Laporan Praktikum Pembuatan Medium

LAPORAN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI PANGAN ISOLASI MIKROBA

Oleh : GOLONGAN 2 CM.TARI DELVIA ATMA Z LISA HENDIRA PUTRI NANDA PUTRI  (D-IV GIZI)

KEMENTERIAN KESEHATAN KESEHATAN JURUSAN GIZI POLTEKKES PADANG 20!"20#

LAPORAN PRAKTIKUM MIKRO$IOLOGI PANGAN J%&%l P'*+%,

: Pembuatan Medium NA (Nutrient Agar) untuk Isoasi Mikroba

H'+ " Tl

: Senin ! "# Se$tember %"#&

T%/% P'*+%,

: #' Maasisa da$at mengetaui tentang medium

%' Maasisa da$at mengetaui tentang *ara $embuatan medium +' Maasisa da$at mengetaui tentang *ara $en,im$anan medium Pe'*e,% Ke-

: II

T+/% P%*

:

Untuk menumbukan mikroba dan mengembangbiakan mikroba- di$erukan suatu substrat ,ang disebut dengan media' Sedangkan media itu sendiri sebeum di$ergunakan arus daam keadaan steri- artin,a tidak ditumbui oe mikroba ain ,ang tidak diara$kan' Susunan baan- baik bentuk baan aami (se$erti tauge- kentang- teur- daging- orte- dan sebagain,a) atau$un baan buatan (berbentuk sen,aa kimia- organik- atau$un anorganik) ,ang di$ergunakan untuk $ertumbuan dan $erkembangbiakan mikroba dinamakan media' Medium da$at dikasi.ikasikan berdasar atas susunan kimia- konsistensi- dan .ungsin,a' Kasi.ikasi medium berdasarkan susunan kimian,a- ,akni- medium organik- ,aitu medium ,ang tersusun dari baan/baan organik- medium anorganik- ,aitu medium ,ang tersusun dari baan/baan anorganik- medium sintetik- ,aitu medium ,ang sususan kimiain,a da$at diketaui dengan $asti- dan medium non/sintetik- ,aitu medium ,ang susunan kimiain,a da$at diketaui dengan $asti ' Baan ,ang diinokuasikan $ada medium disebut inokuum' 0engan menginokuasi medium agar nutrien (nutrient agar ) dengan metode *aan gores atau dengan metode *aan tuang- se/se mikroba itu akan ter$isa sendiri/sendiri' 1ika dua se $ada inokuum asa terau berdekatan etakn,a $ada medium agar- maka kooni ,ang terbentuk dari masing/ masing se da$at ber*am$ur dengan sesaman,a- atau $aing tidak bersentuan- 2adi massa se da$at diamati daam medium agar- bukana suatu biakan ,ang murni (Pe*3ar %""45 46)' Pembiakan mikroba daam aboratorium memerukan medium ,ang berisi 3at ara serta ingkungan $ertumbuan ,ang sesuai dengan mikroorganisme' 7at ara dibutukan oe mikroorganisme untuk $ertumbuan- sistesis se- ke$eruan energi daam metaboism- dan  $ergerakan' La3imn,a- medium biakan berisi air- sumber energi- 3at ara sebagai sumber 

karbon- nitrogen- su.ur- $os$at- oksigen- idrogen- serta unsur/unsur sekeumit (trace element )' 0aam baan dasar- medium da$at $ua ditambakan .aktor $ertumbuan beru$a asam amino- 8itamin- dan nukeotida (9au,o %"":5 6#)' Ada$un ma*am/ma*am media $ertumbuan antara ain5 #' Medium berdasarkan si.at .isik  •

Medium $adat ,aitu media ,ang mengandung agar #;< seingga setea dingin

•

media men2adi $adat' Medium setenga $adat ,aitu media ,ang mengandung agar "-+ = "-&< seingga men2adi sedikit ken,a- tidak $adat- tidak begitu *air' Media semi soit dibuat dengan tu2uan su$a,a $ertumbuan mikroba da$at men,ebar keseuru media teta$i tidak  mengaami $er*am$uran sem$uran 2ika tergo,ang' Misan,a baktei ,ang tumbu $ada edia NB (Nitrogen .ree Bromt,mo Bue) semisoid akan membentuk *in*in i2au kebiruan dibaa $ermukaan media2ika media ini *air maka *in*in ini da$at dengan muda an*ur' Semisoid 2uga bertu2uan untuk men*ega! menekan di.usi oksigenmisan,a $ada media Nitrate Brot- kondisi anaerob atau sedikit oksigen meningkatkan metaboism nitrat teta$i bakteri ini 2uga diaruskan tumbu merata

•

diseuru media' Medium *air ,aitu media ,ang tidak mengandung agar- *onton,a adaaNB (Nutrient Brot)- LB (a*tose Brot)'

