MICROBIOLOGIA SANITARIA I
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LABORATORIO LABORATORIO N°1 : DISTRIBUCIÓN UNIVERSAL DE MICROORGANISMOS
INDICE
I.- OBJETIVOS... OBJETIVOS.............. ..................... ..................... ..................... ..................... ..................... ..................... ..................... ................................. ....................... 1 II.- FUNDAMENT FUNDAMENTO O TEÓRICO........ TEÓRICO................... ..................... ..................... ..................... ..................... ..................................... ..........................11 PREPARACIÓN PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVOS CULTIVOS UTILIZADOS .................................2 .................................2 MEDIOS DE CULTIVOS UTILIZADOS ...................... ................................ ..................... ..............................3 ...................3 TÉRMINOS DESCRIPTIVOS PARA LA MORFOLOGÍA DE COLONIAS EN LA SUPERFICIE DE UN MEDIO SÓLIDO ..............................................................4 ..............................................................4 CARACTERÍSTICAS ÓPTICAS ..................... ............................... ..................... ..................... ............................. ...................6 6 III.- MATERIALES..........................................................................................................7 IV.IV.- PROCEDIMIEN PROCEDIMIENTO... TO.............. ..................... ..................... ..................... ..................... ..................... .......................................... ................................ 8 V.- RESULTADOS........................................................................................................11 VI.- DISCUSIÓN Y OBSERVACIONES.......................................................................14 VII.- CONCLUSIONES CONCLUSIONES.......... ..................... ..................... ..................... ..................... ..................... ............................................ ................................. 15 VIII.- RECOMENDACI RECOMENDACIONES.. ONES............. ..................... ..................... ..................... ..................... ...........................................17 ................................17 IX.- CUESTIONARIO...................................................................................................17 X.- REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS...................................................................... XI.- ANEXOS..... ANEXOS................ ..................... ..................... ...................... ..................... ..................... ..................... .......................................... ................................ Anexo1: Materiales Materiales usados en en el laboratorio laboratorio ....................................................22 Anexo2: Muestras Muestras del cultivo en en el laboratorio laboratorio ..................................................23
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RESUMEN
INTRODUCCION
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DISTRIBUCIÓN UNIVERSAL DE MICROORGANISMOS III.- OBJETIVOS •
Aprender a utilizar los equipos y materiales en el laboratorio de microbiología, necesarios
•
para la preparación de medios de cultivo y conteo. robar la !ormación de microorganismos expuestos en la naturaleza, con requerimientos
•
especiales de cultivo, tales como el agar nutritivo, agar saboureud y caldo nutritivo. "xponer el agar nutritivo y caldo est#riles a di!erentes condiciones de contaminación en el
•
laboratorio y observar el desarrollo de microrganismos en dic$os medios de cultivo. %onocer los !actores que in!luyen en el crecimiento de microorganismos. &ealizar un recuento de bacterias $eterotró!icas mediante la unidad !ormadora de
•
colonias'(.).%* +egn las muestras, determinar el grado de contaminación y el tipo de contaminante en
•
los di!erentes sectores de la !acultad.
IV.- MARCO TEÓRICO CONDICIONES GENERALES PARA EL CULTIVO DE MICROORGANISMOS P!"#"$%&' () '*#"$%&'+ ," )/"$) 0 )!)# /'#"# -ran cantidad de bacterias pueden crecer en una atmós!era con tensión de oxígeno normal. Algunas pueden obtener el oxígeno directamente de variados sustratos. ero los microorganismos anaerobios estrictos sólo se desarrollarn adecuadamente en una atmós!era sin oxígeno ambiental. "n un punto intermedio, los microorganismos microaeró!ilos crecen me/or en condiciones atmos!#ricas parcialmente anaerobias 'tensión de oxígeno muy
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LABORATORIO N°1 : DISTRIBUCIÓN UNIVERSAL DE MICROORGANISMOS reducida*, mientras los anaerobios !acultativos tienen un metabolismo capaz de adaptarse a cualquiera de las citadas condiciones.
C)$,&%&)$"# ',"%*','# ," 2*3",', (n nivel mínimo de $umedad, tanto en el medio como en la atmós!era, es imprescindible para un buen desarrollo de las c#lulas vegetativas microbianas en los cultivos. 0ay que prever el mantenimiento de estas condiciones mínimas en las estu!as de cultivo a 345% proporcionando una !uente adecuada de agua que mantenga la $umedad necesaria para el crecimiento de los cultivos y evitar así que se deseque el medio
L* '3&"$'6 6a mayoría de los microorganismos crecen muc$o me/or en la oscuridad que en presencia de luz solar. 0ay excepciones evidentes como sería el caso de los microorganismos !otosint#ticos.
