UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA CENTRO UNIVERSITARIO DEL SUR ORIENTE TÉCNICO EN PRODUCCIÓN PECUARIA REPRODUCCIÓN E INSEMINACIÓN ARTIFICIAL
LIC. ZOOT. EDWIN WILFREDO CONTRERAS DOCENTE
MANEJO REPRODUCTIVO E INSEMINACIÓN ARTIFICIAL EN CAPRINOS
200840513 MARIO EFRAÍN CORTÉZ RAYMUNDO
JALAPA MAYO 2010
MANEJO REPRODUCTIVO E INSEMINACION INSEMINACION ARTIFICIAL EN CAPRINOS
Mario Cortéz 2010
INTRODUCCIÓN
La especie Caprina es una de las más importantes en la producción de alimentos para consumo humano. Muchas regiones a nivel mundial basan su dieta alimenticia en la leche de cabra y subproductos de ésta; por ser una especie que aprovecha al máximo las fuentes de alimento en materia verde, seca, grano, ramas de árboles e incluso su corteza, espinos, y un sin número de fuentes alimenticias que los mismos animales van seleccionando en su ambiente. En todos los países existen productores de esta especie, por no tener una capacidad de ingesta grande, el manejo de esta especie es una buena alternativa para producir alimentos con alto valor nutritivo para la humanidad con costos de producción considerablemente bajos a comparación de los rumiantes mayores. La inseminación artificial al igual que en bovinos, ha representado una alternativa excelente para la producción caprina de alto valor genético. A nivel mundial existen unidades productivas con programas de Inseminación Artificial, el cual les permite mantener el mercado de la leche de cabra en todas las épocas del año. Pero existen diversas condiciones para llevar a cabo un programa de Inseminación Artificial en un rebaño caprino. Una de las más indispensables es la de una buena nutrición en las hembras reproductoras, una condición corporal apta para la reproducción y personal con experiencia en el tema para optimizar recursos y obtener resultados satisfactorios que permitan circular el capital invertido generando utilidades a un corto y mediano plazo. Actualmente existen dos tipos de Inseminación: la cervical y la laparoscopica, en ambas se usa semen fresco y/o congelado. Cada tipo de Inseminación Artificial requiere de animales en óptimo estado nutricional para obtener crías saludables y vigorosas que establezcan un mejoramiento genético mediante a través de la eficiencia reproductiva que ofrece la IA.
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OBJETIVOS
Identificar los requerimientos indispensables nutricionales que una cabra tiene que poseer para ser Inseminada Artificialmente. Describir el proceso de Inseminación Artificial Cervical y Laparoscopica. Analizar las ventajas y desventajas que posee cada método de inseminación.
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MANEJO REPRODUCTIVO CAPRINO
La obtención de altos rindes reproductivos es una meta de gran interés para los productores caprinos. Por un lado esto garantiza contar con la reposición necesaria que permita descartar los animales viejos y recuperar las pérdidas por mortandad. Por otro lado se fortalece la economía del productor porque le permite tener ingresos por venta de machos cebados. En el mismo sentido, aquellos productores que se encuentran implementando programas de mejoramiento genético deben procurar obtener buenos índices reproductivos para poder realizar una buena selección o simplemente un reemplazo más rápido de los animales viejos o de baja calidad. La cabra muestra una mayor o más fuerte relación que el ovino entre las condiciones ambientales y su fertilidad, lo que hace posible que las diferencias de machos nacidos y destetados puedan ser muy importantes si se incorporan prácticas de manejo adecuadas. Las mismas pueden ordenarse a partir de tres perfiles: ♦ Manejo nutricional y su influencia en el desempeño ♦ Manejo reproductivo propiamente dicho ♦ Atención en la parición
reproductivo
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MANEJO NUTRICIONAL
El manejo nutricional es, sin duda, el aspecto más importante de los tres señalados. La producción de los espermatozoides es un proceso que lleva alrededor de 60 días y bajos niveles nutricionales en los machos durante este período puede provocar deficiencias en la calidad de su semen. Estos requerimientos se intensifican al comenzar el período de servicio. Por lo tanto es necesario que los sementales lleguen en buen estado al inicio de la temporada de servicio. La actividad sexual de los sementales está en relación al estado corporal. Es sabido que aquellos que están flacos o en mal estado servirán menos hembras y de estas una considerable cantidad no quedarán preñadas. En este mismo sentido la madurez sexual de los machos tiene que ver con su desarrollo y peso corporal. En cuanto a las hembras existen dos períodos de importancia central. Durante el servicio su estado corporal debe ser bueno lo que facilita la implantación del embrión, fijación del feto a la placenta y ofrece un buen punto de partida para transitar las restricciones invernales. El último tercio de la gestación y el inicio de la lactancia es el otro periodo crítico. Un buen estado nutricional asegura el nacimiento de una cría fuerte y que la madre cuente con leche en cantidad y calidad suficiente. Es de destacar que la cabra, a diferencia de la oveja, tiende a abortar ante restricciones nutricionales fuertes durante la gestación. Debido a esta circunstancia, problemas nutricionales en esta etapa puede dar menor número de nacimientos. Para lograr estas metas debe lograrse que la hembra llegue al servicio en la mejor condición corporal posible y puede también reservarse un buen potrero para uso exclusivo durante el servicio y la parición y, eventualmente, pensar en una suplementación nutricional.
