Quito - Ecuador
NORMA TÉCNICA ECUATORIANA
NTE INEN 0182:2012
CONSERVAS ENVASADAS DE PESCADO DETERMINACION DEL CONTENIDO DE NITROGENO Primera edición BOTTLED CANNED FISH NITROGEN CONTENT DETERMINATION
First edition
DESCRIPTORES: . PE: CDU: 664.95 CIIU: ICS:
CDU: 664.95 ICS:
Norma Técnica Ecuatoriana
CIIU: MC
CONSERVAS ENVASADAS DE PESCADO DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO DE NITRÓGENO
NTE INEN 0182:2012
1. OBJETO Esta norma especifica un método para la determinación del contenido de nitrógeno de los alimentos animales por el proceso de Kjeldahl. El método no mide formas oxidadas de nitrógeno o compuestos de nitrógeno heterocíclico. Este método no distingue entre el nitrógeno proteico y nitrógeno no proteico. Si es importante determinar el contenido de nitrógeno no proteico, debe ser utilizado un método apropiado.
2. TERMINOLOGÍA Contenido de nitrógeno. Es la cantidad de nitrógeno contenido en la muestra y determinado mediante el procedimiento anotado en la presente norma.
3. RESUMEN El método consiste en la destilación del amoniaco liberado de la muestra y la titulación final del exceso de ácido receptor.
4. EQUIPOS Equipo de laboratorio habitual y, en particular, lo siguiente.
4.1 Desmenuzador mecánico, tamaño laboratorio 4.2 Balanza analítica. 4.3 Aparato de digestión, destilación y valoración. 5. REACTIVOS 5.1 Sulfato de potasio. 5.2 Catalizador , ya sea 5.2.1 o 5.2.2. 5.2.1 Óxido de cobre (II) (CuO). 5.2.2 Sulfato pentahidratado de cobre (II) (CuSO4 • 5H2O). 5.3 Ácido sulfúrico, c (H2SO4) = 18 mol / l, ρ20 (H2SO4) = 1,84 g / ml. 5.4 Parafina. 5.5 Sacarosa. (Continúa) ___________________________________________________________ ______________________ DESCRIPTORES -1-
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5.6 Los materiales estándar , ya sea 5.6.1 o 5.6.2. 5.6.1 Acetanilida, con punto de fusión 114 ° C; contenido de nitrógeno (N) 103,6 g / kg. 5.6.2 Triptófano, con punto de fusión 282 ° C; contenido de nitrógeno (N) 137,2 g / kg. Secar antes de su uso.
5.7 Solución de hidróxido de sodio, w (NaOH) = 33% (fracción de masa). 5.8 Líquido colectante, ya sea 5.8.1 o 5.8.2. 5.8.1 Ácido sulfúrico, solución estándar, c (H 2SO4) = 0,05 mol/l o c(H 2SO4) = 0,125 mol/l. 5.8.2 Ácido bórico, ρ (H3BO3) = 40 g/l. 5.9 Soluciones para la titulación. 5.9.1 Hidróxido de sodio, solución estándar volumétrica, c (NaOH) 0,1 mol/l o c (NaOH) = 0,25 mol/l. 5.9.2 Ácido sulfúrico, solución estándar, c (H 2SO4) = 0,05 mol/l o C (H 2SO4) = 0,125 mol/l. La molaridad de las soluciones volumétricas estándar debe ser conocida hasta el cuarto punto decimal.
5.10 Indicador mezclado, punto neutro a pH 4,4 a 5,8. Disolver 2 g de rojo de metilo y 1 g de azul de metileno en 1 000 ml de etanol φ [(C 2H5OH) = 95% (fracción volumen)].
6. PREPARACION DE LA MUESTRA El producto drenado, se pasa por dos veces como mínimo a través del desmenuzador mecánico y luego se mezcla convenientemente, hasta lograr una muestra homogénea.
