BAB I PENDAHULUAN
1.1
Tujuan Membukt Membuktika ikan n pengaruh pengaruh suhu terhada terhadap p kecepata kecepatan n reaksi reaksi enzimat enzimatik, ik, pengaruh pengaruh pH
terhadap kecepatan reaksi enzimatik, pengaruh konsentrai enzim terhadap kecepatan reaksi enzimatik, dan pengaruh konsentrasi substrak terhadap kecepatan reaksi enzimatik.
1.2
Tinjauan Pustaka Enzim adalah suatu katalis biologis yang dapat mempercepat terjadinya keseimbangan
suatu reaksi kimia. Bisa pula dikatakan enzim sebagai protein dengan sifat katalitik, dimana sifat katalitiknya jauh lebih besar daripada katalis sintetis yang dibuat secara kimia oleh manusia. Enzim juga memiliki spesifitas tinggi terhadap substrat, atau dengan kata lain hanya mau mengkat mengkatali aliss reaksi reaksi tertentu tertentu dengan dengan substra substratt tertent tertentu u saja. saja. Kelebih Kelebihan an enzim enzim sebagai sebagai pengkatalis adalah dapat mempercepat reaksi kimia spesifik tanpa pembentukan produk samping samping.. Umumny Umumnyaa enzim enzim punya punya berat berat molekul molekul jauh lebih besar besar daripada daripada substra substratt yang yang dikatalisnya !inarno, "##$% Enzi Enzim m adala adalah h sebua sebuah h katal katalis isat ator or yang yang dihasi dihasilk lkan an oleh oleh orga organi nism smee hidup hidup yang yang digunaka digunakan n untuk untuk menduku mendukung&m ng&mempe empercep rcepat at reaksi reaksi kimia. kimia. Kebanya Kebanyakan kan dari semua semua enzim enzim disusun oleh protein, kecualir iboz ym es.'iboz ym es adalah molekul dari asam nukleat yang mengkat mengkatali alisa sa reaksi reaksi yang terjadi pada ikatanfo ikatanfoss fodies fodies ter dari '() lain. Enzim dapat dapat ditemukan pada setiap jaringan dan cairan tubuh Birch, "##*%. Enzim merupakan protein yang yang khusu khususs disin disinte tesis sis oleh oleh sel sel hidup hidup untuk untuk mengk mengkat atali alisis sis reaks reaksii yang yang berlan berlangsu gsung ng dida didala lamn mnya ya.. +ung +ungsi si khus khusus us dari dari enzi enzim m adal adalah ah untu untuk k menur enurun unka kan n ener energi gi akti aktia asi si,, mempercepat reaksi pada suhu dan tekanan yang tetap tanpa mengubah besarnya tetapan keseimbangan sebagai pengendali reaksinya Martoharsono, "##-%. Enzim dibagi menjadi " macam berdasarkan komposisinya, yaitu enzim sederhana dan enzim kompleks. Enzim kompleks dikenal sebagai haloenzim yang terdiri dari komponen protein dan molekul organik kecil lainnya. Komponen protein disebut dengan apoenzim dan molekul organik kecil lainnya non enzim% dikenal sebagai koenzim. Meskipun merupakan kata katali lisa sato torr, enzi enzim m tida tidak k sela selalu lu dapa dapatt mengk engkat atal alis isaa subs substr trat at.. Misa Misaln lnya ya )H sela selalu lu mengkatalisa reaksi oksidasi/reduksi tetapi memecahkan nomor dari alkohol yang berbeda dari metanol menjadi butanol Birch, "##*%. +aktor/faktor yang mempengaruhi kerja enzim sendiri antara lain adalah suhu, pH, radiasi sinar 0, u, 1, 2, 3. i samping itu, kecepatan reaksi enzimatik dipengaruhi pula oleh konsentrasi enzim maupun substratnya.