MANEJO REPRODUCTIVO PROPIAMENTE DICHO
Debe realizarse la selección de machos para sementales con la suficiente anticipación (2 meses antes del servicio) para permitir el proveerse de animales de
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reemplazo ante la detección de problemas. Por otra parte los estos no deberían estar más de dos años en el establecimiento para no correr el riesgo que den servicio a sus hijas y, de esta manera evitar la consanguinidad; la que puede estar asociada a malformaciones o enfermedades congénitas. El servicio se puede realizar a campo o a corral. En el primer caso es conveniente utilizar 3 a 4 machos por cada 100 hembras pudiendo aumentarse esta cifra en caso de ser de dos dientes y con poco desarrollo corporal. Sin embargo debe tenerse cuidado que el conjunto de castrones forme un lote más o menos parejo, porque si no se corre el riesgo que haya una diferenciación muy marcada entre animales más dominantes y los más tímidos. Hay que tener cuidado también cuando se introducen machos nuevos. Debe hacerse con tiempo de manera que el animal se adapte y además sea aceptado por el resto de los reproductores. El servicio a corral se organiza juntando en el corral dos o tres veces por días a las hembras con los castrones. Se deben controlar esos momentos y las hembras que son servidas se marcan con tiza o pintura para lana y se apartan para evitar que el macho monte repetidamente a la misma hembra. Una sola cópula por hembra sería suficiente para dejarla preñada cosa que puede controlarse en estas condiciones, pero no en las de campo. En cuanto a la edad de las hembras para el primer servicio, es deseable, que tengan al menos un año y medio, aunque es más determinante el desarrollo corporal que la edad en la madurez reproductiva. Se observa en muchos establecimientos que, por no poder separar a las hembras de edad muy corta, muchas reciben servicio y se preñan, lo cual afecta su desarrollo. Las crías que nacen son más débiles y la mayoría de ellos mueren. Por lo tanto, es importante poder separar las hembritas y que reciban servicio sólo las que han desarrollado bien.
ANATOMIA Y REPRODUCCIÓN DEL CAPRINO
Un conocimiento básico de la anatomía del tracto reproductivo y de la fisiología reproductiva de la hembra caprina, permite comprender con mayor facilidad el proceso reproductivo de la especie ya sea por medio natural o inducido.
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El aparato reproductivo de la cabra comprende los ovarios, los oviductos, el útero, cuello uterino y la vagina. Lo óvulos se originan el ovarios. Los oviductos son pequeños conductos donde son transportados los óvulos hasta su encuentro con los espermatozoides y por ende el lugar donde se realiza la fecundación. Una vez fecundado el óvulo, comienza una serie de divisiones celulares que conforman el embrión, el cual desciende por el oviducto hasta el útero, en donde se desarrolla la gestación. El útero presenta una diferenciación anatómica en su continuidad con la vagina que se denomina cérvix o cuello uterino. La vagina es el órgano copulatorio de la hembra en cuyo externo se localiza la vulva. El comienzo y duración de la época reproductiva de las cabras está supeditada a la ubicación geográfica del hato. Es prolongada en la región tropical y se reduce a medida que se incrementa la latitud. Otros factores inciden sobre estas dos variables son las condiciones ambientales, raciales y nutricionales, (Gibbons, Cueto y Wolff Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria “INTA” de la región
Patagonia Norte, Argentina). La manifestación de celo en las cabras es cíclica y estacional (otoño-invierno). El tiempo que transcurre entre un celo y otro y otro es denominado ciclo estral, considerándose que su duración normal es de 19 a 21 días. El ciclo sexual de las cabras comprende cuatro períodos. El proestro es el día previo al celo. Este corto período se caracteriza por un comportamiento de inquietud, que frente a reiterados intentos de montas por el macho, se presenta huidiza a la cópula. Los signos externos que se pueden observar en esta fase son: presencia de la vulva inflamada y rojiza con descarga de mucus, siendo estos signos más manifiestos en la hembra adulta que en la primeriza. La etapa del estro se caracteriza por la modificación de la conducta sexual de la hembra, que acepta la monta en varias oportunidades. A sus vez los signos externos a nivel vulvar son más manifiestos. Este período tiene una duración de dieciocho a sesenta y tres horas, siendo lo más habitual observar celo durante veinticuatro a treinta y seis horas. En hembras primerizas se debe tomar en cuenta que los signos de celo son menos manifiestos y de menor duración. Finalizado el estro, inicia la etapa sexual metaestro, en la que generalmente se produce la ovulación. El último período del ciclo es el diestro que se extiende hasta que la cabra inicia de nuevo el ciclo sexual; al menos que haya quedado preñada. El ciclo sexual está regulado por las hormonas: folículo estimulante (FSH) y luteinizante (LH), que se produce en la glándula ubicada en el cerebro (hipófisis anterior), estrógeno y progesterona, producidas por el ovario. La FSH tiene
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como función intervenir en la estimulación del desarrollo de los folículos del ovario para la producción de óvulos y la LH actúa en la fase final de del crecimiento de los folículos y desencadena la ovulación. El estrógeno es liberado por los folículos que están en proceso de maduración y su incremento en sangre produce el comportamiento en celo de la cabra y por lo tanto la aceptación de la cópula. Al producirse la ovulación, se forma a partir del folículo ovulatorio el denominado cuerpo lúteo. Su finalidad es producir progesterona, la cual va a cumplir la función de mantener la gestación en el caso de que la hebra quedase preñada. Si la cabra no fuese servida , el cuerpo lúteo va perdiendo su actividad biológica y un nuevo celo se pretenderá después de 19 a 21 días. Este proceso continuará durante la estación reproductiva y será interrumpido sólo por la preñez, determinadas enfermedades o una alimentación deficiente. Por último la oxitocina, que se produce en la hipófisis y su finalidad es el favorecer el transporte de los espermatozoides en el tracto reproductivo de la hembra y estimular el descenso de la leche. En lo que corresponde a los machos, estos poseen capacidad de servicio durante todo el año; pero presentan variaciones en su líbido y calidad seminal. La hormona FSH interviene en la formación de espermatozoides y la LH actúa al nivel del testículo estimulando la producción de andrógenos (testosterona) y en forma conjunta promueven la maduración de los espermatozoides. La testosterona interviene en el deseo sexual o líbido y las características externas de conformación y de comportamiento sexual de los machos.
