EFEK DIURETIK DIURETIK EKSTRAK ETIL ASETAT DA UN WORTEL WORTEL (Daucus Daucus carota L.) PADA TIKUS PUTIH JA NTAN GALUR WISTAR DIURETIC EFFECT OF ETHYL ACETATE EXTRACT OF CARROT (Daucus Daucus carota L carota L.) .) LEAF IN WHITE MAL MALE E MICE WISTAR WISTAR STRAIN Mardiyono1, Yul Mariyah2, Elly Rovitasari3 Fakultas Farmasi, Universitas Setia Budi123 AB STRAK Indonesia memiliki keanekaragaman tanaman yang dapat dimanfaatkan untuk pengobatan, salah satunya adalah daun wortel (Daucus carota L.). Daun wortel secara tradisional dapat digunakan sebagai pelancar air seni (diuretik). Fungsi utama diuretik adalah untuk memobilisasi cairan udem, yang berarti mengubah keseimbangan cairan sedemikian rupa sehingga volume cairan ekstrasel kembali menjadi normal. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek diuretik ekstrak etil asetat daun wortel terhadap tikus putih jantan galur wistar. Serbuk daun wortel (Daucus carota L.) diekstrasi secara maserasi dengan pelarut etil asetat. Hewan uji yang digunakan sebanyak 25 ekor tikus jantan wistar, yang dibagi menjadi 5 kelompok perlakuan, yaitu perlakuan furosemid 4,32 mg/200 g BB ( kontrol positif), perlakuan CMC 0,5% (kontrol negatif) dan ekstrak etil asetat daun wortel dosis 150 mg/kg BB; 300 mg/kg BB dan 600 mg/200 g BB, diberikan peroral dengan volume pemberian 2,5 ml/200 g BB. Hewan uji dimasukkan ke dalam kandang metabolik, diukur volume urinnya pada jam ke- 6, 12, 18, dan 24. Efek diuretik secara keseluruhan dapat dilihat dari hasil analisis data AUC (Area Under the Curve). Data yang diperoleh dianalisis dengan anova satu jalan taraf kepercayaan 95%, kemudian dilakukan uji LSD ( Least Significant Difference). Hasil penelitian menunjukkan bahwa pada harga AUC 0-24, AUC 6-12dan harga AUC 12-24 waktu pengamatan terhadap urin menunjukkan ekstrak etil asetat daun wortel (Daucus carota L.) dengan dosis 150 mg/kg BB; 300 mg/kg BB dan 600 mg/200 g BB berbeda makna (p<0,05) dengan kontrol negatif, sehingga dapat dikatakan bahwa ekstrak etil asetat daun wortel mempunyai efek diuretik. Pada dosis 600 mg/200 g BB mempunyai efek diuretik yang optimal. Kata kunci: diuretik, kunci: diuretik, ekstrak etil asetat, daun wortel (Daucus carota L.) AB STRACT Indonesia has diversity of plants that can be utilized for treatment, one of which is carrot (Daucus carota L.) leaf. carrot leaf traditionally can be used as urine emetic (diuretic). The main function of diuretic is to mobilize edema fluid, which means changing fluid balance be such that extracellular fluid volume returned into normal. This research aims to know the diuretic effect of ethyl acetate extract of carrot leaf against white male mice wistar strain. Carrot (Daucus carota L.) leaf pollen extracted by maceration with ethyl acetate solvent. Animal tests used as many as 25 wistar male mice, which divided into 5 treatment groups, those are treatment of furosemide 4,32 mg/200 g BW (positive control), treatment of CMC 0,5% (negative control) and ethyl acetate extract of carrot leaf dose of 150 mg/kg; 300 mg/kg and 600 g/200 mg BW, given orally with volume of 2,5 ml/200 g BW. Test animals put in
metabolic cage, measured urine volume at 6 th, 12th, 18th, and 24th hour. Overall diuretic effect can be seen from the results of AUC (Area Under the Curve) data analysis. Data obtained were analyzed by one way ANOVA 95% significant level, then done LSD (Least Significant Difference) test. The results showed that the price of the AUC 0-24, AUC 6-12dan AUC 12-24 times the price of the observation of the urine showed ethyl acetate extract of carrot (Daucus carota L.) leaf with a dose of 150 mg / kg; 300 mg / kg and 600 mg/200 g BW different meaning (p <0.05) with a negative control, so it can be said that the ethyl acetate extracts of carrot leaves have a diuretic effect. On the dosage of 600 mg/200 g BW has optimum diuretic effect. Keywords: diuretic, ethyl acetate extract, carrot (Daucus carota L.) leaf
