Quito – Ecuador
NORMA TÉCNICA ECUATORIANA
NTE INEN-ISO 7218 Primera edición 2014-01
MICROBIOLOGÍA DE LOS ALIMENTOS PARA CONSUMO HUMANO Y ALIMENTACIÓN ALIMENTACIÓN ANIMAL. ANIMAL. REQUISITOS GENERALES Y GUÍA PARA EL EXAMEN MICROBIOLÓGICO (ISO 7218:2007, IDT)
MICROBIOLOGY OF FOOD AND ANIMAL FEEDING STUFFS. GENERAL REQUIREMENTS AND GUIDANCE FOR MICROBIOLOGICAL EXAMINATIONS EXAMINATIONS (ISO 7218:2007, 7218:2007, IDT)
__________________ ____________________________ ___________________ _________ Correspondencia: Esta Norma Técnica Ecuatoriana es una traducción idéntica de la Norma Internacional ISO 7218:2007
DESCRIPTORES: Microbiología, Microbiología, alimentos, consumo, humano, animal, requisitos ICS: 07.100.30
74 Páginas
© ISO 2007 Todos los derechos reservados © INEN 2014.
NTE INEN-ISO 7218
2014-01
Prólogo nacional Esta Norma Técnica Ecuatoriana NTE INEN-ISO 7218 es una traducción idéntica de la Norma Internacional ISO 7218:2007, “Microbiology of food and animal feeding stuffs. General requirements and guidance for microbiological examinations”, la fuente de la traducción es la norma adoptada por AENOR. El comité nacional responsable de esta Norma Técnica Ecuator iana y de su adopción es el Comité Interno del INEN.
2014-1134
© ISO 2007 Todos los derechos reservados © INEN 2014 i
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ISO 7218:2007
ÍNDICE Página PRÓLOGO.
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INTRODUCCIÓN .
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1
OBJETO Y CAMPO DE APLICACIÓN .
2
NORMAS PARA CONSULTA.
3 3.1 3.2 3.3 3.4 3.5 3.6
INSTALACIONES. Generalidades . Consideraciones de seguridad. Diseño del laboratorio . Áreas del laboratorio . Distribución y características de los edificios . Limpieza y desinfección .
4 4.1 4.2 4.3 4.4
PERSONAL. Generalidades . Competencia . Verificación del nivel de competencia del personal a lo largo del tiempo . Higiene .
5 5.1 5.2 5.3 5.4 5.5 5.6 5.7 5.8 5.9 5.10 5.11 5.12 5.13 5.14 5.15 5.16 5.17 5.18 5.19 5.20 5.21 5.22 5.23 5.24 5.25 5.26 5.27 5.28
APARATOS Y EQUIPAMIENTO. Generalidades . Cabinas de protección. Balanzas y diluidores gravimétricos. Homogeneizadores, trituradoras y mezcladoras. pH-metro. Autoclave. Preparador de medios. Incubador. Neveras, cámaras de refrigeración . Congeladores y ultracongeladores. Baño termostático. Vaporizadores, incluidos los baños de agua en ebullición . Horno de esterilización . Horno microondas. Lavavajillas para material de vidrio . Microscopios ópticos . Mecheros de gas o incineradores de agujas . Dispensadores de reactivos y medios de cultivo. Mezclador tipo vórtex . Contador de colonias. Equipamiento para cultivo en atmósfera modificada . Centrífuga . Placa calefactora y manta eléctrica . Sembrador espiral . Destiladores, desionizadores y unidades de ósmosis inversa. Temporizadores y dispositivos de control del tiempo . Pipetas y pipeteadores. Termómetros y sistemas de control de la temperatura, incluyendo los registradores automáticos .
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8 9 9 10 10 10 11 11 11 12 14 14 14 14 14 14 15 15 16 17 18 19 20 21 21 22 23 24 25 25 26 27 28 28 29 29 30 30 31 31 32 33 33 34 34
ISO 7218:2007
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5.29 5.30 5.31
Separador inmunomagnético . Sistema de filtración. Otros equipos y programas informáticos.
6
6.6 6.7 6.8
PREPARACIÓN DEL MATERIAL DE VIDRIO Y DEL RESTO DEL MATERIAL DE LABORATORIO. Preparación. Esterilización/descontaminación. Equipamiento y materiales desechables . Almacenamiento del material de vidrio y del resto del material de laboratorio limpio. Mantenimiento del material de vidrio y del resto del material de laboratorio estéril . Descontaminación y desinfección. Tratamiento de residuos . Lavado.
7
PREPARACIÓN Y ESTERILIZACIÓN DE LOS MEDIOS DE CULTIVO .
