Bilirubin Serum Posted by Riswanto on Wednesday, December 23, 2009 Labels: Tes Kimia Darah Bilirubin adalah pigmen kuning yang berasal dari perombakan heme dari hemoglobin dalam proses pemecahan eritrosit oleh sel retikuloendotel. Di samping itu sekitar 20% bilirubin berasal dari perombakan zat-zat lain. Sel retikuloendotel membuat bilirubin tidak larut dalam air; bilirubin yang disekresikan dalam darah harus diikatkan kepada albumin untuk diangkut dalam plasma menuju hati. Di dalam hati, hepatosit melepaskan ikatan itu dan mengkonjugasinya dengan asam glukoronat sehingga bersifat larut air. Proses konjugasi ini melibatkan enzim glukoroniltransferase.
Bilirubin terkonjugasi (bilirubin glukoronida atau hepatobilirubin) masuk ke saluran empedu dan diekskresikan ke usus. Selanjutnya flora usus akan mengubahnya menjadi urobilinogen dan dibuang melalui feses serta sebagian kecil melalui urin. Bilirubin terkonjugasi bereaksi cepat dengan asam sulfanilat yang terdiazotasi membentuk azobilirubin (reaksi van den Bergh), karena itu sering dinamakan bilirubin direk atau bilirubin langsung. Bilirubin tak terkonjugasi (hematobilirubin) yang merupakan bilirubin bebas yang terikat albumin harus lebih dulu dicampur dengan alkohol, kafein atau pelarut lain sebelum dapat bereaksi, karena itu dinamakan bilirubin indirek atau bilirubin tidak langsung. langsung. Peningkatan kadar bilirubin direk menunjukkan adanya gangguan pada hati (kerusakan sel hati) atau saluran empedu (batu atau tumor). Bilirubin terkonjugasi tidak dapat keluar dari empedu menuju usus sehingga akan masuk kembali dan terabsorbsi ke dalam aliran darah. Peningkatan kadar bilirubin indirek sering dikaitkan dengan peningkatan destruksi eritrosit (hemolisis), seperti pada penyakit hemolitik oleh autoimun, transfusi, atau eritroblastosis fatalis. Peningkatan destruksi eritrosit tidak diimbangi dengan kecepatan kunjugasi dan ekskresi ke saluran empedu sehingga terjadi peningkatan kadar bilirubin indirek. Hati bayi yang baru lahir belum berkembang sempurna sehingga jika kadar bilirubin yang ditemukan sangat tinggi, bayi akan mengalami kerusakan neurologis permanen yang lazim disebut kenikterus. Kadar bilirubin (total) pada bayi baru lahir bisa mencapai 12 mg/dl; kadar yang menimbulkan kepanikan adalah > 15 mg/dl. Ikterik kerap nampak jika kadar bilirubin mencapai > 3 mg/dl. Kenikterus timbul karena bilirubin yang berkelebihan larut dalam lipid ganglia basalis. Dalam uji laboratorium, bilirubin diperiksa sebagai bilirubin total dan bilirubin direk. Sedangkan bilirubin indirek diperhitungkan dari selisih antara bilirubin total dan bilirubin direk. Metode pengukuran yang digunakan adalah fotometri atau spektrofotometri yang mengukur intensitas warna azobilirubin.
Nilai Rujukan
total : 0.1 – 1.2 mg/dl, direk : direk : 0.1 – 0.3 mg/dl, indirek : indirek : 0.1 – 1.0 mg/dl DEWASA : total : total : 0.2 – 0.8 mg/dl, indirek : indirek : sama dengan dewasa. ANAK : total :
BAYI BARU LAHIR : total : 1 – 12 mg/dl, indirek : sama dengan dewasa.
Masalah Klinis
Bilirubin Total, Direk •
•
PENINGKATAN KADAR : ikterik obstruktif karena batu atau neoplasma, hepatitis,
sirosis hati, mononucleosis infeksiosa, metastasis (kanker) hati, penyakit Wilson. Pengaruh obat : antibiotic (amfoterisin B, klindamisin, eritromisin, gentamisin, linkomisin, oksasilin, tetrasiklin), sulfonamide, obat antituberkulosis ( asam paraaminosalisilat, isoniazid), alopurinol, diuretic (asetazolamid, asam etakrinat), mitramisin, dekstran, diazepam (valium), barbiturate, narkotik (kodein, morfin, meperidin), flurazepam, indometasin, metotreksat, metildopa, papaverin, prokainamid, steroid, kontrasepsi oral, tolbutamid, vitamin A, C, K. PENURUNAN KADAR : anemia defisiensi besi. Pengaruh obat : barbiturate, salisilat (aspirin), penisilin, kafein dalam dosis tinggi.
