Laporan Praktikum Farmakokinetika Analisis Obat Dalam Darah - Klp4 Jumat Siang

Laporan Praktikum Farmakokinetika

Analisis Obat dalam Darah

Disusun oleh: Kelompok 1 Siang

Ayu Intansari R. Putri

"#$%##&#$"

Binerta Bai Agfa

"#$%###'$&

Fikry Dwi Anjani

"#$%#""$'(

Rosita Kurniawan

"#$%#%$$&(

Sarah

"#$%##'%)$

Tahmida Tahmida Diazutri !tami

"#$%#($*##

FAKULTAS FAKULTAS FARAS! U"!#$RS!TAS !"DO"$S!A D$POK  %&1'

!( TU)UA"

a

+ahasis +ahasiswa wa dihara diharakan kan mamu mamu meng mengana, ana,isi isiss o-at da,am da,am darah darah seara seara in /itro /itro..

 -

+ahasiswa diharakan mamu menggunakan data yang diero,eh untuk  mendaatkan ersamaan farmakokinetiknya.

!!( PR!"S!P PR!"S!P K$R)A K$R)A

Darah Darah diisah diisahkan kan dari dari rotein roteinny nyaa dengan dengan menggu menggunak nakan an T0A. T0A. P,asma P,asma darah darah diasamkan dengan 10, dan ditam-ahkan 2atrium 2itrit. 3a,u di-erikan asam su,famat dan dan tera terakh khir ir ,aru ,aruta tan n 2a41 2a41.. Seny Senyaw awaa

diaz diazo o

yang ang

terter-en entu tuk k diuk diukur ur deng dengan an

sek sektr trof ofot otom omete eterr. Data Data yang yang die diero ro,e ,eh h digu diguna naka kan n untu untuk k meny menyus usun un ersa ersama maan an farmakokinetika dan memrediksi ara em-erian terse-ut.

!!!(

T$OR! DASAR  

!ntuk mem-erikan efek -io,ogis5 o-at da,am -entuk aktifnya harus -erinteraksi dengan dengan resetor5 resetor5 temat aksi atau se, target target dengan dengan kadar yang uku tinggi. tinggi. Se-e,um menaa menaaii reseto resetor5 r5 o-at o-at ter,e-i ter,e-ih h dahu,u dahu,u harus harus me,a,ui me,a,ui roses roses farmako farmakokin kinetik etik.. Fasa Fasa farmakokinetik me,iuti roses fasa II dan fasa III. Fasa II ada,ah roses a-sor-si mo,eku, o-at yang menghasi,kan ketersediaan -io,ogis o-at5 yaitu senyawa aktif da,am airan darah yang akan didistri-usikan ke jaringan atau organ tu-uh. Fasa III ada,ah fasa yang me,i-atkan roses distri-usi5 meta-o,ism dan ekskresi o-at5 yang menentukan kadar senyawa aktif ada komartemen temat resetor -erada. Faktor6faktor enentu da,am roses farmakokinetik ada,ah7 ". Sist Sistem em kom komar artem temen en da,am da,am airan airan tu-u tu-uh5 h5 seert seerti7 i7 aira airan n intr intrase ase,5 ,5 ekste ekstern rna, a, 8,asma darah5 airan interstisia,5 airan ere-rosina,9 dan -er-agai fasa ,iofi, da,am tu-uh. #. Protei Protein n ,asma5 ,asma5 rotein rotein jaringa jaringan n dan -er-ag -er-agai ai senyawa senyawa -io,ogis -io,ogis yang mungki mungkin n daat mengikat o-at. (. Dist Distri ri-u -usi si o-at o-at da,a da,am m -er-er-ag agai ai sist sistem em kom komar arte tem men -io, -io,og ogis is55 teru teruta tama ma hu-ungan waktu dan kadar o-at da,am -er-agai sistem terse-ut5 yang sangat menentukan kinetika o-at.

