Lab. 3 Microscopia y Morfologia Celular

CBI 100

Biología General Instituto de Ciencias Naturales

Guía de Laboratorio Nº 03 / Microscopía y Morfología Celular Módulo II

2011

MICROSCOPIA Y MORFOLOGIA CELULAR

Temario Microscopía y morfología celular

Objetivos 1. Conocer el microscopio óptico y la función de cada uno de los elementos que lo componen. 2. Reforzar, mediante la observación de células, los conceptos contenidos en la teoría celular. 3. Analizar las características generales de las células eucariontes animales y vegetales, así como determinar las diferencias entre una célula y otra.

Instrucciones La guía de laboratorio consta las siguientes partes: ü Primero una introducción al tema con conceptos claves para el alumno ü Segundo aparece una actividad preliminar y el desarrollo del diseño experimental ü Tercero un espacio para los apuntes del laboratorio

Recomendaciones generales para el alumno ü

Para que las clases de laboratorio se desarrollen con total normalidad, se recomienda a los alumnos que la semana anterior a la práctica de laboratorio, lean, realicen la guía de prelaboratorio y asimilen los textos de cada guía, con el fin de hacer las consultas pertinentes del tema con la literatura recomendada, así el alumno podrá llegar al laboratorio con ideas cimentadas para hacer un buen y efectivo trabajo.

ü

Para las prácticas se requiere el uso obligado de delantal, con el fin de evitar las lesiones físicas o daño de la ropa, en el caso de estar utilizando reactivos. Además el alumno debe ceñirse a las normas de seguridad entregadas por el profesor a cargo y ante cualquier duda o peligro, el estudiante debe consultar con el profesor a cargo.

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INTRODUCCIÓN Sin excepción alguna, todos los seres vivos están formados por unidades básicas llamadas células; las diferentes especies de bacterias, protozoos, hongos, vegetales y animales, presentan células propias y específicas que se caracterizan en su morfología, fisiología y contenido de genes que regulan tanto las funciones como las características celulares. Una sola de estas células puede constituir un organismo entero (como es el caso de las bacterias y los protozoos) o bien agruparse y diferenciarse en tejidos y órganos (como en los vegetales y animales) para formar un organismo multicelular. Además, las células presentan organelos donde ocurren muchos de los procesos celulares, como también presentan una membrana plasmática que las aísla del medio que las rodea y les permite comunicarse con su medio y controlar el intercambio con éste. Existen dos modelos básicos de células: el modelo celular procarionte y el modelo celular eucarionte, basados en la ausencia o presencia de una envoltura nuclear limitando al material genético. A pesar de esta radical diferencia, todas las células tienen tres componentes comunes: membrana plasmática, material genético y citoplasma. Las células son pequeñas; la mayoría mide entre 5 y 50 m de diámetro, de manera que se encuentran fuera del poder de resolución del ojo humano, pudiendo ser observadas a través de un microscopio de luz que tiene un mayor poder resolutivo que nuestro globo ocular.

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Membrana nuclear Membrana plasmática Nucleolos Ribosomas Sistema de endomembranas Pared Celular Cloroplastos Organización Celular

PROCARIONTES Bacterias

Hongos

EUCARIONTES Vegetales

Animales

No

Si

Si

Si

Si

Si

Si

SI

No 70S

Si 80S

Si 80S

Si 80S

No

Si

Si

Si

Si No

Si No Unicelular y pluricelular

Si Si

No No

Pluricelular

Pluricelular

Unicelular

CONCEPTOS CLAVES Poder de resolución: corresponde a la capacidad de un microscopio para discriminar detalles muy finos o distinguir puntos muy cercanos entre sí. Portaobjeto: lámina rectangular de vidrio en que se colocan los objetos que se han de examinar microscópicamente. Cubreobjeto: lámina delgada de vidrio, con que se cubren las preparaciones microscópicas para su protección y examen. Suelen ser cuadrados. Célula: Unidad estructural y funcional básica de los seres vivos, que consiste en material orgánico limitado por una membrana. Células procariotas: Células de bacterias estructuralmente simples que no tienen organelos enlazados por membranas; derivados de pro-karion o antes del núcleo. Células eucariotas: Células (por ejemplo: vegetales, animales, protistas, hongos) caracterizadas por una estructura interna dependiente de organelos como núcleo; su nombre se deriva de eu-karion o núcleo verdadero .

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ACTIVIDAD PRELIMINAR Indique el nombre de cada una de las estructuras celulares señaladas.

Tipifique (Clasifique) de la manera mas completa posible cada uno de los modelos celulares.