P 6a concentración de iones $idrógeno es muy importante para el crecimiento de los microorganismos. 6a mayoría de ellos se desarrollan me/or en medios con un p0 neutro, aunque los $ay que requieren medios ms o menos cidos. 7o se debe olvidar que la presencia de cidos o bases en cantidades que no impiden el crecimiento bacteriano pueden sin embargo in$ibirlo o incluso alterar sus procesos metabólicos normales.
T"3"!'*!' 6os microorganismos mesó!ilos crecen de !orma óptima a temperaturas entre 1 y 85%. 9tros como los psicró!ilos crecen a 5% y los termó!ilos a ;5% o incluso a temperaturas superiores '$ipertemó!ilos*. "n líneas generales, los patógenos $umanos crecen en rangos de temperatura muc$o ms cortos, alrededor de 45%, y los sapro!itos tienen rangos ms amplios.
E#"!&6&,', ,"6 3",&)
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LABORATORIO N°1 : DISTRIBUCIÓN UNIVERSAL DE MICROORGANISMOS PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVOS UTILIZADOS 1- ,)$&&6&,', ," $*!&"$"# ',"%*',)# (n medio de cultivo adecuado para la investigación microbiológica $a de cont ener, como mínimo, carbono, nitrógeno, azu!re, !ós!oro y sales inorgnicas. "n muc$os casos sern necesarias ciertas vitaminas y otras sustancias inductoras del crecimiento. +iempre $an de estar presentes las sustancias adecuadas para e/ercer de donantes o captadores de electrones para las reacciones químicas que tengan lugar.
%iertas bacterias tienen necesidades nutritivas especí!icas por lo que se a=ade a muc$os sustancias como suero, sangre, líquido ascítico, etc. >gualmente pueden ser necesarios ciertos carbo$idratos y sales minerales como las de calcio, magnesio, manganeso, sodio o potasio y sustancias promotoras del crecimiento, generalmente de naturaleza vitamínica. Muy a menudo se a=aden al medio de cultivo ciertos colorantes, bien como indicadores de ciertas actividades metabólicas o bien por sus capacidades de e/ercer de in$ibidores selectivos de ciertos microorganismos.
- %)$#"$%&' ',"%*',' ,"6 3",&) artiendo de un medio líquido podemos modi!icar su consistencia a=adiendo productos como albmina, gelatina o agar, con lo que obtendríamos medios en estado semisólido o sólido. 6os medios solidi!icados con gelatina tienen el gran inconveniente de que muc$os microorganismos no se desarrollan adecuadamente a temperaturas in!eriores al punto de !usión de este solidi!icante y de que otros tienen la capacidad de licuarla. Actualmente los medios sólidos son de uso universal, por su versatilidad y comodidad, pero $ay tambi#n gran cantidad de medios líquidos cuyo uso est ampliamente extendido en el laboratorio.
MEDIOS DE CULTIVOS UTILIZADOS: A/'! N*!&&9) "l agar 7utritivo garantiza el crecimiento de todos los microorganismos de importancia clínica tanto -ram positivos como gramnegativos, $ongos y levaduras, adems de proporcionar una $erramienta para el mantenimiento y con!irmación de aislamientos primarios "l agar 7utritivo
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LABORATORIO N°1 : DISTRIBUCIÓN UNIVERSAL DE MICROORGANISMOS se prepara a partir del medio de cultivo des$idratado, materia prima producida por la casa ??6 y tiene la siguiente composición: g@6 "xtracto de carne.................................... . g eptona........ ........................................... . g Agar........................................................ 1.
C'6,) N*!&&9) Medio de cultivo utilizado para propósitos generales, para el desarrollo de microorganismos con escasos requerimientos nutricionales. "st descripto en muc$os procedimientos para el anlisis de alimentos, aguas y otros materiales de importancia sanitaria. %ontiene pluripeptona 'una mezcla de partes iguales de peptona de carne y de caseína* y extracto de carne que constituyen la !uente de carbono y nitrógeno necesarias para el adecuado desarrollo bacteriano.
uede ser utilizado adems, como pre enriquecimiento en la bsqueda de +almonella spp. a partir de alimentos, ya que permite recuperar c#lulas da=adas, diluir metabolitos tóxicos y sustancias in$ibitorias. %omposición ' gr @litro* luripeptona........................................................................................................................ "xtracto de carne....................................................................................................... 0 !inal: .B C .2
A/'! S')*!'*, Medio utilizado para el aislamiento, identi!icación y conservación de $ongos patógenos y sapró!itos.