Bilirubin indirek •
PENINGKATAN KADAR : eritroblastosis fetalis, anemia sel sabit, reaksi transfuse,
malaria, anemia pernisiosa, septicemia, anemia hemolitik, talasemia, CHF, sirosis terdekompensasi, hepatitis. Pengaruh obat : aspirin, rifampin, fenotiazin (lihat biliribin total, direk) •
PENURUNAN KADAR : pengaruh obat (lihat bilirubin total, direk)
Faktor yang dapat mempengaruhi temuan laboratorium : Makan malam yang mengandung tinggi lemak sebelum pemeriksaan dapat • mempengaruhi kadar bilirubin. •
Wortel dan ubi jalar dapat meningkatkan kadar bilirubin.
•
Hemolisis pada sampel darah dapat mempengaruhi hasil pemeriksaan.
•
Sampel darah yang terpapar sinar matahari atau terang lampu, kandungan pigmen empedunya akan menurun.
•
Obat-obatan tertentu dapat meningkatkan atau menurunkan kadar bilirubin.
Bahan bacaan : 1. D.N. Baron, alih bahasa : P. Andrianto, J. Gunawan, Kapita Selekta Patologi Klinik (A Short Text Book of Clinical Pathology), Edisi 4, EGC, Jakarta, 1990. 2. E.N. Kosasih & A.S. Kosasih, Tafsiran Hasil Pemeriksaan Laboratorium Klinik , Edisi 2, Tangerang, 2008.
3. Frances K. Widmann, alih bahasa : S. Boedina Kresno, dkk., Tinjauan Klinis Atas Hasil Pemeriksaan Laboratorium, EGC, Jakarta, 1992.
4. Joyce LeFever Kee, Pedoman Pemeriksaan Laboratorium & Diagnostik , edisi 6, EGC, Jakarta, 2007. 5. Ronald A. Sacher & Richard A. McPherson, alih bahasa : Brahm U. Pendit & Dewi Wulandari, Tinjauan Klinis Hasil Pemeriksaan Laboratorium, Edisi 11, EGC, Jakarta, 2004.
22 June 2012 Uji Kadar Bilirubin Total & Direk : Metode Jendrassik & Grof
Uji Kadar Bilirubin Total &Direk : Metode Jendrassik & Grof 7.1
Tujuan 1. Untuk menentukan total bilirubin di dalam serum. 2. Untuk menentukan kadar direct bilirubin di dalam serum uji.
7.2
Metode yang Digunakan Metode yang digunakan dalam penentuan kadar bilirubin baik bilirubin total atau bilirubin
7.3
direct yaitu Jendrassik & Grof.
Prinsip Pemeriksaan Bilirubin adalah pigmen kuning yang berasal dari perombakan heme dari hemoglobin dalam proses pemecahan eritrosit oleh sel retikulo endotel. Disamping itu sekitar 20% bilirubin berasal dari perombakan zat-zat lain. Sel retikulo endotel membuat bilirudbin tidak larut dalam air; bilirubin yang disekresikan dalam darah harus diikatkan pada albumin untuk diangkut dalam plasma untuk menuju hati. Di dalam hati, sel hepatosit melepaskan ikatan itu dan mengkonjugasikannya dengan asam glukoronat sehingga bersifat larut air, dimana reaksi ini melibatka enzim glukoroni transferase (Joy ce, 2007). Bilirubin terkonjugasi masuk ke saluran empedu dan dieksresikan ke usus. Selanjutnya flora usus akan mengubahnya menjadi urobilinogen dan dibuang
melalui feses serta sebagian kecil dibuang melalui urine. Bilirubin yang terkonjugasi akan dengan cepat bereaksi dengan asam sulfanil yang terdiazotasi membentuk azobilirubin atau bilirubin langsung (direct bilirubin). Bilirubin terkonjugasi yang merupakan bilirubin bebas yang terikat albumin harus terlebih dahulu dicampur dengan alcohol, kafein, atau pelarut lain sebelum dapat bereaksi, dan sering disebut sebagai bilirubin tidak langsung (indirect bilirubin) (Joy ce, 2007). Peningkatan kadar bilirubin direct menunjukan adanya gangguan pada hati berupa kerusakan pada sel hati atau kerusakan pada saluran empedu (batu atau tumor). Bilirubin terkonjugasi tidak dapat keluar dari empedu menuju usus sehinga akan masuk kembali dan terabsorbsi ke dalam aliran darah. Sedangkan peningkatan kadar bilirubin indirect sering dikaitkan dengan peningkatan destruksi eritrosit (hemolisis), seperti pada penyakit hemolitik oleh autoimun, transfuse, atau eritroblastosis fatalis. Peningkatan destruksi eritrosi tidak diimbangi dengan kecepatan konjugasi dan ekresi ke saluiran empedu sehingga terjadi peningkatan kadar bilirubin indirect (Joy ce, 2007). Peningkatan kadar bilirubin yang berlebih dapat disebabkan oleh beberapa faktor diantaranya yaitu : 1.
