Kalibrasi Spektrofotometer UV Vis

Kalibrasi Spektrofotometer UV Vis

Definisi Kalibrasi Menurut ISO/IEC Guide 17025:2005 dan Vocabul ary of International Metrology (VIM) adalah serangkaian kegiatan yang membentuk hubungan antara nilai yang ditunjukkan oleh instrumen ukur atau sistem pengukuran, atau nilai yang diwakili oleh bahan ukur, dengan nilainilai yang sudah diketahui yang berkaitan dari besaran yang diukur dalam kondisi tertentu. Dengan kata lain kalibrasi adalah kegiatan untuk menentukan kebenaran konvensional nilai  penunjukkan alat  penunjukkan alat ukur dan bahan ukur dengan cara membandingkan terhadap standar terhadap standar ukur yang mampu telusur (traceable) ke standar ke standar nasional maupun internasional maupun internasional untuk satuan ukuran dan/atau internasional dan bahan-bahan acuan tersertifikasi. Manfaat kalibrasi adalah sebagai berikut: 1.

Untuk mendukung sistem mutu yang diterapkan di berbagai industri pada peralatan laboratorium dan produksi yang dimiliki

2.

Dengan melakukan kalibrasi, bisa diketahui seberapa jauh perbedaan (penyimpangan) antara harga benar dengan harga yang ditunjukkan oleh alat ukur.

Kalibrasi Spektrofotometer Spektrofotometer Spektrofotometer UV-Vis banyak UV-Vis banyak digunakan untuk penentuan konsentrasi senyawasenyawa yang dapat menyerap radiasi pada daerah ultraviolet (200 –  (200 –  400  400 nm) atau daerah sinar tampak (400 –  (400 –  800   800 nm) (Sastrohamidjojo, (Sastrohamidjojo, 1991). Analisis dengan instrument ini dilakukan dengan penentuan absorbansi dari larutan sampel yang diukur. spektrofotometer mengukur transmitan atau absorban suatu sampel sebagai fungsi panjang gelombang. Pada spektro yang  perlu dikalbrasi adalah panjang gelombang dan absorbansi

Kalibrasi panjang gelombang 

menggunakan filter gelas holium oksida yang mempunyai panjang gelombang acuan (nm)



 pasang filter gelas holium oksida pada kompartemen sampel dan kompartemen pembanding dibiarkan kosong (udara)



Scan spektrum serapan holium oksida, bandingkan panjang gelombang spektrum yang diperoleh dengan data panjang gelombang acuan.

Kalibrasi absorbans 

Buat larutan kalium dikromat 50 + 0,5 mg dalam 1 liter 0,005 mol/L asam sulfat (larutan A)



Buat larutan kalium dikromat 100 + 1 mg dalam 1 liter 0,005 mol/L asam sulfat (larutan B)



Buat larutan 0,005 mol/L asam sulfat sebagai pembanding dan bandingkan hasilnya dengan data acuan (+ 2%)

Cara Menggunakan Spektrofotometer MANUAL PROSEDUR PENGGUNAAN SPEKTROFOTOMETER GENESYS 20

1. Buka plastik pelindung alat dan nyalakan mesin dengan menekan tombol ‘power’ di bagian  belakang mesin (tombol di sebelah kiri bawah) 2. Tunggu hingga 30 menit untuk memanaskan mesin sebelum dilakukan pengukuran sampel. 3. Tekan tombol A/T/C, pilih absorbance (A). 4. Bersihkan cuvet dengan aquades, tiriskan dengan tisu hingga bagian dalam cuvet tidak mengandung aquades lagi. 5. Ukur absorbansi blanko dengan memasukkan larutan blanko ke dalam cuvet (volume minimal hingga ¾ dari tinggi cuvet). Bersihkan bagian luar cuvet yang transparan dari debu dan bekas jari

tangan. 6. Masukkan cuvet ke dalam cell holder pada sample chamber. Cuvet harus diletakkan hingga sampai dasar cell. 7. Tutup sample chamber 8. Tekan tombol untuk mengatur blanko pada konsentrasi 0 9. Pilih panjang gelombang yang akan digunakan untuk mengukur sampel dengan menekan tombol 10. Bersikan cuvet seperti pada metode no. 4 11. Siapkan sampel yang akan diukur, pastikan sampel homogen sebelum memasukkan ke dalam cuvet. 12. Masukkan sampel ke dalam cuvet hingga volume minimal ¾ dari tinggi cuvet. Pastikan  bagian 13.

luar

cuvet

Masukkan

cuvet

besih ke

dari dalam

debu cell

dan holder,

bekas tutup

jari

tangan.

sample

chamber

14. Baca absorbance-nya 15.

Ambil

sampel

dari

cuvet,

bersihkan,

dan

ganti

dengan

sampel

baru.

16. Jika pengukuran semua sampel sudah selesai, matikan mesin, bersihkan cuvet dan tiriskan. Tutup kembali mesin dengan plastik.