7. PROCEDIMIENTO ADVERTENCIA - Las operaciones descritas en los párrafos 7.3.1 y 7.3.2 deben llevarse a cabo en una campana bien ventilada o en una campana de humos que sea resistente al ácido sulfúrico.
7.1 General Para obtener instrucciones generales sobre la aplicación del método de Kjeldahl, véase la Norma ISO 1871.
7.2 Porción de prueba Pesar, con precisión de 1 mg, una masa de la muestra elegida de acuerdo con el contenido de nitrógeno esperado de tal forma que la muestra de ensayo contenga entre 0.005 g y 0,2 g de nitrógeno y, preferiblemente, más de 0,02 g. La masa de la porción de ensayo de muestra homogénea seca al aire debe estar entre 0,5 g y 2,0 g. La masa de la porción de ensayo de muestras húmedas y / o no homogénea debe estar entre 2,5 g y 5,0 g.
7.3 Determinación 7.3.1 Digestión de la materia orgánica Transferir la porción de ensayo cuantitativamente a un matraz de digestión Kjeldahl de tamaño adecuado (normalmente 800 ml). Añadir 15 g de sulfato de potasio (5.1). (Continúa) ___________________________________________________________ ______________________ -2-
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Añadir una cantidad apropiada de catalizador de la siguiente manera: 0,3 g de óxido de cobre (II) (5.2.1) o 0,9 g a 1,2 g de sulfato pentahidrato de cobre (II) (5.2.2). Añadir 25 m l de ácido sulfúrico (5.3) para el prim er gramo de materia seca de la porción de ensayo y 6 ml a 12 ml para cada gramo adicional de materia seca. Mezclar bien, asegurando humectación completa de la muestra problema. Apoyar el matraz de manera que su eje está inclinado en un ángulo de 30 ° a 45 ° con la vertical. Mantener el matraz en esta posición a lo largo del calentamiento. Calentar el matraz primero con moderación para evitar que la espuma suba en el cuello del matraz o escape del matraz.
NOTA 1 Puede ser aconsejable añadir un agente anti-espumante tal como cera de parafina (5.4). Calentar moderadamente, agitando de vez en cuando, hasta que la masa haya carbonizado y la espuma haya desaparecido.
A continuación, calentar más intensamente hasta que el líquido hierva de forma constante.
NOTA 2 El calentamiento es adecuado si se condensa el ácido en ebullición hacia el centro del cuello del matraz Kjeldahl.
Evitar el sobrecalentamiento de las paredes del matraz no en contacto con el líquido.
NOTA 3 Si se utiliza una llama, el sobrecalentamiento, por ejemplo se puede evitar colocando el matraz en una hoja de material resistente al calor con una abertura de diámetro ligeramente inferior que la del matraz en el nivel del líquido.
Después de que el líquido ha quedado claro con un ligero color verde-azul, calentar durante otras 2 h. Deje que se enfríe. Si el digerido comienza a solidificarse, agregar un poco de agua y mezclar por agitación.
7.3.2 Destilación de amoníaco 7.3.2.1 Añadir cuidadosamente 250 ml a 350 ml de agua para disolver completamente los sulfatos. Si es necesario, facilitar la disolución calentando el matraz en agua caliente. Mezclar por agitación y dejar enfriar. Añadir unas pocas ayudas de ebullición (5.12). Para algunas muestras específicas, los sulfatos no pueden disolverse completamente en el agua añadida. En ese caso, se recomienda repetir la digestión con una masa reducida de sulfato de potasio (5.1). 7.3.2.2 Pipetear, poner en el matraz recolectante del aparato de destilación, 25 ml de ácido sulfúrico (5.8.1), la elección de la concentración de acuerdo con el contenido de nitrógeno esperado de la porción de ensayo. Añadir 100 ml a 150 ml de agua. Añadir unas gotas de la mezcla de indicadores (5.10). Proceda de acuerdo con 7.3.2.4. 7.3.2.3 Alternativamente, transferir en el matraz de recolección de 100 ml a 250 ml de ácido bórico (5.8.2). Añadir unas pocas gotas de indicador mixto (5.10). La valoración simultánea del amoníaco (véase 7.3.3.3) durante la destilación es recomendable ya que facilita la verificación del final de la destilación. 7.3.2.4 Sumergir el extremo del refrigerante en el líquido contenido en el matraz de recogida, a una profundidad de menos de 1 cm. Verter lentamente 100 ml de solución de hidróxido sódico (5.7) en el matraz de digestión a lo largo de la pared. Conectar inmediatamente el matraz al aparato de destilación. (Continúa) ___________________________________________________________ ______________________ -3-
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Calentar el matraz de tal manera que aproximadamente 150 ml de destilado se recoja en 30 min. Al final de este tiempo, comprobar el pH del destilado a la punta del condensador con el papel de tornasol (5.11). Si la reacción es alcalina, continuar la destilación.