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LABORATORIO N°1 : DISTRIBUCIÓN UNIVERSAL DE MICROORGANISMOS %loran!enicol......................................................... ....................................................... Agar...............................................................................................................................1.. 0 !inal: . C
TÉRMINOS DESCRIPTIVOS PARA LA MORFOLOGÍA DE COLONIAS EN LA SUPERFICIE DE UN MEDIO SÓLIDO
CRECIMIENTO MICROBIANO "n microbiología, la palabra crecimiento se de!ine como un incremento en el nmero de c#lulas. "l crecimiento es un componente esencial de la !unción microbiana, ya que en la naturaleza cualquier c#lula tiene un periodo de vida !inito y la especie se mantiene como resultado del crecimiento continuo de la población.
FORMA:
F&/.- 1 +iluetas de microorganismos segn su !orma
MARGEN O BORDE:
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F&/.- +iluetas de
microorganismos segn el margen o borde
ELEVACIÓN DE LA COLONIA:
F&/.-; +iluetas de microorganismos segn la elevación
SUPERFICIE 6isa &ugosa legada
COLOR: S" usan t#rminos comunes para de!inirlo y se especi!ica si el pigmento producido di!usible o no.
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LABORATORIO N°1 : DISTRIBUCIÓN UNIVERSAL DE MICROORGANISMOS CARACTERÍSTICAS ÓPTICAS
LU< TRANSMITIDA 'observar a trav#s de la colonia* 9paca: no permite el paso de luz
LU< REFLEJADA 'observar la super!icie de la colonia* 9paca ?rillante
CULTIVO EN CALDO Al igual que en los medios sólidos, en los medios líquidos las características de la bacteria sembrada se re!le/an en las características que presenta el caldo inoculado como son:
F&/.-4 %recimiento en caldo nutritivo elícula: %recimiento casi continuo sobre el líquido +edimento: Depósito de c#lulas en el !ondo del tubo que se re suspende al agitar.
MATERIALES Materiales que se necesita:
!
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"sptula %anastilla -radilla
"quipos que se utiliza:
"nclave 0orno %ocinilla el#ctrica
Medios de cultivo:
Agar nutritivo '%oncentración: 2 g en 1 litro* +e utilizó 2.4 g de agar en 12 ml de agua. %aldo nutritivo '%oncentración: ; g en 1 litro* +e utilizó 1.; gr de caldo en 1 ml de agua. Agar saboraud '%oncentración: g en 1 litro* +e utilizó 8.;4 g de agar en 4 ml de agua.
PROCEDIMIENTO
PROCEDIMIENTO A: G%olonias de bacterias desarrolladas en placas en medio agar nutritivoH
1.- S" &"$"$ 4 *)# ' 45=C %)$ A/'! $*!&&9)# previamente preparados .)lamear en el mec$ero y verter el contenido en 8 placas etri de la siguiente manera:
2.3 6uego que el agar nutritivo $a solidi!icado, llevar a experimentación las placas exponi#ndolas al aire libre de di!erentes ambientes por 1 minutos.
1"
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LABORATORIO N°1 : DISTRIBUCIÓN UNIVERSAL DE MICROORGANISMOS PLACA 1 -&(9 1 AM?>"7<" 09&A
?a=o de mu/eres ')>A* : I :2 pm
-&(9 AM?>"7<" 09&A
?a=o de varones ')>A* : I :21 pm
PLACA N= : Dividir la placa de la siguiente manera
F&/.-5 laca de etri dividido en 8 sectores
PLACA N= ;: laca de etri est#ril no abrir.
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F&/.-> laca de etri est#ril 7J del -rupo 1
PLACA N= 4: laca de etri no est#ril, no abrir.
.3 Despu#s de realizar la recolección de muestras, invertir las placas y llevar a la incubadora a una temperatura de 4J por un periodo de 8; $oras'segn el manual del laboratorio*.Despu#s de este tiempo llevarlas a re!rigerar.
Observaci!: se de/aron en la incubadora las muestras por 8 días.
PROCEDIMIENTO C : ?C*6&9) ," 2)$/)# "$ 6'%'# %)$ '/'! #')!'*,@ 1.3 "n una placa etri verter el Agar +aboraud ya preparado y solidi!icado. "xponerlo a un ambiente determinado y esperar 1 minutos. 2.3"sperar 8; $oras para ver el resultado 'ideal*. +e visualizó 4 días despu#s.
