Instituto Abdón Cifuentes Biología San Felipe
Trabajo experimental de Biología: EXTRACCION DEL ADN DE UNA MUESTRA VEGETAL, LA FRUTILLA.
Integrantes: Pía Peralta Catalina Maulén Javiera Serrano Daniela Fabregat Fecha: 08/04/2016
Curso: 2º medio A
Introducción Objetivos: 1.- Realizar la extracción de ADN de una fruta, que en nuestro caso es la frutilla. 2.-Observar la estructura fibrilar del ADN de la frutilla.
En el siguiente trabajo experimental, que fue realizado en el laboratorio de manera casera, nosotras extrajimos el ADN de la frutilla. Este proceso consta de varias etapas; en primer lugar, se tiene que romper la pared celular y la membrana plasmática, con el lavavajillas y la sal, para acceder al núcleo de la célula. Luego debe romperse la carioteca para liberar al ADN. Después debe precipitarse el ADN en el alcohol para que no disminuya y se separe del resto de los elementos. También contamos con la comparación entre la extracción casera y la industrial: En la extracción profesional o de desarrollo (laboratorio) se añaden enzimas que fragmentan las moléculas de ARN e impiden que se unan al ADN, en cambio, en nuestra extracción casera no añadimos dichas enzimas.
Marco Teórico ADN: Ácido desoxirribonucleico, es la molécula que lleva la información genética utilizada por una célula para la creación de proteínas, contiene las instrucciones genéticas usadas en el desarrollo y funcionamiento de todos los organismos vivos.
Cromosoma: Orgánulo en forma de filamento que se encuentra en el interior del núcleo de una célula eucariota y que contiene el material genético, el número de ellos es constante para las células de una especie.
Cromátida: Filamento que constituye los cromosomas, visible durante la profase y metafase de la mitosis.
Agua desmineralizada: Es lo que se obtiene por destilación del agua potable, es agua potable sin minerales, compuestos y sustancias.
Lavavajillas: Detergente para lavar los platos, quita la grasa con el lauril sulfato de sodio, el cual separa los lípidos y las proteínas que constituyen las membranas que rodean la célula y núcleo
Hielo: Cuerpo sólido y cristalino en que se convierte el agua por el descenso de temperatura. Núcleo celular: Es un organelo membranoso que se encuentra en el centro de las células eucariontes, contiene la mayor parte de material genético (ADN).
Estructura fibrilar: Masa orgánica constituida por células, esta organización proteica tiene forma de fibras o microtúbulos celulares.
Cromatina: Sustancia que se encuentra en el núcleo de la célula formando el material cromosómico durante la interfase. Esta sustancia se compone de ADN + proteínas.
Sal: La función de la sal en este experimento es que mantiene la forma del ADN esto quiere decir que impide que las moléculas de ADN se destruyan, también la sal ayuda a extraer el exceso de agua en la célula.
Frutilla: Son octoploides, es decir, que tienen 2 juegos idénticos de cromosomas, esto significa que contienen dentro de ellas bastante material genético (por eso nos convenía usar esta fruta más que otras).
Alcohol de 96°: Su función es que separa el ADN de otros componentes celulares los cuales son dejados en la solución acuosa, también permite que podamos apreciar el ADN.