IMPORTANTE - Levantar el condensador del líquido justo antes del final de la destilación, para evitar contraflujo. Si, durante la destilación utilizando ácido sulfúrico como líquido colectante, el contenido del matraz colectante se convierte en alcalino, recomenzar la determinación, haciendo los ajustes apropiados.
7.3.3 Titulación 7.3.3.1 Se recomienda la titulación con indicación de punto final automático usando un pH-metro. De lo contrario, el punto final se indica por el cambio en el color de la mezcla de indicadores (5.10) añadido en 7.3.2. 7.3.3.2 Si se utiliza ácido sulfúrico como líquido colectante, se valora, en el matraz colector, el ácido sulfúrico en exceso con una solución de hidróxido de sodio (5.9.1), c (NaOH) = 0,1 mol / l ó c (NaOH) = 0,25 mol / l, según corresponda, hasta que el punto final se indique mediante el pH-metro o hasta que el color cambia de violeta a verde. 7.3.3.3 Si el ácido bórico se utiliza como líquido colectante, valorar el amoníaco con ácido sulfúrico (5.9.2), c (H2SO4) = 0,05 mol / l o C (H 2SO4) = 0,125 mol / l, según proceda, hasta que el punto final se indique mediante el pH-metro o cambie el color de verde a violeta. Si la titulación simultánea no es posible (véase 7.3.2.3), la valoración debe llevarse a cabo tan pronto como sea posible después de que la destilación esté completa, asegurando que la temperatura del destilado no exceda de 25 ° C. Bajo estas condiciones, se evitan las pérdidas de amoníaco.
7.4 Ensayo en blanco Realizar un ensayo en blanco utilizando aproximadamente 1 g de sacarosa (5.5) en lugar de la muestra problema.
7.5 Comprobar la prueba Realizar una prueba de comprobación mediante la determinación del contenido de nitrógeno de la acetanilida (5.6.1) o triptófano (5.6.2) después de adición de 1 g de sacarosa (5.5). La elección de la sustancia para el ensayo de control debe estar relacionada con la digestibilidad de las muestras que se ha analizado. La acetanilida se digiere fácilmente, mientras que la digestión de triptófano es más difícil. La recuperación de nitrógeno a partir de la acetanilida o triptófano debe ser al menos el 99,5% para la acetanilida y al menos 99,0% para el triptófano.
8. CÁLCULOS 8.1 Cálculo del contenido de nitrógeno 8.1.1 Destilado recogido en ácido sulfúrico A condición de que los volúmenes de ácido sulfúrico utilizado para recoger el amoníaco para la determinación (7.3) y para el ensayo en blanco (7.4) sean iguales, calcular el contenido de nitrógeno, WN1, en gramos por kilogramo de la muestra de ensayo, por la siguiente ecuación:
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En donde V0 es el volumen en ml de la solución de hidróxido de sodio (5.9.1) que se requiere para el ensayo en blanco; V1 es el volumen, en mililitros, de la solución de hidróxido de sodio (5.9.1) que se requiere para la determinación; c1 es la concentración, en moles por litro, de la solución de hidróxido de sodio (5.9.1) utilizada para las valoraciones; M es la masa molar, en gramos por mol, de nitrógeno (M = 14 g / mol); m es la masa, en gramos, de la porción de ensayo. Reporte el resultado con una precisión de 0,01 g / kg.
