417003_LAPORAN AKHIR PRAKTIKUM MAMIN KELOMPOK 4 FIXX.docx

LAPORAN PRAKTIKUM SANITASI MAKANAN DAN MINUMAN

Disusun Oleh : KELOMPOK 4

Dhea Pramesti Regita

25010115120008 25010115120008

Bintang Rumiris C

25010115120034 25010115120034

Linda Devega

25010115120068 25010115120068

Alifah Yumna Dearifin

25010115120070 25010115120070

Rosa Faradila

25010115120074 25010115120074

Karina Astari

25010115120080 25010115120080

Arsika Zuhrotul K

25010115130296 25010115130296

Intan Dwi Novita Hanum

25010115140300 25010115140300

SEMESTER V TAHUN AJARAN 2017/2018

LABORATORIUM KESEHATAN LINGKUNGAN

BAGIAN KESEHATAN LINGKUNGAN FAKULTAS KESEHATAN MASYARAKAT UNIVERSITAS DIPONEGORO SEMARANG 2017

HALAMAN PENGESAHAN

1. Judul Kegiatan

: Praktikum Sanitasi Makanan dan Minuman

2. Penyusun

: Kelompok 4

3. Laboratorium/bagian

: Laboratorium Kesehatan Lingkungan Lingkungan FKM UNDIP/ Bagian Kesehatan Lingkungan

4. Nama Mata Kuliah/SKS

: Laboratorium Kesehatan Lingkungan/ Lingkungan/ 3 SKS

5. Lokasi Kegiatan

: Fakultas Kesehatan Masyarakat UNDIP

6. Waktu Kegiatan

: 18 Oktober 2017 – 2017 – 14 14 November 2017

Semarang, 13 Desember 2017 Kepala Laboratorium

Dosen PJMK,

Bagian Kesehatan Lingkungan/ Laboratorium Kesmas FKM Undip,

Yusniar Hanani D., STP, M.Kes

Dr. Dra. Sulistiyani, M.Kes

NIP.197109091995032001 NIP.197109091995032001

NIP.196809111993032013 NIP.196809111993032013

ii

HALAMAN PENGESAHAN

1. Judul Kegiatan

: Praktikum Sanitasi Makanan dan Minuman

2. Penyusun

: Kelompok 4

3. Laboratorium/bagian

: Laboratorium Kesehatan Lingkungan Lingkungan FKM UNDIP/ Bagian Kesehatan Lingkungan