39
8 8.1 8.2 8.3 8.4 8.5
MUESTRAS DE LABORATORIO. Toma de muestras . Transporte . Recepción . Almacenamiento. Porción para análisis.
39 39 39 40 41 41
9 9.1 9.2
ANÁLISIS. Precauciones de carácter higiénico durante los análisis . Preparación de las suspensión inicial y de las diluciones.
41 41 43
10 10.1 10.2 10.3 10.4 10.5
RECUENTO . Generalidades . Recuento en medio sólido . Cálculo y expresión de los resultados obtenidos con los medios sólidos . Recuento de levaduras y mohos . Recuento mediante el uso de un medio líquido.
43 43 44 46 52 52
11 11.1 11.2 11.3
MÉTODO DE DETECCIÓN (MÉTODO CUALITATIVO). Generalidades . Principio. Medida de la incertidumbre.
58 58 58 59
12 12.1 12.2 12.3 12.4 12.5 12.6
MÉTODOS DE CONFIRMACIÓN . Generalidades . Preparación de un cultivo puro. Tinción de Gram (técnica de Hucker modificada) . Uso de galerías bioquímicas para la identificación . Uso de sondas de ácidos nucleicos para la identificación. Métodos serológicos .
59 59 59 59 61 61 61
13
INFORME DEL ANÁLISIS .
62
14 14.1 14.2 14.3
VALIDACIÓN DE LSO MÉTODOS MICROBIOLÓGICOS. Validación de los métodos de referencia . Validación de los métodos alternativos . Validación de los métodos internos.
62 62 62 63
6.1 6.2 6.3 6.4
.......................... .............................. .............................. ...................
6.5
36 36 36 36 36 37 37 37 37 38 38 39
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15
ISO 7218:2007
VALORACIÓN DE LA CALIDAD DE LOS RESULTADOS/CONTROL DE CALIDAD DEL FUNCIONAMIENTO DEL MÉTODO. Control interno de la calidad. Cepas de referencia . Valoración externa de la calidad (ejercicios interlaboratorios) .
......................................
15.1 15.2 15.3
63 63 63 63
ANEXO A (Informativo) PROPIEDADES DE ALGUNOS DESINFECTANTES.
64
ANEXO B (Normativo)
65
BIBLIOGRAFÍA.
DETERMINACIÓN DEL NÚMERO MÁS PROBABLE (NMP)...
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ISO 7218:2007
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PRÓLOGO ISO (la Organización Internacional de Normalización) es una federación mundial de organismos nacionales de normalización (organismos miembros de ISO). El trabajo de preparación de las normas internacionales normalmente se realiza a través de los comités técnicos de ISO. Cada organismo miembro interesado en una materia para la cual se haya establecido un comité técnico, tiene el derecho de estar representado en dicho comité. Las organizaciones internacionales, públicas y privadas, en coordinación con ISO, también participan en el trabajo. ISO colabora estrechamente con la Comisión Electrotécnica Internacional (IEC) en todas las materias de nor malización electrotécnica. Las normas internacionales se redactan de acuerdo con las reglas establecidas en la Parte 2 de las Directivas ISO/IEC. La tarea principal de los comités técnicos es preparar normas internacionales. Los proyectos de normas internacionales adoptados por los comités técnicos se envían a los organismos miembros para su votación. La publicación como norma internacional requiere la aprobación por al menos el 75% de los organismos miembros con derecho a voto. Se llama la atención sobre la posibilidad de que algunos de los elementos de esta norma internacional puedan estar sujetos a derechos de patente. ISO no asume la responsabilidad por la identificación de cualquiera o todos los derechos de patente. La Norma Internacional ISO 7218 fue preparada por el Comité Técnico ISO/TC 34 Productos agrícolas alimenticios, Subcomité SC 9, Microbiología, en colaboración con el Comité Técnico CEN/TC 275, Análisis de los productos alimenticios. Métodos horizontales. Esta tercera edición anula y sustituye a la segunda edición (ISO 7218:1996), que ha sido revisada técnicamente. También incorpora la Modificación ISO 7218:1996/Amd 1:2001.