1.3 Tinjauan Bahan 4.*.4 5uhu 6emperature% 7leh karena reaksi kimia dapat dipengaruhi oleh suhu, maka reaksi yang menggunakan katalis enzim dapat dipengaruhi oleh suhu. 8ada suhu rendah reaksi kimia berlangsung lambat, sedangkan pada suhu yang lebih tinggi reaksi berlangsung lebih cepat. isamping itu, karena enzim itu adalah suatu protein, maka kenaikan suhu dapat menyebabkan terjadinya proses denaturasi. )pabila terjadi proses denaturasi, maka bagian aktif enzim akan terganggu dan dengan demikian konsentrasi efektif enzim menjadi berkurang dan kecepatan reaksinya pun akan menurun. Kenaikan suhu sebelum terjadinya proses denaturasi dapat menaikkan kecepatan reaksi.8eningkatan suhu meningkatkan reaksi enzim yang terkatalisis dan yang tidak terkatalisis dengan cara meningkatkan energi kinetic dan frekuensi tubrukan dari besarnya molekul. Bagaimanapun energy panas dapat meningkatkan energy kinetic dari enzim ke titik yang mana kelebihan energy pelindung untuk dapat mengganggu interaksi non/koalen yang berfungsi mengatur struktur tiga dimensi dari enzim. 9incin polipeptida kemudian mulai terbuka atau terdenaturasi, yang disertai dengan pengurangan kecepatan dari aktiitas katalisis.8ada umumnya enzim akan bekerja baik pada suhu optimum, yaitu antara *#: ; <#:9. 4.*." erajat keasaman pH% 8erubahan pH dapat mempengaruhi perubahan asam amino kunci pada sisi aktif enzim, sehingga menghalangi sisi aktif bergabung dengan substratnya. 5etiap enzim dapat bekerja baik pada pH optimum, masing/masing enzim memiliki pH optimum yang berbeda. 5ebagai contoh = enzim amilase bekerja baik pada pH -,> agak basa%, sedangkan pepsin bekerja baik pada pH " asam kuat&sangat asam%.5eperti protein pada umumnya, struktur ion enzim tergantung pada pH lingkungannya. Enzim dapat berbentuk ion positif, ion negatif, atau ion bermuatan ganda. engan demikian perubahan pH lingkungan akan berpengaruh terhadap efektiitas bagian aktif enzim dalam membentuk kompleks enzim substrat. 4.*.* Konsentrasi enzim Kecepatan reaksi dipengaruhi oleh konsentrasi enzim, makin besar konsentrasi enzim makin tinggi pula kecepatan reaksi, dengan kata lain konsentrasi enzim berbanding lurus dengan kecepatan reaksi. 4.*.< Konsentrasi substrat Hasil eksperimen menunjukkan bah?a dengan konsentrasi enzim yang tetap, maka pertambahan konsentrasi substrat akan menaikkan kecepatan reaksi.Untuk dapat terjadi kompleks enzim substrat, diperlukan adanya kontak antara enzim dengan substrat. Kontak ini terjadi pada suatu tempat atau bagian enzim yang disebut bagian aktif. 8ada konsentrasi substrat rendah, bagian aktif enzim ini hanya menampung sedikit substrat. Bila konsentrasi substrat diperbesar, makin banyak substrat yang dapat berhubungan dengan enzim pada
bagian aktif tersebut. engan demikian, konsentrasi kompleks enzim substrat makin besar dan hal ini menyebabkan makin besarnya kecepatan reaksi. 4.*.> !aktu !aktu kontak&reaksi antar enzim dan substrat menentukan efektiitas kerja enzim. 5emakin lama ?aktu reaksi maka kerja enzim juga akan semakin optimum. 4.*.$ Konsentrasi ion Hidrogen Kecepatan dari hampir semua reaksi enzim yang terkatalisis menunjukkan ketergantungan yang signifikan dari konsentrasi ion hydrogen. Kebanyakan enzim intraseluler menunjukkan aktiitas optimal pada nilai pH > dan @. Hubungan dari aktiitas konsentrasi ion H menunjukkan keseimbangan antara denaturasi enzim pada pH yang tinggi dan rendah serta efek pada enzim, substrat, atau keduanya. 4.*.- Aon logam Aon/ion logam, yang menjalankan peranan katalitik dan structural pada lebih seperempat dari semua enzim yang dikenal dapat pula mengisi peranan pengatur, khususnya bagi reaksi dimana )68 merupakan substrat. Kalau kompleks )68 ion logam tersebut merupakan substrat, aktifitas maksimal secara khas akan terlihat pada rasio molar )68 terhadap logam di sekitar satu.