V.- RESULTADOS &9%"D>M>"7<9 A:
G!*)
P6'%' N= 1 (E#!&6+
P6'%' N= (E#!&6+
P6'%' N P6'%' N 4 (N) E#!&6+ ; (E#!&6+
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Ambiente: laboratorio de microbiologia
N= ," C)6)$&'#
T'3')
M'!/"$ ) )!,"
E6"9'%&$
+ector D >nocula dor no est#ril
7o abrir
7o abrir
4
3
3
3
3
6isos 2 9ndulados
3
3
3
1 lano
lanas 1 %onvexa
3
3
3
1 ?lanco
4 ?lancos
3
3
3
3
3
+ector A elo 1
K1 L8mm '8* K2 L 1mm '1* K L 2mm '2*
K1 L 1cm '* K2 L 1mm '8* K L 2mm '1* K8 L mm '1* K1 L 8mm K L 8mm '1* K L Bmm '1*
2B 6isos 1 6iso 4 9ndulados 8 lana 2 %onvexa con boton
C!)3)/$ "# ) &/3"$'%& $
21 ?lanco %rema 1 Amarillo
C'!%"! &%)
1 9paco 2
G!*)
P6'%' N= 1 (E#!&6+
Ambiente: ?a=o varones')> A*
N= ," C)6)$&'# T'3')
+ector ? 0uella
+ector % >nocula dor "st#ril
24 K1 L 1mm '18* K2 L 2mm '* K L mm '* K8 L mm '1* K L 1mm
4 1
3
6iso
lanos
Amarillas
9pacos
P6'%' P6'%' N 4 N ; (N) E#!&6+ (E#!&6+
P6'%' N= (E#!&6+ +ector +ector ? A 0uella elo
K1 L 1mm
+ector % >noculador "st#ril
+ector D >noculador no est#ril
7o abrir
7o abrir
2
8
K1 L mm K2 L 8mm
K1 L 1mm '1* K2 L mm '1* K L mm '1* K8 L 1mm '1*
K1 L mm '2* K2 L ;mm '1*
K1 L 1mm '1* K2 L 1.mm '1* K L 2.mm '1*
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LABORATORIO N°1 : DISTRIBUCIÓN UNIVERSAL DE MICROORGANISMOS K8 L mm '1* K L 18mm '1*
'1* K L cm '1* K4 L ;cm '1*
M'!/"$ ) )!,"
2 6isos 1 rizoide 1 lobular
1 rizoide 1 6iso
1 6iso 2 rizoides 1 6obular
1 9ndulado 6isos
6isos 1 6obular
1 %onvexo 2 planas
2 lanos
8 lanos
lanas
lanos
C!)3)/$ "# ) 2 %remas &/3"$'% 8 Amarillos &$
1 ?lanco 1 ro/o
8 ?lancos
%remas
%remas
9pacos
1
E6"9'%&$
C'!%"! &%)
24 9pacos 2 9pacos
9pacos 1
8 9pacos
14
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LABORATORIO N°1 : DISTRIBUCIÓN UNIVERSAL DE MICROORGANISMOS G!*)
P6'%' N= 1 (E#!&6+
;
Ambiente: ?a=o varones')> A*
N= ," C)6)$&'#
2
T'3')
P6'%' P6'%' N 4 N ; (N) E#!&6+ (E#!&6+
P6'%' N= (E#!&6+ +ector +ector ? A 0uella elo
2
K1 L 1mm '4* K2 L .mm '1* K L .2mm '1* K8 L 1.mm '2* K L 2mm '* K L cm '1* K4 L .2cm '1* K L .cm '1*
+ector % >noculador "st#ril
+ector D >noculador no est#ril
7o abrir
7o abrir
1
2
1
K1 L 1mm
K1 L .mm '1* K2 L 1mm '1*
M'!/"$ ) )!,"
14 6isos 2 rizoides 1 9ndulado
1 6iso 19ndula do
1 9ndulado
E6"9'%&$
2 %onvexos 1; planas
2 lanos
1 lano
2 lanos
2 ?lanco
1 ?lanco
1 ?lanco 1 Amarillo
C!)3)/$ "# ) %remas &/3"$'% 14 ?lancos &$
2 6isos
K1 L 1mm '* K2 L 2mm '2* K L mm '1* K8 L 8mm '2* K L .mm '1* K L ;.mm '1*
1 rizoide B lanos
1 lanos
1 ?lancos 1 9pacos
C'!%"! &%)
2 9pacos
2 9pacos
1 9paco
2 9pacos
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G!*) 4
P6'%' N= 1 (E#!&6+ Ambiente: +ector +ector ? ?iblioteca')>A A 0uella * elo
N= ," C)6)$&' #
2
P6'%' P6'%' N 4 N ; (N) E#!&6+ (E#!&6+
P6'%' N= (E#!&6+
8
+ector % >noculador "st#ril
+ector D >noculador no est#ril
7o abrir
7o abrir
1
4
K1 L 1mm '* K2 L 2mm '11* K L .mm K1 L '1* 1mm K8 L mm '8* '2* K L 8mm '8* K2 L T'3') K L cm '1* 1.mm K4 L cm '2* '1* K; 1cm '2* K L KB L ;cm '1* mm '1* K1 L 1cm '1*