INSEMINACION ARTIFICIAL EN LA ESPECIE CAPRINA La inseminación artificial consiste en depositar una dosis seminal en el tracto reproductor femenino por medio de unos dispositivos diseñados para tal fin. Este método se usa en todas las especies animales con el fin sobre todo de mejorar genéticamente un hato ya que un macho suele cubrir a varias hembras y por lo tanto sus posibilidades genéticas se expanden de manera más numerosa que la de las madres que dan un determinado número de crías muy limitado a lo largo de su vida. Por ello la elección de un macho que sea capaz de mejorar ostensiblemente la capacidad productiva es un trabajo que no debe de descuidar ningún ganadero que quiera progresar adecuadamente, y para ello el uso de la inseminación es una alternativa fundamental
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El método más utilizado en la Inseminación en Caprinos es el llamado: vaginal o cervical. Se puede realizar con un poco de entrenamiento y de tacto por cualquier persona. En ella el objetivo es dejar la dosis seminal lo más profundo posible en el cuello uterino, teniendo en cuenta que cuando la cabra está en celo se encuentra abierto permitiendo el paso de la parte anterior de la pistola inseminadora en algunos casos. El cuello de la cabra está colocado al fondo de la vagina y es el objetivo a conseguir para realizar una buena inseminación.
La inseminación artificial debe realizarse a las doce horas de haberse detectado el celo. Puede repetirse cada doce horas durante el tiempo que la cabra acepte la monta de un retajo o un marcador.
COLECCIÓN Y EVALUACIÓN DEL SEMEN
La evaluación reproductiva de un animal se debe realizar determinando su capacidad de realizar la monta con un eyaculado de semen de buen poder fecundante. Cuando se realiza un programa de extracción de semen para su utilización en fresco, congelamiento o para realizar un examen seminal; se debe considerar el estado nutricional y sanitario además de una correcta revisión clínica. La técnica mas recomendada para obtener una colecta de semen, es el empleo de una “vagina artificial”, que provee estimulación térmica (temperatura) y mecánica
(presión) para producir la eyaculación. Consiste en una parte externa rígida, por ejemplo: una cubierta externa de prolipropileno térmico y una cubierta interna de latex. Esta se repliega y asegura sobre los extremos del tubo externo con bandas elásticas formando, entre la cubierta externa e interna un compartimiento hermético para el agua. A uno de los extremos se adhiere un tubo colector de vidrio.
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La vagina se carga hasta sus 2/3 partes con agua caliente a 50 oC o más, según las pérdidas de calor que se produzcan hasta el momento de su utilización, siendo importante que la temperatura interior de la misma al momento de la eyaculación sea de aproximadamente 38 – 40oC. El acondicionamiento final de la vagina se logra por el agregado del aire a la cámara de agua con el fin de estrechar la luz vaginal a aproximadamente 1 cm de diámetro. La recolección del semen se realiza en un lugar limpio y libre de polvo. Se lava el prepucio con solución fisiológica y se recortan los pelos prepuciales, para disminuir la contaminación del semen.
Los machos caprinos generalmente se acostumbran con facilidad a realizar la eyaculación en la vagina artificial. La técnica consiste en realizar la desviación manual del pene en el momento en que el macho realiza la monta sobre una hembra inmovilizada. El tubo colector debe protegerse de los cambios bruscos de temperatura durante toda la operación y hasta su colocación en un baño de agua a 36oC. Los machos tienen capacidad de preñar a lo largo de todo el año, aunque su capacidad de servicio (número de hembras servidas por día) y su calidad espermática es mejor en algunas épocas del año. La frecuencia de obtención de semen está supeditada a cada macho en particular. Para un programa de congelamiento se recomienda obtener uno o dos eyaculados diarios durante 4-5 días seguidos y dar descansos de 2-3 días. (Gibbons, Cueto y Wolff, Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria, Región Patagonia Norte, Argentina). Una vez obtenido el semen se debe colocar en baño maría a 36oC, registrándose volumen, densidad y color. Una pequeña gota sobre un portaobjetos entibiado nos permite observar el grado de movimiento en masa o motilidad masal, que nos da una estimación del porcentaje de espermatozoides vivos y su vigor. El volumen, el porcentaje de espermatozoides vivos y su concentración varía entre individuos y aún entre los eyaculados de un mismo animal. Los valores promedio del eyaculado caprino son: 1 cc, 85 % y 3500 millones de espermatozoides por mililitro respectivamente.