BAB III DATA HASIL PRAKTIKUM
3.1 Tabe Pen!a"atan *.4.4 8engaruh Konsentrasi Enzim 6erhadap Kecepatan 'eaksi Enzimatik
(o.
8erlakuan
8engamatan
4.
icuci seluruh alat dan bahan dengan air 5eluruh alat dan bahan bersih dan steril
".
dan aDuades isiapkan penangas air dengan suhu 8enangas air siap dan susu sudah *-9 dan suhu sebanyak $# ml pada dimasukkan ke erlenmeyer Erlenmeyer
*.
6abung reaksi diisi =
•
" ml <# tetes% larutan protease #,> ml larutan protease F #,> ml
•
aDuades #,> ml larutan protease F 4,> ml
•
•
Ber?arna cokelat Ber?arna cokelat kekuningan
•
Ber?arna cokelat pudar
• •
6idak ada perubahan 6idak ada perubahan
•
6idak ada perubahan
•
Muncul penggumpalan dalam ?aktu
•
"$ detik Muncul penggumpalan dalam ?aktu
•
4# detik Muncul penggumpalan dalam ?aktu
•
aDuades <.
6abung reaksi dipanaskan selama > menit =
•
" ml <# tetes% larutan protease #,> ml larutan protease F #,> ml
•
aDuades #,> ml larutan protease F 4,> ml
•
>.
aDuades 6ambahkan 4# ml susu yang sudah dipanaskan ke dalam = •
" ml <# tetes% larutan protease
•
#,> ml larutan protease F #,> ml
•
aDuades #,> ml larutan protease F 4,> ml aDuades
4>,C> detik
HASIL PER#$BAAN (o. 6abung 4. ". *. *.4."
5ubstrat 5usu 4# m susu 4# m susu 4# m susu
Konsentrasi Enzim Konsentrasi a?al 8engenceran 4=4 8engenceran 4=*
!aktu 8enggumpalan detik% "$ detik 4# detik 4>,C> detik
8engaruh pH 6erhadap Kecepatan 'eaksi Enzimatik
(o.
8erlakuan
8engamatan
4.
Mencuci alat/alat yang digunakan saat )lat jadi bersih dan steril
".
praktikum 5iapkan < tabung reaksi yang sudah )da < tabung reaksi dicuci
*.
< tabung reaksi yang terdiri dari = • • • •
H9l #,< G 6abung A% )sam aktat 4G 6abung AA% )Duades 6abung AAA% (a"97* 4 G 6abung A%
• • • •
!arna a?al bening, berbentuk cairan !arna a?al bening, berbentuk cairan !arna a?al bening, berbentuk cairan !arna a?al bening, berbentuk cairan
<.
Masing/masing * ml. 6ambahkan 4 tetes 88 = •
•
Bening&?arna tetap 6etap 6etap Berubah jadi ungu
>.
H9l #,< G 6abung A% )sam aktat 4G 6abung AA% • )Duades 6abung AAA% • (a"97* 4 G 6abung A% • 6ambahkan * ml Kasein = •
H9l #,< G 6abung A%
•
!arna menjadi putih susu, ada
•
)sam aktat 4G 6abung AA%
•
gumpalan 8utih keruh agak bening, tidak ada
•
gumpalan 8utih keruh agak bening, tidak ada
•
gumpalan Ungunya memudar
•
•
)Duades 6abung AAA%
(a"97* 4 G 6abung A% 6ambahkan tripsin yang sudah
• •
•
$
dipanaskan = H9l #,< G 6abung A% )sam aktat 4G 6abung AA% • )Duades 6abung AAA% • (a"97* 4 G 6abung A% • HASIL PER#$BAAN •
N%. Tabun! 4. ". *. <. *.4.* (o
Kasein &' !(L * m * m * m * m
• • • •
En)i" 4 m tripsin 4 m tripsin 4 m tripsin 4 m tripsin
8utih kecokelatan, menggumpal 9okelat bening, berbuih 9okelat bening, berbuih !arna jadi merah muda
*H 4 > @
+a,na a,utan 8utih kecokelatan 9okelat bening 9okelat bening Merah muda
8engaruh 5uhu 6erhadap Kecepatan 'eaksi Enzimatik 8erlakuan
8engamatan
4.
