IDENTIFIKASI METABOLIT SEKUNDER IDENTIFIKASI METABOLIT METABOLIT SEKUNDER I. TUJUAN
a. Memahami prinsip kerja identifkasi meta!"it sek#nder. . Unt#k men$etah#i kand#n$an meta!"it sek#nder da"am sen%a&a ahan sampe" a"am. II. TEORI
Sen%a&a meta!"it sek#nder mer#pakan sen%a&a kimia %an$ #m#mn%a memp#n%ai ke kemamp#an mamp#an i!aktiftas dan er'#n$si sea$ai pe"ind#n$ t#m#han terse#t dari $an$$#an hama pen%akit #nt#k t#m#han it# sendiri ata# "in$k#n$ann%a. Se(ara #m#m kand#n$an kand#n$an meta!"it sek#nder da"am ahan a"am ha%ati dike"!mp!kkan erdasarkan si'at dan reaksi khas s#at# meta!"it sek#nder den$an pereaksi tertent#. Atas dasar ini) kand#n$an meta!"it sek#nder dapat dike"!mp!kkan sea$ai erik#t *.
A"ka"!id
Mer#pakan s#at# $!"!n$an sen%a&a !r$anik %an$ teran%ak ditem#kan di a"am. +ampir se"#r#h sen%a&a a"ka"!ida erasa" dari t#m#h,t#m#han dan tersear
"#as da"am era$ai jenis t#m#han. Sem#a a"ka"!ida men$and#n$ pa"in$ sedikit sat# at!m nitr!$en %an$ iasan%a ersi'at asa dan da"am sea$ian esar at!m nitr!$en ini a$ian dari (in(in heter!sik"ik. +ampir sem#a a"ka"!id %an$ ditem#kan dia"am memp#n%ai keakti'an i!"!$is tertent#) ada %an$ san$at era(#n tetapi ada p#"a %an$ san$at er$#na da"am pen$!atan. A"ka"!id dapat ditem#kan da"am era$ai a$ian t#m#han seperti iji) da#n) rantin$ dan k#"it atan$. Si'at fsika dan kimia a"ka"!id a. Ber#pa krista") am!r') dan ada %an$ (air nik!tina dan sparteina/ .
Tidak er&arna
(.
0ika ersi'at asa) "ar#t da"am pe"ar#t !r$anik
d. 1aram a"ka"!ida "ar#t da"am air) tidak "ar#t da"am pe"ar#t !r$ani( A"ka"!id iasan%a dik"asifkasikan men#r#t si'at seperti a.
A"ka"!ida a"ka"!id sejati/
A"ka"!ida men$and#n$ nitr!$en da"am (in(in heter!sik"ik) erasa" dari asam amina.iasan%a terdapat da"am t#m#han sea$ai asam !r$anik. .
2r!t! a"ka"!ida
2r!t! a"ka"!ida erasa" dari asam amin!) tetapi nitr!$enn%a tidak ter"etak pada (in(in heter!sik"ik. (.
Asenda a"ka"!ida
Asenda a"ka"!ida tidak di'!t!sintesis dari asam amin!) 3 ma(am asenda a"ka"!ida %an$ terpentin$ ada"ah a"ka"!ida ster!ida) misa"n%a k!nssina dan a"ka"!id p#rina) misa"n%a k!4eina. 3.
Triterpen!id 5 Ster!id
Triterpen!id mer#pakan sen%a&a %an$ keran$ka kar!nn%a erasa" dari enam sat#an is!prene dan se(ara i!sinesis dir#m#skan dari hidr!kar!n %an$ kean%akan er#pa a"k!h!") a"dehid) dan asam kar!hidrat. Sen%a&a ini tidak er&arna) erent#k krista") ertitik "e"eh tin$$i dan ersi'at !ptis akti'. Ster!id ada"ah $!"!n$an sen%a&a triterpen!id %an$ men$and#n$ inti sik"!pentana perhidr!'enantren %ait# dari ti$a (in(in sik"!heksana dan se#ah (in(in sik"!pentana. 6.