4. Nama Mata Kuliah/SKS

: Laboratorium Kesehatan Lingkungan/ Lingkungan/ 3 SKS

5. Lokasi Kegiatan

: Fakultas Kesehatan Masyarakat UNDIP

6. Waktu Kegiatan

: 18 Oktober 2017 – 2017 – 14 14 November 2017

Semarang, 13 Desember 2017 Kepala Laboratorium

Dosen PJMK,

Bagian Kesehatan Lingkungan/ Laboratorium Kesmas FKM Undip,

Yusniar Hanani D., STP, M.Kes

Dr. Dra. Sulistiyani, M.Kes

NIP.197109091995032001 NIP.197109091995032001

NIP.196809111993032013 NIP.196809111993032013

ii

KATA PENGANTAR

Puji dan syukur penulis ucapkan kehadirat Allah SWT atas ridho dan hidayah-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan laporan praktikum akhir yang berjudul Laporan Praktikum Sanitasi Makanan dan Minuman. Tujuan dari pembuatan laporan akhir ini adalah untuk memenuhi tugas mata kuliah Kesehatan Lingkungan semester lima pada Fakultas Kesehatan Masyarakat Universitas Diponegoro Semarang. Dapat tersusunnya laporan akhir ini tidak l epas dari bantuan dan dukungan dari banyak pihak. Untuk itu, pada kesempatan ini penulis ingin megucapkan terimakasih kepada: 1. Dr. Dra Sulistiyani, M.Kes selaku dosen penanggung jawab mata kuliah Laboratorium Kesehatan Lingkungan FKM Undip atas pemberian materi terkait praktikum sebagai dasar dalam melaksanakan praktikum. 2. Hanif Tegar Muktiana Sari, A.Md.,KL selaku asisten laboratorium terpadu kesehatan lingkungan FKM UNDIP yang telah membantu dalam pelaksanaan praktikum. 3. Asisten praktikum yang telah membimbing dan membantu dalam pelaksanaan praktikum dan penulisan laporan sementara. 4. Teman-teman Kesehatan Lingkungan FKM Undip 2018 yang telah membantu dan mendukung berjalannya praktikum. Sekian pengantar dari penulis. Mohon maaf apabila terdapat hal-hal yang kurang berkenan. Dalam penulisan laporan akhir ini, penulis percaya terdapat kekurangan dan jauh dari sempurna. Untuk itu, diharapkan kritik dan saran dari pembaca untuk dapat memperbaiki penulisan kedepannya. Mudah-mudahan lapornan akhir ini dapat memberi manfaat bagi pembaca.

Semarang, 13 Desember 2017 Penulis

iii

DAFTAR ISI HALAMAN JUDUL .....................................................................................

i

HALAMAN PENGESAHAN ........................................................................

ii

KATA PENGANTAR…................................................... .............................

iii

DAFTAR ISI ...................................................................................................

iv

DAFTAR TABEL............................................................................................

xii

DAFTAR GAMBAR........................................................................................ xiii PENGENALAN ALAT DAN TEKNIK PENGAMBILAN SAMPEL ASEPTIS

BAB I PENDAHULUAN A. Latar Belakang...................................................................................

1

B. Tujuan Praktikum...............................................................................

1

C. Manfaat Praktikum............................................................................

2

BAB II TINJAUAN PUSTAKA A. Colony counter..................................................................................

3

B. Vortex................................................................................................

3

C. Erlenmeyer........................................................................................

3

D. Cawan petri.......................................................................................

3

E. Masker...............................................................................................

4

F. Inkubator...........................................................................................

4

G. Autoclave..........................................................................................

4

H. Gelas ukur.........................................................................................

5

I. Pipet ukur..........................................................................................

5

J. Beaker glass......................................................................................

5

K. Jas laboratorium................................................................................

6

L. Bulb...................................................................................................

6

M. Oven..................................................................................................

7

N. Kompor listrik...................................................................................

7

O. Tabung reaksi....................................................................................

7

iv

P. Rak tabung reaksi...............................................................................

7

Q. Pipet tetes...........................................................................................

8

R. Penjepit...............................................................................................

8

S. Bunsen................................................................................................

9

T. Jarum ose............................................................................................

9

U. Mikroskop..........................................................................................

9

V. Teknik Aseptis...................................................................................

9

W. Sterilisasi...........................................................................................

10

BAB III METODE PRAKTIKUM A. Waktu Praktikum...............................................................................

11

B. Tempat Praktikum..............................................................................

11

C. Alat.....................................................................................................

11

D. Bahan.................................................................................................

11

E. Sampling............................................................................................

12

F. Skema Kerja.......................................................................................

12

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN A. Hasil.................................................................................................... 13 B. Pembahasan........................................................................................

21

BAB V PENUTUP A. Kesimpulan........................................................................................

23

B. Saran................................................................................................... 23 DAFTAR PUSTAKA LAMPIRAN

ISOLASI DAN INOKULASI MIKROORGANISME


37


38

C. Manfaat Praktikum.............................................................................

38

BAB II TINJAUAN PUSTAKA A. Mikrobiologi......................................................................................

39

B. Isolasi.................................................................................................

39

v

C. Inokulasi.............................................................................................

39

D. Pengenceran........................................................................................

40

E. Dampak Mikroba Pada Makanan.......................................................

40

F. Penanganan Mikroba Pada Makanan.................................................

40


42


42

C. Alat.....................................................................................................

42

D. Bahan.................................................................................................. 42 E. Sampling............................................................................................. 42 F. Skema Kerja.......................................................................................

43

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN A. Hasil....................................................................................................

