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Detección de salmonella sp

septiembre 7

2016

Detectar la presencia de microorganismos del genero Salmonella sp en muestras de alimentos, con el fin de evaluar evaluar su calidad. calidad. Y Abarca todos los microorganismos capaces de crecer en el medio Salmonella-Shigella (SS) a una temperatura entre 30-37ºC. Con los diferentes medios que se utilizan.

Fundamentos de los diferentes medio utilizados  para la identificación de salmonella.

Pre informe de microbiología

Aprendiz  Natalia Mariana Solano Solano Ricaurte

Instructor: María Mónica Gámez

Servicio nacional de aprendizaje (SENA) Ficha: 1025445 Control de calidad de alimentos

CBC

Fundamento del medio XLD (XILOSA-LISINA-DESOXICOLATO) La degradación a acido a partir de la Xilosa, lactosa y sacarosa  producen un viraje a amarillo del indicador Rojo de fenol. El tiosulfato y sal de hierro revelan la formación de H2S por la  precipitación del sulfuro de hierro negro en las colonias. Las  bacterias que descarboxilan la lisina, producen cadaverina, se reconocen por la presencia de un color rojo-purpúreo debido al aumento de pH alrededor de las colonias. El efecto inhibidor es muy débil.

Identificación de salmonella en XLD Las colonias típicas de la Salmonella son de color rojo con el centro negro debido a la producción de H2S .

Fundamento del medio macconkey Agar selectivo y diferencial para el aislamiento de Entero bacterias. El medio contiene sales biliares y cristal violeta que son inhibidores de la microbiota Gram positiva. La lactosa junto al indicador Rojo neutro sirven para la comprobación de la degradación de dicho azúcar, dividiendo el grupo en 2: Bacterias fermentadoras y no fermentadoras de Lactosa. Por fermentación de la lactosa, disminuye el pH alrededor de la colonia. Esto produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro), la absorción en las colonias, y la  precipitación de las sales biliares.

Identificación de salmonella en macconkey Las colonias fermentadoras de lactosa dan un color rosado. Las colonias no fermentadoras de lactosa son incoloras (salmonella)

Fundamento del medio HECKTOEN-ENTERICO (HE). El Agar HE es un medio de cultivo selectivo para la identificación de  bacterias intestinales patógenas. La alta concentración de sales  biliares inhibe el desarrollo de las bacterias Gram positivas. La Fucsina acida junto con el azul de Bromotimol reaccionan virando a amarillo al bajar le pH del medio por la acción de los ácidos  producidos a partir de la fermentación de los 3 hidratos de carbono (Lactosa, Sacarosa, Salicina) que contiene el medio. La combinación de tiosulfato y una sal de hierro dan una coloración negra a las colonias H2S positivas. Salmonella en agar HE

Las colonias de Salmonella spp. Son de color azul verdoso con típicos centros negros por el gas H2S.

Fundamento de las baterias bioquimicas Agar hierro de kliger (KIA) Es un medio sólido y diferencial. El fundamento se basa en la capacidad de fermentación de dos azucares (glucosa y lactosa), en la  producción de ác. sulfhídrico y en la producción de gas.

Identificación de salmonella en agar (KIA) La mayor parte de las salmonellas producen H2S. r esultado es K/A

Fundamento de la prueba del indol El indol es un compuesto que se genera mediante la desaminación reductiva del triptófano y esta reacción es llevada a cabo por algunas  bacterias que poseen las enzimas denominadas en su conjunto triptofanasas. Para detectar la producción de indol se utiliza el medio Caldo triptófano y la lectura de la prueba se realiza con el reactivo de Kovacs (alcohol isoamilo, p-dimetilaminobenzaldehído y ácido clorhídrico concentrado) con el que el indol producido reacciona generando una coloración rosa intensa .

Identificación de salmonella en indol

Fundamento de la prueba de oxidasa Los discos contienen oxalato de dimetil-para-fenilendiamina, el cual es el sustrato de la enzima oxidasa. Los microorganismos que  producen la enzima oxidasa se evidencian porque en presencia de oxígeno atmosférico y citocromo c, se oxida el sustrato presente en los discos a un compuesto de color rojo-fucsia.