Hemolisis akibat inkompaktibilitas ABO atau isoimunisasi Rhesus, defisiensi G6PD, sferositosis herediter dan pengaruh obat.
2.
Infeksi,
septicemia,
sepsis,
meningitis,
infeksi
saluran
kemih,
infeksi
intrauterine. 3.
Polisitemia.
4.
Ekstravasasi sel darah merah, sefalhematom, kontusio, trauma lahir.
5.
Ibu diabetes.
6.
Asidosis.
7.
Hipoksia/asfiksia.
8.
Sumbatan enterohepatik.
traktus
digestif
yang
mengakibatkan
peningkatan
sirkulasi
Dalam uji laboratorium, bilirubin diperiksa sebagai bilirubin total dan bilirubin direct. Sedangkan bilirubin indirect diperhitungkan dari selisih antara bilirubin total dengan bilirubin direct. Metode pengukuran yang digunakan adalah fotometri atau spektrofotometri yang mengukur intensitas warna azobilirubin. Nilai rujukan : DEWASA
:
Total : 0,1±1,2 mg/dL Direct : 0,1 ±0,3 mg/dL Indirect : 0,1-1,0 mg/dL ANAK : Total : 0,2±0,8 mg/dL Indirect : sama dengan dewasa BAYI BARU LAHIR : Total : 1±12 mg/dL Indirect : sama dengan dewasa (Joy ce, 2007)
Bilirubin Total dan Direct Peningkatan kadar dari bilirubin total dan direct dapat terjadi akibat ikterik obstruktif
karena
batu
atau
neoplasma
empedu,
hepatitis, sirosis
hati,
mononucleosis infeksiosa, metastasis hati, penyakit Wilson. Selain terjadi akibat penyakit dapat pula terjadi akibat penggunaan obat misalnya yaitu : antibiotik (amfoterisin
B,
tetrasiklin),
sulfonamide,
isoniazid),
klindamisin,
alupurinol,
eritromisin,
obat
diuretic
gentamisin,
antituberkulosis (asetazolamid,
linkomisin,
(asam
oksasilin,
paraaminosalisilat,
asametakrinat),
mitramisis,
dekstran, diazepam (valium), barbiturate, narkotik (kodein, morfin, meperidin), flurazepam, indometasin, metotreksat, metildopa, papaverin, prokainamid, steroid, kontrasepsi oral, torbutamid, serta vitaminA,C,K. sedangkan penurunan kadar dari bilirubin total dan direct dapat disebabkan karena anemia defisiensi
besi dan pengaruh obat seperti barbiturate, salisilat (aspirin), penisilin, kafein dalam dosis tinggi (Joy ce, 2007).
Bilirubin Indirect Peningkatan
kadar
dari
bilirubin
indirect
dapat
disebabkan
oleh
eritroblastosis fetalis, anemia sel sabit, reaksi tranfusi, malaria, anemia pernisiosa,
septicemia,
anemia
hemolitik,
talesemia,CHF,
sirosis
terdekompensasi, hepatitis, dan pengaruh obat seperti aspirin, rifampin dan fenotiazin. Sedangkan penurunan kadar bilirubin indirect disebabkan karena pengaruh obat (Joy ce, 2007). Pemeriksaan
bilirubin
dalam
urin berdasarkan
reaksi antara
garam
diasonium dengan bilirubin dalam suasana asam, yang menimbulkan warna biru atau ungu tua. Garam diazonium terdiri dari p-nitrobenzene diazonium dan ptoluene sulfonate, sedangkan asam yang dipakai adalah asam sulfosalisilat. Adanya bilirubin 0,05-1 mg/dL urin akan memberikan hasil positif dan keadaan ini menunjukan kelainan fungsi hati atau saluran empedu. Hasil positif palsu dapat terjadi bila dalam urin terdapat mefenamic acid, chlorpromazine dengan kadar yang tinggi, sedangkan negatif palsu dapat terjadi bila urin mengandung metabolit pyidium atau serenium (Joy ce, 2007). Faktor-faktor yang dapat mempengaruhi temuan laboratorium : 1.