Los programas de Inseminación Artificial y Mejoramiento Genético están normalmente destinados a las cabras de alto valor genético, por lo tanto es
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necesario tomar muy en cuenta los siguientes aspectos de nutrición, sanidad y reproductivos: Las hembras deben tener al menos dos puntos de condición corporal a la inseminación. La condición corporal es un valor subjetivo a la gordura de los animales. Consiste en medir la deposición grasa de los músculos lumbares, situados por debajo de las vértebras lumbares. Las cabras deben de estar libres de enfermedades y parásitos. El destete de los cabritos debe realizarse 6-8 semanas antes de la inseminación.
METODOS DE SINCRONIZACION DE CELOS
Los métodos de sincronización de estros constituyen una herramienta de gran utilidad en los servicios dirigidos – estabulados o en campo- y en los programas de Inseminación Artificial, ya que facilitan el manejo de los animales al evitarse el encierre diario durante 21 días para la detección de celos naturales. Se pueden dividir en: naturales y farmacológicos.
METODOS NATURALES En el sistema de cría donde los machos permaneces separados de las hembras fuera de la época reproductiva, se presenta al inicio de la temporada de servicio, una manifestación de celos concentrados (alrededor del 50 a 60% de las hembras del hato) entre el octavo y doceavo día post introducción de los machos en el hato. Este estimulo sexual se denomina “efecto macho” y puede ser empleado como un
método natural y económico para realizar un servicio dirigido a corral o implementar una Inseminación Artificial. Los celos que se manifiestan en forma previa, suelen ser de baja fertilidad y las cabras que no quedan preñadas repiten celo, fértil, a los cinco o siete días. Después del período de concentración de celos, se presenta un porcentaje de celo diario entre el 0 al 3% y de una buena fertilidad. El “efecto macho” puede utilizarse en combinación con otros métodos de
sincronización de celos, en el inicio de la estación reproductiva, para asegurarse de que todas las hembras este ciclando al comienzo del tratamiento hormonal. En
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este caso, la introducción de los machos en el hato debe realizarse unos veinte días antes de iniciar los trabajos de sincronización de estros.
METODOS FARMACOLÓGICOS Tienen la ventaja de concentrar un alto porcentaje de celos en un período corto de celos, en el inicio de la estación reproductiva, para asegurarse que todas las hembras estén ciclando al comienzo del tratamiento hormonal. Los dos más utilizados son: las esponjas intravaginales con progestágenos y progesterona inyectable.
ESPONJAS INTRAVAGINALES CON PROGESTÁGENOS Simulan la acción de un cuerpo lúteo mediante la liberación lenta de progesterona. Se colocan en la vagina de la hembra por 15-17 días, período de tiempo que iguala el tiempo de vida media del cuerpo lúteo. Este método permite alcanzar una elevada concentración de celos y llevar a cabo la inseminación artificial a un tiempo fijo luego de finalizado el tratamiento hormonal. Asimismo concentra los estros fuera de la estación reproductiva, permitiendo la producción de crías aún en época natural no reproductiva. Debido a que hay un porcentaje variable de cabras que no responden al tratamiento o que no muestran la ovulación sincronizada con el resto, como así también a la alteración del transporte espermático producida por efecto de los progestágenos, se aconseja la utilización de progestágenos en forma combinada con una dosis de Gonadotrofina Coriónica equina (eCG). Esta se administra por inyección intramuscular al momento de retirar las esponjas, en la estación reproductiva; o cuarenta y ocho horas antes del retiro, en el anestro estacional. Mejora la sincronía de los celos y de las ovulaciones. La dosis utilizada de eCG varían entre 200 y 400 UI, dependiendo fundamentalmente del peso corporal, de la raza y de la época del año, aconsejándose probar en principio la dosis menor. Dosis elevadas de eCG ocasionan gestaciones múltiples, generando altas pérdidas de animales por mortalidad perinatal. Las esponjas intravaginales pueden utilizarse en combinación con el “efecto macho”, en reemplazo de la utilización de eCG. En este caso, los machos se
introducen en el hato 48 horas antes del retiro de las esponjas.