*. Dosi Dosiss sedi sediaa aan n o-at o-at55 tran trans sor ortt anta antarr kom komar arte teme men n see seert rtii ros roses es a-so a-sorr-s5 s5  -ioakti/asi5 -iodegradasi dan ekskresi yang menentukan ,ama , ama o-at da,am tu-uh 8Siswandono5 "::'9 Konsentrasi o-at ada,ah e,emen enting untuk menentukan farmakokinetik suatu indi/idu mauun ou,asi5 konsentrasi o-at diukur da,am same, -io,ogi seerti air  susu5 sa,i/a5 ,asma dan urin. Sensiti/itas5 akurasi5 dan resisi dari metode ana,isis harus ada untuk engukuran Seara ,angsung o-at da,am matriks -io,ogis. !ntuk itu metode enetaan kadar Seara umum er,u di/a,idasi sehingga informaasi yang akurat didaatkan untuk monitoring farmakokinetik dan k,inik 8Sharge,5 ":::9. Penguk Pengukura uran n konsent konsentrasi rasi o-at o-at di darah5 darah5 serum serum atau atau ,asma ,asma ada,ah ada,ah endek endekata atan n seara seara ,angsu ,angsung ng yang yang a,ing a,ing -aik -aik untuk untuk meni,ai meni,ai farmako farmakokin kinetik etik o-at o-at tu-uh. tu-uh. Darah Darah mengandung e,emen se,u,er menaku se, darah merah5 se, darah utih5 keeing darah dan rotein seerti a,-umin dan g,o-u,in. Pada umumnya serum atau ,asma digunakan untuk engukuran o-at. !ntukmendaatkan serum5 darah di-ekukan dan serum diam-i, dari suernatant sete,ah disentrifugasi. P,asma diero,eh dari suernatant darah yang disentrifugasi dengan ditam-ahkan hearin. 4,eh karena ituserum dan ,asma tidak  sama. P,asma menga,ir kese,uruh jaringan tu-uh termasuk semua e,emen se,u,er darah. Dengan -erasumsi -ahwa o-at di ,asma da,am kesetim-angan e;ui,i-rium dengan  jaringan5 eru-ahan konsentrasi o-at akan meref,eksikan eru-ahan konsentrasi o-at di  jaringan 8Sherge,5 ":::9. Da,am Da,am se-uah se-uah ana,isi ana,isiss o-at o-at da,am da,am airan airan hayati5 hayati5 ada ha,6ha ha,6ha,, entin enting g da,am da,am farmakokinetik yang digunakan se-agai arameter6arameter5 antara ,a in yaitu7 ". Tetaan etaan ,aju ,aju in/asi in/asi atau atau teta tetaan an a-sor a-sorsi. si. #.
!#(

ALAT DA" *A+A" A( ALAT

*( *A+A"

". A,at Sentrifu Sentrifugasi gasi

". Asam Asam trik trik,o ,ora raset setat at 8T0A 8T0A99 &$? &$?

#.

#. 2atrium nitrit

(. Stowa Stowath th

"$? 8di-uat

 -aru9

*. Sektrofotometer !<6< !<6
(. Asam Asam su,f su,fam amat at "&? "&?

&. Ta-ung Ta-ung reaksi reaksi

*. Asam Asam k,ori ,orida da % 2

%. Piet /o,ume /o,ume

&. Sam ame, darah

). Piet Piet ukur  ukur 

%. Anti Antiko koag agu, u,an an

'. 3a-u takar takar "$5$ "$5$ m,

). Para Parase seta tamo mo,, -aku -aku

:. Ba,on Ba,on karet karet

'. 2a41 "$?

,( #( PROS$DUR PROS$DUR K$R)A

a. Prosedur Penetapan Kadar ". Same, darah diam-i, se-anyak #5$ m, ada jam ke $5#&@ $5&@ "5$@ #5$@ *5$@ %5$@ :5$@ dan "#5$. #. Dimasukkan ke da,am ta-ung sentrifuge darah5 ,a,u ditam-ahkan #5$ m, T0A &$? &$? kemudian di sentrifuge se,ama se,a ma ) menit dengan keeatan *$$$ rm. (. Diie Diiett "5$ m, -agian -agian suern suernatan atan yang yang jernih5 jernih5 ,a,u dimasukka dimasukkan n ke da,am ta-ung ta-ung reaksi ,ain. Ditam-ahkan Ditam-ahkan $5& m, 10, %2 serta "5$ m,  2a24# "$?. Diamkan se,ama & menit. *. Ditam-ahkan dengan hati6hati ,arutan asam su,famat "&? se-anyak  "5$ m,5 kemudian kemudian ditam-ahkan ditam-ahkan ,arutan 2a41 "$? se-anyak se-anyak #5& m,. Didiamkan se,ama ( menit di da,am -eaker -erisi es. &. Seraan diukur dengan sektrofotometer ada  maksimum *(& nm. D. b( U-i U-i Pero Perole leha han n Kemba Kembali li

.

