MEDIOS DE CULTIVO
*ASM: Agar salado manitol
Medio selectivo para S. aureus Indicador de pH: Rojo fenol Sustrato: Manitol Agente bacteriostático: Alta concentración de NaCl (7.5%) Lectura: Fermentación manitol Amarillo (S.aureus) No fermentación manitol Rojo (S. epidermidis) *DNA:
Medio diferencial Indicador de pH: No tiene Lectura: Actividad de la enzima Dnasa Para la lectura se debe agregar HCl 1N, Precipitación No degradación Color café claro o halo Dnasa Medio de cultivo utilizado para la detección de enzimas desoxirribonucleasas. Es especialmente útil para la diferenciación entre especies de estafilococos, así como para la diferenciación de Serratia spp. de especies de Klebsiella y Enterobacter. Resultados
Positivo: halo claro, transparente Negativo: el medio se observa opaco.
alrededor
del
crecimiento
bacteriano.
*Baird Parker:
Medio selectivo para S. aureus; medio diferencial para identificar la enzima lipasa. Componentes: Cloruro de litio y telurito de Potasio Inhibe el crecimiento Glicina y piruvato de Potasio Favorece el crecimiento de S. aureus. Lectura: Colonias de color negro indican S. aureus.
Este medio de cultivo es selectivo y diferencial debido al telurito de potasio y al cloruro de litio, los cuales inhiben el desarrollo de la flora acompañante. La yema de huevo permite demostrar la actividad lecitinásica. Los estafilococos coagulasa positiva reducen el telurito a teluro y originan colonias de color grisáceo-negro, y dan reacción sobre la yema de huevo produciendo alrededor de la colonia una zona opaca que a menudo tiene una zona clara mas externa. Se pueden encontrar cepas no lipolíticas, que presentan igual características de colonias pero sin la zona opaca y clara. Se debe confirmar la presencia de S. aureus mediante pruebas bioquímicas. *AS:
Medio enriquecido Crecen bacterias Gram (+) y Gram (-) aerobias Lectura: Hemólisis (Uso de los glóbulos rojos) alfa (parcial), Beta (Total), Gamma (No hay). Colonias pequeñas, puntiformes, blancas o amarillas Sugestivas Gram (+) Colonias Grandes, brillantes, mucoides Sugestivas Gram (-) Hemolisis: Beta: Halo traslucido Alfa: Halo verde Gama: no hay hemolisis *ACH:
Medio enriquecido Crecen aerobios Gram (+) y Gram (-) Lectura: Utilización del hem (Factor X y V) Colonias pequeñas, puntiformes, blancas o amarillas Sugestivas Gram (+) Colonias Grandes, brillantes, mucoides Sugestivas Gram (-) *BHI:
Medio enriquecido
Lectura: Claridad Negativo Turbidez Positiva 18-24 horas a 37°C] Incubación No deben de haber bacterias, si las hay, bacteriemia, septicemia o tifo (febril) Bac. Tracto intestinal Factor de coagulación: fibrina, cuando hay coagulo dentro del caldo en todo el medio Bacterias gram ( + ) y ( - ) *TSI:
Medio diferencial (Aerobios-anaerobios) Inclinado Actividad enzimática, metabólica, anaerobiosis y aerobiosis Sustrato: Glucosa, lactosa, sacarosa Indicador de pH: Rojo fenol o rojo neutro Amarillo: reacción ácida, fermentación de carbohidratos Lectura: Fermentación glucosa o lactosa, producción de gas (CO2), producción de H2S (Sulfidrilos) Amarillo Fermentación Glucosa (Arriba); Lactosa (Abajo) Aerobio; anaerobio *SS:
Medio diferencial para Salmonella y Shigella (Fermentadoras de glucosa) Medio selectivo para bacterias gram negativas Indicador de pH: Rojo fenol Sustrato: Lactosa Agente bacteriostáticos: Sales biliares, verde brillante, tiosulfato sódico Tipo de siembra: Semicuantitativa Lectura: Fermentación de lactosa Medio rosado y colonias rosadas No fermentación de lactosa Medio amarillo y colonias rosadas (Salmonella y Shigella). Presencia de H2S: Salmonella *EMB:
Medio selectivo para Gram (-) Indicador de pH: Eosina azul de metileno Sustrato: Glucosa y lactosa Se lee glucosa Agente bacteriostático: Eosina azul de metileno Lectura: Bacterias fermentadoras de glucosa Fermentación de glucosa Colonias moradas No fermentación de glucosa Colonias rosadas o blancas E.coli Fermentador de lactosa y brillo metálico Klebsiella: mucoide *XLD: Xilosa lisina dexosicolato
Medio selectivo para Salmonella y Shigella en alimentos Indicador de pH: Rojo fenol o rojo neutro Sustrato: Xilosa, lisina Agente bacteriostático: Tiosulfato sódico y desoxicolato, sales biliares. Lectura: Fermentación de Xilosa Medio amarillo No fermentadoras de xilosa Medio rojo (Salmonella y Shigella) Salmonella: Sulfidrilos *TCBS: Tiosulfato Citrato Bilis Sacarosa
