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Extraction et analyse par chromatographie en phase gazeuse de l’huile essentielle de la Menthe pouliot Test antifongique L.Belghazi 1, N.Lahlou1, M.Alaoui Ismaili4, T.Aboussaouira2, N.Habti 3, A.Tantaoui Iraki5 , M. Talbi1, M.Blaghen6, K.Fellat -Zarrouck 1 . (1) Laboratoire Laboratoire de Chimie-Biochimie, Faculté de Médecine et de Pharmacie, Casablanca- Maroc. (2) Laboratoire d'Histologie, Faculté de Médecine et de Pharmacie, Casablanca- Maroc. (3) Laboratoire d´Hématologie, Faculté de Médecine et de Pharmacie, Casablanca- Maroc. (4) Laboratoire Agroalimentaire, Agroalimentaire, Institut Agronomique et Vétérinaire Hassan II, Rabat- Maroc. (5) Ecole sup.- Agro, Casablanca- Maroc. Maroc. (6) Laboratoire de Biochimie, Faculté de Sciences, Ain Chock, Casablanca-Maroc Casablanca-Maroc .
Résumé La Menthe pouliot ou Mentha pulegium est une plante très riche en essence aromatique. Elle est très répondue au Maroc particulièrement entre les régions de Marrakech et Azrou. La principale caractéristique de l’huile essentielle de la plante est sa forte teneur en R(+) pulégone (plus de 85%). Dans ce travail nous nous sommes proposés d'étudier les propriétés antifongique de la menthe pouliot, après son extraction et son analyse à la Chromatographie en Phase Gazeuse. L’extraction de l’huile essentielle de la menthe pouliot est réalisée par hydrodistillation. Les résultats obtenus montrent que le rendement de l’huile essentielle est de 0.82%. Le profil chromatographique a révélé la présence de 46 constituants dont la R(+) pulégone constituant majoritaire. Le test antifongique sur les champignons de type Mucor et Pénicillium a permis de déterminer la quantité minimale fongicide qui est de 20µl. Mots clés : Huile essentielle, Menthe pouliot, pulégone, antifongique. Introduction Les huiles essentielles sont des produits odorants obtenus soit par ent raînement à la vapeur d'eau de végétaux ou de parties de végétaux, soit par expression du péricarpe frais de certains Citrus (5). La menthe pouliot est parmi les plantes les plus riches en essence aromatique (2). Elle doit son odeur et son so n activité activi té à son huile huile essentielle de pouliot, obtenue par hydrodistillation. hydrodisti llation. Il s'agit d'un liquide jaunâtre d'odeur très forte; son analyse chromatographique chromatographique a révélé l'existence de plus de 80% de pulégone. C'est ainsi que l'huile essentielle de la Menthe pouliot est appelée aussi l'huile essentielle à pulégone.
Matériel et méthodes 1.Extraction de l'huile essentielle à partir de la Menthe pouliot. Matériel: Notre étude a porté sur 500g de Menthe pouliot séchée ou fraîche. Elle est cultivée dans la région de Fès et récoltée durant le mois d'avril 2001. La plante entière a subi un séchage dans une serre à température variant entre 36°c et 48°c. Méthode: L'huile essentielle est préparée par hydrodistillation sur l'appareil de Clevenger (1). Le principe de cette méthode est basé sur un entraînement des constituants volatils de l'huile Congrès de Biochimie. Casablanca, 9, 10 et 11 Mai 2002.
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essentielle par la vapeur d'eau. Cette dernière chargée de principes volatils est condensée dans un réfrigérant pour donner de l'huile essentielle après décantation. Analyse de l'huile essentielle L'huile essentielle de la Menthe pouliot est séparée par chromatographie en phase gazeuse selon les conditions suivantes: Chromatographe: Chromatogr aphe: Chromapack Cp 9001; Détecteur :FID ; Colonne : SE 54 DF ; Température Températur e de l'injecteur: 230°C ; Température du détecteur: 240°C ; Programme de température: 50°c(4 min),5°/min,230°(20 min) ; Type d'injection: Partage ; Volume d'injection: 1µl ; Gaz porteur: N2 (Azote) ; Débit du gaz vecteur: 1ml/min ; Atténuation : 4 Test antifongique Le pouvoir antifongique de l’huile essentielle de la Menthe Pouliot est testé sur deux microorganismes Pinicilium et et Mucor. Mucor. L’huile L’huile essentielle essentielle est solubilisée dans l’éthanol à 90% et le volume déposé est de 100µl pour des solutions 5%, 10%, 20%, 50% et 100%. Le milieu de base est le Patato Dextrose Agar (PDA) dont la composition est la suivante: 4g/l d'extrait de pomme de terre, 20g/l de glucose et 15g/l d'Agar Agar bactériologique. Techniques utilisées (3,4) : 1. Technique de micro atmosphère 2. Technique de micro atmosphère forcée 3. Technique de contact direct Résultats
1. Extraction de l’huile essentielle Le rendement d'extraction de l'huile essentielle de la menthe pouliot fraîche est de 0,78%, celui obtenu pour la plante séchée est de 0,90%. 2. Analyse de l’huile essentielle Le chroma chromatogramme togramme montre la présence présence de la R(+) Pulégone (82%) comme composé majoritaire. Tableau 1
Huile essentielle essentiel le en % 0 5 10 20 50 100
Effet sur les champignons Pinicillium Mucor +++ +++ +++ +++ ++ ++ -
3. Test antifongique Les résultats du tableau 1 indiquent que la quantité minimale inhibitrice pour les deux souches est de 20%. Conclusion L’huile essentielle essentielle de la Menthe pouliot est dotée d’un fo rt pouvoir antifongique. antifongique. Il est souhaitable de tester le pouvoir antifongique de la R(+) pulégone ainsi que le pouvoir Congrès de Biochimie. Casablanca, 9, 10 et 11 Mai 2002.
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antibactérien sur plusieurs microorganismes. Il serait de même intéressant d’étudier son mécanisme d’action.
Bibliographie 1. G.R Anes et W.S.A Matheurs (1986) 2. B. Benjilali, M. Ettalibi, M. Ismaili-Alaoui et S. Zrira. Plantes aromatiques et médicinales et leurs huiles essentielles. 3. Ismaili Alaoui M.(1983). Pouvoir antiseptique de Thym sur les microorganismes, mémoire de fin d’études I.A.V Hassan II 4. Remmal A (1994). Activité antibactérienne et antivirale des huiles essentielles d’Origan, de Girofle et de Thym. 5. Pharmacopée française 1976.
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