Buat Buat am amu ura ran n ,as ,asm ma deng dengan an ,ar ,arut utan an -ak -aku u ara arase seta tamo mo,, sehi sehing ngga ga

diero,eh kadar arasetamo, dengan konsentrasi "$5$&# m5 "$$5&# m5 dan &$#5% &$#5% m. m. Tetak etakan an kadar kadar masing masing6ma 6masin sing g same, same, terhada terhada  -aku -aku  arasetamo,5 ni,ai !PK5 serta kesa,ahan sistematik untuk tia -esaran kadar. F. C.

#!( DATA DATA P$".AATA" P$".AATA" DA" P$R+!TU".A" P$R+!TU". A" +( A( Data Data Kur Kur/a /a Kalibr Kalibrasi asi

I. Ta-e, Ta-e, ". Data kur/a kur/a ka,ika,i-rasi rasi ada ada  ma> ma> *(& nm

. Konsentrasi 8m9

K. Sera Seraa an n 8A9 8A9

3. "$ "$$

+. $5#((

 2. #$$

4. $5("#

P. ($$

E. $5*''

R. *$$

S. $5 $5&##

T. &$ &$$

!. $5%"(

<. %$ %$$

. $5)"'

G. H.

Kurva Kurv a Kalibrasi pada

max

0.6

436 nm 0.55

0.5 0.4 Serapan (A)

0.39

0.3

0.29

0.2

0.15 0.12

0.1 0 0

200

400

600

800

1000

Konsentrasi onsentrasi (ppm) (ppm )

.

Cam Cam-ar -ar ". ". Ku Kur/a r/a ka, ka,ii-ra rasi si sam same, dara darah h ad adaa λma> *(% nm

1200

AA. AB. A0. AD. A.

Dengan data terse-ut didaatkan7 - J > "$ 6*

AF.a J $5 AC.

r J $5

Persamaan ,inear kur/a ka,i-rasi7 A1.

y J a  -> AI. y J  >

A. Keterangan Keterangan 7 AK.

a J interse

- J s,oe

> J konsentrasi 8m9

y

J seraan 8A9 A3. A+.

*( Data Serapan Sampel

A2. A4. am ke6

Ta-e, #. Data seraan same, ada  ma> ma> *(& nm AP.Sera  an

AE.

AR.

0

8A9

8

AS.

0L

  6 0L

8

m9 A<."(%$

A.

0

8m9

m9

AT. $5#&

A!.

AH.$5&$

"5*&# A.

BA.

"")& BB.

BD.

"5($$ B.

"#$# BF. ""'#

""*& BC.

BK.

"$:& B3.

B+.

6

6 BE.

BR.

6

B!.

6 B<. B<.

B.

6

6 0A.

0B.

6

0C.

6

"5$ BI. #5 #5$

"5#'" B. $5:% *

B2. *5$ BS.%5$

B4. $5:#& BT.$5)% &

'&# BP. '"#

BG.

BH. BH.

%*& B.

:5$ 00.

$5)"& 0D.

&:( 0.

"#5$

$5*:*

(%(

6 0F. 6

AG.

" '&

B0.

& )

B1.

' )

01. ,!( Perhitungan Analisis

0. Kur/a Kur/a hu-ung hu-ungan an antara antara konsen konsentras trasii o-at o-at da,am da,am ,asma ,asma terhada terhada waktu waktu daat di,ihat ada ,amiran 8kertas semi,og9. Dari hasi, ektrao,asi5 didaatkan7 0K. A J "":# MgNm,

B J #*$ MgNm,

03. Kdistri-usi d istri-usi  J a

K e,iminasi e,iminasi  J -

0+. •

Konstanta ,iminasi 02. - J ,n 0" 6 ,n 0# 04.

0P.

t# 6 t" J ,n %*& O ,n (%( 0E.

,R(

•

"# 6 :

 - 0 &1213 -am

41

Konstanta Distri-usi ,S(

aJ

,n 0" 6 ,n 0# 0T.

0!.

t# O t" J ,n "(%$ 6 ,n ""'# 0<.

,5(

" O $5#&

a 0 &167& -am

41

,8( •

aktu Paruh 0H. 0H. t = J $5%:( $5%:( J $5%:( $5%:( J 93132 -am. 0.

-

$5":"%

DA. •

Persamaan Farmakokinetik DB.

0  J A e6at  B e6-t

D0.

0  J e6$5"')$t   e 6$5":"%t

DD.