K1 L 2mm
K1 L 1mm '1* K2 L 1.mm '1* K L 2mm '* K8 L mm '1* K L 8mm '1*
K1 L 1mm '1* K2 L 2mm '2* K L mm '2* K8 L mm '1*
3 L#$%$ M'!/"$ ) )!,"
E6"9'%& $
C!)3)/ $"# ) &/3"$ '%&$ C'!%" ! &%)
14 6isos 8 1 rizoides 9ndula 12 9ndulado dos 1 6obular
2 planas
11 Amarillo 21 ?lancos
2 9pacos
-&(9 Ambiente 7J de 0ongos
Algunas características
6obular 2 6iso 2 9ndulado
1 6isa
2 O&'()*' %$ 1 L%+()*,
8 lanas
lanas 1 %onvexo botón
1 lana
8 ?lanca s
?lancas 1 Amarilla
1 ?lanca
8 %onvexo botón 2 lanas
2 *-*,#))* $ 4 B)*&*$ 4 O/**$
12
1
2
6ab. Microbiología
?a=o de Mu/eres
%">A
2 8 T,*$)(#' *$ 6ab. ?iblioteca )isicoquímica 14 K1 L Alternaria sp '* K1 L 6evaduras '18*
16 %olonias algonodosas de color verde oliva y ca!es
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LABORATORIO N°1 : DISTRIBUCIÓN UNIVERSAL DE MICROORGANISMOS &9%"D>M>"7<9 ?: %&"%>M>"7<9 D" ?A%<"&>A+ "7 %A6D9 7(<&><>E9 G!*) N=
T*) "#!&6 P&"' "#!&6
T*) $) "#!&6 P&"' "#!&6
C'$&,', ," C!"%&3&"$)
"scaso
escaso
D!&*%&$ ," %!"%&3&"$)
+edimento
sedimento
película
O6)!
aromtico
aromtico
>mperceptible
T*) "#!&6 P&"' "#!&6 escaso
T*) $) "#!&6 P&"' "#!&6 escaso
T*) "#!&6 P&"' $) "#!&6 abundante
+edimento anaerobia
sedimento
elícula aerobia
Aromtica
imperceptible
ptrido
G!*) N= 4 C'$&,', ," C!"%&3&"$) D!&*%&$ ," %!"%&3&"$) O6)!
T*) "#!&6 P&"' $) "#!&6 regular
&9%"D>M>"7<9 %: %(6<>E9+ D" 097-9+ "7 6A%A+ %97 A-A& +A?9(&A7D
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GRUPO 1
OBSERVACIONES "stuvo expuesto al ambiente por 1min.
GRUPO 4
OBSERVACIONES "stuvo expuesto al ambiente por 1min. CARACTERSTICAS
AMBIENTE ?a=o )>A 2@;@1 8:8; I : pm 1 alternaria '2* r$izopus '* aspergillus '1* penicillium '* AMBIENTE sacc$aroneces '2* ?iblioteca verde azulado verde amarillento 2@;@1 verde negrusco 8:8B I :8 pm negrusco marron 1 blanco
GRUPO
TIPO DE ONGOS OBSERVACIONES "stuvo expuesto al ambiente por 1min.
'8* asporangios AMBIENTE '1* alternarias 6aboratorio !isicoquímica '* penicilina '2* levadura 2@;@1 Eerde negruzco 8:8B I :8 pm Eerde amarillento 18 Eerde claro '11* aspergillus '* penicillium
CARACTERSTICAS
0,' *-*,#))&% textura algodonosa. verde azuladas gris verdosas, gris oliva AMBIENTE 6aboratorio de Microbiología AMBIENTE 2@;@1 %entro )>A :8 I : pm 2@;@1 B 8: I : pm '1* esporangiosporas 1 '1* aspergillus alternaria '* '2* alternaria '* penicillium rizopus '2* 0,' *-*,#))&% aspergillus '1* gris verdosas esporangiusporas '* verde azulado verde amarillento verde negrusco
GRUPO 5
OBSERVACIONES GRUPO ; "stuvo expuesto al ambiente por 1min. OBSERVACIONES
VI.- DISCUSIÓN PROCEDIMIENTO A : 3 "l nmero de colonias en el grupo 1 'ba=o de mu/eres )>A* es menor al nmero de colonias en el grupo 'ba=o de varones )>A* para la placa etri 7J1, se observan las di!erentes características de los ambientes como ventilación, $umedad, partículas, nmero de personas presentes ,etc.
