p2&3 Penetapan Waktu Pengambilan Cuplikan Biofar Kel 1

LAPORAN RESMI PRAKTIKUM BIOFARMASETKA PERCOBAAN 2 & 3 PENETAPAN WAKTU PENGAMBILAN CUPLIKAN, PEMILIHAN DOSIS DAN ASUMSI MODEL KOMPARTEMEN

Kelompok H/1

1. Amelia Jovita

1041611207

2. Mujaidah Asma K

1041611182

3. Dian Eka Novita S

1041411045

4. Diana Nirmala P

1041111046

5. Dyah Permatasari

1041511052

PROGRAM STUDI S1 FARMASI SEKOLAH TINGGI ILMU FARMASI "YAYASAN PHARMASI" SEMARANG 2017

PERCOBAAN II PENETAPAN WAKTU PENGAMBILAN CUPLIKAN , PEMILIHAN DOSIS DAN ASUMSI MODEL KOMPARTEMEN

I. TUJUAN PRAKTIKUM

1. Mampu memperkirakan model kompartemen kinetika obat berdasarkan kurva semi logartitmik kadar obat dalam darah terhadap waktu. 2. Mampu menetapkan jadwal dan jumlah pencuplikan serta lamanya sampling untuk pengukuran parameter farmakokinetika berdasarkan model kompartemen yang telah ditetapkan. 3. Mampu menggunakan dosis obat yang tepat untuk subyek uji.

II. DASAR TEORI Penetapan waktu pengambilan sampel merupakan tahapan yang penting, dimana harus diketahui setelah memahami cara analisa obat dalam tubuh. Setelah memahami analisis obat dalam cairan tubuh dan dikuti dengan perkiraan model kompartemen. Kedua factor ini sangat berhubungan sehingga kesalahan waktu pengambilan cuplikan dapat menyebabkan kesalahan dalam penentuan model kompartemen. (Shargel, L and Yu.,1998) Frekuensi atau banyaknya pengambilan cuplikan, akan berhubungan dengan asumsi model kompartemen. Jika kinetika obat mengikuti model dua kompartemen terbuka, maka disarankan banyak pengambilan cuplikannya paling tidak 3 kali tiap absorpsi, 3 kali sekitar puncak, pun cak, 3 kali fase distribusi, dan 3 kali fase eliminasi. Hal ini diperlukan untuk mendapatkan data kadar obat dalam darah vs waktu yang dibutuhkan untuk mengetahui evaluasi parameter farmakokinetika obat. Pengambilan cuplikan pada tahap distribusi tidak diperlukan, apabila kinetika obat mengikuti model satu kompartemen terbuka.

(Ritschell, W. A, 1980)

Pemilihan lama dan banyaknya waktu pengambilan cuplikan dilakukan dengan cuplikan hayati yaitu darah dan urine. Dalam penelitian farmakokinetika dapat pula dikerjakan dengan cuplikan hayati lainnya seperti saliva. Pemilihan lama dan banyaknya waktu pengambilan cuplikan darah dan urin, urin, sesuai sesuai dengan parameter farmakokinetika yang digunakan. cuplikan darah yang digunakan dalam pengambilan cuplikan disarankan berlangsung selama 3 — 3 — 5 5 kali harga waktu paruh eliminasi obat yang diuji. Dan 7 — 7 — 10 10 kali t1/2 obat. (Ritschell, W. A, 1980) Waktu pengambilan cuplikan optimal perlu diperhatikan, karena dapat mempengaruhi kesahihan penetapan asumsi model kompartemennya. Hal ini dapat dikerjakan dengan penelitian pendahuluan atau orientasi.

(D. Argenio DZ.,1981).

P enetap netapan an waktu waktu sampli sampling ng j i ka dat data a par param ame eter ter farma armakkokinet oki netii ka be belum ada ada : 1. Percobaan pendahuluan  cari senyawa derivatnya. 2. Waktu sampling dicari setelah pemberian secara intra vena. 3. Kadar obat dalam plasma sebaiknya dimonitor sampai 3 jam setelah pemberian. 4. Pengambilan cuplikan 4-6 titik pada jam-jam pertama setelah pemberian obat. (Kaplan, S.A.,1973) Pemilihan pengambilan pada darah dilakukan, karena darah merupakan tempat yang paling cepat dicapai obat dan paling logis bagi penetapan kadar obat di dalam tubuh. Paling logis karena darah yang mengambil obat dari tempat absorpsi, mendistribusikan ke jaringan yang dituju, serta menghantarkan ke organ eliminasi. Kedua, bagi kebanyakan obat, bentuk obat tak berubah merupakan senyawa yang memiliki aktivitas farmakologik. Oleh karena itu, penetapan kadar pada cuplikan darah akan memberikan suatu indikasi langsung berapa kadarnya yang mencap ai sirkulasi sistemik. Jika tidak ada metode penetapan kadar obat dalam darah yang tersedia, atau jika level darah pada pemberian dosis normal sangat rendah, maka penetapan kadar obat pada cuplikan urin merupakan alternatifnya. Sebenarnya penggunaan cuplikan urin dapat lebih baik dari pada darah, karena obat diekskresikan ke dalam urin secara sempurna dalam bentuk tak berubah. Karena selain data urin mengukur langsung jumlah obat yang berada di dalam badan, juga karena variabilitas clearance. Keterbatasan penggunaan cuplikan urin di antaranya karena sulitnya pengosongan kandung

kencing, kemungkinan terjadinya dekomposisi obat selama penyimpanan, dan kemungkinan terhidrolisnya konjugat metabolit yang tidak stabil dalam urin, sehingga dapat mempengaruhi jumlah total obat dalam bentuk tak berubah yang dieksresikan pada waktu tak terhingga. Akibatnya dapat terjadi kesalahan penafsiran terhadap harga ketersediaan hayati obat yang diteliti.

P emili mil i han tak takaran aran dosi dosiss dan dan be bentuk sedi sedi aan aan obat obat:: Pemilihan takaran dosis yang akan diberikan pada hewan uji melalui uji pra klinik, dapat didasarkan pada data harga LD50 senyawa yang akan diuji. Perlu diingat dalam mempergunakan data harga LD50 tersebut, yakni cara pemberian senyawa selama penelitian toksisitas akutnya. Jika dalam penelitian toksisitas akut, senyawa diberikan dalam bentuk larutan, maka takaran dosis yang dipilih memiliki batas keamanan yang sesuai / dipercaya. Sedang jika senyawa atau obat diberikan dalam bentuk sediaan padat atau suspensi, serta telah diketahui memiliki harga LD50 yang sangat tinggi, maka batas keamanan yang besar tidak diperlukan. (Kaplan, S.A.,1973) Farmakokinetika adalah ilmu yang mempelajari penyerapan, penyaluran dan pengurangan obat. Deskripsi tentang penyaluran dan pengurangan obat sangat penting untuk merubah permintaan dosis pada individu dan kelompok pasien. Pada fase farmakokinetika, obat mengalami proses ADME yaitu absorpsi, distribusi, biotransformasi (metabolisme) dan ekskresi yang berjalan secara stimulant langsung atau tak langsung meliputi perjalanan suatu obat melintasi sel membrane (Shargel & Yu, 1988). Pengetahuan farmakokinetika berguna dalam berbagai bidang farmasi dan kedokteran, seperti untuk bidang farmakologi. Pertama kali, dengan penelitian farmakokinetika dapat dibantu diterangkan mekanisme kerja suatu obat dalam tubuh, khususnya untuk mengetahui senyawa yang mana yang sebenarnya bekerja dalam tubuh; apakah senyawa asalnya, metabolitnya atau kedua-duanya. Jika efek obat dapat dinilai secara kuantitatif, data kinetika obat dalam tubuh sangat penting artinya untuk menentukan hubungan antara kadar/jumlah obat dalam tubuh dengan intensitas efek yang ditimbulkannya. Dengan demikian daerah kerja efektif obat (therapeutic window) dapat ditentukan farmasetika, farmasi klinik, toksikologi dan kimia medisinal. Obat berada dalam suatu keadaan dinamik dalam tubuh. Dalam suatu sistem biologik peristiwa-peristiwa yang dialami obat sering

terjadi secara serentak. Dalam menggambarkan sistem biologik yang kompleks tersebut, dibuat penyederhanaan anggapan mengenai pergerakan pergera kan obat itu. Model farmakokinetik berguna untuk : 1. Memperkirakan kadar obat dalam plasma, jaringan dan urine pada berbagai pengaturan dosis 2. Menghitung pengaturan dosis optimum untuk tiap penderita secara individual 3. Memperkirakan kemungkinan akumulasi obat dngan aktivitas farmakologi atau metabolit – metabolit metabolit 4. Menghubungakan kemungkinan konsentrasi obat dengan aktivitas farmakologik atau toksikologik 5. Menilai perubahan laju atau tingkat availabilitas antar formulasi 6. Menggambarkan perubahan faal atau penyakit yang mempengaruhi absorbsi, distribusi dan eliminasi (Shargel & Yu, 1988)