46

B. Pembahasan........................................................................................

46

BAB V PENUTUP A. Kesimpulan.........................................................................................

49

B. Saran...................................................................................................

49

DAFTAR PUSTAKA LAMPIRAN

PENGUJIAN BORAKS


57


58

C. Manfaat Praktikum............................................................................

58

BAB II TINJAUAN PUSTAKA A. Bahan Tambahan Makanan.................................................................

59

B. Pengertian Boraks................................................................................. 59 C. Fungsi Boraks....................................................................................... 60 D. Peraturan Mengenai Boraks.................................................................. 60 E. Dampak Boraks Bagi Kesehatan..........................................................

vi

60

BAB III METODE PRAKTIKUM A. Waktu Praktikum................................................................................

61


61

C. Alat.....................................................................................................

61

D. Bahan.................................................................................................

61

E. Sampling............................................................................................

62

F. Skema Kerja.......................................................................................

62


63

B. Pembahasan........................................................................................

64

BAB V PENUTUP A. Kesimpulan.........................................................................................

66

B. Saran...................................................................................................

66

DAFTAR PUSTAKA LAMPIRAN

PENGUJIAN RHODAMIN B


73


73


74

BAB II TINJAUAN PUSTAKA A. Pengertian Bahan Tambahan Pangan................................................

75

B. Pengertian Rhodamin B....................................................................

76

C. Karakteristik Rhodamin B................................................................

76

D. Fungsi Rhodamin B..........................................................................

77

E. Peraturan terkait Rhodamin B...........................................................

77

F. Dampak Bagi Kesehatan..................................................................

77


78


78

vii

C. Alat.....................................................................................................

78

D. Bahan.................................................................................................. 78 E. Sampling............................................................................................. 79 F. Skema Kerja.......................................................................................

79


81

B. Pembahasan........................................................................................

82

BAB V PENUTUP A. Kesimpulan......................................................................................... 84 B. Saran................................................................................................... 84 DAFTAR PUSTAKA LAMPIRAN

PENGUJIAN FORMALIN


91


92


92

BAB II TINJAUAN PUSTAKA A. Pengertian Bahan Tambahan Pangan.................................................

93

B. Pengertian Formalin...........................................................................

93

C. Fungsi Formalin.................................................................................

94

D. Karakteristik Formalin.......................................................................

94

E. Peraturan Terkait Formalin................................................................

95

F. Ciri-ciri Makanan yang Mengandung Formalin................................

95

G. Dampak Formalin..............................................................................

96

H. Tindakan Pencegahan........................................................................

97


98


98

C. Alat.....................................................................................................

98

viii

D. Bahan..................................................................................................

98

E. Sampling.............................................................................................

99

F. Skema Kerja.......................................................................................

99

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN A. Hasil.................................................................................................... 100 B. Pembahasan........................................................................................ 101 BAB V PENUTUP A. Kesimpulan......................................................................................... 103 B. Saran................................................................................................... 103 DAFTAR PUSTAKA LAMPIRAN

METODE HITUNG CAWAN


109


110


110

BAB II TINJAUAN PUSTAKA A. Pengertian Mikroorganisme...............................................................

111

B. Pengertian Koloni Bakteri.................................................................

112

C. Pengertian Metode Hitung Cawan....................................................

112

D. Peraturan Terkait Praktikum..............................................................

113

E. Dampak Kontaminasi Mikroba Bagi Kesehatan...............................

113

F. Pengendalian Kontaminasi Mikroba.................................................

114

BAB III METODE PRAKTIKUM A. Waktu Praktikum............................................................................... 115 B. Tempat Praktikum.............................................................................. 115 C. Alat..................................................................................................... 115 D. Bahan.................................................................................................. 115 E. Sampling............................................................................................. 115 F. Skema Kerja....................................................................................... 116

ix

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN A. Hasil.................................................................................................... 117 B. Pembahasan........................................................................................ 118 BAB V PENUTUP A. Kesimpulan......................................................................................... 120 B. Saran................................................................................................... 120 DAFTAR PUSTAKA LAMPIRAN

MORFOLOGI BAKTERI


127


128


128

BAB II TINJAUAN PUSTAKA A. Pengertian Bakteri..............................................................................

