LAPORAN IMUNOSEROLOGI II PEME RI KSAAN HBsAg HBsAg
DISUSUN OLEH :
KELAS : 15 D KELOMPOK V
NURHILALIYAH NURHILALIYA H
: 153145453144
SULPIA
: 153145453154
JUMRIANI. S
: 153145453135
DEWI ANDRIANI. M
: 153145453127
ZULHAM
: 153145453160
PROGRAM STUDI D III ANALIS KESEHATAN STIKES MEGA REZKY MAKASSAR 2017
BAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang
Hepatitis B merupakan penyakit yang banyak ditemukan sebagai penyebab utama terjadinya kesakitan dan kematian, serta tetap menjadi masalah kesehatan masyarakat di seluruh dunia. Virus Hepatitis B (VHB) dapat menyerang semua umur dan semua suku bangsa, bahkan dapat menimbulkan berbagai macam manifestasi klinis. Hepatitis B adalah infeksi virus yang menyerang hati dan dapat menyebabkan penyakit hati akut maupun kronis (WHO, 2008). Penyakit hepatitis B saat ini sudah menjadi penyakit endemis di berberapa negara termasuk Indonesia. Angka prevalensi infeksi virus hepatitis B di Indonesia antara 3-20%. Hal ini berhubungan dengan penularan virus hepatitis B secara vertikal dari ibu dengan HBsAg positif
kepada bayi yang yang
dilahirkannya terjadi sebanyak seban yak 25-45% (Franco et al ., ., 2012). Penularan secara horizontal terjadi pada anak sebanyak 25-50%. Anak terinfeksi sebelum usia 5 tahun dengan daya tular tertinggi pada usia 3-5 tahun 66,7%. Keadaan ini menjadi penting, semakin muda usia terinfeksi VHB maka efek carier kronis semakin menetap. Indonesia digolongkan ke dalam kelompok daerah endemisitas sedang sampai tinggi, dan termasuk negara yang sangat dihimbau oleh WHO untuk segera melaksanakan usaha pencegahan terhadap hepatitis B (Soejoenoes, 2001).
Deteksi HBsAg dapat dilakukan dengan beberapa metode pemeriksaan, yaitu serologi dan Polymerase dan Polymerase Chain Reaction (PCR). Uji serologi antara lain menggunakan
metode Enzyme
Immunoassay (ELISA), Enzyme
Immunoassay Linked
(EIA), Enzyme
Flouroscent
Assay
Linked (ELFA),
Immunochromatography Test (ICT) atau rapid test , Radio Immunoassay (RIA),
dan
Chemiluminescent Chemiluminescent
Microparticle
Immunoassay
(CMIA).
Sedangkan untuk mendeteksi DNA virus dapat digunakan PCR (Lin et al ., ., 2008). Rapid test merupakan metode ICT untuk mendeteksi HBsAg secara kualitatif yang ditampilkan secara manual dan memerlukan pembacaan dengan mata. Tes ini sudah secara luas digunakan dalam mendiagnosis dan skrining penyakit infeksi di negara berkembang. Tujuan adanya pemeriksaan HBsAg menggunakan rapid test ini adalah untuk mendeteksi kadar rendah antigen target yang ada pada darah dengan pasien asimptomatik. Terdapat beberapa jenis rapid test yang telah diakui keakuratannya, seperti Determine HBsAg yang memiliki sensitifitas 98,92% dan spesifisitas 100%, serta DRWHBsAg yang memiliki sensitifitas 99,46% dan spesifisitas 99,2% (Lin et al ., ., 2008). Immunoassay adalah sebuah tes biokimia yang mengukur konsentrasi suatu substansi dalam cairan, biasanya berupa serum darah dengan melihat reaksi antibodi terhadap antigennya. Metode CMIA merupakan salah satu tes immunoassay yang peka dengan ketelitian dan ketepatan analisis yang baik dengan rentang pengukuran yang luas. Pemeriksaan dengan HBsAg
kuantitatif Architect metode CMIA sudah terkalibrasi standard oleh WHO International Standard untuk HBsAg. Metode ini dapat mengukur HBsAg secara kuantitatif yang sama sensitifnya dengan tes asam nukleat untuk mendeteksi infeksi VHB dengan cepat (Maylin S et al ., 2012).
1.2 Tujuan Praktikum
-
Mampu mengidentifikasi HbSag dengan berdasarkan prinsip imunnassay kromotografi
1.3 Prinsip Kerja
Antigen yang terdapat pada sampel akan berikatan dengan Ab konjugat sehingga akan membentuk kompleks Ag-Ab. Komplek Ag-Ab tersebut akan melewati garis test (T), sehingga terjadi penjenuhan dan akan membentuk warna. Sedangkan antibodi yang bebas akan berikatan dengan antigen konjugat yang berada pada garis kontrol (C), sehingga akan membentuk warna yang mengindikasikan konjugat berfungsi dengan baik.