Pada model dua kompartemen, tubuh dianggap terdiri atas dua kompartemen yaitu kompartemen sentral dan kompartemen perifer. Kompartemen sentral meliputi darah dan berbagai jaringan yang banyak dialiri darah seperti jantung, paru, hati, ginjal dan kelenjar kelenjar endokrin. Obat tersebar dan mencapai kesetimbangan dengan cepat dalam kompartemen ini. Kompartemen perifer adalah berbagai jaringan yang kurang dialiri darah misalnya otot, kulit, dan jaringan lemak sehingga obat lambat masuk kedalamnya. Model dua kompartemen ini pada prinsipnya sama dengan model satu kompartemen, bedanya terdapat dalam proses distribusi karena adanya kompartemen perifer; eliminasi tetap dari kompartemen sentral (Oktavia, 2009). Model Farmakokinetik merupakan suatu hubungan matematik yang menggambarkan perubahan konsentrasi terhadap waktu dalam sistem yang diperiksa. Metode analisis kompartemental digunakan untuk memperkirakan dan menentukan secara kuantitatif apa yang terjadi terhadap obat sebagai fungsi waktu dari saat diberikan sampai waktu dimana obat tersebut sudah tidak ada lagi di dalam tubuh. Model merupakan suatu system yang terbuka jika obat dapat dieliminasi dari system tersebut.

(Mutschler,1991).

Parameter yang biasa digunakan dalam farmakokinetik : 1. Ka (kecepatan absorpsi) 2. Vd (volume distribusi) 3. Cl (clearance/klirens) 4. T1/2 eliminasi (waktu paruh eliminasi) 5. F el (fraksi eliminasi)

Jumlah parameter yang diperlukan untuk menggambarkan model bergantung pada kerumitan proses dan rute pemberian obat. Dalam penelitian, terdapat suatu batasan pada jumlah data yang mungkin diperoleh. Bila jumlah parameter yang dinilai bertambah maka ketelitian penghitungan akan lebih sulit. Agar parameter menjadi sahih, jumlah titik-titik data seharusnya selalu melebihi jumlah parameter dalam model. (Shargel & Yu, 1988). Model 1 kompartemen

Tubuh dianggap sebagai 1 kompartemen tempat obat menyebar dengan seketika dan merata ke seluruh cairan dan jaringan tubuh. Model ini terlalu disederhanakan sehingga untuk kebanyakan obat kurang tepat. Model 2 kompartemen

Tubuh dianggap terdiri atas kompartemen sentral dan perifer. Kompartemen sentral terdiri dari darah dan berbagai jaringan yang banyak dialiri darah seperti jantung, hati ginjal dan kelenjar-kelenjar endokrin. Obat tersebar dan mencapai kesetimbangan dengan cepat. Komponen perifer adalah berbagai jaringan yang kurang dialiri darah misalnya otot, kulit, dan jaringan lemak, sehingga obat lambat masuk ke dalamnya. Model ini prinsipnya sama dengan model 1 kompartemen, bedanya hanya dalam proses distribusi karena adanya kompartemen perifer; eliminasi tetap dari kompartemen sentral. Model ini cocok untuk banyak obat.

Model 3 kompartemen

Kompartemen perifer dibagi atas kompartemen perifer yang dangkal (kompartemen 2) dan kompartemen perifer yang dalam (kompartemen 3). Untuk perhitungan regimen dosis klinik, biasanya digunakan model 1 kompartemen untuk pemberian peroral dan kompartemen 2 untuk pemberian intravena. Pada pemberian bolus intravena, biasanya fase distribusi terlihat jelas (menandakan 2 kompartemen), sedangkan pada pemberian oral, fase distribusinya sering tertutup oleh fase absorpsi. Dalam model kompartemen terbuka, tubuh diasumsikan sebagai kompartemen terbuka, seluruh kompartemen badan dianggap sebagai kompartemen sentral. Dalam hal ini kompartemen sentral didefinisikan sebagai jumlah seluruh bagian tubuh (organ dan jaringan atau bagian lainnya) dimana kadar obat segera berada dalam kesetimbangan dengan yang ada dalam plasma/darah.

Macam – macam model kompartemen yaitu : 1. Mammilary Merupakan model kompartemen yang paling banyak digunakan dalam penentuan farmakokinetika obat.Model mammilary ini membagi kompartemen menjadi 2, yaitu kompartemen satu terbuka dan kompartemen dua terbuka. Pada kompartemen satu terbuka,

obat

langsung

diabsorbsi

dan

dieliminasi

dari

kompartemen

sentral.

Kompartemen sentral dianggap mewakili plasma dan jaringan yang perfusi darahnya tinggi dan secara cepat berkesetimbangan dengan obat, contohnya hati dan ginjal. Ketika obat dengan dosis intravena diberikan, obat langsung masuk secara cepat dalam kompartemen sentral. Pada kompartemen dua terbuka, obat dapat bergerak diantara kompartemen sentral atau kompartemen plasma menuju kompartemen jaringan atau perifer.

Meskipun

kompartemen jaringan tidak mewakili jaringan yang spesifik, akan tetapi terjadi keseimbangan kadar obat di semua jaringan tubuh. Pada model ini, jumlah obat di dalam darah merupakan penjumlahan konsentrasi obat di dalam plasma dan di dalam jaringan.Dengan mengetahui parameter kinetik dari dua kompartemen ini, maka kita dpat menentukan jumlah obat yang masuk ke dalam tubuh dan yang dieliminasi dari tubuh.

a. Kompartemen satu terbuka Pemberian Intravaskular

Keterangan ; perfusi terjadi sangat cepat, seperti tanpa proses distribusi karena tidak dapat diamati sebab terlalu cepat.

Pemberian Ekstravaskular (melalui saluran cerna)

Keterangan; sebelum masuk kompartemen sentral, obat harus mengalami absorbsi. Perfusi juga cepat, sehingga eliminasi terjadi pada kompartemen s entral.

b. Kompartemen dua terbuka Pemberian Intravaskular

Keterangan; tidak ada absorbsi, tetapi ada eliminasi.

Pemberian Ekstravaskular (melalui saluran cerna)

Keterangan; obat mengalami absorbsi, distribusi dan eliminasi.

2. Caternary Model Caternary terdiri dari kompartemen-kompartemen bergabung satu dengan yang lain menjadi satu deretan kompartemen. Perbedaannya dengan mammilary yakni model Caternary terdiri dari satu atau kompartemen sentral, seperti satelit.

lebih kompartemen mengelilingi suatu

Gambar 2. Model Caternary

3. Fisiologik Merupakan model farmakokinetika yang didasarkan atas data anatomik dan fisiologik yang diketahui. Adapun perbedaan dengan model farmakokinetika yang lain; a. Konsentrasi obat

diperkirakan melalui ukuran jaringan, organ, aliran darah dan

melalui percobaan. b. Aliran darah, ukuran jaringan dan perbandingan obat dalam jaringan darah dapat berbeda sehubungan dengan kondisi patofisiologik, terutama terhadap proses distribusi. c. Dapat diterapkan pada beberapa spesies dan dengan beberapa data obat pada manusia dapat diekstrapolasikan. d. Jumlah kompartemen jaringan dalam model ini berbeda-beda tergantung obatnya. e. Jaringan atau organ yang tidak tembus obat



tidak masuk dalam model ini,

contohnya: otak, tulang-tulang dan bagian dari sistem saraf pusat.