129

B. Morfologi Bakteri...............................................................................

129

C. Struktur Bakteri..................................................................................

130

D. Faktor-Faktor Yang Mempengaruhi Pertumbuhan Bakteri................

132

E. Pengertian Pewarnaan Gram..............................................................

134

F. Peraturan Terkait Praktikum............................................................... 134 G. Dampak Kontaminasi Bakteri Bagi Kesehatan................................... 134 H. Pengendalian Kontaminasi Mikroba................................................... 135 BAB III METODE PRAKTIKUM A. Waktu Praktikum...............................................................................

136


136

C. Alat..................................................................................................... 136 D. Bahan.................................................................................................. 136 E. Sampling............................................................................................. 137 F. Skema Kerja....................................................................................... BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN

x

137

A. Hasil.................................................................................................... 139 B. Pembahasan........................................................................................ 139 BAB V PENUTUP A. Kesimpulan......................................................................................... 141 B. Saran................................................................................................... 141 DAFTAR PUSTAKA LAMPIRAN

xi

DAFTAR TABEL

PENGENALAN ALAT DAN PENGAMBILAN SAMPEL ASEPTIS

Tabel 4.1 Hasil Pengenalan Alat-Alat Praktikum ............................................

13


Tabel 4.1 Tabel Hasil Pengujian ......................................................................

46

PENGUJIAN BORAKS

Tabel 4.1 Hasil Uji Warna Test Kit Boraks .....................................................

63


Tabel 4.1 Hasil Pengujian Rhodamin B ...........................................................

81

PENGUJIAN FORMALIN

Tabel 4.1 Hasil Uji Kandungan Formalin pada Mie Kuning Basah ................

100

METODE HITUNG CAWAN

Tabel 4.1 Hasil Perhitungan Mikroba Pada Media PCA................................... MORFOLOGI BAKTERI

xii

117

DAFTAR GAMBAR

PENGENALAN ALAT DAN PENGAMBILAN SAMPEL ASEPTIS

Gambar 3.1 Skema Pengambilan Sampel Aseptis ...........................................

12

Gambar 4.1 Sendok Makan Dimasukkan dalam Kotak Steril .........................

21

Gambar 4.2 Tangan Praktikan Disemprot Alkohol 70% .................................

21

Gambar 4.3. Sampel Sendok dalam Na Fisiologis Dan Dilabeli......................

21


Gambar 3.1 Skema Kerja Preparasi suspensi sampel ......................................

43

Gambar 3.2 Skema Kerja Pengenceran bertingkat ..........................................

44

Gambar 3.3 Skema kerja penanaman media pada PCA ...................................

44

Gambar 3.4 Skema Kerja penanaman media pada EMBA ..............................

45

Gambar 4.1 Hasil Penanaman pada media PCA dan EMBA...........................

46

PENGUJIAN BORAKS

Gambar 3.1 Skema Kerja Pengujian Boraks ....................................................

62

Gambar 4.1 Hasil Pengujian Boraks ................................................................

63


Gambar 2.1 Rumus Kimia Rhodamin B ..........................................................

76

Gambar 3.1 Skema Kerja Persiapan Sampel....................................................

79

Gambar 3.2 Skema Kerja Uji Reaksi Khusus Rhodamin B .............................

80

Gambar 4.1 Hasil Pengujian Rhodamin B .......................................................

81

PENGUJIAN FORMALIN

Gambar 3.1 Skema Kerja Uji Kandungan Formalin dalam Makanan..............

99

Gambar 4.1 Hasil Pengujian Formalin pada Makanan ....................................

101

METODE HITUNG CAWAN

Gambar 3.1 Skema Kerja Metode Hitung Cawan ............................................

116

Gambar 4.1 Koloni Bakteri Pada Media PCA 10 -3 ..........................................