F"a7!n!id
Mer#pakan sen%a&a meta!"it sek#nder %an$ an%ak terdapat pada t#m#h,t#m#han. Se"ain it#) mer#pakan sen%a&a 'eni" pr!pan!id den$an keran$ka kar!n 89,86, 89. Artin%a keran$ka kar!nn%a terdiri dari d#a $#$#s 89 disam#n$ den$an rantai a"i'atik ti$a kar!n. Sea$ian esar sen%a&a :a7!n!id ditem#kan di a"am da"am ent#k $"ik!sida) dimana #nit :a7!n!id terikat pada s#at# $#"a. ;.
Fen!"ik
Mer#pakan ke"!mp!k sen%a&a ar!matik den$an $#$#s '#n$si hidr!ksi". Sisi dan j#m"ah $r#p hidr!ksi" pada $r#p 'en!" did#$a memi"iki h##n$an den$an t!ksisitas re"ati' mereka terhadap mikr!!r$anisme den$an #kti ah&a hidr!ksitasi %an$ menin$kat men%eakan t!ksisitas %an$ menin$kat. <.
Sap!nin
Mer#pakan ke"!mp!k sen%a&a da"am ent#k $"ik!sida terpen!id 5 ster!id. Sap!nin ada pada se"#r#h tanaman den$an k!nsentrasi tin$$i pada a$ian,a$ian tertent#) dan dipen$ar#hi !"eh 7arietas tanaman dan tahap pert#m#han. Dikena" d#a jenis sap!nin %ait# $"ik!sida triterpen!id a"k!h!" dan $"ik!sida str#kt#r ster!id tertent# %an$ memp#n%ai rantai sampin$ spir!keta". Ked#a jenis sap!nin ini "ar#t da"am air dan etan!" tetapi tidak "ar#t da"am eter. Sap!nin triterpen!id dapat memp#n%ai asam !"ean!"at sea$ai a$"ik!nn%a dan asam ini ditem#kan j#$a eas) meskip#n demikian da"am eerapa kas#s) a$"ik!nn%a han%a dikena" sea$ai sap!$enin. 9.
K#marin
Mer#pakan ke"!mp!k sen%a&a 'en!" %an$ #m#mn%a erasa" dari t#m#han tin$$i dan jaran$ ditem#kan pada mikr!!r$anisme) k#marin ini memp#n%ai keran$ka 89,86. Sen%a&a k#marin dia$i empat ke"!mp!k -
= K#marin sederhana dan t#r#nann%a %an$ er#pa hasi" hidr!ksidasi a"k!ksida) $"ik!sida. 8!nt!hn%a s#er!sin. = F#ran! k#marin jenis "inear dan an$#"er) dimana terdapat s#tit#si pada p!sisi en>!id. 8!nt!hn%a an$e"i(in. = 2%ran!k#marin ana"!$ den$an '#ran! k#marin tapi memi"iki (in(in en>im pada s#tit#enn%a. 8!nt!hn%a ?ant%"etin. = K#marin %an$ ters#tit#si pada (in(in p#rin. Seperti ;,hidr!ksi k#marin. @.
at &arna k#in!n
Mer#pakan s#at# heter!sike" (in(in terpad# %an$ str#kt#rn%a er#ah den$an na'ta"ena) tetapi den$an nitr!$en pada p!sisi is!kaindina ada"ah is!mer 3,n%a. .
Kar!ten!id
Sen%a&a t#r#nan dari is!prena %an$ erantai panjan$. Kar!ten!id ada"ah $!"!n$an sen%a&a kimia !r$anik ern#trisi %an$ terdapat pada pi$men a"ami t#m#han dan he&an. Berdasarkan str#kt#r kimian%a) kar!ten!id mas#k keda"am $!"!n$an ttiterpen!id. Kar!ten!id mer#pakan >at %an$ men%eakan &arna merah) k#nin$) !ran$e) dan hija# pada #ah dan sa%#ran. 2eran pentin$ kar!ten!id ada"ah sea$ai a$en anti!ksidan dan da"am sistem '!t!sintesis. Se"ain it# kar!ten!id j#$a dapat di#ah menjadi 7itamin esensia".
III. PROSEDUR PERCOBAAN 3.1
Alat dan Bahan
A.
A"at
*.
Test t#e
3.
2ipet tetes
- Unt#k men$ami" >at
6.
2"at tetes
- Unt#k mereaksikan >at
;.
Lamp# sprit#s
- Unt#k memanaskan
<.
L#mpan$
- Unt#k men$$er#s sampe"
9. Lamp# UC p"at KLT @.
2"at KLT
B.