Medio selectivo para Vibrium colera Indicador de pH: Azul de bromotimol Sustrato: Citrato y sacarosa Agente bacteriostático: Tiosulfato, bilis Lectura: Fermentadoras Medio verde y colonias escasa No fermentadoras Medio amarillo (Vibrio) *Simon’s Citrato:
Prueba diferencial para Gram (-) Indicador de pH: Azul de bromotimol Sustrato: Citrato, tiosulfato sódico y cloruro férrico (Ver producción de Sulfidrilos) Siembra: Picadura Lectura: Utilización del citrato Medio azul rey por alcalinización Presencia de Sulfidrilos Uso del citrato y enzima triosulfato reductasa
*Urea:
Caldo diferencial para Gram (-) Indicador de pH: Rojo fenol Sustrato: Urea Lectura: Presencia de la enzima ureasa Siembra: Mezcla
Medio
cambia a color Fucsia
*SIM: Sulfato indol motilidad
Prueba diferencial para Gram (-) Siembra: Picadura hasta las ¾ partes del medio (No hay estrías) Sustrato: Triptófano Indicador de pH: No tiene Lectura: Presencia de flagelos Motilidad (+) El triptófano de la bacteria desdobla el triptófano en indol, escatol e indol acético. El reactivo de kovac’s por 2’ sobre el agar produce un color cereza si hay
triptofanasa. *LIA: Lisina Hierro Agar
Prueba diferencial para Gram (-) Sustrato: Lisina y baja concentración de glucosa Indicador de pH: Púrpura de bromocresol Siembra: Picadura Lectura: Desaminación Vino tinto (Aerobio) Descarboxilación Morado (Anaerobio) *Mac Konkey:
Sustrato: Lactosa Indicador de pH: Rojo fenol Agente bacteriostático: Cristal violeta, sales biliares Lectura: Fermentación lactosa Rosado intenso No fermentación de lactosa Blanco o amarillo *SABORAUD:
Selectivo para cultivo de hongos y levaduras. Inhibe toda la flora bacteriana que hay en la zona. *Agar Muller Hilton:
Este medio de cultivo ha sido recomendado universalmente para la prueba de sensibilidad a los antimicrobianos. Además es útil con el agregado de sangre para el cultivo y aislamiento de microorganismos nutricionalmente exigentes.
Medio de prueba.
*Caldo bilis verde brillante:
Medio selectivo para la detección del grupo coliforme a partir de agua, leche, derivados lácteos y otros productos de importancia sanitaria e investigar la presencia rápida de Escherichia coli por fluorescencia y confirmación por la formación de gas y prueba del indol.
La presencia de gas en la campana de Durham después de incubar 24 – 48 h a 35ºC se considera como prueba positiva para la presencia del grupo Coli – Enterobacter La presencia de gas en la campana de Durham es prueba presuntiva de la presencia de coliformes. Utilizando una lámpara de luz UV de 366 nm, los tubos que muestran fluorescencia azul claro confirman la presencia de Escherichia coli. Para confirmar el resultado agregar 3 o 4 gotas del reactivo de Kovacs, un anillo de color rojo del reactivo después de 2 a 10 segundos se interpreta como reacción positiva. *Agar nutritivo
Medio de cultivo utilizado para propósitos generales, para el aislamiento de microorganismos poco exigentes en lo que se refiere a requerimientos nutritivos. Su uso está descripto en muchos procedimientos para el análisis de alimentos, aguas y otros materiales de importancia sanitaria. *PCA
Medio de cultivo recomendado para el recuento de bacterias aeróbicas en aguas, aguas residuales, productos lácteos y otros alimentos. También es recomendado como medio general para determinar poblaciones microbianas. *Thayer martin
Medio selectivo para el aislamiento de neisserias patógenas Las colonias de gonococos y meningococos obtenidas en este medio selectivo son usualmente opacas, grisáceas, convexas, de 1-4 mm de diámetro. Luego de 48 h de incubación pueden transformarse en colonias mucoides. Coloración de Gram: diplococos Gram negativos. Se sugiere proseguir con este esquema de identificación. Siembra con isopo *SPS
*Caldo tioglicolato
Es el caldo de enriquecimiento más utilizado en Microbiología. Contiene 0,075 % de Ágar para evitar que las corrientes de convección transporten el oxígeno de la superficie a toda la masa del caldo. El ácido Tioglicólico actúa como agente reductor, disminuyendo aun más el potencial de óxido-reducción del medio. Con el agregado de muchos factores nutrientes (Caseina, extractos de Levadura y Carne, Vitaminas, etc), el medio permite el desarrollo de la mayor parte de las bacterias patógenas. Hay distintas fórmulas modificadas en las que se han incluido otros componentes: un indicador de óxido-reducción (Resazurina), Glucosa, Vitamina K1 y Hemina.