Gambar 3. Model fisiologik (Shargel &Andrew; 2005)

Model Non Kompartemen Parameter

farmakokinetik

dapat

diperkirakan

dengan

cara

lain

yaitu

dengan

menggunakan model non kompartemen. Metode ini dikerjakan atas dasar perkiraan luas daerah di bawah kurva kadar obat didalam darah melawan waktu. Model non kompartemen ini semua prosesnya harus mengikuti kinetika orde satu yang berarti farmakokinetiknya harus linier. AUC ini tidak hanya digunakan untuk menghitung bioavaibilitas, tetapi dapat juga digunakan untuk menghitung klirens obat yang sama dengan perbandingan obat ke dalam pembuluh darah dan AUC.(Gibaldi dan Perrier, 1982) Model non kompartemen ini antara lain dapat digunakan untuk memperkirakan bioavaibilitas, klirens, volume distribusi dan fraksi obat yang berubah menjadi metabolit berdasarkan data dosis tunggal dari obat dan metabolitnya. Pada pemberian obat dosis tunggal, sample darah hanya diambil sampai waktu tertentu (t*) dan konsentrasi tertentu (C*). Oleh karena itu pada perhitungan AUC dari t sampai t~ (AUCo) mengikuti 2 langkah, langkah yang pertama yaitu perhitungan AUC dari t sampai t* dengan menggunakan metode trapezium, sedangkan langkah kedua yaitu menghitung dari t* sampai t~.

Dengan persamaan sebagai berikut : 8. C . dt = C* .............(1) t* K Harga k = 2,303 × slope fase terminal kurva logaritma kadar lawan waktu. Klirens merupakan sebagai fungsi dan kemampuan intrinsik yang dapat memetabolisme suatu obat dari organ khusus seperti ginjal dan liver. Kecepatan obat yang masuk melalui organ sama dengan hasil kali aliran darah dengan konsentrasi darah di vena, sedangkan kecepatan obat yang meninggalkan organ sama dengan hasil kali aliran darah dengan konsentrasi di vena. Perbedaan antara kecepatan masuk dan kecepatan keluar obat disebut dengan kecepatan eliminasi, yaitu dengan persamaan = Q (CA – CV).............(2) (Gibaldi dan Perrier, 1982)

Profil Perkembangan Kadar Obat dalam Tubuh (Darah)

Profil perkembangan kadar obat dalam darah dapat dibagi ke dalam tiga kategori : a.

Profil kinetika, di mana obat dimasukkan sekaligus ke dalam sistem peredaran darah (misalnya cara injeksi intra-vena).

b.

Profil kinetika,di mana obat diberikan secara infus.

c.

Profil kinetika,di mana obat diberikan secara ekstravaskular (oral, rektal, dan lain-lain).

Untuk obat yang diberikan secara injeksi intravena, semua obat akan masuk sekaligus ke dalam sistem peredaran darah,kemudian jumlah obat dalam darah akan menurun karena obat mengalami proses distribusi dan eliminasi (metabolisme danekskresi). Untuk obat yang diberikan secara infus, kadar obat dalam darah akan naik secara perlahan-lahan sesuai dengan kecepataninfus, dan akan naik terus sampai infus dihentikan atau sampai suatu saat di mana kecepatan eliminasi sama dengan kecepatan infus. Setelah infuse dihentikan, kadar obat akan turun kembaliseperti halnya setelah pemberian secara injeksi intravena.

Pada pemberian obat secara ekstravaskular (oral, rektal, dan lain-lain), obat akan masuk ke dalam sistem peredaran darah secara perlahan-lahan melalui suatu proses absorpsi sampai eliminasi. (Cahyati,1985) Pemilihan Lama Waktu dan Banyaknya Pengambilan Cuplikan Hayati

Jika cuplikan darah yang dipergunakan, pengambilan cuplikan dianjurkan berlangsung 35 kali harga waktu paruh eliminasi obat yang diuji dan 7-10 kali waktu paruh eliminasi obat jika cuplikan urin yang dipergunakan. Frekuensi atau banyaknya pengambilan cuplikan, erat kaitannya dengan asumsi model kompartemen. Jika kinetika obat mengikuti model dua kompartemen terbuka, dianjurkan banyak pengambilan cuplikannya paling tidak 3 kali pada tiap absorpsi, 3 kali pada sekitar puncak,3 kali pada tahap distribusi, dan 3 kali pada tahap eliminasi. Keadaan ini diperlukan untuk mendapatkan data kadar obat dalam darah lawan waktu yang cukup untuk evaluasi parameter farmakokinetika obat. Pengambilan cuplikan pada tahap distribusi tidak diperlukan, jika kinetika obat mengikuti model satu kompartemen terbuka. Waktu pengambilan cuplikan yang optimal ini perlu diperhatikan, karena akan menentukan kesahihan penetapan asumsi model kompartemennya. (Cahyati, 1985) Rancangan Aturan Dosis

Ada sejumlah factor yang harus dipertimbangkan dalam merancang aturan dosis terapetik, antara lain : 1. Pertimbangan farmakokinatika yang umum dari obat, meliputi profil absorbsi, distribusi, dan eliminasi pada penderita. 2. Pertimbangan fisiologi penderita, seperti umur, berat badan, jenis kelamin, dan status nutrisi. 3. Kondisi patofisiologi, seperti tidak berfungsinya ginjal, penyakit hati, kegagalan jantung kongestif, perlu dipertimbangkan karena dapat mempengaruhi profil farmakokinetika normal obat. 4. “Exposure” penderita terhadap pengobatan lain atau factor lingkungan yang mungkin juga dapat mengubah farmakokinetikayang umum.

5. Sasaran konsentrasi obat pada reseptor penderita yang meliputi berbagai perubahan kepekaan reseptor terhadap obat. Secara ideal aturan dosis yang baru hendaknya dihitung dengan menggunakan parameter – parameter farmakokinetika yang didapat dari konsentrasi obat dalam serum penderita. Dalam model yang pasti dianggap bahwa parameter rata – rata populasi dapat digunakan secara langsung untuk menghitung aturan dosis penderita tanpa suatu perubahan.Parameter seperti tetapan laju absorbs (Ka), factor bioavailabilitas (F), volume distribusi (Vd) dan tetapan laju eliminasi (K) dianggap tetap. Dosis dapat dihitung dengan persamaan berikut :

Keterangan : D = dosis Vd T1/2 F

= jarak waktu pemberian dosis = volume distribusi = waktu paruh eliminasi obat = fraksi obat yang terabsorbsi (Shargel.2005:368) Besarnya suatu dosis obat seringkali dikaitkan dengan frekuensi pemberian obat.

Bila dipilih suatu jarak waktu pemberian dosis yang sangat panjang, maka dosis yang besar dapat menghasilkan kadar puncak dalam plasma di atas konsentrasi toksik obat, walaupun ∞ tetap sama. Pada umumnya, jarak waktu pemberian dosis untuk sebagian besar Cv

ditentukan oleh waktu paruh eliminasi. Penentuan Dosis dan Jarak Waktu Pemberian Dosis

Dosis dan jarak waktu pemberian dosis seharusnya diperhatikan dalam perhitungan aturan dosis.Secara ideal, aturan dosis yang telah dihitung hendaknya ∞ ∞ mempertahankan konsentrasi obat dalam serum antara C dan C . Untuk pemberian ∞ ∞ dosis ganda secara intravena, rasio C / C dapat dinyatakan dengan :

yang disederhanakan menjadi :

Sehingga dapat dihitung suatu jarak maksimum pemberian dosis τ , yang dapat ∞ ∞ mempertahankan kadar serum berada dalam rentang C dan C . Setelah jarak waktu

pemberian dosis dihitung, maka dosis dapat dihitung. (Shargel.2005:372-373) Langkah – langkah Penetapan Regimen Dosis Optimal

Untuk menetapkan regimen dosis yang optimal bagi seorang pasien dilakukan langkah – langkah berikut : 1. Mula – mula ditentukan kadar target (Ctarget) yang biasanya merupakan nilai tengah dari kisaran kadar terapi. Ctarget = ½ (Cther,min + Cther,max) 2. Kemudian dihitung regimen dosis yang diharapkan akan mencapai kadar target tersebut. Infus :

T dan DM dipilih sedemikian sehingga Css,max dan Css,min hasil perhitungan akan berada dalam kisaran kadarterapi dan T tidak terlalu pendek untuk menjaga kepatuhan pasien makan obat.