Bahan
*.
Sampe" ahan a"am
3. 8+8"6 triterpen!id 6. Rea$en Dra$en!r' a"ka"!id ;.
8+6O+ metan!"/
<.
Fe8"6
9. Anhidrida asetat triterpen!id
- Tempat mereaksikan >at
- Unt#k me"ihat n!da pada - Unt#k #ji k#marin
- Sea$ai !jek per(!aan - Unt#k identifkasi - Unt#k #ji &arna $!"!n$an - Sea$ai pe"ar#t - Unt#k identifkasi 'en!"ik - Unt#k identifkasi
@.
Rea$en me%er
- Unt#k identifkasi a"ka"!id
. +8" pekat dan sap!nin
- Unt#k identifkasi :a7!n!id
.
- Unt#k identifkasi :a7!n!id
Ser#k M$
*. +3SO; 3 N
- Unt#k sampe" a"ka"!id
**. +3SO; pekat triterpen!id
- Unt#k identifkasi
*3. K"!r!'!rm
- Unt#k identifkasi triterpen!id
IV. HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1 Ha!l
Sampe" - da#n se$ar er&arna hija# m#da %ait# da#n s#k#n Identifkasi ,
F"a7!n!id
Ekstrak sampe" +8" pekat - &arna k#nin$ "em!n M$ - tim#" $as) &arna jadi !ran$e teran$
ser#k
2!siti' :a7!n!id ,
Fen!"ik
Sampe" #ji Fe8"6 - &arna (!k"at tak ada per#ahan &arna/
Tidak ada indikasi adan%a 'en!"ik ,
Sap!nin Sampe" #ji dik!(!k - tidak terjadi sap!nifkasi Tidak ada indikasi adan%a sap!nin
,
Triterpen!id5ster!id Sampe" - hija# pekat Sampe" +3SO; pekat - hija# teran$ 2!siti' ster!id
Sampe" +3SO; pekat anhidrida asam asetat hija# er#pa $#mpa"an
ke(i". 2!siti' triterpen!id
,
A"ka"!id
Sampe" #ji rea$en me%er - tak dij#mpai endapan ne$ati'/ ,
K#marin
+asi" ekstrak %an$ dit!t!"kan pada p"at KLT ) pada pen$#jian den$an UC terdapat $aris &arna merah. 2!siti' ada k#marin Tae"
NO.
Meta!"it Sek#nder
+asi"
*.
F"a7!n!id
3.
Fen!"ik
,
6.
Sap!nin
,
;.
Triterpen!id
<.
Ster!id
9.
A"ka"!id
G
@
K#marin
4." P#$%ahaan
Uji identifkasi %an$ te"ah di"ak#kan di#ji terhadap sampe" se$ar da#n s#k#n. Unt#k dapat men$#ji adan%a kand#n$an meta!"it sek#ndern%a) per"# pertama,tama #nt#k men$is!"asi5 men$ekstrak kand#n$an meta!"it terse#t. 2ada pen$erjaann%a di"ak#kan den$an men$$#nakan metan!") dimana metan!" ini dapat me"ar#tkan se(ara #m#m kand#n$an meta!"it sek#nder den$an era$ai kep!"arann%a. 2ada preparasin%a ekstrak terse#t di'raksinasi "a$i ke ke"!mp!k p!"ar den$an pe"ar#t air dan ke"!mp!k n!n p!"ar #nt#k meta!"it %an$ ter"ar#t pada 'raksi k"!r!'!rm. Sete"ah it# ar# di"ak#kan #ji identifkasi dari masin$,masin$ 'raksi. 2ada 'raksi air dapat di#ji identifkasi meta!"it sek#nder %an$ ersi'at p!"ar %ait#
:a7!n!id) 'en!"ik dan sap!nin. Sementara pada 'raksi k"!r!'!rm dapat di#ji identifkasi #nt#k triterpen!id dan ster!id. Identifkasi di"ak#kan den$an pereaksi identifkasi %an$ dapat ereaksi spesifk #nt#k masin$,masin$ ke"!mp!k meta!"it sek#nder dan den$an reaksi %an$ dapat diamati den$an je"as. Unt#k #ji identifkasi k#marin di"ak#kan den$an KLT. 2ada pr!ses #ji ini k!mp!nen, k!mp!nen %an$ ada pada ekstrak metan!" dari sampe" dipisahkan se(ara kr!mat!