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LABORATORIO N°1 : DISTRIBUCIÓN UNIVERSAL DE MICROORGANISMOS 3 ara las placa 7J 2 del grupo 1 sector D inoculador no est#ril, no se observó ninguna colonia a comparación del grupo 7J a pesar de la exposición del inoculador en un medio
contaminado. 3 6a !alta de colonias en la placa 7J para el grupo 1 se debe a que el inoculador expuesto sobre el cultivo $a sido anticipadamente esterilizado.
6a placa 7J para el grupo no debería presentar colonias, por que el inoculador $a sido anticipadamente esterilizadoN sin embargo, podemos notar la presencia de una colonia por lo que podemos pensar que !ue contaminado casualmente.
PROCEDIMIENTO B : 3
PROCEDIMIENTO C : 3 +e observaron en todas las placas el crecimiento de $ongos y levaduras. 3 "n la placa del grupo 8 ,donde tal muestra !ue tomada en la biblioteca')>A*,se encontraron $ongos y levaduras .0ec$o que demuestra una !alta de ventilación e $igiene dentro de la biblioteca de la !acultad. osteriormente se pasó a la identi!icación. 3 "l ambiente ms contaminado de $ongos !ue observado a trav#s de la placa del grupo 1, donde la muestra !ue tomada en el ba=o de caballeros de la )>A.
VII.- CONCLUSIONES PROCEDIMIENTO A: 6as condiciones del medio in!luyen en el crecimiento de diversos tipos de
microorganismos, es importante preservar la $igiene del ambiente. "l conocimiento sobre el tipo de cultivo ayuda a la identi!icación de microorganismos, lo
cual para cada tipo se requieren nutrientes especí!icos. 6a buena utilización de los elementos y equipos de laboratorio permiten la e!ectividad
en la prctica de laboratorio y en la identi!icación de microorganismos. "s evidente segn los resultados de laboratorio el grado de contaminación al que estamos expuestos en la )>A debido al nmero de bacterias encontradas en las muestras.
1!
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+e observó que predominan los microorganismos de elevación convexo y de carcter ópticos opaco.
PROCEDIMIENTO B:
"s posible identi!icar microorganismos mediante diversos medios de cultivo. ara este caso se utilizó el caldo nutritivo.
6os microorganismos estn su/etos al estado est#ril o no est#ril y como bien se puede observar en este experimento no $ay muc$o desarrollo. 6os cultivos aromticos !ueron los que prevalecieron.
9bservamos que este experimento depende de la esterilización de los materiales a usar en cada caso.
PROCEDIMIENTO C:
6os microorganismos como los $ongos se desarrollan en ambientes $medos, por lo cual cada ambiente de la !acultad presenta esta característica por lo cual se $an podido desarrollar.
ara cada ambiente de la !acultad existe una di!erencia entre el nmero de $ongos y su clasi!icación, depende muc$o del medio. or e/emplo, el ambiente ms contaminado en este procedimiento es el ?a=o de %aballeros )>A, donde se puede apreciar $ongos y levaduras en mayor cantidad.
"s importante la identi!icación de los $ongos despu#s de realizado el experimento, ya que previene, advierte y controla acerca del cuidado e $igiene en los diversos sectores de la )>A.
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LABORATORIO N°1 : DISTRIBUCIÓN UNIVERSAL DE MICROORGANISMOS VIII.- RECOMENDACIONES "n todos los experimentos se debe tomar muy en cuenta la seguridad del
•
procedimiento y el correcto uso de los materiales de laboratorio. 7o agitar los tubos de ensayo al momento de observar los resultados, pues ya no se distingue adecuadamente la distribución del crecimiento 'anillo o sedimento*. rocurar tener selladas las placas etri, para evitar el ingreso de microorganismos. 0acer un control riguroso de los tiempos requeridos en los experimentos para evitar complicaciones posteriores. &ealizar bien la medición del peso de los medios de cultivo, así como del volumen de agua destilada, para llevar a cabo los experimentos de manera exitosa. 7o contaminar los materiales ya esterilizados como las pipetas, placas, tubos de
•
ensayo, etc. Al momento de $acer el trasvase del agar nutritivo $acia los recipientes de prueba
•
demorar el menor tiempo posible, ya que si la temperatura de esta ba/a de 8J% tiende a solidi!icarse. +e debe asegurar la correcta ubicación de las placas etri en el ambiente a tomar
•
las muestras, a !in de obtener resultados óptimos en condiciones identi!icadas previamente. +e debe tomar en cuenta la vida media de los microorganismos, los cuales viven
•
aproximadamente 8; $oras luego de ser cultivados, pasado ese tiempo, su identi!icación y su estudio no daría resultados óptimos.