Makan malam yang mengandung lemak tinggi sebelum pemeriksaan dapat mempengaruhi kadar bilirubin.
2.
Hemolisis pada sampel darah dapat mempengaruhi hasil pemeriksaan.
3.
Sampel darah yang terpapar sinar matahari atau terang lampu, kandungan pigmen empedunya akan menurun.
4.
Obat-obatan tertentu dapat meningkatkan atau menurunkan kadar blirubin (Joy ce, 2007). Metode pengukuran kadar bilirubin dapat dilakukan dengan menggunakan berbagai macam metode yaitu :
1.
Van den Bergh, Malloy dan Reaksi Evelyn
Metode ini digunakan reagen Ehlirch diazo, dimana reagen ini bila direaksikan dengan bilirubin direct dalam larutan berair akan membentuk kompleks senyawa berwarna merah muda sampai ungu dalam waktu 1 menit, sedangkan dalam larutan metil alcohol 50%, reagen Ehlirch diazo akan bereaksi dengan bilirubin total membentuk warna merah muda sampai ungu pada waktu penangguhan 30 menit (Anonim, tt). 2. Jendrassik & Grof Pada metode ini, serum atau plasma ditambahkan ke dalam larutan natrium asetat dan kefein-natrium benzoat. Natrium asetat berfungsi sebagai buffer pH pada reaksi diazo, sedangkan natrium benzoate-kafein berfungsi mempercepat kopling bilirubin dengan diazotized asam sulfanilic. Warna azobilirubin muncul dalam waktu 10 menit (Anonim, tt). 3.
ASTRA Metode ini merupakan modifikasi dari metode Jendrassik & Grof (Anonim, tt).
4.
ACA
-
Untuk bilirubin terkonjugasi : bilirubin terkonjugasi bereaksi dengan DSA dalam suasana asam membentuk kromofor merah. Absorbansi kromofor sebanding dengan bilirubin terkonjugasi yang terdapat di dalam serum. Pengukuran dilakukan pada panjang gelombang 540-600 nm. Conjugated bilirubin + DSA + H+ 6 Red chromophore (non-absorbing at 540 nm)
(absorbs at 540 nm) (Anonim, tt).
-
Untuk bilirubin total : bilirubin total akan bereaksi dengan DSA dalam suasana asam membentuk kromofor berwarna merah. Lithium deodesil sulfat (OSZA) digunakan untuk melarutkan bilirubin tak terkonjugasi. Absorbansi kromofor berbanding
lurus
dengan
bilirubin
dalam
menggunakan panjang gelombang 540-600 nm.
sampel
dan
diukur
dengan
(Anonim, tt). Prinsip pemeriksaan dari uji kadar bilirubin ini adalah reaksi bilirubin dengan asam sulfanilic diazotized akan membentuk kompleks azobilirubin. Kompleks warna yang terbentuk sangat tergantung pada pH,
pada suasana asam atau
netral akan terbentuk kompleks warna merah muda, sedangkan pada suasana basa akan terbentuk kompleks warna biru atau ungu.
(Anonim, tt)
7.4 a.
Alat dan Bahan Alat Tabung reaksi Pipet ukur Alat spektrofotometri
b.
Bahan Aquades Serum Asam sulfanilat Pereaksi diazo Methanol
7.5
Cara Kerja
Penentuan Kadar Bilirubin Total dalam Serum : Dibuat pereaksi diazo : 10 mL larutan asam sulfanilat dicampur dengan 0,3 mL Natrium Nitrit. ↓ Dicampur bahan uji dengan perbandingan sebagai berikut : Test (T)
Blanko (Bl)
Standar
Aquades (mL)
1
1
1
Serum/ plasma (mL)
0,1
0,1
0,1
Asam sulfanilat (mL)
-
0,3
0,1
Pereaksi diazo (mL)
0,3
-
0,3
Metanol (mL)
1,5
1,5
1,5
↓ Dicampurkan dan ditangguhan selama 30 menit. ↓ Dibaca dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 530 nm dengan titik nol aquades. ↓ Digunakan standar 10 mg%, dibaca absorbansinya pada
λ
530 nm.
