Pemeriksaan VDRL Carbon Antigen Nama :
Ni Kadek Dwi Anjani
NIM
P07134013021
I. II.
:
Tujuan Untuk mendeteksi adanya antibody non – treponemal pada sampel serum. Dasar Teori Sifilis adalah penyakit menular seksual yang sangat infeksius, disebabkan oleh bakteri berbentuk spiral, Treponema pallidum subspesies pallidum. Schaudinn dan Hoffmann pertama kali mengidentifikasi Treponema pallidum sebagai penyebab sifilis pada tahun 1905. Schaudin memberi nama organisme ini dari bahasa Yunani trepo dan nema, dengan kata pallida dari bahasa Latin (Efrida ; 2014). Penularan bakteri ini biasanya melalui hubungan seksual (membran mukosa vagina dan uretra), kontak langsung dengan lesi/luka yang terinfeksi atau dari ibu yang menderita sifilis ke janinnya melalui plasenta pada stadium akhir kehamilan (Lukehart; 2005) Pemeriksaan / Tes serologi terhadap sifilis (TSS), yaitu : Tes nontreponemal / Tes cardiolipin (reagen): Venereal Disease Research Laboratory test (VDRL), rapid plasma reagin (RPR). Tes treponemal / Tes spesifik: Treponema pallidum Haemaglutination Test (TPHA), Treponema pallidum Particle Agglutination Test (TPPA), Fluorescent
Treponemal
Antibody
Absorption
Test
(FTA-abs),
Microhemagglutination Assay for Antibodies to Treponema pallidum (MHA-TP), Treponemal Enzyme Immunoassay (EIA) untuk deteksi Imunoglobulin G (IgG), Imunoglobulin G dan M (IgG dan Ig M), atau Imunoglobulin M (IgM) (Young; 2000) Pemeriksaan sifilis dengan metode VDRL mudah dilakukan, cepat dan sangat baik untuk skrining. Uji VDRL dilakukan untuk mengukur antibody IgM dan IgG terhadap materi lipoidal (bahan yang dihasilkan dari sel host yang rusak) sama halnya seperti lipoprotein, dan mungkin kardiolipin berasal dari treponema (Efrida; 2014). III.
Alat Dan Bahan a. Alat 1. Slide test (latar putih) 2. Disposable dropper
3. Mikropipet 50
IV.
dan tip
4. Tabung serologi b. Bahan 1. Sampel serum 2. Tissue 3. NaCl 0,9% Prosedur Kerja Tes Kualitatif 1. Semua APD digunakan dengan baik, benar dan lengkap 2. Alat dan bahan yang akan digunakan disiapkan 3. Sampel diteteskan sebanyak satu tetes (50 ) pada slide test 4. Reagen dihomogenkan dan diteteskan satu tetes pada slide test yang sudah diisi sampel 5. Slide test digoyangkan – goyangkan selama 8 menit 6. Dilihat secara makroskopis dicahaya yang bagus 7. Hasil positif akan menunjukkan agregasi hitam besar 8. Sampel negative akan menunjukkan hasil abu – abu halus Tes Kuantitatif 1. Tabung disiapkan sebanyak 5 buah dan diberi label
, , ,
2. Pengenceran berseri dilakukan dengan cara memipet 50 masing – masing tabung 3. Pada tabung pertama
dimasukkan 50
dihomogenkan. Setelah itu dipipet 50
sampel,
,
saline ke kemudian
pada tabung pertama lalu
dimasukkan dan dihomogenkan pada tabung kedua, dst 4. Pada tabung pertama dipipet 50 lalu diteteskan pada slide test 5. Reagen diteteskan pada slide test sama, dihomogenkan lalu slide test digoyangkan selama 8 menit 6. Hasil dilihat secara makroskopi. Hasil positif menunjukkan adanya
V.
flokulasi 7. Perlakuan yang sama dilakukan pada setiap pengenceran Interpretasi Hasil Uji Kualitatif - Reaktif : Bila tampak gumpalan sedang atau besar ditengah dan dipinggir lingkaran
-
Reaktif lemah : Bila tampak gumpalan kecil – kecil halus pada
pinggir lingkaran - Non – reaktif : Bila tidak nampak flokulasi/ gumpalan Uji Kuantitatif Lingkaran terakhir yang memberikan hasil pemeriksaan positif (terjadi VI.
flokulasi Hasil Data Pasien Nama Umur Jenis Kelamin Hasil Pemeriksaan
: : : :
Putu Agus W 39 Tahun Laki-laki Negatif ( - ) Tidak terjadi flokulasi
VII. Pembahasan Uji Venereal Disease Research Laboratory (VDRL) merupakan pemeriksaan slide microflocculation untuk sifilis yang menggunakan antigen yang terdiri dari kardiolipin, lesitin, dan kolesterol. Antigen tersebut disuspensikan dalam cairan bufer salin, membentuk flokulasi ketika digabungkan dengan antibodi lipoidal pada serum atau cairan serebrospinal pasien sifilis.