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COLOCACIÓN Y RETIRO DE LAS ESPONJAS
Antes de proceder a la colocación de las esponjas, es conveniente rociarlas externamente con un antibiótico en aerosol sin corticoides. La esponja se comprime e introduce en el extremo biselado del aplicador, cuidando que el hilo cuelgue hacia afuera. El vástago se coloca dentro del aplicador por el extremo libre hasta que haga contacto con la esponja. El aplicador es humedecido externamente con vaselina. Para facilitar la maniobra de colocación de la esponja, es conveniente que la hembra esté parada en posición natural. El aplicador y vástago son introducidos suavemente hasta el fondo de la vagina. El tubo aplicador se retira unos 3-4 centímetros manteniendo el vástago en su sitio, hasta liberar la esponja. Se recomienda cortar los hilos de las esponjas de tal manera que sobresalgan 2-3 cm de la vagina de la hembra para evitar pérdidas de esponjas. Para retirar las esponjas, se tira firme pero suavemente del hilo hacia atrás, manteniendo una leve inclinación hacia abajo. Si algún animal no presentase el hilo visible, será aconsejable verificar por medio de un vaginoscopio, que la esponja no se encuentre en el interior de la vagina. No se recomienda utilizar esponjas en las cabrillas de primer servicio ya que, debido a la necesidad de romper el himen durante su colocación, un gran número de animales presentará los laterales de la esponja adheridos a las paredes internas de la vagina al momento de su retiro. Una posibilidad sería romper el himen con el aplicador de esponjas y colocarlas una semana después. El costo de sincronización de estros mediante las esponjas y eCG es de 2.5 a 3 $ por cabra. 1
PROGESTERONA INYECTABLE
Otra alternativa consiste en la utilización de dos inyecciones intramusculares de progesterona (20 mg c/u) cada cuarenta y ocho horas, con la incorporación del 4% de retajos, en el momento de aplicar la primera dosis. Los celos se presentan agrupados entre el tercer y cuarto día de la segunda aplicación, presentándose celos el 50 – 80% de las cabras. La alta variabilidad en la respuesta a la 1
Dato publicado en 2007, en la República Argentina.
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sincronización con progesterona está relacionada, entre otros factores, al estado nutricional del hato. Este método permite reducir el costo en la sincronización de estros.
MANEJO DEL SEMEN FRESCO La inseminación con semen fresco hace referencia a la utilización inmediata del eyaculado entre su obtención y su deposición en el tracto reproductivo de una hembra. Una vez que el semen es analizado y considerado apto, debido a que cumple con los requisitos mínimos para ser utilizado, se puede diluir o bien fraccionar hasta lograr una concentración de cien millones de espermatozoides por dosis y un volumen máximo de 0.25 cc. Por ejemplo, con un eyaculado de una concentración de tres mil millones/cc de semen, se pueden inseminar treinta hembras. El semen puede utilizarse puro, sin diluir, fraccionando 0.03 cc por cabra (1cc/30); o diluido mediante el agregado de un diluyente en base a leche descremada de vaca al 10% y glucosa al 1%. La dilución del semen aumenta su período de conservación (valor de referencia: aproximadamente una hora entre la obtención del eyaculado y la ultima inseminación), al mismo tiempo que facilita su dosificación. Por ejemplo: considerando los valores anteriores, mediante la adición de 2cc de diluyente, se completan 30 dosis de inseminación de 0.1 cc por animal. El diluyente es calentado previamente a 92-94oC durante diez minutos, entibiándose luego a 28-30oC. Este se agrega por las paredes del tubo y se mezcla realizando movimientos oscilatorios. Es muy importante verificar la motilidad masal del semen cada cinco o seis inseminación, de manera de asegurarse que conserve su capacidad fecundante y no haya sido alterado por algún accidente técnico que se haya cometido en forma desapercibida (contaminación con agua, golpe térmico, etc.). El semen fresco caprino diluido y refrigerado a 5 oC, no debe ser conservado por períodos de tiempo superiores a las 8-12 horas, debido a que pierde su poder fecundante. La dosis de inseminación de referencia con semen refrigerado es de 150 millones por cabra.
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PROCESO DE INSEMINACIÓN ARTIFICIAL CERVICAL EN LA ESPECIE CAPRINA
Se debe preparar el equipo de inseminación limpio y desinfectado. Colocar 1/2 litro de agua a 37°C en el termo para descongelar las pajuelas. Además de una mesa y toallitas de papel para colocar el material de inseminación
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El termo criogénico con el semen debe estar cerca del termo de descongelación. Antes de iniciar la inseminación se deben identificar las canastillas donde está colocado el semen a utilizar. Destapar el termo criogénico. Verificar el nivel de nitrógeno que debe estar lleno. Elevar la canastilla lo suficiente para tomar la pajuela con las pinzas, sin que ésta sobrepase el cuello del termo criogénico y colocarle en el termo de descongelación. Vuelva la canastilla del termo criogénico a su posición original. Tape el tanque criogénico. Transcurridos 15 segundos, saque la pajuela del termo de descongelación.
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Secar perfectamente la pajuela; cortar el extremo de la pajuela y colocarla en el inyector o aplicador.
Colocar la vaina sobre el inyector y fijarla bien con el anillo previsto para ello.
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Levantar suavemente la cabra por la parte posterior. Colocar bien los brazos bajo las nalgas de la cabra como se indica en la ilustración. Una vez que la cabra está en dicha posición limpiar la vulva con toallitas de papel.
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Tomar el espéculo lubricado para facilitar su entrada en la vagina. La cola de la cabra se eleva para visualizar la vulva e introducir el espéculo lubricado en la vagina de la cabra hasta localizar el cérvix.