↓ Prosedur nomor 2 dilakukan sebanyak 2 kali.
Penentuan Direct Bilirubin Dibuat pereaksi diazo : 10 mL larutan asam sulfanilat dicampur dengan 0,3 mL Natrium Nitrit. ↓
Dibuat campuran bahan uji dengan perbandingan sebagai berikut : Test (T)
Blanko (Bl)
Standar
Aquades (mL)
1
1
1
Serum / plasma (mL)
0,1
0,1
-
Asam sulfanilat (mL)
-
0,3
0,3
Pereaksi diazo (mL)
0,3
-
0,3
Metanol (mL)
-
-
0,1
↓ Dilakukan sebanyak dua kali prosedur di atas. ↓ Dicampur dan didiamkan selama 10 menit. ↓ Dibaca pada panjang gelombang 530 nm dengan titik nol aquades. ↓ Dicatat absorbansinya.
7.6
Hasil Pemeriksaan & Interpretasi Hasil Hasil Pengamatan Kadar Bilirubin Total Standar
= 0,015
Blanko A
= 0,020
Blanko B
= 0,033
Test A
= 0,042
Test B
= 0,017
Perhitungan :
Test A
Total bilirubin=
= = 14,67 mg % Test B
Total bilirubin =
= = - 10,667 mg % Perhitungan total bilirubin pada test B tidak dapat menunjukkan hasil karena menghasilkan nilai negatif.
Hasil Pengamatan Kadar Bilirubin Direct Standar
= 0,001
Blanko A = 0,014 Blanko B = 0,025 Test A
= 0,034
Test B
= 0,080
Perhitungan : Test A
Total bilirubin =
=
= 200 mg % Test B
Total bilirubin
=
= = 550 mg %
Interpretasi Hasil Fraksi terkonjugasi (direct bilirubin) adalah fraksi yang larut dalam air sehingga dapat diekskresi oleh ginjal. Ketika dilakukan perhitungan dengan metode Van den Bergh, total serum bilirubin total konsentrasinya 17 mmol/L atau 1 mg/dL, lebih dari 80% dari bilirubin total atau 5,1 µmol/L (0,3 mg/dL) adalah nilai normal direct bilirubin (Harrison’s Principles of Internal Medicine 17 th Edition). Peningkatan konsentrasi bilirubin total plasma (unconjugated/indirect bilirubin) menunjukkan adanya peningkatan produksi bilirubin total plasma, penyakit
hemolisis.
Sedangkan
peningkatan
konsentrasi
direct
bilirubin
menunjukkan kelainan hereditas, kerusakan sel-sel hati. Pada hasil perhitungan bilirubin total dan direct bilirubin yang didapat saat praktikum, test A memiliki nilai total bilirubin > 0,1 mg/dL, yaitu 14, 67 mg/dL, dan untuk test B, yaitu -10,667 mg/dL. Untuk test A, nilainya jauh melebihi batas normal, maka dapat dikatakan terjadi hemolisis eritropoesis pada pasien A. Sedangkan untuk test B, hasil yang didapatkan memiliki nilai negatif (-10,667 mg/dL), sehingga tidak dapat diinterpretasikan. Perhitungan untuk direct bilirubin, nilainya pada test A = 200 mg/dL, dan pada test B = 550 mg/dL. Nilai ini sangat tinggi sehingga ada kemungkinan pada kedua pasien mengalami kelainan hereditas.
7.7
Pembahasan Pada praktikum kali ini dilakukan penentuan kadar bilirubin total dan kadar bilirubin direct.
Reaksi bilirubin dengan asam sulfanilic diazotized akan
membentuk kompleks azobilirubin. Kompleks warna yang terbentuk sangat tergantung pada pH, pada suasana asam atau netral akan terbentuk kompleks warna merah muda, sedangkan pada suasana basa akan terbentuk kompleks warna biru atau ungu.
(Anonim,tt). Bilirubin merupakan pigmen kuning yang berasal dari perombakan heme dari hemoglobin dalam proses pemecahan eritrosit oleh sel retikulo endotel. Sel retikulo endotel membuat bilirubin tidak larut dalam air; bilirubin yang disekresikan dalam darah harus diikatkan pada albumin untuk diangkut dalam plasma untuk menuju hati (Joyce,2007). Dari hasil praktikum penentuan kadar total bilirubin dilakukan dengan menggunakan reagen diazo untuk membentuk kompleks warna yang nantinya dapat diukur dengan spektrofotometri. Penggunaan asam sulfanilat dalam reagen
diazo
ini
berfungsi
untuk
memberikan
suasana
asam
sehingga
membantu pembentuk kompleks warna, sedangkan penambahan metil alcohol berfungsi untuk memberikan suasana basa, sehingga kompleks yang terbentuk akan berwarna merah muda sampai ungu.