IX.- FUENTES DE INFORMACION X.- ANEXOS XI.- CUESTIONARIO 1. H* '%)!"# &$6*0"$ "$ 6' 3&%!)&)6)/&' ,"6 '&!"K 6a atmós!era no tiene una microbiota autóctona, pero es un medio para la dispersión rpida y global de muc$os tipos de microorganismos. Adems $ay una importante trans!erencia de ellos y de sus metabolitos gaseosos entre la atmós!era, la $idros!era y la litos!era. Aunque la atmós!era es un ambiente $ostil para los microorganismos, en la tropos!era in!erior se encuentran un gran nmero de ellos. •
6as nubes poseen agua, intensidad de luz y concentración de %92 su!iciente para permitir el crecimiento de los microorganismos !otoautótro!os.
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"n zonas industriales, puede $aber, incluso, la su!iciente concentración de sustancias orgnicas en la atmós!era que permita el crecimiento de algunos microorganismos $eterótro!os.
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6os microorganismos pueden ser transportados rpidamente, en !orma de bioaerosoles, a trav#s de grandes distancias con el movimiento del aire que representa el me/or camino de dispersión. Algunos $an creado adaptaciones especializadas que !avorecen su supervivencia y su dispersión en la atmós!era.
. HC*6"# #)$ 6'# %'!'%"!#&%'# !&$%&'6"# ," '#"!/&66*# !2&)&*3 "$&%&66&*3 0 #'%2'!)30%" %"!"9'"K As"er#i$$%s 2 especies de distribución cosmopolita, conocidos como mo$os negros. %apaces de utilizar una gran variedad de sustratos a causa de la gran cantidad de • •
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enzimas que producen. ueden producir micotoxinas, a!latoxinas, la ms potente es la a!latoxina carcinógena ?1. ueden producir en!ermedades en seres $umanos, aspergilosis, Aspergillus fumigatus. Aplicación industrial: obtención de cido cítrico y glucónico ' A. niger *. "structuras somticas: micelio de $i!as desarrolladas septadas, $ialinas, con c#lulas plurinucleadas.
R&i'(bi%) 6as bacterias Rhizobium son organismos de vida libre que $abitan en la rizos!era y se alimenta de los restos de organismos muertos. "stas contienen un plsmido que codi!ica in!ormación que es vital para la in!ección y la nodulación de la planta $ospedadora correspondiente. +on bacilos móviles, -ram3negativos, con dos capas de pared celular 'la primera capa est $ec$a por carbo$idratos y proteínas, y la segunda capa por lípidos y carbo$idratos*, procariotas, aerobios 'necesita oxígeno para crecer*, móviles 'al $acerse el test de motilidad, el agar se vuelve amarillo y no de su color original Imorado3*, beta 'digiere la $emoglobina*, crece casi en cualquier temperatura, pero su desarrollo es ms óptimo a una temperatura de 2 J% '44 J)*, sus dimensiones son de .3.B x 1.23. Om, y cuenta con !lagelos.
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LABORATORIO N°1 : DISTRIBUCIÓN UNIVERSAL DE MICROORGANISMOS Pe!ici$$i%) •
D"#%!&%&$ 3&%)6/&%'.3 0ongo !ilamentoso que presenta conidió!oros tabicados de pared lisa '23 Om*, rami!icado al !inal, con m#tulas 'de ;312 Om* y !ilides en !orma de botella 'de 4312 Om*, donde nacen conidios lisos, elipsoidales 'de 2,38 Om* azules o verde3azulados en cadenas, sin rami!icar, con un penac$o o pincel característico. %olonias de crecimiento rpido, vellosas, aterciopeladas, verdosas con una corona radial anc$a y blanca, a 2 %5 'no crecen o crecen pobremente a 4 %5*. uede $aber gotas de exudado sobre la super!icie de la colonia. &everso $abitualmente amarillento o cremoso. "sporulación abundante. 9lor aromtico,
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especiado o a!rutado 'a manzana o a pi=a*. '&'.3 "l enicillium es un g#nero grande y encontrado casi por todas partes, y siendo comnmente el g#nero de $ongos ms abundante en suelos. 6a !cil proli!eración de los enicillium en los alimentos es un problema. Algunas especies producen toxinas y pueden $acer el alimento no comestible o an peligroso. "l micelio del $ongo, con/unto de !ilamentos tubulares llamados $i!as, crece en la super!icie de !rutas, pan, quesos y otros alimentos. "s una buena prctica desec$ar los alimentos que demuestran el desarrollo de cualquier mo$o. +e encuentra con !recuencia en los edi!icios $medos y mo$osos donde deteriora di!erentes materiales de construcción, entre los que resaltan el papel de decoración 'crece bien en la cola empleada para su ad$esión a las paredes*. 7o muestra una notable variación estacional. 6as mximas concentraciones de conidios en el aire se alcanzan en invierno y primavera 'mayores en las reas urbanas que en las rurales*. +u temperatura óptima de crecimiento es de 2 %5, pero crece entre y 4 %5. "s alimento de caros como Acarus siro y
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R"!),*%%&$.3 6a reproducción asexual se produce en enicillium mediante unas c#lulas, los conidios, que se !orman en el extremo de $i!as especializadas, losconidió!oros. Rstos son rami!icados y en !orma de abanico. 6os órganos sexuales son gametangios arrollados en $#lice.