Con la ayuda de una fuente de luz, localizar el cérvix. Si la cantidad de moco que está presente en el interior del cérvix es abundante con ayuda del espéculo se puede sacar el moco. Sin retirar el espéculo de la vagina descienda la cabra hasta el suelo. Retire el espéculo de la vagina y el moco saldrá. Eleve nuevamente la cabra e introduzca el espéculo en la vagina. Introducir el inyector y presionar suavemente para atravesar el cérvix y tratar de introducirlo suavemente en el útero. No se debe ejercer demasiada presión pues se puede dañar la mucosa uterina. Si no puede pasar los anillos del cérvix depositar el semen suavemente y retirar el inyector y el espéculo lenta y suavemente para evitar lesiones en los tejidos de la cabra.
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Liberar la cabra bajándola con delicadeza para evitar estrés. Evitar cualquier tratamiento y manipulación en los días siguientes a la inseminación. Limpiar perfectamente el material después de la inseminación.
INSEMINACIÓN ARTIFICIAL MEDIANTE ENDOSCOPÍA EN LA ESPECIE CAPRINA
La endoscopía es una técnica que mediante un sistema óptico introducido en el interior del animal por punción del abdomen y una fibra flexible de vidrio para la prolongación lumínica, permite realizar visualizaciones internas de órganos y sin recurrir a la cirugía. Cuando se realiza la Inseminación Artificial con esta técnica, también se le llama laparoscopía debido a que la observación se realiza atravesando la pared abdominal para la visualización de los órganos reproductivos internos. El acceso con la dosis de semen se realiza a través de un pequeño orificio que se efectúa con un trócar en proximidad de la glándula mamaria. Este método de inseminación consiste en inyectar la mitad del semen en cada cuerno uterino, mediante una pipeta que dispone de una fina aguja en uno de sus extremos. Esta técnica de inseminación mediante laparoscopía es utilizada ampliamente en la especie ovina, donde los porcentajes de preñez con semen
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congelado por vía cervical son del 20-25%, debido a la dificultad que presenta el cérvix para ser traspuesto con la pipeta de inseminación. En los caprinos está siendo utilizada con la doble finalidad de elevar el porcentaje de preñez respecto a la IA por vía vaginal y de reducir el número de espermatozoides por dosis de inseminación.
La siguiente tabla presenta valores de eficiencia reproductiva para distintas alternativas de Inseminación Artificial (en razas lecheras). SEMEN FRESCO
VIA Cervical
DOSIS 100 mil
IA Con detección de celo CONGELADO Cervical 200 mil Con detección de celo sistemática* Laparoscopía 50 mil Con detección de celo sistemática** *45 horas post retiro de las esponjas intravaginales **55 horas post retiro de las esponjas intravaginales
PREÑEZ 60-70% 60% 65%
CONGELAMIENTO DE SEMEN CAPRINO
PREPARACIÓN DEL DILUYENTE SEMINAL Se utiliza leche descremada de vaca en polvo al 10%, más glucosa al 1%, diluidos en agua destilada. Ejemplo; 50 ml de agua destilada, 5 g de leche descremada, 0.5 gramos de glucosa. El diluyente se mantiene a 92-94oC en baño de agua durante 10 minutos. Cumplido este tiempo, se entibia a 36 oC y se agrega penicilina y estreptomicina (1000 UI y 1 mg/ml de diluyente, respectivamente). El volumen total se divide en dos fracciones iguales: DILUYENTE A-sin agregado de glicerol- y DILUYENTE B-con agregado de glicerol al 12%- Ejemplo; para 25 ml de diluyente B, la cantidad de glicerol a agregar es de 3 ml. Se entibia el glicerol y agrega al diluyente aún caliente para lograr una buena homogenización. El diluyente A permanece a 36oC, mientras que el diluyente B se coloca en un refrigerador a 5 oC, es importantísimo que éste no enfríe por debajo de esta
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temperatura. El pH del diluyente debe mantenerse entre 6.8 y 7.2 sí se está trabajando en un ambiente caluroso, es conveniente colocar la solución A en el refrigerador para evitar su acidificación y entibiarla poco antes de su utilización.
OBTENCIÓN Y EVALUACIÓN DEL SEMEN Una vez que el semen fue recolectado en la vagina artificial, se lo mantiene en un baño de agua a 36oC durante su evaluación. Se observa una gota de semen al microscopio con 100 aumentos sobre portaobjetos templado por platina térmica. Se puede tener una idea de la calidad del semen por la velocidad con que se hacen y deshacen las ondas seminales (motilidad masal). La motilidad se estima por el vigor del movimiento de las ondas en una escala subjetiva (0 mínimo; 5, máximo). Únicamente si la motilidad masal es de 4 o mayor se procede a congelar el semen. En todo momento es importante que el semen se mantenga protegido de los cambios bruscos de temperatura, contacto con el agua, radiación solar directa e impurezas. Por lo tanto, todo el material debe estar limpio y seco y a la misma temperatura del semen.
DETERMINACIÓN DE LA CONCENTRACIÓN ESPERMÁTICA La determinación de la concentración espermática se realiza en cámara de Neubauer. Para el cargado de la cámara de recuento espermático se tendrán en cuenta los siguientes pasos: Adherir al cubreobjetos sobre la cámara humedeciendo sus bordes con vaselina o saliva ejerciendo luego una firme presión contra la cámara. Si la adhesión es correcta se observa en los bordes del cubreobjetos un fenómeno de difracción de la luz denominado “anillos de Newton”.