Descripción del experimento Inicialmente, comenzamos mezclando 3 cucharaditas de detergente con una cucharadita de sal en un vaso precipitado. Estos dos ingredientes son esenciales ya que previamente al mezclarlo con el zumo de frutilla, romperán o disolverán la pared celular y membrana plasmática de las células de la frutilla, y así poder acercarnos más al ADN. En más detalle, la sal tiene un alto contenido de sodio con carga positiva que atraerá las moléculas de ADN impidiendo que se destruyan. También extrae el exceso de agua que puede tener las células y las moléculas del ADN (Efecto osmótico). El lavavajillas sirve para la extracción pura del ADN, ya que tiene un ingrediente el cual es el lauril sulfato de sodio, el cual limpia los trastes removiendo grasas, proteínas y carbohidratos (obviamente de la pared y la membrana plasmática). Luego a esta mezcla le agregamos 25 ml de agua desmineralizada. Esta agua es aquella a la que se le han eliminado las impurezas e iones mediante la destilación. Es muy importante usar este tipo de agua y no el agua potable de la llave, ya que esta produciría una precipitación de la mezcla en vez de una disolución. Incluso, el agua potable de nuestra ciudad, San Felipe, es demasiado dura, y esto provocaría que el lavavajillas se corte y no sea lo suficientemente potente para la acción que debe realizar. Previamente, cortamos la frutilla en pedacitos, dejando a nuestro uso solo la parte central. Esto se debe a que si ocupamos toda la frutilla podría haber alteraciones en nuestro resultado o disolución ya que las semillas de la frutilla también tienen sales y esto provocaría una precipitación. También cabe mencionar, que la parte central de la frutilla tiene una pared celular más débil, por lo tanto, será más fácil su degradación. Seguidamente, con la ayuda de una batidora, trituramos los pequeños trozos del centro de la frutilla más 20 ml de agua desmineralizada, para crear un zumo acuoso, el cual luego lo colamos en un vaso precipitado para evitar que hubiera pedacitos restantes de la frutilla. Luego, unimos las dos mezclas, la primera que era la sal con detergente y las segunda que eran los pedacitos de frutilla con agua triturados. Lo agitamos durante 5 minutos para que sucedan los procesos de destrucción y la disolución de la pared y membrana plasmática. Finalmente comenzamos con el paso más importante; En un tubo de ensayo pusimos una pequeña cantidad de la solución de la frutilla y luego con otro tubo de ensayo vertimos en él, el alcohol (con una cantidad de 5 ml). El alcohol es sumamente importante ya que esté permite que el ADN se precipite en el alcohol fuera de la solución de la frutilla, donde puede ser visto a nuestros ojos. También el alcohol separa el ADN de otros componentes celulares, los cuales son dejados en la solución acuosa. Además, el alcohol debe estar a una temperatura lo más baja posible, ya que si está a la misma temperatura que la
solución de frutilla se van a mezclar y no se podrá apreciar el ADN. Y si esta frio las mezclas se separaran y podremos ver LAS HEBRAS DE ADN.(es por eso que el tubo de ensayo lo envolvimos en hielo). Dejamos reposar 5 minutos la mezcla envuelta en hielo y gracias a un minucioso y ordenado trabajo pudimos tener el resultado esperado, y logramos observar las hebras de ADN, el cual era nuestra finalidad en este experimento.
Análisis del experimento y preguntas 1º pregunta:
¿Qué finalidad tiene el exponer las células a un detergente fuerte?
La finalidad por la cual expusimos las células a un detergente fuerte, es que se separa los lípidos, las proteínas, y los carbohidratos que se encuentran en la pared y membrana celular. Previamente la disuelve y esto permite que podamos apreciar bien los componentes de la célula para posteriormente separarlos. Cabe mencionar también que gracias al detergente se rompe también la membrana nuclear(Carioteca) y el ADN es liberado por completo de la célula. 2º pregunta: ¿Qué función desempeña el alcohol en el proceso y en que infiere que este frio? El alcohol cumple la función de separar el ADN de los otros componentes celulares, convirtiéndose en una mezcla heterogénea, donde el zumo de frutilla esta al fondo del tubo de ensayo y el alcohol asciende a la superficie. También permite que podamos apreciar mejor el ADN. El alcohol debe estar muy frío, ya que, si este está a la misma temperatura que el agua, estos dos se mezclaran, ya que es soluble en agua, sin embargo, si esta frio se va a separar y podremos observar el material genético. 3º pregunta: Investiga y explica brevemente en que consiste la electroforesis. Es un método de laboratorio, en el que se utiliza una corriente eléctrica controlada, con la finalidad de separar biomoléculas según su tamaño y carga eléctrica a través de una matriz gelatinosa.
Algunas imágenes de nuestro resultado:
Como podemos observar en el alcohol hay una sustancia viscosa y blanca, que son fibrillas de ADN que precipitaron por sobre el alcohol. Este es nuestro trabajo y nuestros resultados, los cuales a nuestro parecer resultaron muy bien. También como conclusión este producto filamentoso que obtuvimos de la extracción no es ADN puro, ya que entremezclado en él hay fragmentos de ARN (debido a que nuestro experimento fue casero y no profesional). Una extracción “profesional” se realiza añadiendo enzimas que fragmentan las moléculas de ARN y que impiden que se unan al ADN como dijimos anteriormente.
Webgrafía http://www.javeriana.edu.co/Facultades/Ciencias/neurobioquimica/libros/celul ar/electroforesis.html www.monografias.com http://www.buenastareas.com/ensayos/Extraccion-Del-Adn-De-La-Fresa/ http://m.monografias.com/trabajos91/informe-experimento-extraccionadn/informe-experimento-extraccion-adn.shtml
