SERVICIO NACIONAL DE APRENDIZAJE CENTRO NACIONAL DE HOTELERÍA, TURISMO Y ALIMENTOS TECNÓLOGO PROCESAMIENTO DE ALIMENTOS LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA INFORME: S A L MON E L L A S P RESULTADO DE APRENDIZAJE: FICHA: 1131542 INTEGRANTES: María Camila Carranza
INSTRUCTOR: Camila Ubaque COMPETENCIA: Fecha practica: 21/02/17 Fecha entrega: 28/02/17
MARCO TEÓRICO INTRODUCCIÓN «salmonela» 1 en español) es un género un género de bacterias de bacterias que pertenece a la familia Enterobacteriaceae , formado por bacilos Gram bacilos Gram negativos, anaerobios facultativos, con flagelos con flagelos perítricos y que no desarrollan cápsula (excepto la especie S. typ ni esporas. Son bacterias Son bacterias móviles que producen ácido producen ácido sulfhídrico (H2S). Emplean glucosa Emplean glucosa por poseer una enzima especializada, pero no lactosa, y lactosa, y no producen ureasa producen ureasa ni tienen metabolismo fermentativo. fermentativo .
S almonella almonella (también
Para diferentes tipos de alimentos, existen distintos protocolos para el aislamiento de Salmonella, todos ellos son esencialmente similares en principio y emplean las etapas de pre enriquecimiento, enriquecimiento selectivo, aislamiento en medios de cultivos selectivos y diferenciales, identificación bioquímica y confirmación serológica de los microorganismos
OBJETIVOS Taxonomia: Objetivos generales Este procedimiento tiene por objeto explicar los pasos a seguir para realizar para realizar el ensayo Salmonella sp en alimentos y productos; empleando la técnica detección.
Objetivos específicos.
Analizar los resultados y compararlos con la norma Identificar las características de la salmonella para así identificar si hay presencia o no.
El género El género Salmonella es de taxonomía de taxonomía difícil, modificada en estos últimos años por el aporte de estudios moleculares de homología de ADN que han clarificado el panorama taxonómico de las enterobacterias. Para la bacteriología clínica, la Salmonella es un bacilo un bacilo patógeno primario (como Shigella, Yersinia y ciertas cepas de E. coli ), anaerobio facultativo, algunos móviles y no fermentan la lactosa. S. typhi es es la única serovariedad que no produce gas en la fermentación de los azúcares.
Prueba de reconocimiento Pre enriquecimiento: es el paso en donde la muestra es enriquecida en un medio nutritivo no selectivo, que permite restaurar las células de Salmonella dañadas, logrando de esta manera una condición fisiológica estable.
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INSTRUCTOR: Camila Ubaque COMPETENCIA: Fecha practica: 21/02/17 Fecha entrega: 28/02/17
Enriquecimiento selectivo: se logra a partir
no se resuelve y se debe tratar con antibióticos específicos.
de un medio de cultivo que conjunte dos condiciones, por un lado, debe incrementar las poblaciones de Salmonella y por otro inhibir otros microorganismos presentes en la muestra.
Selección en medios sólidos: este punto se deriva directamente del anterior y se utilizan medios selectivos, que restringen el crecimiento de otros géneros diferentes a Salmonella y que permitan el reconocimiento visual característico de colonias sospechosas. Identificación bioquímica: este paso permite la identificación genérica de los cultivos de Salmonella y la eliminación de cultivos sospechosos falsos.
MATERIALES, EQUIPOS, REACTIVOS Y MEDIOS DE CULTIVOS. Cajas de Petri con agar nutritivo Cultivo microbiano: Agar XLD Agar Bismuto Agar Mac Conkey Agar SIM Agar Citrato Agar TSI Caldo tetratianato Agua peptonada Cloruro de sodio Pipetas Mortero Muestra: Ala de pollo Incubadora Asas microbiológicas
Enfermedades causadas Salmonelosis
Es una enfermedad una enfermedad infectocontagiosa producida por enterobacterias enterobacterias del género Salmonella. Comprende un conjunto de cuadros clínicos cuya principal manifestación es la gastroenteritis la gastroenteritis aguda, una de las intoxicaciones alimentarias más comunes causadas por ingerir agua y alimentos contaminados,
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Activar agares Esterilizar los utensilios y agares Macerar la muestra Pesar 10 gr
Agregar la muestra en el agua peptona
Servi los agares en tubos (SIM, TSI y Citrato) y en cajas Petri (Mac conkey, bismuto y XLD) Dejar los agares servidos en los tubos en la nevera Dia 2: colocar 1 ml de la muestra en el Caldo tetratianato Dejar en incubadora de 35ºC por 24 h Tomar muestra de la bacteria y sembrarla en los agares de cajas Petri por 24 h a 35ºC Dia 3: Realizar pruebas de reconocimiento de bacterias: tinción de gram y conteo Tomar una muestra de la bacteria y sembrarla en agares de tubos incubar a 35ºC por 24 h
Fecha practica: 21/02/17 Fecha entrega: 28/02/17
mucosas; halo de precipitación.
AGAR HEKTOEN:
MICROORGANISMOS: Pseudomonas
Verdes hasta azuladas, planas, borde irregular.
AGAR BISMUTO SULFITO:
MICROORGANISMOS:
Salmonella, con excepción de Salmonella Centro negro, paratiphy A y Salmonella borde claro, poyorum precipitado negro con brillo metálico alrededor de las colonias (ojo de conejo, ojo de pez).
PRUEBA TSI CITRATO BISMUTO
REACCION Alcalino/Acido Alcalino/Acido con gas y H2S Negativo para salmonella Positivo para salmonella
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Para el Agar HEKTOEN se denotaron los colores verde y azul combinados.
Fecha practica: 21/02/17 Fecha entrega: 28/02/17
colonias verdes oscurecimiento
AGAR
Para el Agar BISMUTO SULFITO los bordes del tubo eran de color claro y en la superficie un brillo metálico, el resto del tubo mantenía un color negro.
con
poco
o
ningún
MacConkey:
El cristal violeta y las sales biliares inhiben el crecimiento de organismos gram positivos, lo que permite la selección y el aislamiento de bacterias gram negativas.
DISCUSIÓN: En la práctica de salmonella sp se 5trealizo de una manera eficaz, por lo cuales los resultados del pollo salieron positivos en la salminella sp, tuvimos inconvenientes al hacer la prueba de tinción de gran ya que no hubo gran cantidad de muestra de la salmonella sp para mirar los resultados por el microscopio Positivos para salmonella. La salmonella se encuentra en las aves crudas, los huevos, la carne vacuna y, algunas veces, en las frutas y vegetales sin lavar. También se puede adquirir tras manipular mascotas, especialmente reptiles.
AGAR XLD: es un medio moderadamente selectivo y de diferenciación para el aislamiento y la diferenciación de patógenos entéricos gram negativos (Salmonella y
CONCLUSIONES Los resultados fueron favorables para la prueba de salmonella sp como podemos ver en la tabla de resultados que en el agar XLD se presentó un microorganismo llamado KLEBSIELLA, en el agar HEKTOEN se presentó un microorganismo llamado Pseudomonas y en el último agar bismuto se presentó un microorganismo llamado salmonella sp, es decir que el pollo que se
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http://aprendeenlinea.udea.edu.co/revistas/ind ex.php/iatreia/article/viewFile/3783/3500 http://www.elika.net/datos/pdfs_agrupados/Doc umento82/1.Salmonella.pdf http://www.scielo.org.co/pdf/bio/v24n1/v24n1a1 1.pdf
Fecha practica: 21/02/17 Fecha entrega: 28/02/17