117


117


117

Gambar 4.4 Koloni Bakteri Pada Media EMBA 10 -3 ......................................

118

MORFOLOGI BAKTERI

Gambar 3.1 Skema Kerja Pembuatan Film ......................................................

xiii

137

Gambar 3.2 Skema Kerja Pewarnaan Gram ....................................................

138

Gambar 4.1 Hasil Pengamatan Morfologi Bakteri Pada Mikroskop ...............

139

xiv

Pengenalan Alat dan Pengambilan Sampel Aseptis

xv

BAB I PENDAHULUAN A. Latar Belakang

Alat adalah suatu benda yang dipakai untuk mengerjakan sesuatu, perkakas, perabot, yang dipakai untuk mencapai maksud tertentu yang harus diperhatikan kebersihannya. Kebersihan dari alat dapat mengganggu hasil pratikum apabila alat yang digunakan tersebut tidak bersih, maka akan terjadi hal-hal yang tidak diinginkan contohnya jika pada alat & alat tersebut masih tersisa bahan kimia, maka alat tersebut dapat saja bereaksi dengan bahan yang kita gunakan sesudahnya dan dapat mengakibatkan kegagalan dalam pratikum. Pada saat melakukan praktikum di laboratorium sudah harus mengenal apa-apa saja alat-alat yang digunakan di dalam laboratorium ini terkait bidang mikrobiologi. Kesalahan dalam penggunaan alat dan bahan dapat menimbulkan hasil yang didapat tidak akurat dalam hal ilmu statistika kesalahan seperti ini oleh karena itu, pemahaman fungsi dan cara kerja peralatan serta bahan harus mutlak dikuasai oleh praktikan sebelum melakukan praktikum di laboratorium kimia. Bukan hal yang mustahil bila terjadi kecelakaan di dalam laboratorium karena kesalahan dalam pemakaian dan penggunaan alat dan bahan yang dilakukan dalam suatu pratikum yang berhubungan dengan bahan kimia berbahaya, disamping itu, pemilihan jenis alat yang akan digunakan dalam penelitian disesuaikan dengan tujuan penelitian agar penelitian berjalan lancar.

B. Tujuan Praktikum

1. Untuk mengetahui dan memahami nama alat-alat laboratorium dan bagian bagian dari alat 2. Untuk mengetahui dan memahami fungsi dari masing-masing alat dan prinsip kerjanya 3. Untuk mengetahui dan memahami cara penggunaan alat-alat laboratorium yang digunakan dalam praktikum sanitasi makanan minuman 4. Untuk mengetahui cara pengambilan sampel secara aseptic

1

2

C. Manfaat Praktikum

1. Mahasiswa dapat mengetahui dan memahami nama dan bagian-bagian dari peralatan di laboratorium 2. Mahasiswa dapat mengetahui dan memahami fungsi dan prinsip kerja dari masing-masing alat di laboratorium 3. Mahasiswa dapat mengoprasikan alat-alat di laboratorium 4. Mahasiswa dapat mengetahui cara pengambilan sampel secara aseptic

BAB II TINJAUAN PUSTAKA A. Colony Counter

Colony counter adalah alat untuk menghitung jumlah koloni bakteri atau mikroorganisme dalam cawan petri yang biasanya dilengkapi dengan pencatat elektronik. Bakteri yang akan dihitung adalah bakteri yang masih hidup, dengan melakukan pengeceran dari medium bakteri misalnya sampai 3 kali dalam tabung reaksi. 1 Colony counter merupakan perelatan yang dilengkapi dengan kuadran penghitungan, lampu dan kaca pembesar untuk mempermudah penghitungan mikroba. Colony counter merupakan alat untuk menghitung mikroorganisme dalam cawan petri 2

B. Vortex

Vortex mixer diciptakan oleh kroft bersaudara, yaitu Jack A. Kraft dan Harold D. Kraft . Vortex adalah perangkat sederhana yang umum digunakan di laboratorium untuk menghomogenkan larutan. Ketika tabung reaksi ditekan ke dalam gelas karet maka gerak di transmisikan ke cairan (tabung reaksi yang dimasukan). 3