3. Sampel darah harus diambil setelah tercapai keadaan mantap, yakni setelah paling sedikit 4-5 x t 1/2 , jika obat diberikan tanpa dosis awal. Tetapi untuk obat – obat yang toksik, sampel diambil setiap 2 x t1/2 dan dosisnya langsung disesuaikan jika kadar yang dicapai lebih tinggi dari yang diharapkan. 4. Penyesuaian regimen dosis obat dilakukan berdasarkan respon klinik pasien dan / atau kadar plasmanya. Hanya jika respons klinik tidak dapat dijadikan pegangan, maka penyesuaian dosis ditentukan sepenuhnya oleh kadar plasma dengan menggunakan perhitungan berikut :

Dosis baru = Dosis lama x

kadar plasma target kadar plasma yang diukur

Loading Dose dan Maintenance Dose

Loading dose merupakan dosis awal untuk mencapai konsentrasi awal terapi, sedangkan maintenance dose digunakan untuk menjaga konsentrasi obat tetap pada rentang terapi. Untuk mencapai kadar plasma yang tinggi pada dosis pertama, dosis yang lebih besar diberikan sebagai dosis awal. Pada pemberian dosis berulang, akan terjadi peningkatan kadar obat (akumulasi) sampai tercapai keadaan mantap (steady state), dimana kadar obat tidak lagi meningkat (stabil) karena kecepatan eliminasi obat oleh tubuh telah menyamai kecepatan masuknya obat ke dalam tubuh. Kadar mantap atau steady state (Css) dicapai setelah 4-5 x waktu paruh obat. Tss

= 5 x t1/2

T90%ss

= 3,3 x t1/2

Dosis muat (loading dose = DL) adalah dosis yang dimaksudkan untuk langsung mencapai Css (kadar terapi = Cther) DL = Css max x Vd = Css max x

(IV)

(Oral

DL biasanya diberikan untuk obat yang t1/2 nya relative panjang dibandingkan dengan waktu yang diinginkan untuk mencapai kadar terapi, misalnya : -

Tetrasiklin (t1/2 ~ 12 jam)

-

Digoksin (t1/2 ~ 36 jam), tetapi digitalisasi biasanya dibagi dalam 3-4 dosis yang diberikan selama 1-2 hari

-

Lidokain (t1/2 ~ 1 jam) untuk aritmia setelah infark miokard (Departemen Farmakologi dan Terapeutik FKUI, 2007) Analisis Bahan Paracetamol (PCT)

N-(-4-hydroxyphenyl)ethanamide, N-acetyl-para aminophenol

Paracetamol mengandung tidak kurang dari 98,0 % dan tidak lebih dari 101,0 %, dihitung tehadap zat yang telah dukeringkan. Pemerian

: serbuk hablur, putih, tidak berbau,rasa sedikit pahit

Kelarutan : larut dalam air mendidih dan dalam NaOH 1 N, mudah larut dalam etanol. (Anonim, 1995: 649 )

Acetaminophen (Abenol, Aminofen, Datril, Panadol, Neopap, Parasetamol) Klasifikasi

: Analgesik non-opioid, antipiretik

Identifikasi

:

Kerja Obat

: Menghambat sintesis prostaglandin yang berperan sebagai

Nyeri ringan sampai sedang, demam

mediator nyeri dan demam Efek Terapetik

: Analgesik, antipiretik, tidak memiliki kemampuan anti-inflamasi yang signifikan

Farmakokinetika

Absorbsi

: Diabsorbsi dengan baik setelah pemberian oral. Absorbs rektal bervariasi

Distribusi

: Didistribusikan secara luas, menembus plasenta memasuki ASI

Metabolisme dan ekskresi : 85-95% dimetabolisme oleh hati. Metabolitnya dapat bersifattoksik pada keadaan overdosis.Metabolit diekskresi oleh ginjal. Waktu paruh

: 1-4 jam

Dosis

: - P.O (dewasa dan anak-anak >12 tahun) 325-1000 mg tiap 4-6 sesuai kebutuhan (tidak boleh lebih dari 4 gram/hari, atau 2,6 gram/hari kronis) - Rektal (Dewasa dan anak-anak > 12 tahun : 325-650 mg tiap 4 jam sesuai kebutuhan (tidak lebih dari 6 suppositoria per 24 jam)

Sediaan

: - Tablet kunyah 80 ; 160 mg - Granula 80 mg/ paket, 80 mg / kapsul - Tablet 160, 325, 500, dan 650 mg

Waktu Kerja Obat : P.O → awitan : 0,5-1 jam, puncak :1-3 jam, durasi: 3-4 jam Rektal → awitan : 0,5-1 jam, puncak : 1-3 jam, durasi : 3-4 jam. (Deglin 2005 hal. 3-4)

Heparin

Heparin adalah sediaan steril mengandung polisakaridosulfat seperti yang terdapat dalam jaringan hewan yang menyusui, mempunyai sifat khas pembekuan darah. Potensi tiap mg tidak kurang dari 110 UI, dihitung terhadap zat yang telah dikeringkan dan tidak kurang dari 90% dan tidak lebih dari 110% dari jumlah yang tertera pada etiket. Pemerian

: serbuk;putih atau putih kuning gading ; agak higroskopis.

Kelarutan

: Larut dalam 2.5 bagian air.

Khasiat

: Anti koagulan

(Depkes RI,1979:280) Heparin merupakan suatu kelompok asam sulfat glikosaminoglikans (atau mukopolisakarida) yang terdiri atas sisa monosakarida pengganti dari asetilglukosamin dan asam glukoronat beserta derivat-derivatnya. Sisa asam glukoronat hampir semuanya dalam bentuk asam iduronic dan beberapa ester-sulfat. Sisa N-asetilglukosamin mungkin mengalami deasilasi, N-sulfat dan ester-sulfat secara acak. Hasilnya berupa rantai 45-50 sisa glukosa dari komposisi tersebut diatas. Molekul-molekul tersebut diikatkan oleh komponen-komponen sulfat pada protein skeleton yang berisi glisin dan sisa asam amino serin. Berat molekul heparin berkisar dari 3000 sampai 40.000 Daltons dengan rata-rata 12000-15000. Heparin endogen berlokasi di dalam paru-paru, pada dinding arteri dan di dalam sel-sel mast yang lebarnya sama dengan polimer molekul yang beratnya 750.000. Berada di dalam plasma dengan konsentrasi 1,5 mg/l.

Heparin mempunyai beberapa manfaat, diantaranya adalah sebagai berikut : 1. Dapat

mencegah

terjadinya

pembekuan

darah,

juga

memiliki

efek

menghambatpengikatan antibodi antifosfolipid, memicu terjadinya efek anti-radang (antiinflamasi) serta memfasilitasi proses penempelan (implantasi) plasenta di rahim. 2. Anti koagulan injeksi yang bekerja dengan cara mengikat anti trombin dimana menghasilkan peningkatan yang sangat besar pada aktivitas anti thrombin. 3. Heparin gel (topikal) kadang-kadang dapat digunakan untuk mengobati cedera olahraga. Penggunaan topikal gel tersebut dapat untuk memblokir aktivitas histamin dirilis, dan membantu mengurangi peradangan. 4. Sebagai afinitas ligan dalam pemurnian protein. (Mustchler, Ernest, 1991)

Farmakokinetik Absorpsi :

Heparin tidak diabsorpsi secara oral, karena itu diberikan secara Sub kutan atau Intravena. Pemberian secara Sub kutan bioavaibilitasnya bervariasi, mula kerjanya lambat 1-2 jam tetapi masa kerjanya lebih lama, sedangkan secara intravena awitan kerjanya cepat, puncaknya tercapai dalam beberapa menit, dan lama kerjanya singkat.