BAB II TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Pengertian Hepatitis
Hepatitis merupakan penyakit peradangan pada hati yang disebabkan oleh virus, bakteri, penyakit autoimun, racun dan lain sebagainya. Virus hepatitis, sebagai penyebab hepatitis virus telah banyak mengalami perkembangan. Saat ini, telah ditemukan jenis-jenis virus hepatitis antara lain virus hepatitis A, B, C, D, E, G dan TT (masih dalam tahap penelitian). Hepatitis yang berlangsung kurang dari 6 bulan disebut “Hepatitis akut”, hepatitis yang berlangsung lebih dari 6 bulan disebut “hepatitis kronis”. Penyebab Hepatitis biasanya terjadi karena virus, terutama salah satu dari kelima virus hepatitis, yaitu A, B, C, D atau E. Hepatitis juga bisa terjadi karena infeksi virus lainnya, seperti mononukleosis infeksiosa, demam kuning dan infeksi sitomegalovirus. Penyebab hepatitis non-virus yang utama adalah alkohol dan obat-obatan (Mustofa,S. 2013 ). 2.2. Etiologi
Penyebab hepatitis bermacam-macam akan tetapi penyebab utama hepatitis dapat dibedakan menjadi dua kategori besar yaitu penyebab virus dan penyebab non virus. Sedangkan insidensi yang muncul tersering adalah hepatitis yang disebabkan oleh virus. Hepatitis virus dapat dibagi ke dalam hepatitis A, B, C, D, E, G. Hepatitis non virus disebabkan oleh agen bakteri, cedera oleh fisik atau kimia, pada prinsipnya penyebab hepatitis terbagi atas
infeksi dan bukan infeksi. Hepatitis B dan C dapat berkembang menjadi sirosis (pengerasan hati), kanker hati dan komplikasi lainnya yang dapat mengakibatkan kematian (Mustofa,S. 2013 ). Dalam masyarakat kita, penyakit hepatitis biasa dikenal sebagai penyakit kuning. Sebenarnya hepatitis adalah peradangan organ hati (liver) yang disebabkan oleh berbagai faktor. Faktor penyebab penyakit hepatitis atau sakit kuning ini antara lain adalah infeksi virus, gangguan metabolisme, konsumsi alkohol, penyakit autoimun, hasil komplikasi dari penyakit lain, efek samping dari konsumsi obat-obatan maupun kehadiran parasit dalam organ hati (liver). Salah satu gejala penyakit hepatitis (hepatitis symptoms) adalah timbulnya warna kuning pada kulit, kuku dan bagian putih bola mata. Peradangan pada sel hati dapat menyebabkan kerusakan sel-sel, jaringan, bahkan semua bagian dari organ hati (liver). Jika semua bagian organ hati (liver) telah mengalami kerusakan maka akan terjadi gagal hati (liver) yang menyebabkan kematian (Mustofa,S. 2013 ). 2.3. Patofisiologi
Virus atau bakteri yang menginfeksi manusia masuk ke aliran darah dan terbawa sampai ke hati. di sini agen infeksi menetap dan mengakibatkan peradangan dan terjadi kerusakan sel-sel hati (hal ini dapat dilihat pada pemeriksaan SGOT dan SGPT). Akibat kerusakan ini maka terjadi penurunan penyerapan dan konjugasii bilirubin sehingga terjadi disfungsi hepatosit dan mengakibatkan ikterik. peradangan ini akan mengakibatkan peningkatan suhu tubuh sehinga timbul gejala tidak nafsu makan
(anoreksia). Salah satu fungsi hati adalah sebagai penetralisir toksin, jika toksin
yang
masuk
berlebihan
atau
tubuh
mempunyai
respon
hipersensitivitas, maka hal ini merusak hati sendiri dengan berkurangnya fungsinya sebagai kelenjar terbesar sebagai penetral racun. Aktivitas yang berlebihan yang memerlukan energi secara cepat dapat menghasilkan H2O2 yang berdampak pada keracunan secara lambat dan juga merupakan hepatitis non-virus. H2O2 juga dihasilkan melalui pemasukan alkohol yang banyak dalam waktu yang relatif lama, ini biasanya terjadi pada alkoholik. Peradangan yang terjadi mengakibatkan hiperpermea-bilitas sehingga terjadi pembesaran hati, dan hal ini dapat diketahui dengan meraba / palpasi hati. Nyeri tekan dapat terjadi pada saat gejala ikterik mulai nampak (Hardjoeno 2007 ). Hepatitis viral dapat dibagi menjadi dua kelompok yaitu kronik dan akut. Klasifikasi hepatitis viral akut dapat dibagi atas hepatitis akut viral yang khas, hepatitis yang tak khas (asimtomatik), hepatitis viral akut yang simtomatik, hepatitis viral anikterik dan hepatitis viral ikterik. Hepatitis virus kronik dapat diklasifikasikan dalam 3 kelompok yaitu hepatitis kronik persisten,
hepatitis
kronik
lobular,
dan
hepatitis
kronik
aktif.