PENDAHULUAN Banyak tanaman sayur yang dapat digunakan sebagai tanaman obat, salah satunya adalah wortel (Daucus carota L.). Wortel merupakan tanaman sayur yang banyak kegunaannya bagi pelayanan kesehatan masyarakat di dunia. Selain kaya akan kandungan gizi, terutama vitamin A juga berkhasiat untuk penyembuhan berbagai penyakit (Rukmana, 1995). Penelitian sebelumnya Permana (2008) telah melakukan uji efek diuretik ekstrak etanol 70% pada daun wortel dengan dosis 0,15 g/kg BB, 0,30 g/kg BB, dan 0,60 g/kg BB. Hasil penelitian tersebut menunjukkan bahwa ekstrak daun wortel dengan dosis 0,15 g/kg BB, 0,30 g/kg BB, dan 0,60 g/kg BB mampu memberikan efek diuretik pada tikus putih jantan galur Wistar, dalam penelitian tersebut senyawa yang diuji bersifat polar. Penelitian kali ini menggunakan pelarut etil asetat dengan metode maserasi yang merupakan salah satu metode ekstraksi untuk perpindahan zat aktif yang semula berada di dalam sel, ditarik oleh penyari (Harbone, 1987). Berdasarkan pertimbangan tersebut perlu dilakukan penelitian uji efek diuretik ekstrak etil asetat daun wortel pada tikus putih (Rattus norvegicus) jantan galur Wistar. Metode ekstraksi dipilih berdasarkan beberapa faktor seperti sifat dari bahan mentah obat dan daya penyerapan dengan tiap macam metode ekstraksi dan keperluan dalam memperoleh ekstraksi yang sempurna atau mendeteksi sempurna dari obat atau simplisia (Ansel, 1989). Diuretik digunakan pada semua keadaan dimana dikehendaki pengeluaran urin yang banyak, seperti pada penderita penyakit hipertensi, udema, dan batu ginjal. Penyakit-penyakit tersebut termasuk menduduki urutan atas dalam morbilitas (pola penyakit) di Indonesia. Efek-efek samping utama dari diuretik yang sering terjadi adalah : Kehilangan kalium: Diuretik yang berkerja di muka tubuli sebagai distal ujung memperbesar ekskresi ion-ion K+ dan H+ karena ditukarkan dengan ion Na+, yang kadarnya 3mMol/liter. Gejala-gejala yang timbul berupa kelemahan otot, kejang-kejang, anoreksia obstipasi, kadang-kadang juga aritmia jantung tetapi gejala ini tidak selalu menjadi nyata (Tan dan Kirana 1986).
3
Retensi urat dan hi perurikemia: Dapat terjadi pada semua diuretik terkecuali amilorida. Hal ini disebabkan oleh adanya persaringan antara diuretik dengan asam urat mengenai trasportnya ditubuli. Terutama klortalidon dan memberikan resiko yang lebih tinggi untuk retensi urat dan serangan encok. (Tan dan Kirana, 1986). Mengurangi metabolisme gluko sa: Dapat terjadi diabetes (yang laten), mungkin karena menekan sekresi insulin terutama tiazid. Efek anti diabetika oral dapat diperlemah dengan adanya tiazid (Tan dan Kirana, 1986). Mempertinggi kadar kolesterol pada 15% kadar HDL dan trigliserida dengan masing-masing lebih kurang 6%: Kolesterol yang diaggap sebagai faktor pelindung terhadap penyakit jantung justru diturunkan, terutama oleh klortalidon. Pengecualian adalah indapamida yang praktis tidak mempengaruhi kadar lipida tersebut (Tan dan Kirana, 1986). Hiponatremia dan alkalosis : Akibat diuresis yang terlalu pesat dan kuat seperti halnya dengan diuretik lengkung maka kadar natrium plasma dapat menurun keras dan terjadilah hiponatremia. Gejala-gejalanya ialah gelisah, kejang- kejang otot, haus, letarghi (selalu mengantuk), dan kolaps, terutama orang-orang lanjut usia yang peka terhadap dehidrasi. maka sebaiknya diberikan dosis pemula yang rendah, yang berangsurangsur dipertinggi, atau obat diberikan secara berkala, misalnya 3-4 kali. (Tan dan Kirana, 1986). Efek samping yang lain : Gangguan lambung usus (mual, muntah, diare), rasa letih, nyeri kepala, pusingpusing dan jarang terjadi reaksi- reaksi kulit (Tan dan Kirana, 1986). Berdasarkan pustaka, dapat disusun hipotesis dalam penelitian ini yaitu pertama, ekstrak etil asetat daun wortel (Daucus carota L.), mempunyai efek diuretik pada hewan percobaan tikus putih (Rattus novergicus) jantan galur wistar. Kedua, pada variasi dosis tertentu ekstrak etil asetat daun wortel mempunyai efek diuretik yang optimal atau paling efektif. METODE PENELITIAN Bahan Serbuk daun wortel, tikus putih jantan galur wistar umur 2-3 bulan berat badan 100-300 g, furosemid murni, CMC 0,5%, etil asetat, akuades steril. Al at Panci, oven, blender, kompor, evaporator, timbangan hewan uji kepekaan 0,1 g, timbangan analitik (satorius) kepekaan 0,1 mg dan 0,01, spuit injeksi volume 5 ml, jarum oral tikus ukuran 15 ml Alat untuk uji farmakologi yaitu: jarum oral, spuit, timbangan tikus, labu takar 100 ml, kandang mencit, evaporator dan Sterling Bidwell.