Mencuci peralatan dengan air dan sterilkan 6abung bersih dan steril dengan aDuades
".
Masukkan > ml susu ke dalam > tabung reaksi
Ber?arna putih
*.
Masukkan 4 ml enzim protease ke dalam > Ber?arna orange kecokelatan tabung reaksi lain
<.
8asangkan satu tabung reaksi berisi dengan 6abung saling berpasangan satu tabung reaksi berisi enzim protease
>.
Masukkan pasangan pertama ke dalam gelas 6idak ada perubahan kimia berisi es selama > menit.
$.
8asangan kedua pada suhu ruang selama > 6idak ada perubahan menit.
-.
Masukkan
pasangan
ketiga
ke
dalam 6idak ada perubahan
penangas air *-/ <# 9 selama > menit. C.
Masukkan
pasangan
keempat
ke
dalam 6idak ada perubahan
ke
dalam 6idak ada perubahan
penangas air -$ 9 selama > menit. @.
Masukkan
pasangan
kelima
penangas air sampai mendidih 4##9% 4#.
9ampurkan larutan protease ke dalam tabung berisi susu tadi sampai mengendap =
•
6abung A 6abung AA
•
6abung AAA
•
•
Menggumpal selama 4# detik 5etelah ditunggu selama *,"> menit
•
tidak terjadi penggumpalan Hanya menggumpal sedikit pada
•
dasar tabung, ?aktu penggumpalan • •
6abung A 6abung
• •
C# detik Menggumpal pada ?atku 4"# detik Menggumpal pada detik ke/>. 6erbentuk " lapisan. apisan atas orange, lapisan ba?ah putih.
HASIL PER#$BAAN N%. Tabun! 4 " * < >
Te"*e,atu,e -#/ # ">/*# *-/<# ->/C# 4##
+aktu *en!!u"*aan -0etik/ 4# detik 4@> detik C# detik 4"# detik > detik
*.4.< 8engaruh Konsentrasi 5ubstrat 6erhadap Kecepatan 'eaksi Enzimatik (o. 8erlakuan 4. Mencuci dan mensterilkan dengan ".
8engamatan )lat alat menjadi bersih
aDuades, semua alat Memasukkan susu ke dalam tabung
6erdapat susu sesuai takarannya.
reaksi =
*.
5usu > ml 5usu < ml F 4 ml aDuades • 5usu * ml F " ml aDuades • Memasukkan 4 ml enzim protease ke Enzim protease terdapat pada tabung reaksi,
<.
dalam * tabung reaksi <# gr&l ber?arna cokelat Masukkan tabung A, > ml susu selama > 6idak ada perubahan
>.
menit ke penangas air 9ampurkan enzim protease pada tabung Menggumpal
$.
A. iamati sampai terjadi penggumpalan. ber?arna putih Masukkan tabung AA, < ml F 4 ml 6idak ada perubahan
•
pada
C@
detik,
endapan
aDuades ke dalam penangas air selama > -.
menit 9ampurkan enzim protease pada tabung 6erdapat endapan pada -$ detik, endapan AA.
C.
iamati
sampai
terjadi ber?arna putih
penggumpalan. Masukkan tabung AAA, * ml F " ml 6idak ada perubahan aDuades ke dalam penangas air selama >
@.
menit 9ampurkan enzim protease pada tabung 6erdapat endapan pada ># detik AAA.
iamati
sampai
terjadi
penggumpalan.
HASIL PER#$BAAN (o. 6abung
Enzim
Konsentrasi substrat
!aktu 8enggumpalan
4.