Virus hepatitis A mempunyai masa inkubasi singkat/hepatitis infeksiosa, panas badan (pireksia) didapatkan paling sering pada hepatitis A. Hepatitis tipe B mempunyai masa inkubasi lama atau disebut dengan hepatitis serum (Hardjoeno 2007 ).
Hepatitis akibat obat dan toksin dapat digolongkan ke dalam empat bagian yaitu: hepatotoksin-hepatotoksin direk, hepatotoksin-hepatotoksin indirec, reaksi hipersensitivitas terhadap obat, dan idiosinkrasi metabolik (Hardjoeno 2007 ). Obat-obat yang dapat menyebabkan gangguan/ kerusakan hepar adalah: (Kresno boediana 2014). 1. Obat anastesi. 2. Obat antibiotik. 3. Obat antiinflamasi. 4. Obat antimetabolik dan imunosupresif. 5. Antituberkulosa. 6. Hormon-hormon. 7. Obat psikotropik. 8. Lain-lain, contoh phenothiazine. 2.4. Gambaran klinis Penyakit Hepatitis
Gambaran klinis dapat dibagi dalam dua kelompok besar yaitu : 1. Hepatitis kronik. a. Secara klinis bervariasi dari keadaan dari keadaan tanpa keluhan sampai perasaan lelah yang sangat mengganggu. Adanya keluhan dan gejala hipertensi portal (asites, perdarahan varises esofagus) menunjukkan penyakit pada stadium yang sudah lanjut. b. Pemeriksaan
biokimiawi
menunjukkan
bilirubin, transminase dan globulin serum.
peningkatan
kadar
c. Gambaran histopatologis memperlihatkan kelainan morfologis yang khas untuk hepatitis kronik (Kresno boediana 2014). 2. Hepatitis akut. a. Pada umumnya, hepatitis tipe A, B, dan C mempunyai perjalanan klinis yang sama. Hepatitis tipe b dan c cenderung lebih parah perjalanan penyakitnya dan sering dihubungkan dengan serumsickness. b. Serangan yang teringan tidak menunjukkan gejala dan hanya ditandai dengan naiknya transminase serum. c. Serangan ikterus biasanya pada orang dewasa dimulai dengan suatu masa prodmoral kurang lebih 3-4 hari sampai 2-3 minggu, saat mana pasien umumnya merasa “tidak enak badan”, menderita gejala digestif, terutama anoreksia dan nausea, dan kemudian ada panas badan ringan; ada nyeri di abdomen kanan atas, yang bertambah pada tiap guncangan badan; tak ada nafsu untuk merokok atau minum alkohol; perasaan badan tak enak bertambah menjelang malam dan pasien merasa sengsara. d. Kadang-kadang dapat menderita sakit kepala yang hebat. e. Hati dapat di palpasi dengan pinggiran yang lunak dan nyeri tekan pada 70% pasien. f.
Setelah kurang lebih 1-4 minggu masa ikterik, biasanya pasien dewasa akan sembuh (Kresno boediana 2014).
3.
Manifestasi Klinik a. Stadium Praikterik berlangsung selama 4-7 hari. Pasien mengeluh sakit kepala, lemah, anoreksia, mual, muntah, nyeri pada otot, dan nyeri di perut kanan atas, urin menjadi lebih coklat. b. Stadium Ikterik, berlangsung selama 3-6 minggu. Ikterus mulamula terlihat pada sclera, kemudian pada kulit seluruh tubuh. Keluhan-keluhan berkurang, tetapi pasien masih lemah anoreksia, dan muntah. Hati membesar dan nyeri tekan. Tinja mungkin berwarna kelabu atau kuning muda. Serangan Ikterus biasanya pada orang dewasa dimulai dengan suatu masa prodromal, kurang lebih 3-4 hari sampai 2-3 minggu, saat mana pasien umumnya merasa tidak enak makan, menderita gejala digestive terutama anoreksia dan nausea dan kemudian ada panas badan ringan, ada nyeri di abdomen kanan atas yang bertambah pada tiap guncangan badan. Masa prodormal diikuti warna urin bertambah gelap dan warna tinja menjadi gelap, keadaan demikian menandakan timbulnya ikterus dan berkurangnya gejala : panas badan menghilang, mungkin timbul bradikardi. Setelah kurang lebih 1-2 minggu masa ikterik, biasanya pasien dewasa akan sembuh. Tinja menjadi normal kembali dan nafsu makan pulih. Setelah kelihatannya sembuh rasa lemah badan masih dapat berlangsung selama beberapa minggu.