4
Prosedur uji diuretik Rancangan percobaan yang digunakan dalam pengujian ini adalah rancangan acak lengkap pola searah menggunakan 25 ekor tikus yang diadaptasikan dengan keadaan laboratorium tempat penelitian dilakukan dan dipuasakan makan selama 24 jam sebelum perlakuan namun tetap diberi minum. Hewan uji dikelompokkan menjadi 5 kelompok uji dan tiap kelompok terdiri atas 5 ekor. Suspensi furosemid, suspensi CMC 0,5% dan ekstrak etil asetat daun wortel diberi sekali minum pada hewan uji. Pemberian dilakukan secara peroral dengan volume pemberian 2,5 ml / 200 g BB tikus. Masing-masing kelompok pada jam ke 6, 12, 18 dan 24 setelah perlakuan. Volume urin yang diukur adalah volume urin tiap waktu pengamatan dan volume urin kumulatif. Air minum diberikan sebanyak 2,5ml/200 g BB tiap jam untuk hewan uji secara peroral yaitu pada jam ke 6, 12, 18,dan pada jam ke 24 air minum diberikan sebanyak2,5 ml. Setelah jam ke 24 tikus tidak diberi minum. Selama perlakuan hewan uji tidak diberi makan. Identifi kasi kandungan senyawa ekstrak daun wortel Uji kualitatif kandungan senyawa kimia dilakukan terhadap ekstrak daun wortel meliputi uji adanya saponin, flavonoid, alkaloid, dan tanin. Metode Analisi s Data yang diambil pada uji diuretik adalah volume urin tiap waktu, volume urin kumulatif dari tiap hewan uji pada setiap kelompok perlakuan dan data konsumsi air minum kumulatif. Pengambilan data dilakukan pada jam ke- 6, 12, 18, dan 24 jam Setelah perlakuan, sedangkan volume air minum kumulatif yang dikonsumsi diukur pada jam ke-6 sampai jam ke-24 data yang diperoleh kemudian dijadikan sebagai luas daerah di bawah kurva (Area Under the Curve) dengan rumus trapesium yaitu:
[ AUC ]
tn tn -1
=
Vn - 1 + Vn (tn - tn - 1 ) 2
............................. ........... 1
Keterangan: AUC = Area di bawah kurva Vn = volume urin pada jam ke-n Vn-1 = volume urin pada jam ke- (n-1)
Perhitungan % daya diuretik dapat dilihat dengan rumus = % daya diuretik =
AUCp - AUCk x 100% AUCk
................................2
Keterangan : AUCp = AUC tiap perlakuan AUCkn = AUC kontrol negatif
Kemudian data AUC urin, data volume air minum kumulatif dan volum kumulatif diuji distribusi normalnya dengan uji kolmogrov-Smirnov. Data yang diperoleh terlebih dahulu diuji distribusi dan homogenitas variannya. Apabila data distribusi normal dan variannya homogen, lalu diolah secara statistik dengan anava satu jalan. Apabila ada perbedaan yang bermakna, dilanjutkan dengan uji least
7
significant difference (LSD) dengan taraf kepercayaan 95% menggunakan metode SPSS 12,0 (Schefler, 1987). HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil uj i kualitatif ekstrak etil asetat daun wort el Ekstrak daun wortel sebelum digunakan dalam penelitian, dilakukan identifikasi kandungan kimia ekstrak untuk memastikan adanya senyawa golongan flavonoid, saponin, tanin dan alkaloid setelah mengalami ekstraksi. Berdasarkan hasil tersebut menunjukkan hasil uji kualitatif ekstrak etil asetat daun wortel. Hal ini menunjukkan bahwa kandungan zat aktif yang terdapat pada daun wortel ekstrak etil asetat adalah saponin, tanin, dan flavonoid.