8.1.2 Destilado recogido en ácido bórico Calcular el contenido de nitrógeno de la muestra de ensayo por la ecuación:
En donde: wn2 es el contenido de nitrógeno, en gramos por kilogramo, de la muestra de ensayo; V2 es el volumen, en mililitros, del ácido sulfúrico (4.9.2) requerido para el ensayo en blanco; V3 es el volumen en ml de ácido sulfúrico (4.9.2) que se requiere para la determinación; M es la masa molar, en gramos por mol, de nitrógeno (M 14 g / mol); C2 es la concentración, en moles por litro, del ácido sulfúrico (4.9.2) utilizado para las valoraciones; m es la masa, en gramos, de la porción de ensayo. Reporte el resultado con una precisión de 0,01 g / kg.
9. PRECISION DEL METODO La diferencia entre los resultados de dos determinaciones efectuadas simultáneamente o en sucesión rápida no debe exceder de 0,002 mg de nitrógeno por 100 g de muestra
10 INFORME DE PRUEBA El informe de ensayo deberá especificar: a) toda la información necesaria para la completa identificación de la muestra; b) el método de muestreo utilizado, si se conoce; c) el método de ensayo utilizado, con referencia a esta parte de la norma ISO 5983;
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d) todos los detalles operativos no especificados en esta parte de la Norma INEN 0182, o considerados como opcionales, junto con detalles de cualquier incidente ocurrido durante la realización del procedimiento, que puede haber influido en el resultado de la prueba (s); e) el resultado de la prueba obtenido.
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APENDICE Z Z.1 NORMAS A CONSULTAR INEN 179 Conservas envasadas de pescado. Muestreo.
Z.2 BASES DE ESTUDIO Norma OFSANPAN lALUTZ 031-02-00. Determinación de bases volátiles totales, OPS/OMS Oficina Sanitaria Panamericana. Washington, 1968. Norma ISO 5983-1, Alimentos para animales - Determinación del contenido de nitrógeno y cálculo del contenido de proteína cruda - Parte 1: Método Kjeldahl
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(Continúa) DESCRIPTORES:
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INFORMACIÓN COMPLEMENTARIA Documento: TÍTULO: CONSERVAS ENVASADAS DE PESCADO Código: NTE INEN DETERMINACION DEL CONTENIDO DE NITROGENO 0182 ORIGINAL: REVISIÓN: Fecha de iniciación del estudio: Fecha de aprobación anterior del Consejo Directivo Oficialización con el Carácter de por Resolución No publicado en el Registro Oficial No. Fecha de iniciación del estudio: Fechas de consulta pública: de
a
Subcomité Técnico: Fecha de iniciación: Integrantes del Subcomité Técnico:
Fecha de aprobación:
NOMBRES:
INSTITUCIÓN REPRESENTADA:
Mediante compromiso presidencial N° 16364, el Instituto Ecuatoriano de Normalización – INEN, en vista de la necesidad urgente, resuelve actualizar el acervo normativo en base al estado del arte y con el objetivo de atender a los sectores priorizados así como a todos los sectores productivos del país. Para la revisión de esta Norma Técnica se ha considerado el nivel jerárquico de la normalización, habiendo el INEN realizado un análisis que ha determinado su conveniente aplicación en el país. La Norma en referencia ha sido sometida a consulta pública por un período de 30 días y por ser considerada EMERGENTE no ha ingresado a Subcomité Técnico.
Otros trámites: Esta NTE INEN 0182:2012, reemplaza a la NTE INEN 0182:75 La Subsecretaría de la Calidad del Ministerio de Industrias y Productividad aprobó este proyecto de norma Oficializada como:
Por Resolución No.
Registro Oficial No.