%' Medium Berdasarkan Kom$osisi •

Medium sintesis ,aitu medium ,ang kom$osisi 3at kimia diketaui 2enis dan

•

takarann,a se*ara $asti' Misan,a Gu*ose Agar- Ma* >onke, Agar' Medium semisintesis ,aitu media ,ang sebagian kom$osisin,a diketaui se*ara $asti misan,a P0A (Potato 0e?trose Agar) ,ang mengandunga agr dekstrosa dan ekstrak 

•

kentang' Medium nonsintesis ,aitu media ,ang dibuat dengan kom$osisi ,ang tidak da$at diketaui se*ara $asti dan biasan,a angsung diekstrak dari baan dasarn,a- misan,a Tomato 1ui*e Agar- Brain @eart In.usion Agar- Pan*reati* kstrak'

+' Medium Berdasarkan Tu2uan •

Media untuk isoasi- media ini mengandung sen,aa esensia untuk $ertumbuan

•

mikroba- misan,a Nitrient Brot- Bood Agar' Media seekti.! $engambat- media ,ang seain mengandung nutrisi 2uga ditamba suatu 3at tertentu seingga media tersebut da$at menekan $ertumbuan mikroba ain dan merangsang $ertumbuan mikroba ,ang diinginkan' >onton,a adaa Luria

Bertani mediaum ,ang ditamba Am$isiin untuk erangsang '*oi resisten antibioti* dan mengambat komtaminan ,ang $eka am$isiin' Media di$erka,a (enri*ment)- meru$akan media ,ang mengandung kom$onen dasar 

•

untuk $ertumbuan mikroba dan ditamba kom$onen kom$eks se$erti dara- serumkuning teur' Media di$erka,a 2uga bersi.at seekti. untuk mikroba tertentu' Bakteri ,ang ditumbukan daam media ini tidak an,a menumbukan nutrisi sederana untuk berkembangbiak teta$i membutukan kom$onen kom$eks- misan,a Bood •

Teurite Agar- Bie Agar- Serum Agar' Medium untuk $erema2aan kutur- media umum atau s$esi.ik ,ang digunakan untuk 

•

 $erema2aan kutur' Media untuk menentukan kebutuan nutrisi s$esi.ik- media ini digunakan untuk  mendiagnosis atau menganaisis metaboism suatu mikroba' >onton,a adaa Kosers >itrate medium ,ang digunakan untuk mengu2i kemam$uan menggunakan asam sitrat sebagi sumber karbon' Media untuk karakteristik bakteri- media ,ang digunakan untuk mengetaui

•

keamam$uan s$esi.ik suatu mikroba' Kadang/kadang indi*ator ditambakan untuk  menun2ukkan adan,a $erubaan kimia' >onton,a5 Nitrate Brot-Laa*tose BrotArginine Agar' Media di.erensia- media ini bertu2uan untuk mengidenti.ikasi mikroba dari

•

*am$urann,a berdasarkan karakter s$esi.ik ,ang ditu2uakan $ada media di.erensiamisan,a TSIA (Tri$e Sugar Iron Agar) ,ang mam$u memii nteroba*teria  berdasarkan bentuk- arna- ukuran kooni dan $erubaan arban media disekeiing kooni (Gaung- %""C)' $h

:

#' NA!P0A %' ADuades

Al*

:

#' >aan $etri

6' O8en

%' Geas Kimia

:' Auto*a8e

+' @ot $ate

4' Lam$u s$iritus

&' Tabung $engen*er  ;' Nera*a anaitik  C' Ke'/

:

#' Ambia medium Nutrient Agar (NA)- ba*a $etun2ukn,a baik/baik' @itunga 2uma ,ang sesuai untuk 8oume ,ang anda butukan' Ambi medium NA dengan s$atua atau sendok ,ang disediakan dan timbanga seban,ak #" gr dengan nera*a anaitik  %' Tambakan medium dengan air suing seban,ak ;"" m ke daam geas kimia 4"" m +' 0idikan bebera$a menit agar medium arut dan terus diaduk dengan batang  $engaduk dari ka*a &' Penia$an medium se$erti NA biasan,a tidak $eru diakukan $en,esuaian P@ ;' Msukkan ke daam tabung reaksi E / F - kemudian tabung ditutu$ atau disumbat dengan ka$as 6' Sterikan medium tersebut dengan autoka. $ada suu #%#> dengan tekanan # atm seama #; menit :' Tuangkan medium se*ara merata ke daam *aan $etri steri se*ara ase$ti*' Penuangan agar dengan suu terau tinggi akan men,ebabkan kondensasi ,ang  berebian' 4' Biarkan mdium men2adi $adat dan dingin dan tuis $ada $ermukaan uar  *aan!tabung- tangga dan nama medium C' Bungkus *aan $etri dengan kertas dan tabung daam keran2ang serta sim$an daam emari es'