Distribusi :

Ikatan dengan protein sangat tinggi. Heparin tidak melalui plasenta dan tidak terdapat dalam air susu ibu.

Metabolisme :

Heparin cepat dimetabolisme terutama di hati. Masa paruhnya tergantung dari dosis yang digunakan, suntikan IV 100, 400,atau 800 unit/kgBB memperlihatkan masa paruh masing-masing kira-kira 1, 2 ½ dan 5 jam.

Ekskresi :

Heparin diekskresi dalam bentuk utuh melalui urin. (Sweetman, Sean,.2009)

Asam trikloroasetat (TCA)

Asam trikloroasetat P CCl3COOH ; BM 163,39; murni pereaksi. (Depkes RI,1995:1136) Asam trikloroasetat (nama sistematis: asam trikloroetanoat) adalah analog dari asam asetat, dengan ketiga atom hidrogen dari gugus metil digantikan oleh atom-atom klorin. Senyawa ini merupakan asam yang cukup kuat (pKa = 0,77, lebih kuat dari disosiasi kedua asam sulfat). Senyawa ini dibuat melalui reaksi klorin dengan asam asetat bersama katalis yang cocok. CH3COOH + 3Cl2 → CCl3COOH + 3HCl

Senyawa ini banyak digunakan dalam bidang biokimia, untuk pengendapan makromolekul seperti protein, DNA dan RNA.Garam natriumnya digunakan sebagai pembasmi rumput liar.Larutan yang mengandung asam trikloroasetat digunakan untuk penghapus tato dan pengobatan kutil, termasuk kutil kelamin (aman digunakan selama kehamilan).Garam-garam dari asam trikloroasetat disebut trikloroasetat. Reduksi sebagian dari asam trikloroasetat menghasilkan asam dikloroasetat, merupakan suatu obat aktif yang berpotensi dapat menyembuhkan penyakit kanker. (Dumas,1840 : 101)

VOLUME DARAH TIKUS

III.

ALAT DAN BAHAN ALAT :

1. Labu takar 2. Mikropipet 3. Tabung reaksi 4. Tabung penampung darah 5. Vortex-Mixer 6. Sentrifuge 7. Alat spektrofotometer 8. Kuvet 9. Pipet volume 10. Filler 11. Gunting 12. Holder BAHAN :

1. Paracetamol 2. Asamtrikloroasetat (TCA) 20% 3. Heparin 4. Hewan uji : Tikus 5. HCL 6N 6. NaNO2 7. Asam Sulfamat 8. NaOH 10% 9. Penangas Es 10. Aquadest

IV.

SKEMA KERJA a.

Pembuatan Larutan Stok Paracetamol Ditimbang 100 mg Paracetamol

Di masukan labu takar 100 ml

Di larutkan metanol Diadkan dengan aquadest 100 ml

Kadar Larutan stok PCT 100mg/100ml atau 1000µg/ml

b.

Pembuatan Kurva Baku Paracetamol Ditampung 500µl darah tikus, tempatkan dalam wadah berisi heparin

Tambahkan Larutan stok PCT sehingga kadarnya 100 µg/ml,200µg/ml,300µg/ml,400µg/ml,500µg/ml,600µg/ml,dan

Ditambahkan 2,0 ml TCA 20% pada masing – masing kadar lalu divortex sampai homogen

Disentrifuge masing – masing kurva baku dengan kecepatan 2500 rpm (5-10 menit)

Diambil 1,5 ml beningan, masukkan dalam labu takar 100ml

Ditambahkan 0,5 ml HCL 6N dan 1,0 ml NaNO 210% homogenkan, didiamkan selama 15 menit pada suhu <15˚C

Ditambahkan 1,0 ml asam sulfamat 15% dan 3,5 ml NaOH 10% ad dengan Aquadest

Dibaca absorbansinya pada panjang gelombang maksimal

c.

Pembuatan Blanko

Ditampung darah tikus ,tempatkan dalam wadah berisi heparin

Ditambahkan 2,0 ml TCA 20% pada masing – masing kadar lalu divortex sampai homogen


Diambil 1,5 ml beningan, masukkan dalam labu takar 100ml

Ditambahkan 0,5 ml HCL 6N dan 1,0 ml NaNO 210% homogenkan, didiamkan selama 15 menit pada suhu <15˚C



d.

Penetapan Panjang Gelombang Maksimal Kurva baku Paracetamol 100, 300, 500 µg/ml

Dibaca absorbansinya pada panjang gelombang antara 380-580nm

e.

Pencarian Absorbansi Kurva Baku Kurva baku 0 – 700 µg/ml

Dibaca absorbansinya pada panjang gelombang yang telah

Dibuat kurva antara absorbansi terhadap waktu

f.

Uji Pendahuluan Farmakokinetik Paracetamol Dikonversi dosis PCT 500, 750, 1000mg/kgBB manusia diberikan

Dosis kelp. 1 & 2 (500mg/kgBB), kelp. 3 & 4 (750mg/kgBB), kep. 5 & 6

Tikus 1 : 0, 60, 150 menit; Tikus 2 : 15, 90, 180 menit; Tikus 3 : 30, 120,

Diambil cuplikan pada menit ke 0-240 @250 µl darah melalui vena

Ditambahkan 2,0 ml TCA 20% lalu divortex sampai homogen


Diambil 1,5 ml beningan,masukkan dalam labu takar 100ml



Ditetapkan kadar hasil pencuplikan dengan kurva baku yang telah dibuat

V. DATA PENGAMATAN DAN PERHITUNGAN PEMBUATAN LARUTAN STOCK PARASETAMOL

Penimbangan 100 mg ± 5% + = 95mg-105mg Berat Kertas + zat

= 0,6257 g

Berat Kertas + sisa

= 0,5252 g -

Zat

0,1005 g

Konsentrasi Paracetamol sebenarnya = 100,5 g = 1005 μg/ml 0,1 L Deret Baku

Seri larutan Baku 0μg/ml . C1 = V2 . C2 . 1000 = 250μl . 0 μg/ml V1 = 0 μl Darah = 250 μl – 0μl = 250 μl 100μg/ml

Koreksi Kadar

V1 V1

V1 . C1 = V2 . C2 0μg . 1005 = 250μl . C2 C2 = 0 μg/ml

V1 V1

V1 . C1 = V2 . C2 25μg . 1005 = 250μl . C2 C2 = 100,5 μg/ml

V1 V1

V1 . C1 = V2 . C2 50μg . 1005 = 250μl . C2 C2 = 201 μg/ml

V1 V1

V1 . C1 = V2 . C2 75μg . 1005 = 250μl . C2 C2 = 301,5 μg/ml

. C1 = V2 . C2 . 1000 = 250μl . 100 μg/ml V1 = 25 μl Darah = 250 μl – 25μl = 225 μl 200μg/ml . C1 = V2 . C2 . 1000 = 250μl . 200 μg/ml V1 = 50 μl Darah = 250 μl – 50μl = 225 μl 300μg/ml . C1 = V2 . C2 . 1000 = 250μl . 300 μg/ml V1 = 75 μl Darah = 250 μl – 75μl = 175 μl

400μg/ml V1 V1

. C1 = V2 . C2 . 1000 = 250μl . 400 μg/ml V1 = 100 μl Darah = 250 μl – 100μl = 175 μl 500μg/ml

V1 . 100μg

C1 = V2 . C2 . 1005 = 250μl . C2 C2 = 402 μg/ml

V1 V1

V1 . 125μg

C1 = V2 . C2 . 1005 = 250μl . C2 C2 = 502,5 μg/ml

V1 V1

V1 . 150μg

C1 = V2 . C2 . 1005 = 250μl . C2 C2 = 603 μg/ml

V1 V1

V1 . 175μg

C1 = V2 . C2 . 1005 = 250μl . C2 C2 = 703,5 μg/ml

. C1 = V2 . C2 . 1000 = 250μl . 500 μg/ml V1 = 125 μl Darah = 250 μl – 125μl = 125 μl 600μg/ml . C1 = V2 . C2 . 1000 = 250μl . 600 μg/ml V1 = 150 μl Darah = 250 μl – 150μl = 100 μl 700μg/ml . C1 = V2 . C2 . 1000 = 250μl . 700 μg/ml V1 = 175 μl Darah = 250 μl – 175μl = 75 μl