Aspirar semen con la pipeta para glóbulos rojos, que debe estar templada y perfectamente seca, hasta la marca de 0.25. Limpiar el extremo de la pipeta cuidando de no variar el enrase. Aspirar el líquido de dilución (puede ser agua destilada) hasta la marca 101. Tapar con los dedos ambos lados de la pipeta y agitar horizontalmente en forma suave unas 30 veces. Desechar las primeras gotas. Colocar el extremo de la pipeta en el borde del cubreobjetos y dejar que la cámara se cargue por capilaridad. El líquido no debe pasar a los surcos laterales ni deben quedar glóbulos de aire o zonas sin cargar. Dejar reposar unos minutos antes del recuento.
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La cámara también puede cargarse con micropipeta, realizando con una dilución del cinco microlitros de semen en 2 cc de agua. Se coloca la cámara bajo observación microscópica (100 o 200 aumentos). Si la distribución de los espermatozoides no es homogénea, se repite la operación de carga. Se cuenta el número de espermatozoides en un cuadrado “grande” (sin
divisiones internas) por cada cuadrante y se repite el conteo en uno de los cuadrantes elegido al azar, contándose en total cinco cuadrados. La concentración de espermatozoides/cc se calcula multiplicando la suma de los espermatozoides contados en los cinco cuadrados por 12, 800,000.
CENTRIFUGACIÓN DEL SEMEN CON LA SOLUCIÓN DE LAVADO
La especie caprina presenta ciertas particularidades en la composición de su plasma seminal. Una de ellas es la existencia de una fracción proteica (BUIII) procedente de las glándulas bulboretrales que interacciona con la leche utilizada en el diluyente produciendo inhibición de la motilidad de los espermatozoides. Para evitar los efectos perjudiciales de esta sustancia, la mayoría de investigadores sugieren “lavar” el semen, es decir separa y eliminar el plasma seminal mediante centrifugación antes de mezclar el semen con el diluyente. Esta metodología se emplea en las razas caprinas lecheras. Como solución de lavado puede utilizarse Citrato de Sodio al 2.8% (2.8 g de citrato de sodio en 100 ml de agua destilada). El pH de la solución debe ser de 6.8 – 7.2. Para proceder la dilución de los líquidos seminales, se le agregan 10 ml de la solución de lavado al semen, y se centrifuga por 10 minutos a 2000 rpm. Eliminando el sobrenadante, por medio de una pipeta, se reitera este procedimiento, tratando de que la masa de los espermatozoides que se observa en el fondo del tubo se disuelva en la solución de lavado. Es importante que el Citrato de Sodio esté a igual a temperatura que el semen. Por lo tanto, el primer lavado se realiza a 36oC, y el segundo lavado, teniendo en cuenta que durante el centrifugado se pierde temperatura, se realiza a 20-25oC(temperatura de laboratorio).
PRIMERA DILUCIÓN AGREGADO DE LA SOLUCION A Se calcula el volumen de diluyente que se debe agregar al semen de acuerdo a las indicaciones que figuran en la planilla en la hoja anexa. Si no se realiza la
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dilución del plasma seminal, se agrega la solución “A” a 36 oC
mediante una pipeta templada. Si se realiza el lavado del semen, al número total de espermatozoides en el eyaculado se le descontará un 10% de su valor (pérdida estimada de espermatozoides que se produce al remover el líquido sobrenadante). En este último caso se procede a agregado del diluyente a 20-25oC.
DESCENSO DE LA TEMPERATURA Y TIEMPO DE ESTABILIZACION A 5oC
Una vez agregado el diluyente A, se procede al enfriamiento del semen diluido, desde la temperatura a la cual se agregó el diluyente, hasta 5oC. El enfriamiento se realiza a razón de unos 2 oC cada tres minutos. El semen diluido debe permanecer a esta temperatura en refrigeración por un tiempo de 45-60 minutos, antes de proceder al agregado del diluyente B.
SEGUNDA DILUCIÓN AGRAGADO DE LA SOLUCION B
El diluyente B se agrega fraccionando en tres partes iguales, a intervalos de diez minutos, homogeneizando cada vez. A los diez minutos de agregada la última fracción de solución B, se comienza con el acondicionamiento del semen para su congelamiento, es recomendable colocar la pipeta en la refrigeradora con anterioridad a esta dilución.