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ISO 7218:2007
INTRODUCCIÓN Cuando se realizan análisis microbiológicos, es especialmente importante que:
− sólo se aíslen y se recuenten aquellos microorganismos presentes en las muestras; − los microorganismos no contaminen el medio ambiente. Para conseguir estos objetivos, es necesario prestar atención a las medidas de higiene personal, y emplear técnicas de trabajo que aseguren, en la medida de lo pos ible, la ausencia de contaminaciones de origen externo. Por lo tanto, en esta norma internacional, solamente se pueden proporcionar algunos ejemplos sobre las precauciones que deben adoptarse durante los análisis microbiológicos, y es esencial poseer un conocimiento detallado de las técnicas microbiológicas y sobre los microorganismos estudiados. Es importante que los análisis se realicen de la manera más exacta posible, incluyendo el seguimiento y el registro de todos aquellos aspectos que pudieran afectar a los res ultados y al cálculo del número de microorganismos, y a la incertidumbre de los resultados. Finalmente, es responsabilidad del director del laboratorio considerar si las manipulaciones son seguras y si se pueden considerar como buenas practicas de laboratorio. Por ejemplo, muchas manipulaciones pueden causar contaminaciones cruzadas de forma no intencionada. El analista debería verificar siempre la precisión de los resultados obtenidos con su técnica. Es necesario tomar algunas precauciones cuando se construye y equipa el laboratorio, para que la realización de los análisis sea la correcta. Deben tomarse algunas precauciones, no solamente por razones de higiene sino también para asegurar una buena reproducibilidad de los resultados. No se pueden especificar todas las precauciones que deben tomarse en todas las posibles circunstancias, pero esta norma internacional establece al menos las principales medidas que se deben tomar para preparar, esterilizar y almacenar los medios y utilizar el equipamiento. Si se siguen las orientaciones indicadas en esta norma internacional, se contribuirá también al mantenimiento de la salud y la seguridad del personal. Se puede encontrar información adicional sobre este tema en las referencias dadas en el apartado de bibliografía. Para distinguir la guía orientativa dentro de esta nor ma internacional, se ha impreso en un tipo de letra distinto ( Arial).
1 OBJETO Y CAMPO DE APLICACIÓN Esta norma internacional indica los requisitos generales y ofrece unas opciones/una guía orientativa con tres objetivos principales:
− implementación de las Normas del Subcomité ISO/TC 34/SC 9 o del Subcomité ISO/TC 34/SC 5 para la detección o el recuento de microorganismos, denominadas de aquí en adelante “normas específicas”;
− las buenas prácticas de laboratorio en los laboratorios de microbiología de los alimentos (no es propósito de esta norma internacional detallar dichas prácticas; existen manuales disponibles para ello);
− una guía orientativa para la acreditación de los laboratorios de microbiología de los alimentos (esta norma internacional describe los requisitos técnicos para la acreditación de un laboratorio de microbiología por parte de las organizaciones nacionales conforme al anexo B de la Norma ISO/IEC 17025:2005). Los requisitos de esta norma internacional anulan y sus tituyen a los de las normas específicas existentes. En la Norma ISO 22174 se ofrecen indicaciones adicionales sobre los análisis dentro del campo de la biología molecular.
INFORMACIÓN COMPLEMENTARIA Documento: NTE INEN-ISO 7218
TÍTULO: MICROBIOLOGÍA DE LOS ALIMENTOS PARA Código: ICS CONSUMO HUMANO Y ALIMENTACIÓN ANIMAL. 07.100.30 REQUISITOS GENERALES Y GUÍA PARA EL EXAMEN MICROBIOLÓGICO (ISO 7218:2007, IDT)
ORIGINAL: Fecha de iniciación del estudio: 2013-11-25
REVISIÓN: La Subsecretaría de la Calidad del Ministerio de Industrias y Productividad aprobó este proyecto de norma Oficialización con el Carácter de por Resolución No. publicado en el Registro Oficial No. Fecha de iniciación del estudio:
Fechas de consulta pública: 2013-11-27 al 2013-12-12 Comité Interno del INEN: Fecha de iniciación: 2013-12-13 Integrantes del Comité Interno:
Fecha de aprobación: 2013-12-13
NOMBRES:
INSTITUCIÓN REPRESENTADA:
Eco. Agustín Ortiz (Presidente) Ing. José Luis Pérez Ing. Paola Castillo Ing. Tatiana Briones
DIRECCION EJECUTIVA COORDINACIÓN GENERAL TÉCNICO DIRECCIÓN DE NORMALIZACIÓN DIRECCIÓN DE VALIDACIÓN Y CERTIFICACIÓN DIRECCIÓN DE METROLOGÍA DIRECCION DE REGLAMENTACIÓN DIRECCIÓN DE NORMALIZACIÓN
Ing. Laura González Ing. Bolívar Cano Ing. Gonzalo Arteaga (Secretaría Técnica)
Otros trámites: Compromiso Presidencial N° 20549 del 08 de junio del 2013, para el fortalecimiento de normas del Instituto Ecuatoriano de Normalización – INEN Esta NTE INEN-ISO 7218:2014, reemplaza a la 17:1973 La Subsecretaría de la Calidad del Ministerio de Industrias y Productividad aprobó este proyecto de norma Oficializada como: Voluntaria Por Resolución No. 13531 de 2013-12-20 Registro Oficial Suplemento No. 155 de 2014-01-06