Larutan ditangguhkan selama 30
menit bertujuan agar garam diazonium bereaksi sempurna dengan bilirubin yang terdapat dalam
serum. Dari hasil
pengamatan didapatkan bahwa, nilai
absorbansi standar sebesar 0,015, blanko sebesar A 0,020 dan blanko B 0,033, dan absorbansi test A yaitu 0,042 test B yaitu 0,017 sehingga nilai total bilirubin A didapatkan sebesar 14,67 mg/dL, dan untuk test B sebesar -10,667 mg/dL, dimana nilai ini total untuk dewasa yaitu : 0,1±1,2 mg/dL. Hasil negatif pada test B mungkin disebabkan oleh kesalahan pada saat pengerjaan, seperti pemipetan yang kurang akurat sehingga kadar total bilirubin yang rendah terbaca. Peningkatan nilai ini diakibatkan karena beberapa faktor misalnya yaitu: 1.
Hemolisis akibat inkompaktibilitas ABO atau isoimunisasi Rhesus, defisiensi G6PD, sferositosis herediter dan pengaruh obat.
2.
Infeksi,
septicemia,
intrauterine. 3.
Polisitemia.
sepsis,
meningitis,
infeksi
saluran
kemih,
infeksi
4.
Ekstravasasi sel darah merah, sefalhematom, kontusio, trauma lahir.
5.
Ibu diabetes.
6.
Asidosis.
7.
Hipoksia/asfiksia.
8.
Sumbatan
traktus
digestif
yang
mengakibatkan
peningkatan
sirkulasi
enterohepatik. Dari hasil praktikum penetuan kadar bilirubin direct juga dilakukan dengan menggunakan reagen diazo dalam suasana asam dengan menggunakan asam sulfanilat. Bilirubin dalam serum jika direaksikan dengan reagen diazo akan dapat membentuk kompleks warna yang nantinya diukur intensitasnya dengan spektofotometri. Pada pengukuran ini dilakukan penangguhan larutan selama 10 menit yang bertujuan agar bilirubin bereaksi dengan garam diazonium dengan bilirubin yang terdapat di di dalam serum. Dari hasil pengamatan didapatkan absorbansi standar 0,001, blanko A 0,014, blanko B 0,025, test A 0,034, dan test B 0,080. Nilai rujukan untuk kadar bilirubin direct yaitu: 0,1 ±0,3 mg/dL. Dari hasil perhitungan, diperoleh nilai direct bilirubin yang sangat tinggi di atas normal, yaitu 200 mg/dL untuk test A dan 550 mg/dL untuk test B. Hasil ini dapat menunjukan keadaan kelainan fungsi hati atau saluran empedu. Hasil positif palsu dapat terjadi bila dalam urin terdapat mefenamic acid, chlorpromazine dengan kadar yang tinggi, sedangkan negatif palsu dapat terjadi bila urin mengandung metabolit pyidium atau serenium Peningkatan kadar bilirubin direct menunjukan adanya gangguan pada hati berupa kerusakan pada sel hati atau kerusakan pada saluran empedu (batu atau tumor). Bilirubin terkonjugasi tidak dapat keluar dari empedu menuju usus sehinga akan masuk kembali dan terabsorbsi ke dalam aliran darah ( Joy ce,2007). Selain dapat menentukan kadar bilirubin total dan bilirubin direct, juga dapat
ditentukan kadar
bilirubin
indirect,
kadar
bilirubin
indirect dapat
ditentukan dengan selisih dari kadar total dengan kadar bilirubin direct.
Nilai
rujukan untuk pengukuran kadar bilirubin indirect : 0,1-1,0 mg/dL. Peningkatan kadar bilirubin indirect sering dikaitkan dengan peningkatan destruksi eritrosit (hemolisis), seperti pada penyakit hemolitik oleh autoimun, transfuse, atau eritroblastosis fatalis. Peningkatan destruksi eritrosi tidak diimbangi dengan
kecepatan
konjugasi
dan
ekresi ke saluiran
peningkatan kadar bilirubin indirect (Joy ce,2007).
empedu sehingga terjadi
