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Cromatografía en Capa Fina
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separacion de aminoacidos por cromatografia en capa fina
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Separación e Identificación de Aminoácidos de Jugo de Frutos Por Cromatografía Bidimensional en Capa FinaDescripción completa
Instituto Politécnico Nacional Escuela Nacional de Ciencias Biológicas Químico Farmacéutico Industrial Laboratorio de Bioquímica General 3FV1, Sección 2 Hidrolisis de RNA y DNA e identificación de bases púricas y pirimídicas por cromatografía en capa fina.
Objetivo: Separar las base nitrogenadas del DNA y el RNA por cromatografía en capa fina a partir de hidrolizados de los mismos, identificándolas por la propiedad que tienen de absorber luz ultravioleta. Esquema del cromatograma obtenido.
Resultados. Base Nitrogenada
Rf
Citosina
0.5172
Guanina
0.5862
Adenina
0.6206
Uracilo
0.6896
Timina
0.7758
DNA
0.6034
RNA
0.6034
Longitud de Onda (λ)
Absorbancia 1.931 1.672
260 nm Máx. valor para ácidos nucleicos
1.782 1.141 1.120 1.439 1.183
280 nm Máx. valor para proteínas
1.250 0.768 0.751
Discusión. Los dos tipos de ácidos nucleicos los cuales son acido desoxirribonucleico (DNA) y ácido ribonucleico (RNA), presentan diferencias entre si una de ellas es en una de la bases nitrogenadas. Las cuales son la adenina (A) y la guanina (G) son púricas, y la timina (T), la citosina (C) y el uracilo (U) son pirimidínicas. Las bases A, T, G y C se encuentran en el ADN, mientras que en el ARN el uracilo toma el lugar de la timina. Esto se ve reflejado en la cromatografía en capa fina ya que se tomaron muestras de cada una de las bases nitrogenadas y de DNA y RNA y como se puede observar en el revelado del cromatograma las muestras corren correspondientes a sus bases nitrogenadas. Conclusiones. Las bases nitrogenadas de los ácidos nucleicos absorben luz ultravioleta en la región 260 – 280 nm. Bibliografía.
Eric. E. y P.K. Stumpf “Bioquímica Fundamental” Edit. Limusa, S.A., 3° edición, pp. 39, 40, 64. Plummer, D.T. “Introducción a la Bioquímica Practica” Edit. Mc Graw Hill Latinoamericana, S.A. pp. 166-167 (1981).