COLORACION CELULAR SIMPLE Y COMPUESTA I. II. III.
INTRODUCCION OBJETIVOS MARCO TEORICO
COLORACIÓN: Es el proceso de teñir artificialmente los microorganismos con colorantes o
reactivos para facilitar su estudio estudio microscópico forma, agrupación y estructuras. Un colorante es un compuesto orgánico que consta de anillos bencénicos y grupos cromóforos (agrupación de átomos que da color a ciertos compuestos) y auxocromos (sustituyentes como el grupo oxidrilo o el amino que mejoran las características de absorción del cromóforo). En el laboratorio de microbiología se pueden usar los colorantes de varias formas como: a) Para teñir bacterias y hacerlas visibles al microscopio. b) Para la identificación de microorganismos en base a sus características de tinción, por ejemplo, si son o no alcohol-ácido resistentes, si son Gram positivas o Gram negativas. c) En los medios de cultivo para inhibir el desarrollo de algunas bacterias y así poder estudiar selectivamente a los microorganismos que si crecen. Los colorantes más utilizados: azul de metileno, cristal violeta, safranina, ácido pícrico, lugol y la hematoxilina. Son catiónicos y se combinan fuertemente con componentes celulares cargados negativamente, como los ácidos nucleicos y los polisacáridos ácidos.
TIPOS DE COLORACIONES
DIRECTA: se producen por inmersión en el baño colorante. INDIRECTA: en este tipo de coloración, el colorante no puede actuar directamente, el objeto que ha e colorarse debe ser tratado de antemano por otra sustancia que lo prepare para admitir el colorante, esta se llama mordiente. CLASIFICACION DE LOS COLORANTES:
a) Colorantes naturales: como la hematoxilina, el carmín y la orceina. b) Colorantes artificiales: como el azul de metileno, la safranina, azul de anilina, etc. SEGÚN SUS PROPIEDADES QUIMICAS: ejemplo la eosina, colorante cargado en forma negativa, se une a Colorantes ácidos: como por ejemplo componentes celulares cargados positivamente. Estos componentes cargados positivamente se denominan acidófilos, porque tienen afinidad por los colorantes ácidos. Colorantes básicos: como por ejemplo el azul de metileno, colorante cargado positivamente, se
une a componentes celulares cargados negativamente. Estos componentes cargados negativamente se denominan basófilos, porque tienen afinidad por los colorantes básicos. Por ejemplo, estos colorantes se unen al núcleo y ciertas regiones del citoplasma.
Como caso particular, la hematoxilina no tiene carga, para teñir un tejido se la une a un mordiente que junto a la hematoxilina forman una laca. La laca es básica y por lo tanto se une a cargas negativas de la célula o matriz extracelular.
Colorantes neutros: son colorantes en los que la porción ácida y la básica colorean. Tiñen las
partes básicas de una célula de un color y las partes ácidas de otro. Tiñen el núcleo de un color y el citoplasma de otro. Ej. El eosinato de azul de metileno.
Colorantes indiferentes: tiñen aquellas estructuras o sustancias que los disuelven más fácilmente
que el líquido en que están preparados. Un ejemplo es el colorante sudan, un colorante de lípidos.
TINCIÓN:
Es el proceso por el cual las moléculas de un colorante se adsorben a una superficie. El uso de colorantes permite cambiar el color de las células de los microorganismos y poder realizar la observación en microscopio óptico. De acuerdo a la reacción que ocurre, existen diferentes tipos de tinción: TINCIÓN SIMPLE:
Se entiende por tinción (o coloración) simple al teñido de los microorganismos aplicando sólo una solución colorante. Este tipo de tinciones pueden ser positivas o negativas. TINCIÓN COMPUESTA o diferencial:
Aunque existen múltiples tipos de tinciones, aquí vamos a referirnos a los dos métodos de coloración compuesta más comúnmente empleados en la práctica corriente del laboratorio de microbiología: la tinción de Gram y la de Ziehl-Neelsen. Estas coloraciones permiten diferenciar las bacterias incluso cuando tienen igual forma y tamaño, por esta razón es una “tinción diferencial”.
TINCIÓN DE GRAM Elaborada por Hans Christian Gram en 1884, es la más empleada en bacteriología. La propiedad de la grampositividad depende de la naturaleza y composición química de la pared o parte de ella. Se han propuesto varias teorías para su explicación, pero la más aceptada es la que sostiene que las bacterias gramnegativas son más permeables al alcohol debido a su alto contenido en lípidos. Cuando la bacteria se tiñe con el complejo colorante básico-mordiente, éste queda atrapado en las bacterias grampositivas y no puede ser arrastrado por el decolorante a causa de la naturaleza físico-química de su pared. Por el contrario, en las gramnegativas es arrastrado debido a su alto contenido lipídico. IV. V.
MATERIALES Y METODOS RESULTADOS
VI. VII. VIII.
DISCUSION CONCLUSION REFRENCIAS BIBLIOGRAFICAS ANEXO
