medios de cultivo.docx

CALDO GLUCOSADO

Este medio de cultivo se utiliza para el crecimiento y multiplicación de diversos microorganismos. Como no contiene más hidratos de carbono que la glucosa, el medio medio es adecu adecuado ado para para la demos demostra tració ción n de fermen fermentac tación ión de glucos glucosa a cuando se agrega previamente un indicador de pH. pH =.!"#.$ %eptona de case&na

$#.#g

E'tracto de carne

!.#g

(aCl

).#g

*lucosa

$#.#g

 +gua destilada

$.#$g

AGAR ALMIDON

Este Este medi medio o se util utiliz iza a para para iden identi tific ficar ar micr microo oorg rgan anis ismo mos s que que degr degrad adan an el almidón. a hidrolisis del almidón se evidencia cubriendo la placa con una solución de lugol. -e forma un compleo color azul con el almidón, ausente en las zonas donde hubo hidrolisis. -i las colonias son almidón positivas, aparece un halo transparente alrededor de las mismas.

E'tracto de carne

!.#g

%eptona

).#g

 +lmidón soluble

/.#g

 +gar0 agar

$).#g

 +gua destilada

$.#$

AGAR TRIBUTIRINA

Este medio se utiliza para la identificación de microorganismos lipoliticos. a degradación de tributirina produce halos de aclaramiento alrededor de las colonias, en contrate con el resto del medio que permanece turbio. a incubación es hasta /h en condiciones óptimas. E'tracto de levadura

!.#g

%eptona

).#g

1ributirina

$#.#g

 +gar 2 agar

$).#g

 +gua destilada

$.#$

MEDIO DE GELATINA FUNDAMENTO

Ciertas bacterias elaboran una enzima e'tracelular que tiene la propiedad de hidrolizar la gelatina, esta enzima es conocida como *elatinasa. a presencia de gelatinasa puede ser demostrada inoculando un cultivo bacteriano en un medio conteniendo gelatina. pH 3.4 " #./. a prueba se realiza a temperatura a la cual la gelatina se mantenga en estado sólido por si misma 5por eemplo a !6C de temperatura7

COMPOSICIÓN

%eptona

).# g

*elatina

$/#.# g

E'tracto de carne

!.# g

 +gua destilada;

$###.# ml

PROCEDIMIENTO

8nocular los tubos en profundidad e incubar a !6C durante /9 hrs., 8ncubar  tubos sin inocular para el control. INTERPRETACIÓN

a presencia de l&quido significa que la gelatina ha sido hidrolizada 5liquefactada7. %or el contrario, si el medio permanece sólido es se:al de que la bacteria no posee la enzima gelatinasa. Este medio puede ser repartido en

placas, /#ml por placa y sembrado en estr&as, luego de la incubación se agrega el siguiente reactivo< REACTIVO DE FRAZIER

HgC/

$) g

 +gua destilada

$## ml

HCl5c7

/# ml .

%eptona de caseina

$#.#g

(aCl

).#g

 +gua destilada

$.#$

-e cubre la placa con el reactivo, cuando la gelatina no es hidrolizada, se formará un precipitado blanco muy opaco 5 ausencia de hidrólisis 7, y cuando la gelatina es hidrolizada se formará un halo claro en el contorno de la colonia sobre la estr&a. CALDO TRIPTOSA

%ara enriquecimiento, aislamiento, cultivo y diferenciación, sobre todo de brucellas, pero tambin de Estreptococcos, %neumococcos, >eningococos, isterias, %asteurellas y otros microorganismos patógenos.  +islamientos de razas de brucellas a partir de cultivos mi'tos< a adición de violeta cristal sirve para la inhibición de la flora gram positiva. ?iferenciación de las especies de @rucella, en base a su sensibilidad frente a determinados colorantes< +dición de tionina y fuscina básica. Este medio de cultivo constituye una buena base para la preparación de agar0 agar. 8nvestigación de brucella melitensis en hemocultivos< +dición de sodio citrato, como anticoagulanteA la adición de agar0agar y el cultivo en atmósfera con $#B de C/ aumentan el rendimiento en @rucellasA pH .!"#./ a peptona de case&na 5triptona7 consiste en una elevada proporción de triptófano, el cual degradado por los microorganismos indol 5D7 formándose indol. El cloruro de sodio mantiene el balance osmótico. -e incuba $/0/9 horas a !C. luego de la incubación se agrega el reactivo ovacs, en los microorganismos indol 5D7 la capa de reactivo toma un color  roo0cereza al cabo de pocos minutos.

MEDIO UREA

USO

-e emplea para la diferenciación de bacterias por medio de la utilización de la urea como Fnica fuente de carbono. PRINCIPIO

 a enzima ureasa hidroliza la urea en amon&aco y anhidrido carbónico, ante la variación de pH por la alcalinización, el indicador roo de fenol, vira de amarillo claro a ligeremente rosado o rosa me'icano. -e utiliza solamente para la detección de la actividad de la ureasa en especies del gnero %roteus que dan la prueba positiva despus de una incubación de 4 h. -i los nutrientes suministrados por el e'tracto de levadura se consumen antes de que la bacteria muestre un crecimiento aceptable no podrá determinarse con e'actitud su capacidad de hidrolizar la urea. -i un microorganismo es capaz de hidrolizar  la urea, pero no de utilizar el amon&aco como fuente de nitrógeno, no se produce crecimiento y es posible observar un resultado falso negativo. (o se recomienda para las bacterias con reacción de ureasa retardada. -embrar el medio de cultivo con el cultivo puro de ensayo. 8ncubar /9 2 94 h a !)GC. ormula en gramos por un litro de agua destilada E'tracto de levadura

#.$#g

osfato monopotasico

I.$#g

osfato disodico

I.)#g

Joo de fenol

#.#$g

urea

/#.#g