PANJANG GELOMBANG MAKSIMAL DAN OPERATING TIME

Paracetamol Max : 427 Operating Time : 5 menit DATA KURVA BAKU PARACETAMOL

Konsentrasi 100,5 201 301,5 402 502,5 603 703,5

Absorbansi -0,014 -0,008 0,065 0,184 0,341 0,419 0,408

a = -0,143 b = 8,5145 . 10-4 r = 0,968366113 y = bx + a = 8,5145 . 10-4 x + (-0,143)

kurva absorbansi baku 0.4 0.35 0.3 0.25 0.2 absorbansi 0.15 0.1 0.05 0 -0.05

0

100

200

300

BERAT PENIMBANGAN TIKUS Tikus 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15

Berat Tikus 233 g 214,8 g 242 g 217,5 g 245,1 g 218,1 g 229,6 g 259,6 g 214,5 g 237 g 232,9 g 200,7 g 200,05 g 218 g 218,4 g

400

500

600



PERHITUNGAN LARUTAN STOK PARACETAMOL Dosis terbesar 1000mg/ 50kgBB

Manusia 70kg = 70kg x 1000mg/kgBB = 1400mg 50kg Tikus (200 g) = 1400 mg x 0,018 = 25,2 mg Dosis Tikus = 259,6 g x 25,2 mg = 32,71 mg 200 g Cstok = 32,71 mg = 13,08 mg/ml x 100 ml = 1,308 g ½ . 5 ml ±5% = 1242,6 mg – 137,2 mg



PENIMBANGAN LARUTAN STOK PARACETAMOL Kertas + zat = 1,7078 g Kertas + sisa = 0,4581 g Zat

= 1,2497 mg/ml

Cstok sebenarnya = 1249,7 mg/100 ml = 12,497 mg/ml Konversi dosis 500 mg/50 kgBB Manusia 70 kg --70kg/ 50 kg x 500 mg = 700 mg Tikus ( 200 g) -- 700 mg x 0,018 = 12,6 mg



PERHITUNGAN DOSIS PEMBERIAN Pada kelompok 1 Konversi dosis 500mg/50 kgBB Manusia 70 kg 70kg x 500 mg = 700 mg 50kg Tikus  700 mg x 0,018 = 12,6 mg 1. Tikus nomer 1 = 233 g Dosis = 233 g x 12,6 mg = 14,679 mg 200 g Vp = 14,679 mg = 1,17 ml 12,497 mg/ml 2. Tikus nomer 2 = 217 g Dosis = 217 g x 12,6 mg = 13,671 mg 200 g Vp = 13,671 mg = 1,09 ml 12,497 mg/ml

Pada kelompok 2

Konversi dosis 500mg/50 kgBB Manusia 70 kg 70kg x 500 mg = 700 mg 50kg Tikus  700 mg x 0,018 = 12,6 mg

1. Tikus nomer 11 = 232,9 g Dosis = 232,9 g x 12,6 mg = 14,6727 mg 200 g Vp = 14, 6727 mg = 1,17 ml

12,497 mg/ml 2. Tikus nomer 12 = 200,07 g Dosis = 200,7 g x 12,6 mg = 12,6044 mg 200 g Vp = 12,6044 mg = 1,008 ml 12,497 mg/ml

Pada kelompok 3


1. Tikus nomer 5 = 245,1 g Dosis = 245,1 g x 18,9 mg = 23,16 mg 200 g Vp = 23,16mg = 1,85 ml 12,497 mg/ml 2. Tikus nomer 7 = 229,6 g Dosis = 229,6 g x 18,9 mg = 21,69 mg 200 g Vp = 21,69mg = 1,74 ml 12,497 mg/ml

Pada kelompok 4


1. Tikus nomer 8 = 259,6 g Dosis = 259,6 g x 18,9 mg = 24,53 mg 200 g Vp = 24,53mg = 1,96 ml 12,497 mg/ml 2. Tikus nomer 10 = 237 g Dosis = 237 g x 18,9 mg = 25,80 mg 200 g Vp = 25,80mg

= 2,06 ml

12,497 mg/ml

Pada kelompok 5


1. Tikus nomer 14 = 218 g Dosis = 218 g x 25,2 mg = 27,5184 mg 200 g Vp = 27,5184 mg = 2,20 ml 12,497 mg/ml

2. Tikus nomer 15 = 218,4 g Dosis = 218,4 g x 25,2 mg = 27,468 mg 200 g Vp = 27,468 mg

= 2,19 ml

12,497 mg/ml

Pada kelompok 6


1. Tikus nomer 9 = 214,5 g Dosis = 214,5 g x 25,2 mg = 27,027 mg 200 g Vp = 27,027 mg = 2,16 ml 12,497 mg/ml

2. Tikus nomer 12 = 200,07 g Dosis = 200,07 g x 25,2 mg = 25,21 mg 200 g Vp = 25,21 mg

= 2,02 ml

12,497 mg/ml

DATA ABSORBANSI

-

Paracetamol dosis 500 mg T(menit) Ke 0 15 30 60 90 120 150 180

-

Absorbansi Kelompok 1 0,001 0,026 0,031 0,020 0,001 0,007 0,001 -0,006

Kelompok 2 0,001 0,005 0,006 0,020 0,017 0,012 0,009 0,002

Paracetamol 750 mg T (menit) Ke 0 15 30 60 90 120 150 180

Absorbansi Kelompok 3 0,00 0,001 0,007 0,012 0,020 0,019 0,010 0,005

Kelompok 4 0,00 -0,040 -0,035 0,033 0,046 0,052 0,023 0,019

-

Paracetamol 1000 mg T (menit) Ke

Absorbansi Kelompok 5 0,000 -0,027 -0,024 -0,014 0,014 -0,038 -0,042 -0,043

0 15 30 60 90 120 150 180



Kelompok 6 0,000 0,010 0,019 0,040 0,018 0,015 -0,015 -0,047

DATA PERLAKUAN PARACETAMOL DOSIS 500 MG

T (menit) 0 15 30 60 90 120 150 180

Absorbansi (Tikus) 0,001 0,005 0,006 0,020 0,017 0,012 0,009 0,002

Konsentrasi (μg/ml) Cp  169,12 173,82 174,99 191,44 187,91 182,04 178,52 170,29

Ln Cp 5,13 5,16 5,16 5,25 5,24 5,20 5,18 5,14

Fase Eliminasi T (menit) 120 150 180

Ln Cp 5,20 5,18 5,14

a = 5,3233 b = -1.10-3 r = -1 . 10-3x + 5,3233

Rentang Cuplikan Darah 

3-5 x t½ 3-5 x 693 menit 2079 menit – 3465 menit 34,65 jam – 57,75 jam

t½ = 0,693/k = 0,693 0,001 = 693 menit

K = -b = -(-0,001) = 0,001

10 p C n L

1 0

15

30

45

60

75

90

105

120

135

150

165

180

Waktu (menit)

Gambar Kurva t (menit) vs ln Cp Dosis 500mg

kurva abs cuplikan 500mg 195 190 185 180

Cp

175 170 165 0

50

100

150

200

Gambar Kurva t (menit) vs Cp Dosis 500mg




T (menit) 15 30 60 90 120 150 180

Absorbansi (Tikus) 0,001 0,007 0,012 0,020 0,019 0,010 0,005

Konsentrasi (μg/ml) Cp

Ln Cp



169,12 176,17 182,04 191,44 190,26 179,69 173,82

5,13 5,17 5,20 5,25 5,24 5,19 5,16

195

Persamaan y = 8,514 x 10-4 x – 0,143 Fase eliminasi 3 titik dari bawah t 180, 150, dan 120 T 120 150 180

a = 5,397

Ln Cp 5,24 5,19 5,16

b = -1,33 x 10-3 r = -0,9897

y = -0,00133 x + 5,397

Rentang Pencuplikan Darah 

t½ = 0,693 / k

K = -b

3-5 x t½ 3-5 x 521,05 menit = (1563,16 – 260,5,25) menit

K = - (-0,00133) K = 0,00133 / menit

= 0,693/0,00133 = 521,05 menit

= 26,05 jam – 43,42 jam

10

p C n L

1 0

15

30

45

60

75

90

105

120

135

150

Waktu (menit)

Gambar Kurva t (menit) vs ln Cp Dosis 750mg

165

180

195

cuplikan 750mg 195 190 185 180

Cp

175 170 165 0

50

100

150

200

Gambar Kurva t (menit) vs Dosis 750mg




T (menit) 0 15 30 60 90 120 150 180

Absorbansi (Tikus) 0 0,010 0,019 0,040 0,018 0,015 -0,015 -0,047

Konsentrasi (μg/ml) Cp

Ln Cp



0 179,69 190,26 214,92 189,09 185,56 -185,56 -223,15

0 5,19 5,24 5,37 5,24 5,22 -

10

p C n L

1 0

15

30

45

60

75

90

105

Waktu (menit)

Gambar Kurva t (menit) vs ln Cp Dosis 1000 mg

120

135

kurva 1000mg 250 200 150 100 50 0

cp

-50 0

50

100

150

200

-100 -150 -200 -250

Gambar Kurva t (menit) vs Cp Dosis 1000 mg

VI.

