ESPIROQUETAS M.V. Aurico Sousa Fonseca Departamento de Patología Veterinaria Cátedra de Microbiología e Inmunología
TAXONOMÍA Y NOMENCLATURA •
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Actualmente se describen en la sección XXV del volumen 5 de la 2da. Edición Edici ón del Manual Bergey de Bacteriología sistemática Se incluyen en: • •
Clase Spirochaetes Orden Spirochaetales
CARACTERÍSTICAS MORFOLOGÍCAS Bacterias móviles Forma de hélice 0,1 a 3,0 μm de diámetro longitud de 5 a 250 μm Gram negativas Microscopia óptica
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Técnicas para aumentar grosor Difíciles de colorear, se observan con microscopía de campo oscuro y/o contraste de fases.
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Impregnación argéntica (Técnica de Levaditi) Tinción negativa con nigrosina o tinta china (Fontana-Tribon-deau) Wright, Romanowsky y Giemsa Inmunoperoxidasa Anticuerpos Fluorescentes
CARACTERÍSTICAS DE CRECIMIENTO •
Son quimioheterótrofos •
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Fuentes de carbono y energía: • Aminoácidos, largas cadenas de ácidos grasos y largas cadenas de alcoholes grasos Se pueden comportar como anaerobios, aerobios, anaerobios facultativos o microaerófilos
CARACTERÍSTICAS DE CRECIMIENTO •
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Algunos géneros se pueden cultivar en medios artificiales de laboratorio, siendo su crecimiento lento Se desarrollan bien en medios enriquecidos • con suero de conejo o hemoglobina Entre los medios más adecuados para • espiroquetas se encuentran • Stuart, Fletcher, Noguchi, Korthof, Reiter y Ramme, Chang, Li-Yan Po y el medio sólido de Cox y Larson Treponema se ha logrado cultivar hasta por dos generaciones en líneas celulares Se multiplican por fisión binaria (división transversal)
ECOLOGÍA Hábitat
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Son ubicuas y de distribución cosmopolita Formas bacterianas de vida libre en: • • aguas dulces y saladas, Tierras, lodos y fango • Saprofitas en el suelo en descomposición Simbiontes en: • • Cavidad bucal y aparato genital del ser se r humano y de los animales. Aparato digestivo de mamíferos (rúmen ( rúmen bovino) y de moluscos (género Cristispira) Patógenos intracelulares • • •
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Treponema
Agentes Zoonóticos • Borrelia y Leptospira Patógenos animales de trascendencia económica •
Brachyspira
ECOLOGÍA •
Transmisión •
La transmisión natural ocurre por vía • Oral o digestiva • Aerógena • Por contacto • Mediante vectores hematófagos • Garrapatas e insectos
Microorganismos lábiles que muestran sensibilidad a:
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Calor Luz Desecación Acidez Sustancias químicas como: Arsenicales • Mercuriales • • Bismuto Lisozima Antibióticos como: Penicilina, tetraciclina, tetraciclina, estreptomicina estreptomicina y tilosina •
Resistencia
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rifampicina
GÉNEROS DE INTERÉS EN MEDICINA VETERINAR VETERINARIA IA •
Familias •
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Spirochaetaceae • Borrelia • Treponema Serpulinaceae • Brachyspira Leptospiraceae • Leptospira
Género Borrelia Generalidades
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Comprende especies patógenas para el ser humano y los animales (aves, vacas, ovejas, caballos y perros) Agentes productores de zoonosis
Características morfológicas y estructurales
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Morfología helicoidal Espiras amplias, irregulares y escasas Extremos del cilindro protoplasmático son afilados El interior del citoplasma citop lasma no presenta túbulos Cubierta externa presenta un lipopolisacárido tóxico diferente a la endotoxina de las Gram negativas Tamaño entre 0,2 y 0,5 µm de diámetro y 3-20 µm de longitud Posee entre 7 y 30 filamentos axiales
Género Borrelia Generalidades
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Comprende especies patógenas para el ser humano y los animales (aves, vacas, ovejas, caballos y perros) Agentes productores de zoonosis
Características morfológicas y estructurales
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Morfología helicoidal Espiras amplias, irregulares y escasas Extremos del cilindro protoplasmático son afilados El interior del citoplasma citop lasma no presenta túbulos Cubierta externa presenta un lipopolisacárido tóxico diferente a la endotoxina de las Gram negativas Tamaño entre 0,2 y 0,5 µm de diámetro y 3-20 µm de longitud Posee entre 7 y 30 filamentos axiales
Género Borrelia •
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Se visualizan mejor al microscopio tras coloraciones con anilina que las otras espiroquetas Son Gram negativas, pero se colorean mejor con Giemsa, Wright y Naranja de acridina Resisten varias semanas en los coágulos sanguíneos a temperatura ambiente, algunos meses a 4 oC y por tiempo indefinido a -20 oC Atraviesan la placenta Se eliminan por la leche y la orina