4 m larutan enzim
> m susu
detik% C@ detik
".
protease 4 m larutan enzim
< m susu F 4 m
-$ detik
*.
protease 4 m larutan enzim
aDuades * m susu F " m
># detik
protease
aDuades
BAB I PEMBAHASAN
<.4
)nalisa 8rociding dan )nalisa Hasil dari 8engaruh Konsentrasi Enzim 6erhadap
Kecepatan 'eaksi Enzimatik 5aat melakukan praktikum kinetika enzim alat/alat dicuci terlebih dahulu dengan air dan aDuades. 5etelah alat bersih dan steril, menyiapkan penangas air dengan suhu *-9 dan susu sebanyak $# m pada Erlenmeyer. 6abung reaksi masing/masing diisi " m larutan protease yang ber?arna cokelat, #,> m larutan protease dicampur #,> m aDuades menjadi ber?arna cokelat kekuningan, dan #,> m larutan protease dicampur 4,> m aDuades menjadi ber?arna cokelat pudar. 6abung reaksi kemudian dipanaskan selama > menit. Masing/masing tabung yang telah dipanaskan di amati perubahan ?arnanya. 6ernyata setelah diamati ketiga tabung tersebut tidak terjadi perubahan ?arna yang signifikan. Kemudian di tambahkan 4# m susu yang dipanaskan ke dalam masing/masing tabung reaksi. Hasilnya pada tabung yang berisi " m larutan protease terjadi penggumpalan dalam ?aktu "$ detik. 8ada tabung #,> m larutan protease dicampur #,> m aDuades terjadi penggumpalan dalam ?aktu 4# detik. 8ada tabung #,> m larutan protease dicampur 4,> m aDuades terjadi penggumpalan dalam ?aktu 4>,C> detik.
<."
)nalisa 8rociding dan )nalisa Hasil dari 8engaruh pH 6erhadap Kecepatan 'eaksi
Enzimatik 8ertama/tama alat yang digunakan dicuci hingga bersih dan steril. 5etelah itu siapkan < buah tabung reaksi yang masing/masing tabung sebanyak * m yang terdiri dari H9l #,< G, asam laktat 4G, aDuades, dan (a"97* 4G. H9l #,< G, asam laktat 4G, aDuades, dan (a "97* / 4G a?alnya ber?arna bening dan berbentuk cairan. 5etelah ditambahkan 4 tetes 88, tabung reaksi yang berisi H9l #,< G, asam laktat 4G dan aDuades cenderung tidak mengalami
perubahan ?arna. Berbeda dengan (a"97* 4G mengalami perubahan ?arna secara drastis menjadi ungu. Kemudian masing/masing tabung reaksi diberi * m Kasein. 8erubahan yang terjadi pada tabung H9l #,< G menjadi putih susu dan terdapat gumpalan. 6abung yang berisi )sam laktat 4G dan )Duades berubah menjadi putih keruh agak bening namun tidak ada gumpalan. 8ada tabung yang berisi (a"97* 4G ?arna ungu menjadi lebih pudar. Kemudia ditambahkan kembali tripsin yang sudah dipanaskan. 8ada tabung H9l #,< G berubah ?arna menjadi putih kecokelatan dan menggumpal, tabung berisi asam laktat 4G berubah ?arna jadi cokelat bening dan berbuih, tabung berisi aDuades berubah ?arna menjadi cokelat bening dan berbuih, dan (a"97* 4G berubah ?arna menjadi merah muda. <.*
)nalisa 8rociding dan )nalisa Hasil dari 8engaruh 5uhu 6erhadap Kecepatan 'eaksi
Enzimatik )lat dicuci bersih hingga steril. Kemudian masukkan > m susu pada > tabung reaksi. Kemudian tambahkan 4 m enzim protease ke dalam masing/masing tabung reaksi. 5usu yang a?alnya ber?arna putih masing/masing berubah ?arna menjadi putih kecokelatan. 6abung masing/masing dipasangkan dengan satu tabung reaksi yang berisi enzim protease. Masukkan pasangan pertama pada gelas kimia yang berisi es selama > menit. Kemudian pasangan tabung yang kedua dimasukkan pada suhu ruang selama > menit. alu pasangan ketiga dimasukkan ke dalam penangas air bersuhu *-9/<#9 selama > menit. 8asangan keempat dimasukkan ke dalam penangas air bersuhu -$9 selama > menit. 8asangan keempat dimasukkan ke dalam penangas air bersuhu 4##9 atau sampai mendidih. Hasilnya pada kelima pasangan tersebut tidak terjadi perubahan. 5etelah itu campurkan masing/masing tabung dengan larutan protease sampai mengendap. 8ada tabung dari pasangan pertama terjadi penggumpalan selama 4# detik. 8ada tabung dari pasangan kedua tidak terjadi penggumpalan selama 4@> detik. 8ada tabung dari pasangan ketiga terjadi penggumpalan sedikit pada dasar tabung selama C# detik. 8ada tabung dari pasangan keempat terjadi penggumpalan selama 4"# detik. 8ada tabung dari pasangan kelima terjadi penggumpalan pada detik ke/>, terbentuk " lapisan dimana lapisan atas ber?arna orange dan lapisan ba?ah ber?arna putih.