c. Stadium pasca ikterik. Ikterus mereda, warna urin dan tinja menjadi normal lagi.Penyembuhan pada ank-anak lebih cepat lebih cepat dari orang dewasa, yaitu pada akhir bulan kedua, karena penyebab yang biasanya berbeda (Kresno boediana 2014). 2.5 Pengertian Hepatitis B
Virus hepatitis B (VHB) adalah virus DNA, suatu prototif virus yang termasuk keluarga Hepadnaviridae. Virus ini memiliki DNA yang sebagian berupa untaian tungaal (single stranded DNA) dan DNA polymerase endogen yang berfungsi menghasilkan DNA untaian ganda (double stranded DNA, dsDNA). Virion lengkap VHB terdiri atas suatu struktur berlapis ganda dengan diameter keseluruhan 42 nm. Bagian inti sebelah dalam (inner core) yang berdiameter 28 nm dan dilapisis selaput (envelop) yang tebalnya 7 nm mengandung dsDNA dengan berat molekul 1.6X 106. Bagian envelop yang mengelilingi core terdiri ataskompleks dengan sifat biokimia heterigen ; bagian ini mempunyai sifat antigen berbeda dengan antigen core (HBcAg) dan disebut antigen permukaan hepatitis B surface antigen (HbsAg). HbsAg diproduksi lebih banyak oleh hepatosit yang terinfeksi dan dilepaskan ke dalam darah sebagai partikel bulat berukuran 17-25 nm (diametrer rata-rata 20 nm) dan sebagian partikel tubuler berdiameter sama yang panjangnya berkisraan natara 100-200 nm (Mustofa,S. 2013 ). Antibody terhadap HBcAg dan HBsAg masing-masing disebut antyi HBc dan anti-HBs. Keberadaan anti-HBs dalam sirkulasi melindungi seseorang terhadap infeksi dengan VHB. Selain kedua jenis antigen di atas
antigen lain yang diketahui adalah HBeAg yang merupakan bagian integral dari kapsid virion VHB. HBeAg dapat beredar bebas dalam darah atau membentuk kompleks dengan IgG. Karena kaitannya ssangat erat dengan nukleokapsid VHB, maka HBeAg merupakan petanda yang dapat dipercaya yang menunjukkan banyaknya virion dalam serum. Sebaliknya ant HBe digabungkan dengan kadar virion yang lebih rendah (Mustofa,S. 2013 ). Hepatitis B adalah salah satu peradangan hati yang disebabkan oleh suatu virus hepatitis B. Hepatitis B muncul dalam darah dan menyebar melalui kontak dalam darah, air mani dan cairan vagina yang terinfeksi atau penggunaan bersama jarum obat. Hepatitis B merupakan penyakit yang dapat berjalan akut maupun kronik. Sebagian penderita hepatitis B akan sembuh secara sempurna dan mempunyai kekebalan seumur hidup, tapi sebagian lagi gagal memperoleh kekebalan. Virus hepatitis B dengan komponen antigen permukaan (HbsAg). Diameter 42 nm, dengan ” core ” 4 nm. ” coat virion ” merupakan ” surface antigen ” atau HbsAg ”. Suface antigen biasanya diproduksi berlebihan sehingga dijumpai dalam darah penderita. Pada hepatitis agresif, hati mengalami peradangan kronik, fibrotik dan mengecil dan dapat menjurus. Gejalanya meliputi penyakit kuning, lemah, rasa sakit pada perut dan muntah (Mustofa,S. 2013 ).
2.6 Cara Penyebaran Virus Hepatitis B
Penyebaran virus hepatitis B dapat melalui berbagai cara : 1. Penularan melalui kulit (perkutan) Penularan perkutan terjadi jika bahan yang mengandung HBsAg/partikel virus hepatitis B intak masuk atau dimasukkan ke dalam kulit. Terdapat 2 keadaan cara penularan ini : (Kresno boediana 2014). a.
Penularan perkutan yang nyata : Terjadi jika bahan yang infeksius masuk melewati kulit; melalui penyuntikan darah atau bahan yang berasal dari darah, baik secara intravena atau tusukan jarum. 1)
Hepatitis pasca transfusi Hepatitis virus B akut dapat timbul sebagai akibat transfusi darah yang mengandung HBsAg positip. Dengan melakukan uji saring darah donor terhadap adanya HBsAg, maka jelas terdapat penurunan
prevalensi
kejadian
hepatitis
pasca
transfusi. 2)
Hemodialisa Prevalensi yang tinggi baik sebagai infeksi akut
maupun
kronik,
telah
dilaporkan
pada
penderita dengan penyakit gagal ginjal kronik yang menjalani hemodialisa berkala.