0  J e6$5"')$>(5%"%:  e  6$5":"%>(5%"%: D$(

 J g;ml

DF. •

A!0 8Area !nder 0ur/e9 DC. A!0 J A  B J "":# "":# 

#*$ J 73%32'1% g(-am;ml

D1.

a

-

$5"')$

$5":"%

DI. •


J

D3. D+. •

&$$$$$ &$$$ $$ Mg

%**$5%'%) µg.jam/ml > $5":"% Njam

A!0.-


D2 . •

J '&<17'7 ml

B

#*$ MgNm,

K,irens D4.

0, J - >
DP.

J $5":"% jam > *$&5")*) m,

D=(

0 77391< ml;-am

DR(

Perhitungan UP UPK >U >U-i Pe Perolehan Ke Kembali?

DS.

Ta-e, *. 1asi 1asi,, Per Perhi hitu tung ngan an !PK dan Kesa, esa,ah ahan an Sist Sistem emat atik  ik 

DT(Konsent rasi

DU( Serapan

>ppm?

DH. DH.

#

D.

&

"5$$* ."5$&

&$

D. $$ I. "$$$

>A?

$ . "5(#

D#(Kada r teruk  ur >ppm ?

D5( UPK  >@ ?

A. ':.**%5':

B.%5( #

F. :*.#(

C. "#5

&5)"

)'

K. "#(.$)#5) %

)

3. #:5

')

D8( Kesala han sist em ati k  >@ ? 0.:(5 %'

1. ')5## +. )$5"(

2. 4.

Pero,ehan Kem-a,i

J "$$? J R?

P.Kesa,ahan P. Kesa,ahan sistematik E.

J "$$? 6 R?

>

$R( Konsentrasi "$ m

J

$5"() 6 $5$%$% J "&'5'( m S. *5'" . "$ 6*

T. !.

!PK J <. .

G.

> "$$? J "$5$&# > "$$? J %5(#? "&'5'(

Kesa, esa,ah ahan an sist sistem emat atik ik

J "$$? $$? 6 %5(#? 5(#? J :(5% :(5%' '?

H. H. . Konsentrasi "$$ m

J

$5*(: O $5$%$% J )'%5': m FA. FA. *5'" . "$ 6*

FB.

F0. !PK J "$$5&# > "$$? J "#5)'? FD. )'%5%: F. F. Kesa, esa,ah ahan an sist sistem emat atik ik J "$$? $$? 6 "#5)' #5)'? ? J ')5# )5##? FF. FC. Konsentrasi &$$ m J $5')$ O $5$%$% J "%'#5)* m F1. *5'" . "$ 6* FI.

#!(

F. !PK J &$ &$#5% > "$$? J #:5')? FK. "%'#5)* F3. F3. Kesa, esa,ah ahan an sist sistem emat atik ik J "$$? $$? 6 #:5' :5')? J)$ J)$5"( 5"(? F+. P$*A+ASA" F2. F2.

Pada Pada ra rakt ktik ikum um ka, ka,ii ini ini rak rakti tika kan n me,a me,aku kuka kan n er eroo-aa aan n meng mengen enai ai

ana,isa o-at da,am darah. Tujuan dari raktikum ini ada,ah menetakan kadar   arasetamo, da,am darah yang terdaat sejum,ah arasetamo, yang di-uat da,am konsentrasi tertentu5 dan disiakan da,am waktu sekitar "# jam. jam . Same, darah yang di ukur ada ) -uah yaitu untuk untuk ana,isa ada ada jam ke $5#&@ $5&@ "5$@ #5$@ *5$@ %5$@ :5$ dan "#5$. F4.

4-at yang akan diana,isa ada,ah arasetamo,. Prinsi Prinsi  yang yang

digunakan da,am menetakan kadar arasetamo, da,am darah yaitu em-entukan garam garam diazo diazoni nium um dari dari gugu guguss amin amin aroma aromati tiss seku sekund nder er yang yang terda terdaa att ada ada  arasetamo,. Pem-entukan garam diazonium di,akukan dengan ter,e-ih du,u gugus amin sekunder ini dihidro,isis menjadi amin aromatis rimer. Pem-entukan

garam diazonium terjadi aa-i,a suhu ero-aan5 -aik itu suhu same, dan reagen5  -erkisar antara &6"&0. FP.

