mecanismo de absorción, distribución , metabolismo y excreción de la vitamina B6Descripción completa
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Proceso Biotecnologico acerca de la obtención de la Vitamina C en la industria
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Vitamina C
Seria Vitamina C Tiande http://tian-de.ro/32-vitamin-c [email protected]
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Descripción: Laboratorio de Vitamina C
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Metodología para la determinación de vitamina C por HPLCDescripción completa
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ESTUDIO CINÉTICO Reacción de oxidación del ácido ascórbico con ferricianuro de potasio.
Leer previamente todo el protocolo protocolo antes de la clase. Objetivo. Establecer la ecuació ec uación n Ley de rapidez rapidez de la reacción. reacción. Objetivos consecuen c onsecuentes. tes. 1. Determinar el orden y la constante de rapidez. Evaluar la rapidez de reacción a cada con c oncentr centración ación del reactivo limitan li mitante. te. Pre-laboratorio (entr (entre egar al inicio de la clase). 1. Definir conceptos: orden, constante y rapidez de reacción. 2. Métodos Métodos para determinar los conceptos conceptos mencionados en 1. 3. Utilidad del método de aislam ais lamiento iento de Ostwald. 4. ¿Qué es un agente antioxidante? 5. Importancia Importancia farmacéutica farmacéutica de la Vitamina C. 6. Calcul Calc ular ar la concentración concentración del K3Fe(CN)6 en la curva patrón. 7. Calcul Calc ular ar la con c oncentr centración ación de K3Fe(CN)6, Vitamina C y HCl en cada mezcla de reacción. 8. Calcul Calc ular ar la fuerza fuerza iónica i ónica [I = ½ (Ci 2i )] en cada mezcla de reacción. 9. Propuesta Propuesta de la reacción entr entree la l a vitamina C y el ferricianuro ferricianuro de potasio. 10. Balance redox redox de la l a reacción: reacc ión: C 6O6H8+ Fe(CN)6
3-
C 6O6 H6 + Fe(CN)6
4-
11. Resultado de los cálculos solicitados en el protocolo experimental. Cálculos desglosados en bitácora de trabajo. Desarrollo experimental: experimental: A. Conectar los equipos antes de iniciar el experimento. experimento. B. Calibrar Cal ibrar el espectrofotóm espectrofotómetro etro ( = 418 nm.) nm.) 20 min. antes antes de iniciar el trabajo. trabajo. Blanco: agua ag ua destilada. destilada. C. Preparar diluciones de Ferricianuro de Potasio para la curva patrón (Tabla 1), utilizando pipetas pipetas graduadas. graduadas.
Tabla 1.- Diluciones de Ferricianuro de Potasio en la Curva Patrón K3 Fe(CN)6 (0.0025 mol dm-3) ml 4 3 2 1 0.25
HNO3 (0.1 mol dm -3) ml 1 1 1 1 1
H2Odest. ml
Concentración final (mol dm-3)
5 6 7 8 8.75
D. Leer absorbancias de la curva patrón (Tabla 1A): Anotar los datos de absorbancia y concentración para la curva patrón. Así como los parámetros de regresión lineal. Tabla 1A.- Datos de la Curva Patrón Tubo Absorbancia K3Fe(CN)6 (moles/dm3) 1 2 3 4 5
m= o.o.= c.c.l. =
E. Etiquetar cuatro juegos de 3 vasos de precipitados, limpios y secos de la siguiente manera: ácido ascórbico (AA), K3 Fe(CN)6 (FP) y mezcla reactiva (MR), respectivamente y según la corrida. F. Preparar las soluciones reactivas utilizando buretas, como lo refiere la Tabla 2. Tabla 2.- Soluciones reactivas de acuerdo al cambio de concentración del reactivo limitante.
Corrida Num.
1 2 3 4
Vaso K3Fe(CN)6 ml K3 Fe(CN)6 ml HNO3 ml H2 Odest (0.0025 M) (0.1M)
8 6.4 4 3.2
2.0 2.0 2.0 2.0
0 1.6 4 4.8
Vaso H2 A ml Vit C ml H2 Odest (0.004M)
5 4 2.5 2
5 6 7.5 8
G. Programar el espectrofotómetro para medir la cinética de la reacción (*) H. Tabularlas concentraciones teóricas de cada una de las diluciones de los reactivos en la mezcla reactiva (formato Tabla 3), según la corrida.
Tabla 3.- Concentración inicial teórica en cada mezcla de reacción. Corrida K3Fe(CN)6 Vit C I 3 3 (mol/dm ) (mol/dm ) (mol/dm3 )
INICIO DE REACCIÓN A. Una vez preparadas las soluciones de ferricianuro y vitamina C (tabla 2) y según el no. de corrida, verter ambas SIMULTÁNEAMENTE en el vaso MR y al mismo tiempo accionar el cronómetro o iniciar programa en el espectrofotómetro (*), agitar en forma manual y efectiva en un breve lapso de tiempo.
AA
M
FP
B. Trasvasar con prontitud y cuidadosamente la mezcla reactiva a la celda, de manera que ocupe el 70 por ciento del volumen total de capacidad, para evitar derrames dentro del equipo. C. Capturar las lecturas de cambio de absorbancia según la tabla 4. Tabla 4.- Tiempo estimado en el monitoreo de la reacción. Corrida Num.
Intervalo de lectura
No. de lecturas
1 2 3 4
20 seg. 40 seg. 60 seg. 80 seg.
15 15 15 15
Tiempo estimado de la corrida
D. Medir la temperatura y pH de la muestra restante. Contenido del Informe. I. ANTECEDENTES TEÓRICOS (Incluir breve reseña histórica) II. OBJETIVOS III. RESULTADOS Tablas de resultados: a. Curva Patrón y gráfica correspondiente. (ABS vs C), datos de regresión lineal. b. Método Diferencial: elaborar las gráficas de C vs. T, obtener “r” en cada punto del gráfico; elaborar la gráfica Log r vs Log C. c. Método Integral: Aplicar las ecuaciones lineales de orden “0”, “1” y “2” a los datos de cada corrida. Mostrar datos de la regresión lineal de cada gráfico. Presentar los gráficos.
d. Determine el orden de reacción y la constante de reacción, bajo el criterio de linealidad. e. Calcular la rapidez y la fuerza iónica para cada corrida. f. Presentar tabla de resultados finales con la Ecuación Ley de rapidez de la reacción IV. V. VI.
DISCUSIÓN E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS CONCLUSIONES. BIBLIOGRAFÍA CONSULTADA.