3)
Alat suntik Penularan
lewat
suntikan
dengan
mempergunakan alat yang tidak steril, telah lama dikenal. Sering sesudah imunisasi masal terjadi letupan hepatitis beberapa waktu kemudian. b.
Penularan perkutan tidak nyata : Penularan perkutan yang tidak nyata bisa terjadi. Banyak penderita mendapat hepatitis virus B dan tidak pernah dapat mengingat bahwa mereka mendapat trauma pada kulit atau hal lain, virus hepatitis B tidak dapat menembus kulit yang sehat, namun dapat melalui kulit yang mengalami kelainan penyakit kulit. Penularan yang tidak nyata ini sangat mungkin memegang peranan penting dalam menerangkan jumlah pengidap HBsAg yang sangat besar.
2. Penyebaran melalui selaput lendir a.
Penyebaran peroral Cara ini terjadi jika bahan yang infeksius mengenai selaput lendir mulut. Cara ini tidak sering menimbulkan infeksi. Agaknya penularan melalui mulut hanya terjadi pada mereka dimana terdapat luka didalam mulutnya.
b.
Penyebaran seksual Cara ini terjadi melalui kontak dengan selaput lendir saluran ginjal, sebagai akibat kontak seksual dengan individu yang mengandung HBsAg positip yang bersifat infeksius. Infeksi dapat terjadi melalui hubungan seksual baik
heteroseksual
maupun
homoseksual.
Hal
ini
dimungkinkan oleh karena cairan sekret vagina dapat mengandung HBsAg. c.
Penularan perinatal (transmisi vertikal) Penularan
perinatal
ini
disebut
juga
sebagai
penularan maternal neonatal dan merupakan cara penularan yang unik. Penularan infeksi virus hepatitis B terjadi dalam kandungan, sewaktu persalinan, pasca persalinan. 2.7 Pengertian HbsAg
Antigen permukaan virus hepatitis B (hepatitis B surface antigen, HBsAg) merupakan material permukaan dari virus hepatitis B. Pada awalnya antigen ini dinamakan antigen Australia karena pertama kalinya diisolasi oleh seorang dokter peneliti Amerika, Baruch S. Blumberg dari serum orang Australia (Kresno boediana 2014). HBsAg merupakan petanda serologik infeksi virus hepatitis B pertama yang muncul di dalam serum dan mulai terdeteksi antara 1 sampai 12 minggu pasca infeksi, mendahului munculnya gejala klinik serta meningkatnya SGPT. Selanjutnya HBsAg merupakan satu-satunya petanda serologik selama
3 – 5 minggu. Pada kasus yang sembuh, HBsAg akan hilang antara 3 sampai 6 bulan pasca infeksi sedangkan pada kasus kronis, HBsAg akan tetap terdeteksi sampai lebih dari 6 bulan dan tidak adanya anti-HBc IgM. Beberapa
kasus
menunjukkan
peningkatan
menjadi
hepatitis
kronis
berhubungan dengan adanya penyakit kronis yang diderita, misalnya kegagalan ginjal, infeksi HIV, dan diabetes..HBsAg positif yang persisten lebih dari 6 bulan didefinisikan sebagai pembawa (carrier). Sekitar 10% penderita yang memiliki HBsAg positif adalah carrier, dan hasil uji dapat tetap positif selam bertahun-tahun (Kresno boediana 2014). 2.8 Pemeriksaan HbsAg
Pemeriksaan HBsAg berguna untuk diagnosa infeksi virus hepatitis B, baik untuk keperluan klinis maupun epidemiologik, skrining darah di unitunit transfusi darah, serta digunakan pada evaluasi terapi hepatitis B kronis. Pemeriksaan ini juga bermanfaat untuk menetapkan bahwa hepatitis akut yang diderita disebabkan oleh virus B atau superinfeksi dengan virus lain (Kresno boediana 2012). HBsAg positif dengan IgM anti HBc dan HBeAg positif menunjukkan infeksi virus hepatitis B akut. HBsAg positif dengan IgG anti HBc dan HBeAg positif menunjukkan infeksi virus hepatitis B kronis dengan replikasi aktif. HBsAg positif dengan IgG anti HBc dan anti-HBe positif menunjukkan infeksi virus hepatitis B kronis dengan replikasi rendah (Hardjoeno 2007 ).
