UNIVERSIDAD NACIONAL JOSÉ FAUSTINO SÁNCHEZ CARRIÓN-BIOQUÍMICA
ACCIÓN DE LA LIPASA PANCREÁTICA MATERIALES:
Aceite de cocina
Frutaenzima (pastilla)
PRÁCTICA N°2- ACCIÓN DE LA LIPASA PANCREATICA
pipetas simples de 5 y10ml.
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Baño maría 37°C
Bureta de 50ml.
Matraces 125ml.
REACTIVOS
Buffer fosfato pH 8.0
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Hidróxido de sodio 0.1 N
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Hidróxido de sodio 0.01 N
Solución alcohólicas fenolftaleína
PROCEDIMIENTO: “Muestra con que se trabajará la experiencia: “ACEITE NEUTRALIZADO” 1. Neutralización del aceite: Colocar 50 ml. de aceite en un matraz, añadir dos gotas de solución alcohólica de fenolftaleína. Mezclar y agregar poco a poco Hidróxido de Sodio 0.01N hasta una coloración ligeramente rosada.
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2. Solución de pancreatina y sales biliares: para su preparación se hará uso de fármacos comerciales como el FRUTAENZIMA que contiene 200mg. de pancreatina y 50mg. de sales biliares.
Disolver 2 pastillas en 40 ml. de buffer fosfato pH 8.0
3. Hidrolisis del aceite (triglicéridos): seguir las indicaciones de siguiente cuadro.
SOL/TUBO
1
2
3
4
Aceite neut.
2
2
2
2
Buffer
4
4
---
4
H2O destilada
10
---
4
---
Sol. Enzima
---
10
10
10 (hervida)
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Agitar bien, si el color ligeramente rosado no persiste añadir Hidróxido de sodio 0.1N poco a poco agitando continuamente hasta obtener el color.
OBSERVACIÓN DE LOS TUBOS – RESULTADOS: 1 tubo de ensayo
PROCEDIMIENTO/RESULTADO
- El primer tubo de ensayo, se procedió a realizar todos los anteriores pasos ya vistos, a excepción de la solución de enzima. - Como observamos en la imagen final las soluciones se separaron; sin mostrar coloración alguna.
RESULTADOS: El gasto fue 6.5 ml
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2 tubo de ensayo
PROCEDIMIENTO/RESULTADO
- En el segundo tubo de ensayo se realizó todos los paso anteriormente citados según el cuadro; exceptuando el paso de agregar H2O destilada. - En la última imagen observamos se tornó de una coloración rosada bajo la solución de aceite. RESULTADOS: Se mantiene rosado.
3 tubo de ensayo
PROCEDIMIENTO/RESULTADO - En el tercer tubo de ensayo, realizamos los anteriores pasos ya citados en el cuadro; a excepción del paso de agregar el buffer. - En la última imagen vista no presentó ninguna coloración solo se separó.
RESULTADOS:
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Él gasto fue 3.5 ml
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1 tubo de ensayo
PROCEDIMIENTO/RESULTADO - En el primer tubo de ensayo se realizó todos los procedimientos excepto la agregación de solución enzimática, - En la última imagen observamos que la soluciones permanecían separadas, y luego se llevó a baño maría durante una hora.
RESULTADOS:
El gasto fue 1.3 ml
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CONCLUSIONES: - Las lipasas pertenecen al conjunto de hidrolasas. - Disgregar las grasas de los alimentos de manera que se puedan absorber correctamente. - Cataliza la hidrólisis de triacilglicerol a glicerol y ácidos grasos libres. - Las lipasas se encuentran presentes para la digestión de grasas, la reconstitución del organismo y el metabolismo lipoproteico. - EL hidróxido de sodio ayuda a que la solución se torne de un color ligeramente rosado.
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CUESTIONARIO: 1. ¿Qué papel asume el calcio y la lipasa en la digestión de los triglicéridos? El calcio facilita la absorción de otros nutrientes, se absorbe en el duodeno por transporte activo, este transporte es estimulado directamente por la vitamina D3. Lipasa su función principal es la de romper las grasas y triglicéridos durante la digestión humana y las convierten en ácidos grasos libres. La mayoría de las lipasas y sus respectivas actividades existe en la naturaleza, y que proporcionan la misma función en la digestión de los nutrientes en otros organismos.
2. ¿Cuáles son los productos de la acción de la lipasa pancreática? Fracciona las grasas (triglicéridos) a componentes más simples (ácidos grasos) que pueden absorberse en el intestino. El páncreas también segrega fosfolipasas que rompen los fosfolípidos y colesterol esterasa que degrada el colesterol esterificado a colesterol y ácidos grasos libres y 2-MAG .Todos estos compuestos lipídicos e insolubles en agua, se emulsionan por las sales biliares para que puedan procesarse.
3. ¿Qué otras lipasas existen? Las Sales biliares lipasa dependiente es secretada en el páncreas y las glándulas mamarias y ayuda en la digestión de las grasas. Jugos digestivos tales como la lipasa pancreática, lipasa gástrica y lipasa lingual trabajo con otras proteínas para generar actividad enzimática óptima en los diferentes órganos del cuerpo, mientras que lisosomales obras de lipasa dentro de las organelas. Endotelio basados lipasas tales como la lipasa hepática, la lipoproteína lipasa y la lipasa endotelial por otro lado ayudar a regenerar las lipoproteínas de baja densidad en la sangre con el fin de acomodar los ácidos grasos.