H+l P'*+%,

:

(I)

(IV)

(VII)

(II)

(V)

(III)

(VI)

(VIII)

Pe,1h :

Medium da$at dikasi.ikasikan berdasar atas susunan kimia- konsistensi- dan .ungsin,a' Kasi.ikasi medium berdasarkan susunan kimian,a- ,akni- medium organik- ,aitu

medium ,ang tersusun dari baan/baan organik- medium anorganik- ,aitu medium ,ang tersusun dari baan/baan anorganik- medium sintetik- ,aitu medium ,ang sususan kimiain,a da$at diketaui dengan $asti- dan medium non/sintetik- ,aitu medium ,ang susunan kimiain,a da$at diketaui dengan $asti ' Ada % medium ,ang da$at digunakan ,aitu medium P0A dan NA- sedangkan untuk   $raktikum

kai

ini ,ang dibuat adaa medium NA (Nutrient Agar)' Medium

NA

mengandung nutrisi/nutrisi ,ang dibutukan untuk $ertumbuan bakteri . Menurut Pe*3ar  (%""45 #+4)- men,atakan baa si.at/si.at media ,ang digunakan untuk .aktor $ertumbuan ,aitu arus muda tumbu- media arus dibuat- $ertumbuan bakteri arus kas dan mem$un,ai si.at/si.at ,ang diinginkan' 1ika si.at ini di$enui- maka $ertumbuan bakteri akan bagus' Pada $roses $embuatan media- medium NA menggunakan magnetik stirrer untuk  mengomogenkan agar dengan aDuades seama $emasakan agar' Menurut @adiotomo (#CC+5 ;+)- magnetik stirrer ber.ungsi sebagai aat $engomogenan atau $emer*e$at $earutan- dan  2uga mengaduk medium seama sedang di$anaskan agar tidak ter2adi $enggum$aan $ada saat di$anaskan' Seain itu- ot $ate digunakan untuk memanaskan medium ingga masak dan mem$er*e$at reaksi ,ang ter2adi $ada medium ingga mendidi' Autoka. ber.ungsi untuk  mensterikan baan/baan dan aat/aat ,ang taan terada$ $anas dan tekanan ,ang tinggi' Medium ,ang tea disterikan- tidak terda$at mikroba dan tidak ter2adi $erubaan .isik se$erti $erubaan arna- tidak berbau- tidak teriat $ermukaan medium ,ang tidak  ditumbui oe kooni mikroba' @a ini menun2ukkan baa medium ,ang tea disteriisasi tidak ter2adi kontaminasi mikroba' Medium NA sebeum disterikan berarna kuning dan setea itu disterikan dengan autoka. au didiamkan seingga berarna kuning $u*at' Setea itu- medium tersebut di$indakan ke *aan $etri dengan ati/ati sam$ai medium NA tersebut abis' Medium NA ,ang diisikan ke tabung reaksi adaa F dan 2uga arus ditutu$- 2ika tabung reaksi tidak memiiki tutu$- maka bisa ditutu$ dengan ka$as atau$un kertas ,ang di$adatkan' Ini bertu2uan agar medium NA ini teta$ ter2aga kesteriann,a seingga tidak ada mikroba ,ang masuk' Medium ,ang dituangkan ke *aan $etri arus se*ara merata dan daam keadaan steri se*ara ase$ti*' Penuangan medium ini tidak dengan suu ,ang terau tinggi karena 2ika dengan suu ,ang terau tinggi maka akan men,ebabkan kondensasi ,ang  berebian

Ke+,%l 5

Medium adaa suatu baan ,ang terdiri atas *am$uran nutrisi ,ang di$akai untuk  menumbukan mikroba' Medium NA (Nutrient Agar) digunakan untuk budida,a bakteri dan untuk $en*egaan organisme daam air- imba- kotoran- dan ainn,a' Medium NA meru$akan medium $adat ,ang mengandung agar #;< seingga setea dingin medium tersebut akan men2adi $adat' 0aam $embuatann,a- Medium NA ,ang dida$atkan setea dimasukkan ke daam *aan $etri ,aitu #4 bua'

D3*' P%*

Ma*mud- M' %""4' Teknik Penyimpanan dan Pemeliharaan Mikroba' Baai

Peneitian

Bioteknoogi Tanaman Pangan- Bogor'

Penuntun Praktikum Mikrobioogi Pangan Taun A2aran %"#&!%"#; tt$5!!bensonandika'bogs$ot'*om!%"#+!##!$enanaman/media/dan/isoasi/bakteri'tm ardia3- Srikandi' #CC%' Mikrobiologi Pangan 1' Gramedia Pustaka Utama- 1akarta

Padang ! ": Se$tember %"#& Pembimbing Praktikum-

(A3i3a- SKM)

Hang Membuat La$oran-

>M'TARI