Pemeriksaan HbsAg secara rutin dilakukan pada pendonor darah untuk mengidentifikasi antigen hepatitis B. Transmisi hepatitis B melalui transfusi sudah hampir tidak terdapat lagi berkat screening HbsAg pada darah pendonor. Namun, meskipun insiden hepatitis B terkait transfusi sudah menurun, angka kejadian hepatitis B tetap tinggi. Hal ini terkait dengan transmisi virus hepatitis B melalui beberapa jalur, yaitu parenteral, perinatal, atau kontak seksual. Orang yang berisiko tinggi terkena infeksi hepatitis B adalah orang yang bekerja di sarana kesehatan, ketergatungan obat, suka berganti-ganti pasangan seksual, sering mendapat transfusi, hemodialisa, bayi baru lahir yang tertular dari ibunya yang menderita hepatitis B (Kresno boediana 2014). Menurut Kresno boediana tahun 2014 ada beberapa pemeriksaan standar yang biasa digunakan untuk menegakkan diagnosa infeksi hepatitis B yaitu: 1.
HBsAg (hepatitis B surface antigen): adalah satu dari penanda yang muncul dalam serum selama infeksi dan dapat dideteksi 2 -8 minggu sebelum munculnya kelainan kimiawi dalam hati atau terjadinya jaundice (penyakit kuning). Jika HBsAg berada dalam darah lebih dari 6 bulan berarti terjadi infeksi kronis. Pemeriksaan HBsAg bisa mendeteksi 90% infeksi akut.
2.
Fungsi dari pemeriksaan HBsAg diantaranya : - Indikator paling penting adanya infeksi virus hepatitis B - Mendiagnosa infeksi hepatitis akut dan kronik
- Tes penapisan (skrining) darah dan produk darah (serum, platelet dll). - Skrining kehamilan 3.
Anti HBs (antobodi terhadap hepatitis B surface antigen): jika hasilnya “reaktif/positif” menunjukkan adanya kekebalan terhadap infeksi virus hepatitis B yang berasal dari vaksinasi ataupun proses penyembuhan masa lampau.
4.
Anti HBc (antibodi terhadap antigen inti hepatitis B): terdiri dari 2 tipe yaitu Anti HBc IgM dan Anti HBc IgG.
Anti HBc IgM: - Muncul 2 minggu setelah HBsAg terdeteksi dan bertahan hingga 6 bulan. - Berperan pada core window(fase jendela) yaitu saat dimana HBsAg sudah hilang tetapi anti-HBs belum muncul. Anti HBc IgG: - Muncul sebelum anti HBcIgM hilang - Terdeteksi pada hepatitis akut dan kronik - Tidak mempunyai efek protektif Interpretasi hasil dan beberapa metode yang dapat di gunakan dimana anti-HBc tergantung hasil pemeriksaan HBsAg dan Anti-HBs (Hardjoeno 2007 ).
2.8.1 Metode : HBsAg Test a. Prinsip : Ketika
serum/plasma
ditambahkan
dalam
sampel pad, serum akan bergerak menuju pada konjugat yang dilapisi dengan gold-monoclonal antibody sebagai anti HBs konjugat. Campuran tersebut bergerak di sepanjang membran oleh aksi kapiler dan bereaksi dengan cocktail monoclonal dan polyclonal antibody anti HBs yang melapisi area test. Apabila terdapat HBsAg pada tingkat minimal 0,5ng/ml, hasilnya terbentuk warna pada tes tersebut. Jika tidak ada HBsAg dalam sampel, warna pada area tidak akan nampak. Selanjutnya sampel akan menuju ke kontrol area dan membentuk warna merah / ungu mengindikasikan bahwa tes bekerja dan hasilnya valid. b. Interprestasi hasil Baca Interpretasi dalam 20-30 menit
Positif (+) : Adanya dua garis warna pada tanda T dan C
Negatif (- ) : Hanya ada satu garis warna pada kontrol (C)
Invalid : Tidak ada garis warna pada kontrol (C).
2.8.2
Metode : pasif aglutinasi latex a.
Prinsip : HbsAg dalam serum akan berekasi dengan antibodi HbsAg yang reaktif yang dilekatkan pada latex yang ditandai dengan aglutinasi yang jelas.
b. Interprestasi hasil. -
2.8.3
Hasil postif terdapat aglutinasi
Pemeriksaan Hepatitis B metode ELISA a. Prinsip : Pencucian untuk menghilangkan pembungkus antigen terbentuk kompleksbiotin dan streptolisin menghubungkan alkalin fosfat mengkatalisis hidrolis dan substrat menghasilkan fluoresensi, diukur pada panjang gelombang 450 nm. Intensitas dari fluoresensi sebanding dengan kualitas Anti-HBs pada serum. b. Interpretasi Hasil : Ada atau tidaknya HBsAg dalam sample yang diperiksa ditentukan oleh hubungan nilai absorban dari setiap sample dengan nilai Cut Off (NCO).
