon meru!akan urutan oligonukleotida yang berisi urutan probe yang terda!at diantara dua tangkai urutan 2NA+ Molecular beacon digunakan untuk mendeteksi keberadaan M. tuberculosis dan mendiagnosa resistensi riam!isin sebagai tanda !engganti untuk TB M2R secara bersamaan+ Molecular beacon menggunakan fluorop#or dan /uenc#er untuk mendeteksi hibridisasi !ada masing>masing
dari lima region target am!liikasi gen 1alah satu dari molecular beacon probes dibuat untuk mendeteksi 2NA !ada sam!el kontrol $acillus globigi" suatu organisme tanah yang bers!ora" bertindak sebagai !enguji kualitas untuk !erangka! bakteri" lisis bakteri" ekstraksi 2NA" am!liikasi dan deteksi probe 0ima molecular beacon lainnya dibuat untuk hibridisasi !ada region core rpo$>am!likon+ 0ima *arna berbeda yang digunakan !ada hibridisasi probe" masing> masing menutu! se/uence asam nukleat secara ter!isah diantara am!liikasi gen rpo$ (1teingart et al" &')+ Menurut .iatek dalam N*okoye et al (&'3) probe screen riam!isin adalah untuk mutasi di core region rpo$+ Molecular beacon dibuat hanya untuk hibridisasi gen rpo$ se/uences yang cocok dengan M. tuberculosis wild tpe+
ara !emakaian geneeD!ert .emakaian GeneXpert secara manual sangat mudah4 buffer ditambahkan !ada sam!el s!utum dengan !erbandingan -olume yang telah ditentukan (&4)" masukkan sam!el ke dalam catridge c#amber kemudian catridge dimasukkan ke dalam GeneXpert + 1etelah itu" semua !roses yang terjadi adalah secara automatis4 GeneXpert !ada a*alnya menangka! organisme M.
tuberculosis dari sam!el s!utum !ada ilter membran+ Inhibitor mencuci sel organisme yang ditangka! dengan buffer kemudian dilisiskan dengan sumber energi ultrasonik dan 2NA yang terle!as dielusi (dialirkan) melalui saringan membran+ 1olusi 2NA akhirnya dicam!ur dengan reagen .R kering kemudian di!indahkan ke dalam tabung .R untuk real0time .R dan dideteksi+ $asilnya da!at da!at diketahui dalam *aktu kurang lebih & jam+ Adanya semua lima sinyal luoresensi menunjukkan riam!isin sensiti terhada! 2NA M. tuberculosis+ E= sinyal luoresensi diindikasikan bah*a M. tuberculosis resisten riam!isin+
dan
sensiti-itasnya sama dengan kultur media !adat $al ini dibuktikan !ada saat sesudah dilakukan !enyem!urnaan !ada Xpert kemudian dilakukan -alidasi klinis !ada !asien di daerah Arika 1elatan" India" .eru"
,ji GeneXpert MTB/RIF meru!akan uji diagnostik TB yang memiliki banyak kelebihan diantaranya4 mudah di!akai" mengurangi !emakaian biosafet cabinet " hasil di!eroleh lebih ce!at yaitu kurang lebih & jam" dan tidak memerlukan tenaga ahli khusus untuk melakukannya+ Teta!i GeneXpert MTB/RIF juga memiliki keterbatasan" diantaranya yaitu4 adanya batasan masa !akai catridge" suhu !engo!erasian/ kelembaban diba*ah '' sehingga di negara tro!is membutuhkan !enyejuk udara yang teta! menyala" biaya mahal" ketersediaan aliran listrik" dan memerlukan !era*atan tahunan serta kalibrasi tia! mesin+ 1etelah seseorang didiagnosis sebagai TB M2R maka harus segera dilakukan !elacakan kontak erat !asien+ 2einisi kontak erat adalah orang yang tinggal dalam satu ruangan selama bebera!a jam sehari dengan !asien TB M2R" misalnya anggota keluarga" teman kerja dalam ruangan yang sama" dan lain>lain+ Berdasarkan !engalaman" kontak erat !asien TB M2R yang kemudian sakit TB sebagian besar juga sebagai !asien TB M2R+ Resistensi terhada! obat ini biasanya tidak terdeteksi karena kultur dan uji ke!ekaan obat tidak rutin dilakukan !ada klinik TB+ .emakaian %AT lini !ertama untuk !engobatan !ada !asien meningkatkan resiko resistensi dida!at" kambuh dan !engobatan gagal+