PEMBAHASAN Pada praktikum kali ini dilakukan penetapan waktu pengambilan darah dan

pemilihan model kompartemen yang ditetapkan dengan

hasil grafik pengukuran data

konsentrasi dengan waktu. Tujuan dalam praktikum ini adalah menentukan model kompartemen kinetika obat, serta menentukan waktu dan jumlah pencuplikan sampling untuk pengukuran parameter farmakokinetika dengan menggunakan hewan uji tikus. Darah menjadi pilihan utama dalam penelitian farmakokinetika karena darah adalah tempat paling mudah dan cepat dicapai obat karena adanya proses ADME yang ada dalam tubuh, Darah mentransportkan obat ke tempat absorbsi dan mendistribusikan nya ke dalam jaringan sasaran kerja obatyang kemudian setelah obat di metabolisme obat akan mengalami proses eliminasi.. Pada percobaan ini digunakan data darah karena sebagian besar konsentrasi obat berada dalam darah, dimana darah merupakan tempat yang cepat dicapai obat sehingga dapat dilakukan penetapan kadar obat didalam tubuh.Dalam percobaan ini, darah diambil dari hewan uji tikus melalui bagian vena ekor dengan cara memotong ujung ekor hewan uji. Tetesan pertama dibersihkan terlebih dahulu dengan kapas, sedangkan darah yang dipakai adalah setelah tetesan pertama tersebut. Untuk lebih memudahkan keluarnya

darah, ekor tikus diberi vaselin dan diurut, serta b isa juga dengan di olesi air panas. Darah yang keluar di tampung pada tempat penampung darah (ependroff), dimana tempat penampung darah tersebut sudah ditambah heparin yang berfungsi sebagai antikoagulan untuk mencegah membekunya darah. Hal ini karena darah besifat mudah menggumpal. Kemudian di-vortex agar dapat bercampur secara merata dan terbentuk ikatan antara heparin dengan protein plasma sehingga darah tidak cepat membeku. Data deret baku yang digunakan menggunakan deret baku yang telah digunakan pada percobaan sebelumnya dimana Parasetamol dengan konsentrasi larutan stock masing-masing obatnya adalah 1000 ppm. Kedua larutan stock tersebut masingmasing dibuat deret bakunya. Paracetamol dibuat dengan kadar 0, 100, 200, 300, 400, 500, 600 dan 700 µg/ml.Deret baku Paracetamol ditambah dengan 2,0 ml TCA 20 %. Kemudian divortex kembali agar dapat bercampur secara merata antara darah dengan larutan yang ditambahkan. Selanjutnya di-sentrifuge dengan kecepatan 2500 rpm selama 10 menit. Tujuan disentrifuge adalah untuk membantu larutan TCA dalam memisahkan protein dari darah sehingga protein dalam darah dapat terendapkan dan diperoleh supernatannya (beningannya). Setelah disentrifuge, diambil serum darah untuk mencari panjang gelombang maksimum, mencari kurva baku, dan mencari harga perolehan kembali, kesalahan acak dan kesalahan sistemik dari kedua obat tersebut. Untuk data deret baku yang digunakan adalah deret baku 100,5 , 201, 301,5 , 402, 502,5 , 603, 703,5. Fungsi dari penambahan reagen-reagen pada saat preparasi sampel darah cuplikan adalah : 

Penambahan TCA untuk mengendapkan kandungan protein yang ada di dalam darah, adanya ion negative dari larutan TCA mampu bergabung dengan protein darah yang bermuatan positif. Tanpa adanya penambahan larutan TCA tersebut, protein darah mampu berikatan dengan obat terutama albumin dan dengan adanya protein tersebut dapat menggangu pada pengukuran absorbansi menggunakan spektrofotometer visible sehingga absorbansi yang terbaca kurang tepat.



Penambahan larutan NaNO2 0,1% pada supernatan, berfungsi untuk membentuk garam diazonium. Penambahan NaNO2 ini menghasilkan gas NO2 sehingga perlu

pendiaman selama ± 3 menit agar gelembung yang terbentuk hilang dan tidak mengganggu proses pengukuran absorbansi. 

Penambahan Asam Sulfamat 0,5% , berfungsi untuk memberikan suasana asam, serta dapat juga berfungsi untuk mengurangi kelebihan gas NO2 yang terbentuk.

Lalu dibaca absorbansinya dengan spektrofotometer visibel pada λ= 380 – 580 nm. Diperoleh λ maks Parasetamol adalah 427 nm dengan Operating Time 5 Menit. Perlu dilakukan pencarian λ max karena pada panjang gelombang maksimal mempunyai kepekaan yang maksimum, hal ini karena setiap perubahan konsentrasi larutan yang dianalisa, perubahan absorbsinya besar. Selain itu, disekitar panjang gelombang maksimum bentuk kurva absorbsinya datar dan pada kondisi tersebut hukum Lambert-Beer akan terpenuhi. Kemudian untuk langkah selanjutnya adalah dilakukan pembuatan kurva baku. Pembuatan kurva baku ini bertujuan untuk mengetahui kelinieritasan suatu kurva dimana kurva baku tersebut diperoleh dari hubungan antara konsentrasi Vs absorbansi dari deret baku yang dibuat. Hubungan antara konsentrasi berbanding lurus dengan absorbansi. Dengan langkah kerja yang sama, diperoleh persamaan Paracetamol diperoleh persamaan garisy = 8,5145x+(-0,413)dan diperoleh nilai r = 0,9683 Dari data yang didapatkan dari paracetamol dosis 500mg waktu cuplikan yang ada didapatkan t pada 0 menit hingga t pada 180 menit, padaha seharusnya data yang didapatkan adalah t pada menit 0 menit sampai t pada menit 300 menit. Dari data serapan absorbansi didapatkan data sebagai berikut : t15 didapatkan absorbansinya 0.005 dengan konsentrasi 173,82dan Ln Cp sebesar 5,16, t30 didapatkan absorbansinya 0,006 dengan konsentrasi 174,99dan Ln Cp sebesar 5,16, t60 didapatkan absorbansinya 0,020 dengan konsentrasi 191,44 dan Ln Cp sebesar 5,25, t90 didapatkan absorbansinya 0.017 dengan konsentrasi 187,91 dan Ln Cp sebesar 5,24, t120 didapatkan absorbansinya 0.012 dengan konsentrasi 182,04 dan Ln Cp sebesar 5,20, t150 didapatkan absorbansinya 0,009 dengan konsentrasi 178,52 dan Ln Cp sebesar 5,18, t180 didapatkan absorbansinya 0,002 dengan konsentrasi 170,29 dan Ln Cp sebesar 5,14. Setelah didapatkan waktu dan Ln Cp maka dihitung 3 data terakhir yang dianggap sebagai fase eliminasi dan diregresikan sehingga di dapatkan y =-1 . 10-3x + 5,3233, kemudian dari persamaan tersebut dihitung waktu t1/2 eliminasinya dan didapatkan waktu paruh eliminasi obat adalah 693 Menit dengan t1/2