<.<
)nalisa 8rociding dan )nalisa Hasil dari 8engaruh Konsentrasi 5ubstrat 6erhadap
Kecepatan 'eaksi Enzimatik )lat dicuci dan disterilkan dengan aDuades. 5etelah alat menjadi steril masukkan susu kedalam tabung reaksi dimana masing/masing tabung berisi susu > m, susu
Masukkan tabung A yang berisi susu > m ke dalam penangas air selama > menit, tidak terjadi perubahan. )ngkat tabung reaksi dan tambahkan enzim protease pada tabung A. Hasilnya terjadi penggumpalan pada detik ke C@ dan endapan ber?arna putih. Kemudian Masukkan tabung AA yang berisi susu menit. 5etelah itu tambahkan enzim protease pada tabung AA. Hasilnya terdapat endapan pada detik ke -$ dan endapan ber?arna putih. Masukkan tabung AAA yang berisi susu *m dicampur " m aDuades ke dalam penangas air selama > menit. Kemudian tambahkan enzim protease pada tabung AAA. Hasilnya terdapat endapan pada detik ke >#.
BAB PENUTUP
.1
Kesi"*uan Enzim adalah substansi yang dihasilkan oleh sel/sel hidup dan berperan sebagai
katalisator pada reaksi kimia yang berlangsung dalam organisme. Enzim juga memiliki spesifitas tinggi terhadap substrat, atau dengan kata lain hanya mau mengkatalis reaksi tertentu dengan substrat tertentu saja. )ktiitas enzim dipengaruhi oleh suhu optimal enzim berkisar antara *#/ <# I9, yaitu suhu tubuh. iatas suhu ># I9 enzim secara bertahap menjadi inaktif karena protein terdenaturasi dan pada suhu 4## I9 semua enzim rusak, sedangkan pada suhu sangat rendah, enzim tidak benar / benar rusak tetapi aktifitasnya sangat banyak berkurang.
.2
Sa,an 5edikit saran dari saya kepada asisten lab agar dapat memperhatikan para praktikal
yang belum mengerti dalam menjalankan praktikum tersebut. Kepada asisten lab agar tidak bosan mengajari kami, dan selalu mengingatkan kami para praktikal. Harapan saya semoga praktikum Biokimia ini dapat berjalan dengan baik sampai selesai.
DATAR PUSTAKA
Birch, 8. "##*%. Enzyme Kinetics.Uniersity of 8aisley. ???.medicine.indstate.edu. E?ing, J.!. "##<%. Anstrumental Methods of 9hemical )nalysis. McJra?/Hill Book 9ompany. U5). Khopkar,5.M . "##"% . Konsep asar Kimia )nalitik . Uniersitas Andonesia 8ers akarta. Martoharsono, 5. "##-%. Biokimia A. Jadjah Mada Uniersity 8ress. Logyakarta. !inarno, +. J. "##$%. Enzim 8angan. 86 Jramedia 8ustaka Utama. akarta.