Pada ero ro-aan aan ka,i a,i ini di-utuhkan reag eagen -erua T0A5 10,5

 2a24#5 Asam Asam Su,fam Su,famat5 at5 dan 2a41. 2a41. Same, Same, darah darah harus harus diisah diisahkan kan ter,e-i ter,e-ih h dahu,u dahu,u dari rotein6ro rotein6rotein tein darah dengan dengan menggunak menggunakan an T0A. T0A -erfungsi untuk mengendakan rotein darah sehingga didaatkan airan jernihNsuernatan yang yang

digu diguna naka kan n

untu untuk k

ros roses es

se,a se,anj njut utny nya. a.

Sue Suern rnat atan an

yang ang

die diero ro,e ,eh5 h5

ditamditam-ahk ahkan an 10, untuk untuk menghi menghidro dro,isi ,isiss gugus gugus amin amin sekund sekunder er menjad menjadii amin amin aromatis aromatis rimer rimer ada arasetamo,. arasetamo,. Cugus Cugus terse-ut terse-ut akan -ereaksi dengan 2a24 # memmem-en entu tuk k

gara garam m

diaz diazon oniu ium. m. Pena Penamm-ah ahan an asam asam su,f su,fam amat at ada ada reak reaksi si

se,anjutnya se,anjutnya akan mem-entuk mem-entuk -anyak -anyak -usa. -usa. Asam Asam su,fama su,famatt ini -ergu -erguna na untuk  untuk  mem-erikan mem-erikan suasana asam kuat ada reaksi diazotasi sehingga garam diazonium  -isa ter-entuk semurna. Penam-ahan 2a41 "$? -ertujuan untuk menetra,kan asam. Berdasarkan erhitungan ana,isis dan grafik yang diero,eh5 menunjukkan kadar arasetamo, yang semakin menurun mem-entuk garis yang tidak ,inear  sehingga daat disimu,kan -ahwa em-erian o-at ini ada,ah seara intra/ena  -o,us 8dua komartemen9. Dari grafik ini,ah daat ditentukan ni,ai
Se,ain

menetakan

kadar

arasetamo,

da,am

darah5

 raktikan juga me,akukan uji ero,ehan kem-a,i 8!PK9 dan menghitung ni,ai kesa,ahan kesa,ahan sistematik sistematik dengan dengan konsentrasi konsentrasi "$5$&# m@ "$$5&# "$$5&# m@ dan &$#5% &$#5%  m. 2i,ai !PK dan kesa,ahan sistematik s istematik yang kami daatkan menunjukkan ni,ai kesa,ahan sistematik yang -egitu -esar. Kesa,ahan ini kemungkinan dise-a-kan o,eh -e-eraa ha, yaitu7 ". Kurang Kurang hati6hati hati6hatinya nya raktikan raktikan da,am menam-ahka menam-ahkan n reagen. reagen. #. Kesa,ah Kesa,ahan an da,am rosed rosedur ur em-aaa em-aaan n sektrom sektrometer eter !/ /is dimana dimana masih terdaatnya ge,em-ung udara di da,am ,arutan suernatan.

(. Kurang Kurang jernihnya jernihnya airan airan suernatan suernatan yang yang diiet5 diiet5 yang yang daat daat menggangg mengganggu u  engukuran a-sor-ansi. *. Suhu yang kurang kurang otima, otima, untuk untuk em-en em-entukan tukan garam diazon diazonium ium.. FS. #!!(

K$S!PULA"

a. k e J $5$(*& jam

6"

 -. k d J $5:&"" jam 6" . A J "% "%"$ Mg MgNm, d. B J )#$ Mg MgNm, Nm, e. 0  J (%$5"(: MgNm, f.

t = J #$5$' jam. am.

g.
A!0 A!0 J ##& ##&%# %#5( 5(*# *# Mg.j Mg.jam amNm Nm,,

 j.

0, 0 ##5"%" m,Njam

FT. F!. #!!! #!!!(( DAFT DAFTA AR PUST PUSTA AKA

F<. F<. +an +ansur sur5 !mar !mar..5 dkk. kk. #$"" $"".  Penuntun Praktikum Farmakokinetika. Farmakokinetika. Deok7 !ni/ersitas Indonesia. F.Sh F .Shar arg ge,5 e,5 3eon5 eon5 et. et. a,. a,. ":''. :''.  Biofarmasetika dan Farmakokinetika Terapan, edisi kedua. Sura-aya7 A;uadest,angga !ni/ersity Press. FG.

!8( LAP!RA" LAP!RA"

FH. FH. F.