Sample positif bila absorban ≥ Cut Off Value (COV).
Sample negative bila absorban sample < Cut Off Value (COV).
BAB III METODELOGI KERJA
3.1 Alat yang diperlukan :
1. Cetrifuge. 2. Tabung reaksi. 3. Tourniquet. 4. Timer. 5. Sarung tangan steril. 6. Masker. 3.2 Bahan yang diperlukan :
1. Sampel serum. 2. Spuit. 3. Kapas alkohol 70%. 4. Alat uji Immunoassay merk CIK (dipcard). 3.3 Prosedur kerja :
1. Preparasi sampel a. Diambil darah vena pasien sebanyak 3 ml b. Disentrifugasi selama 10 menit dengan kecepatan 3000 rpm hingga didapatkan sampel serum. Keterangan : Sampel darah harus disimpan dalam wadah bersih dan kering. Uji dapat dilakukan menggunakan sampel plasma maupun
serum, pengumpulanya harus mengikuti prosedur laboratorium klinik reguler, dipisahkan serum dan plasma sesegera mungkin agar tidak terjadi hemolisis, suhu spesimen berkisar 2- 8° C, spesimen harus segera digunakan setelah pengumpulan jika tidak, untuk
penyimpanan
yang
berkepanjangan
spesimen
dapat
dibekukan dan disimpan dibawah suhu -20°C dengan catatan spesimen tidak boleh dibekukan berulang-ulang kali. c. Diperhatikan kondisi sampel yang diperoleh dengan melihat terjadinya hemolisis atau tidak 2. Cara kerja: a. Dibuka kemasan alat uji pada suhu kamar. b. Diberi label pada alat uji dengan identitas pasien. c. Disimpan alat uji pada permukaan yang datar dan bersih. d. Diteteskan 60-90 µl serum (2 tetes) ke dalam alat uji dan dipastikan tidak ada gelembung udara e. Diatur waktu sebelum pembacaan. f. Dibaca hasilnya dalam 15 menit. Hasil positif bisa terlihat sesingkat 1 menit.
BAB IV HASIL PRAKTIKUM
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Jenis Specimen
Serum
Kondisi Specimen
Baik
Kode Specimen
Mr. M
Merek KIT
CIK
No. Lot
F 02 11KI
Tanggal kadaluarsa
16/02/2016
Metode Pemeriksaan
Card Antigen yang terdapat pada sampel serum akan berikatan dengan antibodi konjugat
sehingga
membentuk
kompleks antigen-antibodi, kemudian kompleks antigen-antibodi ini akan 8.
berikatan Prinsip Pemeriksaan
dengan
antibodi
yang
terdapat pada garis T (Test ) sampai jenuh. Selanjutnya antibodi bebas akan berikatan
dengan
antigen
yang
terdapat pada garis C (Control ) hingga membentuk kompleks warna yang mengindikasikan
bahwa
berfungsi dengan baik
kojugat
Negatif (-)
9.
Intrepretasi Hasil
BAB V PEMBAHASAN
Pada praktikum yang dilakukan kali ini, diperoleh hasil negatif pada pemeriksaan HBsAg ( Hepatitis B Surface Antigen), sehingga akan terbentuk 1 garis yaitu pada area kontrol (C). Hal ini dikarenakan, spesimen tidak mengandung antigen HBs, maka tidak terbentuk kompleks Ag-Ab pada area test (T) sehingga tidak menghasilkan warna. Sedangkan, pada area kontrol (C) terbentuk warna dikarenakan antibodi bebas yang akan berikatan dengan antigen konjugat yang berada pada area kontrol (C) dan akan terbentuk warna yang mengindikasikan konjugat berfungsi dengan baik atau hasil uji dapat dikeluarkan (valid). Terbentuknya garis warna akan terlihat di permukaan pada area test (T), jika terdapat antigen yang cukup terhadap resiko HBV (Hepatitis B Virus) dalam sampel. Jika antigen terhadap resiko HBV tidak ada atau ada namun pada tingkat yang sangat rendah dalam sampel, maka tidak akan ad a warna yang muncul dalam garis test (T). Adanya HBsAg dapat dideteksi karena antigen dari sampel serum atau plasma akan berikatan dengan antibodi rekombinan virus Hepatitis B yang terdapat di dalam Test Kit Anti-HBs. Kompleks tersebut akan bermigrasi disepanjang membrane strip secara kromatografi menuju daerah test dan menghasilkan garis berwarna pada daerah garis uji apa bila hasilnya positif. Pada patofisiloginya sendiri, sel hati manusia merupakan target organ bagi virus Hepatitis B. Virus ini, mula-mula melekat pada reseptor spesifik di membran sel hepar kemudian mengalami penetrasi ke dalam sitoplasma sel hepar.