ACONDICIONAMIENTO DEL SEMEN PARA SU CONGELAMIENTO
El semen se puede congela en pajuelas en vapores de nitrógeno líquido a -196 oC o en pastillas en hielo seco (dióxido de carbono sólido a -79oC). El semen congelado por cualquiera de estos dos medios se conserva en un termo con nitrógeno líquido. El congelamiento en pastillas es más simple que pajuelas, pero estas últimas permiten ser rotuladas individualmente y son más fáciles de manipular durante la Inseminación Artificial. Las pajuelas, el alcohol polívinilico y una jeringa con aguja de 1.5 cm se colocan en refrigeración previo al congelamiento. Las pajuelas se cargan pipeteando las
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dosis seminales a través del tapón triple (algodón- alcohol-polivinilico- algodón) sumergiendo el extremo sin tapón en el semen. Para proceder al llenado de las pajuelas , se las toma del extremo con tapón (para no transmitir el olor de la mano al semen). El alcohol polivinilico del tapón triple gelifica y sella en contacto con el líquido. Se secan con papel absorbente, se crea una cámara de aire de 1.5 cm en el extremo sin tapón, con jeringa con aguja de la medida y se sella dicho extremo con golpes suaves y perpendiculares sobre una placa que contenga alcohol polivínilico. Inmediatamente se sumergen en recipiente con agua a 5oC. Es necesario contar con una caja de tergopor, con tapa, de aproximadamente 39 cm de largo por 34 cm de ancho por 25 cm de altura. Se vuelca nitrógeno líquido en la caja hasta 6 cm respecto al fondo. Se tapa unos minutos hasta que cese la ebullición y se enfríe su interior. Luego de secar la pajuelas, estas se colocan horizontalmente en un marco de aluminio, cuidando de que no se toquen entre sí. Finalmente las pajuelas se vuelcan en nitrógeno y se almacenan en portapajuelas en un termo de nitrógeno líquido.
ATENCIÓN EN LA PARICIÓN
La gestación de la cabra dura 149 días con una variación de hasta 5 días en más o en menos. Como se explicó anteriormente la concentración de celo y servicio ya sea en forma natural o artificial, hace que la parición también esté concentrada. Las cabras paren generalmente en condiciones climáticas difíciles por el frío, lluvia e inclusive nevadas, por lo cual debe atenderse la parición tratando de proteger a las crías del estrés térmico (golpe de frío) al transcurrir los primeros momentos de vida mojado y expuesto a las inclemencias del ambiente. Para esto son muy útiles los refugios de parición donde pueden permanecer las crías en los primeros días de vida, mientras las madres salen a pastorear. Una alternativa es adosarle sobre la pared norte de este refugio un pequeño invernáculo de polietileno al que puedan acceder las crías para calentarse (Raso y Bottaro, 2005). Los refugios deben ser construcciones ubicadas junto al potrero de parición. Es conveniente que los lados Sur y Oeste sean cerrados y tener una buena entrada de sol hacia el Norte. La caída del techo debe ser hacia atrás y adelante. En condiciones normales, no será necesaria la intervención del hombre para ayudar en el parto. Sin embargo, en caso que el mismo tenga una duración excesiva o se detecte una hembra presentando complicaciones puede ser
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necesario prestar ayuda. A tal fin deben usarse guantes descartables, porque pueden transmitirse enfermedades al hombre. La implementación de estas sencillas prácticas, se logran en general con la organización del trabajo y la implementación de prácticas de manejo y nutricionales, más que la realización de costosas inversiones. Si bien la construcción de reparos puede resultar onerosa debe tratarse de construir instalaciones funcionales.
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CONCLUSIONES
Las hembras tiene que tener al menos dos puntos de condición corporal a la inseminación. Siendo esta un valor subjetivo a la gordura de los animales. El hato de reproductoras también tiene que estar manejado bajo un plan profiláctico y de suplementación nutricional para evitar complicaciones en la gestación y parto. Las cabras también tienen que estar libres de enfermedades y parásitos. La Inseminación Cervical se realiza con la ayuda de un espéculo el cual facilita la ubicación del cuello uterino, al ubicar el cérvix se introduce un inyector con el que se atraviesa el cérvix y posteriormente se deposita el semen en el cuerpo uterino de la cabra. Mientras que la Inseminación Laparoscópica también llamada Endoscopía, se realiza por un sistema óptico introducido en el interior del animal por punción del abdomen y una fibra flexible de vidrio para la prolongación lumínica, permite realizar visualizaciones internas de órganos y sin recurrir a la cirugía. Aplicando la dosis de semen a través de un pequeño orificio que se efectúa con un trócar en proximidad de la glándula mamaria. En lo que respecta a las ventajas y desventajas de una y de otra Inseminación Artificial, se puede mencionar que ambas son eficientes. Sin embargo para realizar la IA por Endoscopía se requiere de un equipo más sofisticado y personal mejor capacitado con un conocimiento perfecto de la anatomía de las cabras.
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RECOMENDACIONES Para llevar a cabo un programa de IA artificial en cabras, es necesario que las hembras estén bajo un buen manejo nutricional, ya que la nutrición representa un factor muy incidente en la obtención de resultados positivos o negativos de la reproducción. A la hora de elegir el método de inseminación, analizar si se cuenta con el recurso humano y material requerido para tal actividad. Dar prioridad especial a las cabras primíparas, en lo que respecta la sincronización de celos. Manejar adecuadamente el semen colectado o congelado a utilizar para así asegurar buenos resultados del programa de IA.
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BIBLIOGRAFIA
Reproducción e Inseminación Artificial en pequeños rumiantes. [En línea] http://www.producción-animal.com.ar [Consultada 28-05-2010] Inseminación Artificial en Caprinos. [En línea] http://www.capraispana.com/destacados/inseminación/cuelloflech.jpg [Consultada 26-05-2010]