DISEÑO EXPERIMENTAL & ACTIVIDADES Materiales En cada mesón se dispondrá de una bandeja para cuatro alumnos con: Material biológico Compuestos Material de procesamiento químicos Muestra de Elodea Azul de Metileno Mondadientes (para obtención de (Hojas) células epiteliales bucales) Portaobjetos (32) Cubreobjetos (32) Gotarios Pizeta con agua destilada Plumón rotulador Mecheros de alcohol

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OBJETIVOS 1. Conocer el microscopio óptico y la función de cada uno de los elementos que lo componen. 2. Reforzar, mediante la observación de células, los conceptos contenidos en la teoría celular. 3. Analizar las características generales de las células eucariontes animales y vegetales, así como determinar las diferencias entre una célula y otra. PROCEDIMIENTOS GENERALES & ANÁLISIS DE MUESTRAS I. Manejo y uso del microscopio. Observe la lámina del microscopio óptico que se encuentra en su guía de trabajo. Identifique y reconozca los componentes del microscopio en su instrumento de trabajo ubicado en el mesón. Proceda a manipular su microscopio siguiendo las instrucciones de la guía. Es fundamental que la manipulación de este delicado instrumento se realice con el máximo cuidado. Se recomienda a los alumnos ajustarse estrictamente a las indicaciones. Siéntese cómodamente frente al microscopio. Mientras observa, una mano maneja el tornillo macrométrico y la otra los tornillos del carro. Observe con ambos ojos abiertos, para ello ajuste la distancia entre los oculares. El revólver se mueve siempre de menor a mayor objetivo en sentido contrario a los punteros del reloj. Coloque el condensador en su posición más baja, a fondo en el soporte. Deje el diafragma completamente abierto. Encienda la lámpara. Comience enfocando siempre con el menor aumento correspondiente al objetivo lupa (4x). Gire el tornillo macrométrico y suba la platina hasta que llegue al tope y el objetivo quede ubicado a unos centímetros de la platina. Observe por el ocular y verá el campo visual uniforme. Coloque el portaobjeto con la preparación a observar centrada en la platina; el cubreobjeto debe estar hacia arriba. Fije la preparación con las pinzas. Observe por el ocular y gire el tornillo macrométrico, alejando lentamente el objetivo de la preparación hasta obtener una imagen más o menos nítida. Afine el enfoque y logre mayor nitidez con el tornillo micrométrico. Pase al aumento siguiente girando el revólver hasta escuchar un “clic” que indica que el objetivo se encuentra centrado. Para enfocar ahora, solo debe utilizar el tornillo micrométrico. Trabaje solo hasta el objetivo mayor (40x). El uso del objetivo de inmersión (100x) será indicado solamente por su profesor puesto que requiere la aplicación de aceite de inmersión.

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II. Enfoque de una preparación

Procedimiento g eneral para el montaje de muestras biológ icas húmedas y enteras para microscopía.

I.

Célula animal y procariota: mucosa bucal y bacterias asociadas (DEMOSTRATIVA).

Rotule un portaobjetos (A); raspe suavemente, con una tórula o un mondadientes, la cara interna de su mejilla. Con el material obtenido realice un extendido sobre el portaobjetos limpio y seco, para ello ponga en contacto la muestra que obtuvo con una de las superficies del portaobjeto. Fije la muestra, para ello entibie muy suavemente el portaobjetos que contiene la muestra con la llama del mechero. Cubra la muestra con un par de gotas del colorante azul de metileno y espere dos minutos. Luego, escurra el exceso de colorante secando por las orillas de la muestra con papel secante. Deposite una gota de agua destilada sobre la muestra y coloque un cubreobjetos. Seque los bordes del exceso de agua con papel secante. Observe al microscopio, dibuje y describa. Considere forma, tamaño y presencia de estructuras celulares. II. Célula vegetal: hojas de E l o d e a . Extraiga una hoja de Elodea sp. y pósela sobre un portaobjetos limpio y seco. Evite que éstas queden con pliegues o burbujas de aire. Agregue con ayuda de un gotario una gota de agua y coloque sobre ella el cubreobjetos. Observe al microscopio y describa. Considere forma, tamaño y presencia de estructuras celulares.

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III. Protozoos:

Euglena

sp.

Con un gotario obtenga una muestra de protozoos del cultivo. Deje caer una gota sobre un portaobjetos limpio y seco. Observe al microscopio, dibuje y describa. Considere forma, tamaño y presencia de estructuras celulares. Apóyese en el esquema de la izquierda para complementar su descripción.

Apóyese en las siguientes imágenes y luego conteste la tabla comparativa anexa.

Planta acuática E l o d e a sp.

Células de la mucosa bucal humana

Célula muscular esquelética

Neuronas multipolares (médula)

Esquema de una bacteria tipo

Células cromafines

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TABLA DE RESULTADOS Unicelular o multicelular

Núcleo y ubicación

Organelos subcelulares

Forma

Límite celular

Otras observacion es

Elodea sp

Células bucal

mucosa

Bacterias Célula muscular esquelética Neuronas multipolares Células cromafines BIBLIOGRAFÍA Karp G. “Biología Celular y Molecular”, Ed. McGraw-Hill Interamericana. Salomón – Berg. “Biología de Villee”, Ed. Interamericana McGraw-Hill. Cooper G. “La Célula”, Ed. Marbán. APUNTES DE LABORATORIO …………………………………………………………………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………………

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