Identificación de salmonella en prueba oxidasa Es negativa

Fundamento del voges proskauer

Esta prueba se realiza para determinar la capacidad de un microorganismo de fermentar la glucosa con producción de ácido  por la vía ácido mixta o con producción de un producto final neutro (acetoína) por la vía butanodiólica .

Identificación de salmonella en V/P  Negativo

Fundamento de la prueba de citrato Se usa para determinar si el organismo es capaz de utilizar el citrato como única fuente de carbono y compuesto amoniacales como única fuente de nitrógeno. El medio contiene citrato sódico, fosfato de amonio y azul de bromotimol como indicador; este se tornará azul cuando el medio se basifica. Las bacterias que metabolizan el citrato liberan iones amonio al medio (degradación del fosfato amónico) lo que provoca que este se alcalinice y el indicador vire azul.

Identificación de salmonella en citrato Es positivo

Fundamento del agar (LIA) Es un medio que sirve para demostrar la producción de dos enzimas: la lisina descarboxilasa y la lisina desaminasa, además la presencia de sales de hierro sirve para detectar la producción de H2S por algunos microorganismos. La descarboxilacion de la lisina ocurre en ambiente anaeróbico o sea en el fondo del tubo y se pone de manifiesto por la alcalinización del medio produciendo un viraje del indicador púrpura de bromocresol. La presencia de glucosa en los componentes del LIA determina primero una reacción de fermentación, produciendo acidificación y cambio de color del medio a amarillo y el pH favorable para la reacción de descarboxilacion que ocurre después, volviendo a su color violeta original la parte del fondo del tubo.

Identificación de salmonella la en LIA

Fundamento rojo de metilo Determinar la capacidad de un microorganismo para producir y mantener estables los productos terminales ácidos de la fermentación de la glucosa y vencer la capacidad amortiguadora del sistema. La prueba Rojo de metilo es cuantitativa para la producción de ácido y requiere que los microorganismos produzcan ácidos fuertes a partir de la glucosa, de forma que el medio del pH

descienda a menos de 4.4. Esta distinción puede hacerse a través del indicador Rojo de metilo que presenta color amarillo por encima de un pH de 5.1 y solo presenta color rojo cuando el pH desciende a 4.4.

Identificación de salmonella en M/R Positivo

Fundamento de la ureasa

Los microorganismos que poseen la enzima Ureasa tienen la capacidad de hidrolizar la urea contenida en el medio con  producción de amoniaco, para esta prueba se utiliza el caldo urea de Stuart o agar urea de christensen. El caldo Stuart está estabilizado con sales de fosfato a un pH de 6.8. El microorganismo en estudio debe producir cantidades relativamente grandes a fin de superar el sistema estabilizador del medio y elevar el pH del medio los suficiente como para virar el indicador (por encima de 8.0).

Identificación de la salmonella en agar urea  Negativo

Fundamento de movilidad (agar SIM) Me permite determinar la capacidad de movimiento por parte de un microorganismo

Identificación de salmonella en agar SIM_ movilidad Positiva

Fundamento del medio rambach Medio de cultivo cromogénico CHROMagar para detectar y aislar Salmonella SPP en muestras de alimentos

identificacion del medio rambach para salmonella

Fundamento del agar SS El agar SS es un medio altamente selectivo que inhibe el desarrollo de la mayoría de coniformes y permite el desarrollo de las especies de Salmonella y Shigella. La alta concentración de sales biliares y citrato se sodio inhibe a todas la bacterias Gram positivas y a algunas Gram negativas. La Lactosa es el único hidrato de carbono y el Rojo neutro detecta la producción de ácido. El tiosulfato de sodio es una fuente se azufre y las bacterias que producen H2S se detectan  por la presencia de un precipitado negro por el citrato férrico.

Identificación de salmonella en agar SS.