Tahap Pre – Analitik Darah diambil dari salah satu vena pasien atas nama Putu Agus W (Laki – laki/ 39 Tahun), kemudian darah yang telah diperoleh ditampung pada tabung tanpa anti koagulan lalu disentrifuge untuk memperoleh serum. Spesimen harus berada di suhu ruangan, 23 -29 0C pada saat pemeriksaan berlangsung. Jika pemeriksaan ditunda lebih dari 4 jam, tabung spesimen ditutup dan disimpan pada refrigerator dengan suhu 20 – 80C. Jika pemeriksaan ditunda lebih dari 5 hari,
spesimen dibekukan pada suhu dibawah -200C. Tahap Analitik 1. Uji Kualitatif Alat-alat dan bahan untuk pemeriksaan VDRL disiapkan dan dikondisikan dengan suhu ruang. Serum dipipet sebanyak 50 µl dengan mikropipet, kemudian letakkan diatas slide test (berlatar putih). Kemudian diteteskan reagen sebanyak satu tetes ke slide test yang telah berisi sampel serum pasien. Dan dihomogenkan
selanjutnya digoyang-goyangkan selama 8 menit. Lihat hasilnya secara makroskopi ada tidaknya flokulasi dibawah cahaya yang baik. Jika pada uji kualitatif ini menunjukkan hasil yang positif, maka dapat dilanjutkan ke uji kuantitatif. 2. Uji Kuantitatif Alat-alat dan bahan untuk pemeriksaan VDRL disiapkan dan dikondisikan dengan suhu ruang. Disiapkan tabung sebanyak 5 buah dan diberi label dan dimasukkan
,
,
,
,
.
50
saline dipipet
ke masing – masing tabung. Pada tabung
pertama dimasukkan 50
sampel, kemudian dihomogenkan.
Setelah itu dipipet 50
pada tabung pertama tadi, lalu
dimasukkan dan dihomogenkan pada tabung kedua, dst. Pada tabung pertama dipipet 50 lalu diteteskan pada slide test. diteteskan pada slide test sama, dihomogenkan lalu slide test digoyangkan selama 8 menit. Kemudian diamati ada tidaknya flokulasi secara makroskopi dibawah pencahayaan yang baik. Jika pemeriksaan menunjukkan hasil yang positif, maka dilanjutkan ke pengamatan terhadap tabung kedua (pengenceran
) dengan
perlakuan yang sama seperti tabung pertama tadi, dst. Tahap Pasca Analitik Untuk mendiagnosis sifilis, hasil pemeriksaan VDRL reaktif harus digabung dengan pemeriksaan treponema reaktif lainya seperti Fluorescent
Treponemal
Antibody
Absorption
dan
Microhemagglutination Assay for Antibodies to Treponema pallidum. Hasil VDRL reaktif dapat bermakna infeksi baru atau lama dengan treponema patogen, meskipun hasil reaksi positif palsu dapat juga terjadi. Hasil reaksi positif palsu dapat disebabkan oleh kesalahan laboratorium dan serum antibodi yang tidak ada hubungannya dengan sifilis. Hasil VDRL nonreaktif tanpa gejala klinik sifilis dapat berarti
tidak terinfeksi sifilis dan pengobatan yang efektif. Apabila hasil VDRL non-reaktif disertai dengan gejala klinik sifilis, dapat berarti sifilis primer dini, reaksi prozone pada sifilis sekunder. Inkubasi dari infeksi sifilis tidak dapat disingkirkan dari hasil VDRL non-reaktif. Pada pemeriksaan VDRL Carbon Antigen terhadap pasien atas nama Putu Agus W (Laki – laki / 39 tahun) diperoleh hasil VDRL yang negative / non-reaktif yaitu tidak terjadi flokulasi. Karena pada uji kualitatif diperoleh hasil negative, maka tidak dilanjutkan ke uji kuantitatif. Darah dari pasien yang baru terkena sifilis ataupun yang masih dalam masa inkubasi bersifat infeksius. Waktu berkembangbiak Treponema pallidum selama masa aktif penyakit secara invivo 30-33 jam. Lesi primer muncul di tempat kuman pertama kali masuk, biasanya bertahan selama 4-6 minggu dan kemudian sembuh secara spontan. VIII. Kesimpulan Berdasarkan pemeriksaan VDRL Carbon Antigen terhadap pasien atas nama Putu Agus W (Laki-laki / 39 Tahun) diperoleh hasil negative yaitu tidak terjadi flokulasi. IX.
Daftar Pustaka Efrida. 2014. Imunopatogenesis Treponema pallidum dan Pemeriksaan Serologi. Jurnal Kesehatan Andalas. Vol. 3 No. 3. Lukehart SA. 2005. Syphilis. In: Spirochetal Diseases, Harrison’s Principles of Internal Medicine, editors Kasper DL, fauci AS, Longo DL, Braunwald E, Jameson JL, 16th ed, McGraw Hills, New York. p: 977-988. Young H. 2000. Guidelines for serological testing for syphilis. Sex Transm Dis. 76: 403 -5.