Género Borrelia •
Aislamiento e identificación •
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El cultivo es difícil y lento (7-8 (7 -8 días) • Tasa promedio de generación: 18 a 20 horas Especies que han podido ser aisladas en vitro son microaerófilas Antes se cultivaban y aislaban en • Huevos embrionados de gallina • Animales de experimentación (ratón recién nacido) • Pases sucesivos en vectores artrópodos
Género Borrelia •
Aislamiento e identificación •
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Ahora se emplean medios artificiales como: • Noguchi y Li-Yan-Po • Medio BSK II (Barbour-Stoenner y Kelly) • Suero de conejo, 5 fluorouracilo fluorouracilo y kanamicina • Medio CM RL 1066 • Glutamina Temperatura de incubación • 33 a 35 °C
Género Borrelia •
Hábitat •
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Parásitos obligados que se encuentran distribuidos por el torrente circulatorio Presentan la misma distribución geográfica que sus vectores
Género Borrelia Transmisión
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Artrópodos hematófagos Garrapatas de los géneros Argas, •
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Ixodes, Rhipicephalus, Margaropus, Boophilus y Ornithodoros Adquieren las Borrelia al alimentarse de
los animales enfermos • Hombres, aves, vacas, ovejas, caballos y perros o los reservorios • Aves migratorias, roedores, ciervos, vacas, ovejas y caballos Se ha demostrado transmisión transovárica
Género Borrelia Especies de interés
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Borrelia anserina •
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Borrelia theileri •
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Enfermedad de Lyme
Borrelia afzelii •
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Aborto epizoótico en bovinos
Borrelia burgdorferi •
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Fiebre recurrente en vacas. También en ovejas y equidos
Borrelia coriaceae •
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Borreliosis o espiroquetosis aviar
Enfermedad de Lyme
Borrelia garinii •
Enfermedad de Lyme
Género Borrelia Diagnóstico serológico
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Elisa Posibles falsos positivos con cepas OX-2 y OX-K de Proteus Inmunofluorescencia Inmunofluorescencia indirecta (IFI) Western blot
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Diagnóstico molecular
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PCR (Reacción en cadena de la Polimerasa)
Género Borrelia •
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Tratamiento Tetraciclina, penicilina, eritromicina, amoxicilina, kanamicina y ceftriaxona Medidas profilácticas Evitar el contacto con los vectores que sirven de vehiculo a Borrelia Uso de productos frente a las garrapatas Eliminar roedores Existen bacterinas y vacunas de subunidades para perros
Género Treponema
Género Brachyspira Generalidades
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Catarsis taxonómica Inicialmente Treponema • (T. hyodysenteriae) • En 1991 Stanton et al., la reclasifican como Serpula En 1992 Stanton et al., • la reclasifican como Serpulina • En 1997 Ochiai et al., reporta una homología mayor de 96% con Brachyspira
Género Brachyspira Especies de interés
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Brachyspira aalborgi •
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Brachyspira hyodysenteriae •
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No patógena
Brachyspira pilosicoli •
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Disenteria porcina intensa
Brachyspira innocens •
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Especie tipo del género
Espiroquetosis intestinal porcina débil
Brachyspira alvinipulli • •
Enteropatógena para el pollo. Produce diarrea
Género Brachyspira •
Hábitat • •
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Reservorio: intestino del cerdo Perros y roedores son sensibles sensibl es al microorganismo
Transmisión •
Fecal-oral
Género Brachyspira •
Diagnóstico •
Toma de muestra
Género Brachyspira Características morfológicas Características y estructurales
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Bacteria móvil, helicoidal B. hyodysenteriae Mide 8-10 µm de longitud • y 0,3-0,4 µm de diámetro Presenta de 14 a 18 endoflagelos • • La mitad se inserta en cada uno de los extremos B. pilosicoli Mide 4-8 µm de longitud y 0,2• 0,3 µm de diámetro Presenta de 10 a 12 endoflagelos •
Género Brachyspira Aislamiento e identificación
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Crecen en condiciones de anaerobiosis en agar sangre soja tripticasa a 38 °C Se pueden usar el medio de agar sangre modificado complementado con espectinomicina y rifampicina
