ANÁLISE DE ALIMENTOS PRÁTICA DETERMINAÇÃO DO TEOR DE CARBOIDRATOS DETERMINAÇÃO DO TÍTULO DA SOLUÇÃO DE FEHLING 1. FUNDAM FUNDAMENT ENTAÇÃO AÇÃO TEÓRIC TEÓRICA A - O título ou fator de Fehling é determinado para verificação da especificidade destes em relação aos açúcares redutores. - Os rea reati tivo voss são são prep prepar arad ados os de ma mane neira ira que que 10mL 10mL dos dos me mesm smo o (10mL de A e 10mL de B) tenham ação compatível com o poder red reduto utor de 10mL 10mL de uma uma soluç oluçã ão padr padrã ão de aç açúc úcar ar red redutor utor (normalmente a glicose) numa concentração de 0,5g%. - Cada 10mL dos reativos de Fehling (10mL de A mais 10mL de B) serão reduzidos teoricamente por 10mL da solução padrão 0,5g% de glicose. - Cada 100mL do padrão de glicose contém 0,5g de glicose (0,5g%), portanto cada 10mL contém 0,05g de glicose. Assim, o valor título do reativo deverá ser 0,05.
2. MATERIAL: béqueres de 250Ml, pipetas volumétricas de 10mL, bico de bunsen, buretas, pedaços de porcelana ou pérolas de vidro. Reagentes: soluções A e B de Fehling, sol. de glicose 0,5g%, azul de metileno. 3. PROC PROCED EDIM IMEN ENTO TO - Acertar o volume da bureta com a solução padrão de glicose 0,5g% - Preparar um béquer de 250mL com 10mL de solução A e 10mL de solução B - Adicionar 2 gotas de azul de metileno e alguns pedaços de porcelana ou pérolas de vidro - Titular as soluções do béquer sob fervura até o ponto de viragem (marrom tijolo)
4. CÁLCULO
mL de glicose gasto x 0,5 =Título de Fehling (T) 100
*Obs: quando utiliza-se volumes de solução A e B na ordem de 10mL, utiliza-se T (valor inteiro) na fórmula para o cálculo de concentração de açúcares. Quando utiliza-se volumes de solução A e B na ordem de 5mL, utiliza-se T/2 (valor pela metade do título.
DETERMINAÇÃO DE AÇÚCARES REDUTORES 1. MÉTODO: Fehling – Lane Eynon 2. AMOSTRA: 3. FUNDAMENTO: fundamenta-se no poder redutor de soluções neutras de mono e dissacarídeos quando em presença de soluções alcalinas de metais pesados como por exemplo o cobre. 4. REATIVO DE FEHLING: é compostos de duas soluções, uma solução cúprica de sulfato (A), e outra tártaro alcalina (B). As duas soluções são guardadas separadamente para maior estabilidade das mesmas. Quando mistura-se quantidades equimolares das soluções e adicionamos a amostra preparada contendo açúcares redutores, o cobre II do reativo A é reduzida a carga I. A reação ocorre em meio alcalino (reativo B) entre os açúcares redutores e o cobre II. O sulfato cúprico dá lugar ao óxido cuproso que apresenta cor marrom tijolo, cor do ponto de viragem. Solução A = sulfato cúprico (cobre II) Solução B = tartarato duplo de sódio e potássio.
5. MATERIAL: béqueres de 250Ml, pipetas volumétricas de 5 e 10mL, bico de bunsen, balões de 100 e 250mL, funil, papel filtro, balança, buretas, pedaços de porcelana ou pérolas de vidro. Reagentes: soluções A e B de Fehling, sol. de ferrocianeto de potássio 15%, sol. de sulfato ou acetato de Zn 30%, NaOH 40%, HCl concentrado, fitas de pH, azul de metileno. 6. PROCEDIMENTO a. Pesar aproximadamente 5g da amostra em béquer pequeno b. Transferir lavando com água para um balão volumétrico de 200 ou 250 mL c. Utilizar água suficiente para retirar todo resíduo do béquer mas NÃO completar ainda o volume do balão d. Adicionar 2mL de ferrocianeto de K e agitar e. Adicionar 2mL de sulfato ou acetato de Zn e agitar f. COMPLETAR o volume g. Deixar sedimentar por 5 minutos h. Filtrar em erlenmeyer g. Completar a bureta com o filtrado (GUARDAR A SOLUÇÃO QUE SOBROU) h. Preparar um béquer de 250mL com 5mL de solução A e 5mL de solução B e pedaços de porcelana ou pérolas de vidro i. Adicionar 1 gota de azul de metileno (indicador) j. Levar ao bico de bunsen e aguardar fervura l. Titular as soluções do béquer com o filtrado obtido em h até que a cor azul torne-se totalmente marrom tijolo (ponto de viragem) 7. CÁLCULO Açúcares redutores = 100 x D x T/2* % * Usa-se T/2 quando o vol. de Fehling for de 5mL VxP D = volume de diluição, volume do balão usado para a diluição V = volume de amostra gasto na titulação P = peso da amostra DETERMINAÇÃO DO TEOR DE AÇÚCARES REDUTORES TOTAIS
1. MÉTODO: Fehling – Lane Eynon 2. AMOSTRA: 3. PROCEDIMENTO: a partir da solução de filtrado obtido na primeira metodologia - Aliquotar 50mL da solução que resta do item g na metodologia anterior - Colocar em balão de 100mL - Adicionar 2mL de HCl concentrado - Levar ao BM por 1 hora a 60 0C - Retirar do BM e resfriar na torneira - Neutralizar com NaOH 40%, utilizando fita de pH para verificar a ausência de acidez - Completar o volume - Completar a bureta com a solução obtida
- Preparar um béquer de 250mL com 10mL de solução A e 10mL de solução B - Adicionar pedaços de porcelana ou pérolas de vidro e 2 gotas de azul de metileno - Titular as soluções de Fehling sob fervura com a amostra até ponto de viragem (marrom tijolo) 4. CÁLCULO Teor de açúcares redutores totais= 100 x D x T* x 0,95% x 2 VxP * Usar T quando o volume de Fehling for 10 mL D = volume de diluição, volume do balão usado para a diluição T = título de Fehling (fator da solução), consta no rótulo da solução V = volume de amostra gasto na titulação P = peso da amostra 0,95 = fator de conversão de hexoses para sacarose 2 = segunda diluição que foi feita com 50mL da amostra em balão de 100mL (50/100 = ½)