$raf) termas#k k#marin jika ada sampe" meman$ men$and#n$ k#marin/. 0ika sampe" #ji men$and#n$ k#marin) k#marin akan terpisah dari k!mp!nen "ainn%a se(ara kr!mat!$raf er#pa er(ak n!da. Keeradaan k#marin akan dapat diamati i"a pada p"at KLT) dimana p"at den$an penamahan NaO+ dan deteksi men$$#nakan UC. K#marin %an$ ereaksi den$an NaO+ akan ter"epas $#$#s "akt!nn%a dan den$an erikatan den$an "!$am Na) sehin$$a terent#k sen%a&a %an$ akan er:#!r!sensi merah,!ran$e i"a diamati den$an "amp# UC %an$ penampakan n!da ini spesifk #nt#k keeradaan k#marin pada sampe" #ji. Unt#k #ji k#marin ini e"#m diketah#i pereaksi kimia #nt#k #ji identifkasin%a. Nam#n dapat di#ji den$an pen$amatan :#!r!sensin%a den$an "amp# UC 69< nm. Ata# dapat j#$a di#ji den$an KLT den$an adan%a standar m#rni k#marin. 0ika sampe" dan k#marin standar die"#si pada p"at KLT %an$ sama maka n!da dari sampe" den$an har$a R' %an$ sama den$an standar k#marin akan
memerikan identifkasin%a. Nam#n #nt#k (ara ini di#t#hkan standar m#rni dari k#marin terse#t.
V. KESIMPULAN DAN SARAN &.1 K#!$'(lan
2ada per(!aan meta!"it sek#nder) dapat disimp#"kan ah&a pada sampe" da#n s#k#n terdapat sen%a&a meta!"it sek#nder sea$ai erik#t a.
F"a7!n!id
.
Triterpen!id dan ster!id
(.
K#marin
2ada sampe" tidak terdapat sen%a&a meta!"it sek#nder 'en!"ik) a"ka"!id dan sap!nin. &.1
Sa)an
Unt#k hasi" se"anj#tn%a didapatkan maksim#m) disarankan kepada pratikan se"anj#tn%a a$ar a. Da"am pen$$er#san sampe" enar,enar har#s ha"#s a$ar didapat hasi" %an$ diin$inkan. . 2ratikan har#s te"iti da"am me"ihat per#ahan &arna %an$ terjadi. (. Berhati,hati saat meneteskan k"!r!'!rm dan >at,>at eraha%a "ainn%a.
T(*a S#%#l($ P)at!+($
*. Apa %an$ dimaks#d den$an sen%a&a meta!"it sek#nder eserta (!nt!h dan $amarkan str#kt#rn%a H 0a&a - Sen%a&a meta!"it sek#nder ada"ah >at,>at ata# sen%a&a %an$ dihasi"kan dari t#m#han ata# makh"#k hid#p dimana '#n$sin%a e"#m dapat diketah#i se(ara pasti. 8!nt!h sen%a&a meta!"it sek#nder a.
A"ka"!id -
.
Triterpen!id
(.
Ster!id
3. Apa peredaan meta!"it sek#nder dan meta!"it primer 0a&a Meta!"it primer ada"ah sen%a&a hasi" meta!"isme %an$ har#s ada pada makh"#k hid#p. Meta!"it sek#nder ada"ah sen%a&a hasi" meta!"isme %an$ tidak se"a"# ada pada makh"#k hid#p) iasan%a dihasi"kan pada t#m#han.
6. T#"iskan pen$amatan identifkasi meta!"it sek#nder se(ara te!ri H
2en$amatan identifkasi meta!"it sek#nder a.
F"a7!n!id
.
Fen!"ik
- !ran$e - ir#
(. Sap!nin pekat
- dik!(!k #sa tidak hi"an$ +8"
d.
Triterpen!id - merah
e.
Ster!id
'.
K#marin
- hija# - er:#!r!sensi
$. A"ka"!id ka#t
- ditamah pereaksi me%er tim#"
DAFTAR PUSTAKA
Djama")R#sdi . *. K!$!a Bahan Ala$. Uni7ersitas Anda"as - 2adan$. http -55&&&.(hem,is,tr%.!r$.meta!"it,sek#nder. http -55e"fra&!r!titjan.&!rdpress.(!m