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LABORATORIO N°1 : DISTRIBUCIÓN UNIVERSAL DE MICROORGANISMOS Sacc&ar()*ces cerevisiae 6a levadura de cerveza es un $ongo unicelular, un tipo de levadura utilizado industrialmente en la !abricación de pan, cerveza y vino %aracterísticas: S Mor!ología elíptica u ovoide SAlta capacidad !ermentativa. S)ormadora de esporas 'ascosporas con 8 esporas* S7o asimila nitratos ni escinde arbutina. S%recimiento en presencia de etanol. S)ermenta y asimila glucosa, galactosa, maltosa, sacarosa y ra!inosa. S7o !ermenta ni asimila lactosa.
;. H* &$/!",&"$"# %)$&"$" "6 %'6,) $*!&&9) A/'! #')*!'*, 0 A/'! $*!&&9)K A/'! N*!&&9) A principios de 1B la A0A 'American ublic 0ealt$ Association* sugirió esta !ormulación como un medio de cultivo estndar para el anlisis de agua. "l Agar 7utritivo se encuentra descrito en los M#todos "stndar de la A0A y de la A9A% 'Association o! 9!icial Analytical %$emists* para el anlisis de agua, lec$e y sus derivados, alimentos y otros materiales. "l Agar 7utritivo sigue siendo un medio ampliamente utilizado para el cultivo de microorganismos no !astidiosos. "n este medio el extracto de carne y la peptona aportan la !uente de nitrógeno, vitaminas y carbono. "l agar es adicionado como agente solidi!icante.
A/'! N*!&&9) "xtracto de carne eptona Agar Agua
C'$&,', g g 1g 1ml
C'6,) N*!&&9) Medio de cultivo utilizado para propósitos generales, para el desarrollo de microorganismos con escasos requerimientos nutricionales. +u uso est descripto en muc$os procedimientos para el anlisis de alimentos, aguas y otros materiales de importancia
sanitaria.
C'6,) N*!&&9)
C'$&,',
"xtracto de carne
g
eptona
g
Agua
1ml
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A/'! S')*!'*, "s un medio para el cultivo de $ongos y levaduras. "l Agar +abouraud es una mod i!icación del Agar de Dextrosa. "ste medio es usado para el cultivo de $ongo patógenos, particularmente de aquellos asociados con in!ecciones de la piel. 6a alta concentración de dextrosa y $a aci+e'
+e$ ", $acen a #ste un medio selectivo para $ongos. %on la adición de ciclo$eximida, estreptomicina y penicilina, se obtiene un excelente medio para el aislamiento primario de dermato!itos.
A/'! S')*!'*,
C'$&,',
luripeptona
1g@l
%loran!enicol -lucosa
.g@l 8g@l
Agar
1g@l
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LABORATORIO N°1 : DISTRIBUCIÓN UNIVERSAL DE MICROORGANISMOS X.- REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 3 Mic$ael Madigan, To$n MartinUo, TacU arUer, ?iología de los microorganismos, Madrid, "ditorial earson ,28. 3Mic$ael T.elczar, "lementos de Microbiología, M#xico, "ditorial Mc3-raV 0ill, 1B;8.
ginas Vebs: MW %oncepción %asado -onzlez, Medios de cultivo en un laboratorio de Microbiología. P%onsulta: 14 de setiembre del 21Q Disponible en: $ttps:@@libroslaboratorio.!iles.Vordpress.com@212@B@medios3de3cultivo3en3un3 laboratorio3de3microbiologcada.pd! Dr. Eíctor +ilva, >denti!icación de 0ongos, )acultad de Medicina. P%onsulta: 14 de setiembre del 21Q Disponible en: $ttp:@@VVV.soc$in!.cl@documentos@presentacionesXmicrobiologiaXcliX211@1XdrX+ilva .pd!
XI.- ANEXOS Anexo1: Materiales usados en el laboratorio
F&/.- ipeta est#ril y no est#ril
F&/.-1 >noculadores
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F&/.-11
Anexo2: Muestras del cultivo en el laboratorio
F&/.-1 %ultivo de A+ del -rupo 8
F&/.-1; %ultivo de %7 del -rupo 1
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F&/.-14 %ultivo de A+ del -rupo 1
F&/.-15 %ultivo de A+ del -rupo 2
F&/.-1> Muestras de los grupos
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