No 1
2 3
4
Tabel 1. Identifikasi kualitatif daun wortel Kandungan Identifikasi Pustaka kimia (Robinson, 1995) Saponin 1 ml larutan + 10 ml air di Kocok buih tetap ada kuat-kuat selama 10 menit, terbentuk buih yang mantap selama kurang labih 10 menit penambahan 1 tetes HCI2B buih tidak hilang Flavonoid Ekstrak + 1-2 ml methanol panas merah sampai +serbuk Mg +4-5 tts HCL 2N merah jingga Alkaloid Ektrak + 1ml HCL 2N +2 tetes endapan putih reagen meyer Kekuningan Ekstrak+ 1ml HCL 2N+5 tetes Bauchardat Tanin 1 g + 100 ml air panas diaduk hijau violet disaring. 5 ml larutan + FeCl3 5% b/v.
Pengamatan buih tetap ada
merah sampai merah jingga endapan putih kekuningan
hijau violet
Hasil u ji efek diuretik ekst rak etil asetat daun wortel Tabel 2. Rata-rata AUC dan persen d iuretik tiap perl akuan Kelompok perlakuan Kontrol negatif Kontrol positif Ekstrak etil asetat150mg/ 200gBB Ekstrak etil asetat300mg/ 200g BB Ekstrak etil asetat600mg/ 200 g BB
0-6
AUC rata-rata pada 6-12 12-18
18-24
0-24
% Diuresis
0,81±0,15
1,85±0,47
2,45±0,87
3,14±1,81
8,24±2,59
-
4,38±3,29
10,75±3,02
10,71±5,99
8,99±4,21
33,84±4,17
291,038±48,14
2,55±2,56
7,14±3,92
8,92±1,52
8,05±3,65
26,66±7,04
207,83±81,35
4,77±2,79
9,66±3,26
9,17±1,76
8,55±2,60
32,15±9,58
5,56±2,84
11,42±3,38
11,05±2,33
10,07±4,09
38,11±8,49
271,29±`110,69
340,02±98,09
Gambar 1. Histogram rata-rata AUC dan persen diuretik tiap perlakuan
Histogram di atas dapat menunjukkan urutan daya diuretik dari yang terkecil ke terbesar yang dihasilkan pada hewan uji adalah pada perlakuan ekstrak etil asetat 150 mg/200 g BB, ekstrak etil asetat 300 mg/200 g BB, kontrol positif dan terbesar pada ekstrak etil asetat 600 mg/200 g BB. Hal ini berarti kenaikan efek diuretik yang dihasilkan dipengaruhi oleh kenaikan dosis. Hasil daya diuretik dilakukan analisa Anova satu jalan diperoleh data yang berbeda secara bermakna (p=0,000), sehingga diperoleh nilai yang berbeda bermakna antara kontrol positif dengan ekstrak etil asetat 150 mg/200 g BB, 300 mg/200 g BB dan 600 mg/200 g BB. KESIMPULAN 1. Ekstrak etil asetat daun wortel (Daucus carota L.) mempunyai efek diuretik pada tikus jantan galur wistar. 2. Ekstrak etil asetat daun wortel (Daucus carota L.) dengan dosis 600 mg/kg BB yang mempunyai efek diuretik yang optimal dibandingkan dengan dosis 150 mg/200 mg BB dan 300 mg/200 g BB.
DAFTAR PUSTAKA Ansel, H. C., 1989, Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi, Edisi IV, 5, 607, Universitas Indonesia Press, Jakarta. Harbone. JB.,1987. Metode Fitokimia. Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan. Diterjemahkan oleh Kakasih Padmawinata dan Iwang Sudiro. Edisi II, Penerbit ITB, Bandung. 1-10, 47-102. Permana, K. 2007. Efek Diuretik Ekstrak Etanol Daun Wortel (Daucus carota L) Pada Tikus Putih Jantan Wistar [Thesis]. Surakarta: Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah. Rukmana, R. 1995, Bertanam Wortel 14-17 Kanisius . Jogjakarta.
Schefler, W.C.,1987, Statistika untuk biologi, farmasi, kedokteran dan ilmu yang bertautan, Terbitan ke-2, 131-142, Penerbit ITB, Bandung. Tan TH dan Rahardja K. 1986. Obat-Obat Penting dan Khasiat. Penggunaan dan Efek-efek Sampingnya. Edisi