Virus melepaskan mantelnya di sitoplasma, sehingga melepaskan nukleokapsid. Selanjutnya nukleokapsid akan menembus sel dinding hati. Asam nukleat VHB akan keluar dari nukleokapsid dan akan menempel pada. DNA hospes dan berintegrasi pada DNA tersebut. Proses selanjutnya adalah DNA VHB memerintahkan sel hati untuk membentuk protein bagi virus baru. Virus Hepatitis B dilepaskan ke peredaran darah, terjadi mekanisme kerusakan hati yang kronis disebabkan karena respon imunologik penderita terhadap infeksi (Mustofa & Kurniawaty, 2013). Setelah HBsAg menghilang, anti-HBs akan terdeteksi dalam serum pasien dan terdeteksi sampai waktu yang tidak terbatas sesudahnya. Karena terdapat variasi dalam waktu timbulnya anti-HBs, kadang terdapat suatu tenggang waktu (window period ) beberapa minggu, bulan atau tahun lebih yang memisahkan hilangnya HBsAg dan timbulnya anti-HBs. Selama periode tersebut, anti-HBc dapat menjadi bukti serologik pada infeksi virus Hepatitis B. Anti- HBc sendiri merupakan antibodi terhadap antigen core yang terdapat pada sel hati. Dikenal 2 macam anti-HBc yaitu anti-HBc IgM dan anti-HBc total. Untuk mengetahui adanya infeksi virus hepatitis B bila HBsAg dan anti-HBs negatif, perlu dilakukan pemeriksaan anti-HBc IgM untuk memastikan apakah individu tersebut telah terpapar (Asdie et al , 2012). Berdasarkan pada patofisologinya, antigen virus Hepatitis B (HBV) dapat dideteksi dalam serum manusia sekitar 2 minggu sampai 2 bulan sebelum ada gejala klinik yang terjadi. Pada pemeriksaan HBsAg ( Hepatitis B Surface Antigen) sendiri, dapat menggunakan spesimen serum atau plasma heparin.
Sampel yang digunakan merupakan sampel yang tidak limfemik, tidak hemolisis (pemisahan serum atau plasma harus dilakukan segera mungkin), dimana sampel yang digunakan merupakan sampel serum atau plasma. Specimen yang ikterik (hiperbilirubin sampai dengan 500µmol/l), hemolisis (sampai dengan 30mg/l) dapat mempengaruhi hasil pembacaan yang dapat memberikan hasil positif palsu maupun negatif palsu. Pada pemeriksaan HBsAg secara kualitatif, apabila ditemukan hasil positif dapat dilanjutkan dengan pemeriksaan HBsAg secara kuantitatif dengan pemeriksaan HBsAg Architect berdasarkan metode CMIA (Chemiluminescence Microparticle Immunoassay test ). Metode ini, merupakan generasi terbaru setelah ELISA dengan kemampuan deteksi yang lebih sensitif. Interpretasi hasil dari pemeriksaan HBsAg kuantitatif Architect adalah nonreaktif jika spesimen dengan nilai konsentrasi <0,05 IU/mL dan reaktif jika spesimen dengan nilai konsentrasi >0,05 IU/mL. Sampel nonreaktif menandakan negatif untuk HBsAg dan tidak membutuhkan tes selanjutnya (Ahn SH dan Lee JM, 2011).
BAB VI KESIMPULAN
Berdasarkan hasil pemeriksaan pada sampel darah dengan metode rapid test dan prinsip imunokromatografi assay, dapat disimpulkan bahwa hasil yang diperoleh negatif (-).
DAFTAR PUSTAKA
Ahn SH, Lee JM. 2011. Quantification of HBsAg: Basic virology for clinical practice. World J Gastroenterol. 17(3):283-89. Asdie AH, dkk. 2012. Harrison Prinsip-Prinsip Ilmu Penyakit Dalam, Edisi ke13. Jakarta: EGC. Boediana Kresno, S. 2012 . Imunologi Diagnosis dan Prosedur Laboratorium, edisi ketiga : Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Jakarta. Boediana Kresno, S. 2014 . Imunologi Diagnosis dan Prosedur Laboratorium, edisi keempat : Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Jakarta. Hardjoeno UL. 2007. Kapita selekta hepatitis virus dan enterprestasi hasil laboratorium. Makassar. : Cahaya dinan rucitra. : Hlm 5-14.
Mustofa S, Kurniawaty E. 2013. Manajemen gangguan saluran serna : panduan bagi dokter umum. Bandar lampung : Aura printing dan publishing. Jlm.272-7.