teoritis adalah 1-4 jam dan waktu ambil cuplikan dengan rumus 3-5 x t1/2 elimnasi adalah 2079 menit sampai 3465 menit dengan amsumsi obat telah tereliminasi seluruhnya. Dari data tersebut pula dilakukan pembuatan grafik dan didapatkan grafik yang menurut kelompok kami bedasarkan model kompartemennya obat parasetamol yang kita lakukan percobaan bedasarkan t vs konsentrasi pada kurva semilogaritma dapat diamsusikan

bahwa

sampel

yang

digunakan

menganut

model

kompartemen

Ekstravaskuler 2 terbuka dimana obat terabsorbsi terlebih dahulu kemudian terdistribusi dan termetobolisme hingga akhirnya tereliminasi. Dari data yang didapatkan dari paracetamol dosis 750mg waktu cuplikan yang ada didapatkan t pada 0 menit hingga t pada 180 menit, padaha seharusnya data yang didapatkan adalah t pada menit 0 menit sampai t pada menit 300 menit. Dari data serapan absorbansi didapatkan data sebagai berikut : t15 didapatkan absorbansinya 0,001 dengan konsentrasi 169,12dan Ln Cp sebesar 5,13, t30 didapatkan absorbansinya 0,007 dengan konsentrasi 176,17dan Ln Cp sebesar 5,17, t60 didapatkan absorbansinya 0,012dengan konsentrasi 182,04 dan Ln Cp sebesar 5,20, t90 didapatkan absorbansinya 0.020 dengan konsentrasi 191,44 dan Ln Cp sebesar 5,25, t120 didapatkan absorbansinya 0.019 dengan konsentrasi 190,26 dan Ln Cp sebesar 5,24, t150 didapatkan absorbansinya 0,010 dengan konsentrasi 179,69 dan Ln Cp sebesar 5,19, t180 didapatkan absorbansinya 0,005 dengan konsentrasi 173,82 dan Ln Cp sebesar 5,16. Setelah didapatkan waktu dan Ln Cp maka dihitung 3 data terakhir yang dianggap sebagai fase eliminasi dan diregresikan sehingga di dapatkan y = -0,00133 x + 5,397, kemudian dari persamaan tersebut dihitung waktu t1/2 eliminasinya dan didapatkan waktu paruh eliminasi obat adalah 521,05 Menit dengan t1/2 teoritis adalah 1-4 jam dan waktu ambil cuplikan dengan rumus 3-5 x t1/2 elimnasi adalah 1563,16 menit sampai 260,25 menit dengan amsumsi obat telah tereliminasi seluruhnya. Dari data tersebut pula dilakukan pembuatan grafik dan didapatkan grafik yang menurut kelompok kami bedasarkan model kompartemennya obat parasetamol yang kita lakukan percobaan bedasarkan t vs konsentrasi pada kurva semilogaritma dapat diamsusikan

bahwa

sampel

yang

digunakan

menganut

model

kompartemen

Ekstravaskuler 2 terbuka dimana obat terabsorbsi terlebih dahulu kemudian terdistribusi dan termetobolisme hingga akhirnya tereliminasi.

Pada data paracetamol 1000 mg tidak bisa dihitung karena pada t150 dan t180 asorbansinya menunjukkan hasil minus sehingga tidak ditemukan hasil untuk Ln Cp . Pada tabel volume darah tikus, untuk bobot tikus 230 g total volume sirkulasi darah menurut GUIDELINES for blood collection and freq. Adalah 14,7. Sehingga untuk 250µg x 8 cuplikan adalah 1000 µg x 14,7 adalah 14.700 µg. Dengan volume distribusi obat dalam darah terdistribusi sempurna. Sedangkan volume darah tikus secara teoritis adalah 64ml/kgBW. Berdasarkan hasil perhitungan diperoleh kurva dari masing-masing dosis yang menunjukan puncak atau Cmaks yang berbeda. Pada dosis 500mg dan 1000mg Cmaks berada pada menit ke-60 sedangkan pada dosis 750mg Cmaks berada pada menit ke-90. Sehingga diperoleh kurva yang memiliki Cmaks berbeda,hal ini mungkin disebabkan oleh metode percobaan yang kurang tepat, dimana saat percobaan digunakan dua tikus yang secara bergantian digunakan untuk pengukuran kadar obat paracetamol. Adanya perbedaan fisiologi dari hewan uji yang meliputi berat badan, jumlah reseptor, maupun metabolisme menyebabkan perbedaan jumlah obat yang terdapat dalam tubuh sehingga absorbansi dalam penentuan Cmaks akan mengalami perbedaan. Walaupun Cmaksnya berbeda namun kurva dari ketiga dosis memiliki bentuk yang sama. Ketiga kurva tidak dapat menggambarkan secara jelas antara fase absorbsi, fase distribusi dan fase eliminasi. Sehingga model kompartemen dari obat paracetamol pada percobaan kali ini tidak dapat dilakukan.

VII. KESIMPULAN 1. Panjang gelombang maksimum dan Paracetamol 427 nm dengan operating time yang di dapat selama 5 menit. 2. Persamaan garis linier pada Paracetamol diperoleh persamaan garis a = -0,143,

b = 8,5145 . 10 4r = 0,968366113, y = bx + a = 8,5145 . 10-4 x + (-0,143) 3. Rentang pencuplikan darah paracetamol dosis 500 mg menghasilkan 34,65 jam – 57,75 jam, K= -0,001 (0,001)dan waktu paruh t½ yaitu 693 menit dan rentang cuplikan darah paracetamol dosis 750 mg menghasilkan 26,05 jam – 43,42 jam,

K= 0,00133/menit dan waktu paruh eliminasinya yaitu 521,05 menit. Pada dosis paracetamol 1000mg tidak dapat dihitung dikarenakan T150 dan T180 asorbansinya menunjukkan hasil minus sehingga tidak ditemukan hasil untuk Ln Cp .

VIII. DAFTAR PUSTAKA 

Ritschel WA Handbook of basic pharmacokinetics 2nd ed. Hamilton: Drus Intelligence Publication, Inc, 1980; 230-232, 280



Notari RE Biopharmaceutics and clinical pharmacokinetics -an introduction, 3rd ed . New York: Marcel Dekker, Inc. 1980; 18-29



Mutschler , Ernst. 1991. Dinamika Obat Farmakologi dan Toksikologi Edisi Kelima. Institut Teknologi Bandung : Bandung



Oktavia, RW., 2009, “ Pengaruh Seduhan Teh Hijau (Camellia sinensis) Terhadap Farmakokinetika Parasetamol Yang Diberikan Bersama Secara Oral Pada Kelinci Jantan”,Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah: Surakarta.



Shargel L, dkk. 2005. Biofarmasetika dan Farmakokinetika Terapan. Airlangga University Press : Surabaya

LAMPIRAN PIKET PERCOBAAN 2 DAN 3 PENETAPAN WAKTU PENGAMBILAN CUPLIKAN, PEMILIHAN DOS IS DAN ASUMSI MODEL KOMPARTEMAN

1. Asam Trikloroasetat (TCA 20 %) = (2 ml x 10 x 6 kelompok) + (2ml x 8) = 120 ml + 16 ml = 136 ml ~ 150 ml TCA yang ditimbang =

2   

x 150 ml = 30 g

Cara Pembuatan : 1) Ditimbang TCA 30 g, masukkan labu takar 2) Dilarutkan dengan aquadest ad 150 ml

2. HCL 6 N Kebutuhan

= (0,5 ml x 10 x 6 kelompok) + (0,5 x 8) = 30 ml + 4 ml = 34 ml ~ 50 ml

N

= =

%  BJ    v M 7 %  ,8     6,

= 11,9616 N V1 x N1

= V2 x N2

V1 x 11,9616 = 50 ml x 6 N V1

= 25 ml

Cara Pembuatan : 1) Diukur HCL 25 ml, masukkan beaker glass perlahan – lahan melalui dinding yang telah berisi 1/3 bagian air 2) Ditambahkan aquadest ad 50 ml

p2&3 Penetapan Waktu Pengambilan Cuplikan Biofar Kel 1

Recommend Documents