C. Erlenmeyer

Erlenmeyer ditemukan oleh Richard August Emil Erlenmeyer. Emil Erlenmeyer merupakan pelopor dalam perkembangan struktur molekul. Erlenmeyer adalah jenis labu laboratorium yang banyak digunakan. Memiliki tubuh berbentuk kerucut, leher silinder dan dilengkapi dengan dasar yang datar.4

D. Cawan Petri

Penemunya adalah seorang ahli bakteri dari Jerman bernama Julius Richard Petri dan sejak itu petri dish (cawan petri) menjadi bagian penting dari sebuah penemuan untuk peralatan laboratorium Ketika cawan petri belum

3

4

ditemukan biasanya orang memakai wadah lain seperti tabung reaksi untuk menempatkan kultur sel yang sangat kecil dengan cara dimiringkan dan jika melihat cara tersebut media kultur sel tersebut tidak akan mendapatkan ruang sebanyak yang didapat dengan cawan petri. alat ini berbentuk bulat bisa terbuat dari kaca atau plastik dan memiliki ukuran bervariasi biasanya berdiameter 6 cm, 7.5cm atau 10cm dengan tinggi 1.5cm dan selalu berpasangan, yang ukurannya agak kecil sebagai wadah dan yang lebih besar merupakan tutupnya.5

E. Masker

Masker

merupakan

salah

satu

perlengkapan

penting

di

dalam

laboratorium. Masker dapat untuk melindungi sistem pernafasan dari berbagai bahan volatile berbahaya dan berbagai kontaminan.

6

F. Inkubator

Inkubator adalah alat yang digunakan untuk tumbuh dan memelihara budaya mikrobiologi atau kultur sel. Inkubator mempertahankan suhu optimal, kelembaban dan kondisi lain seperti karbon dioksida (CO2) dan kandungan oksigen dari atmosfer di dalam. Inkubator sangat penting untuk banyak pekerjaan eksperimental dalam biologi sel, mikrobiologi dan biologi molekuler dan digunakan untuk kultur bakteri baik serta sel eukariotik. 7

G. Autoclave

Autoclave adalah alat pemanas tertutup yang digunakan untuk mensterilisasi suatu benda menggunakan uap bersuhu dan bertekanan tinggi, Penurunan tekanan pada autoclave tidak dimaksudkan untuk membunuh mikroorganisme, melainkan meningkatkan suhu dalam autoclave. Suhu yang tinggi inilah yang akan membunuh microorganisme. lat ini diciptakan oleh Charles Chamberland di 1879, meskipun prekursor yang dikenal sebagai digester uap diciptakan oleh Denis Papin pada tahun 1679. Autoclave yang banyak digunakan dalam mikrobiologi, kedokteran, tato, tindik, ilmu kedokteran hewan, mikologi, kedokteran gigi, perawatan kaki dan fabrikasi

5

prosthetics. Mereka bervariasi dalam ukuran dan fungsi tergantung pada media yang akan disterilkan.

8

H. Gelas Ukur

Gelas ukur adalah peralatan laboratorium umum yang digunakan untuk mengukur volume cairan. Alat ini memiliki bentuk silinder dan setiap garis penanda pada gelas ukur mewakili jumlah cairan yang telah terukur. Gelas ukur berukuran besar biasanya terbuat dari polipropilena karena resistansi kimia yang sangat baik atau polimetilpentena karena transparansinya. Gelas ukur sering digunakan untuk mengukur volume cairan. Gelas ukur secara umum lebih akurat dan lebih presisi dibandingkan labu laboratorium dan gelas kimia, tetapi gelas ukur semestinya tidak dapat digunakan dalam analisis volumetric.9

I. Pipet Ukur

Pipet adalah alat berbentuk silinder kecil dan panjang mirip dengan sedotan. Terbuat pipet ukur dari bahan gelas yang dilengkapi dengan ukuran dalam mililiter (ml). Secara umum Pipet berfungsi untuk memindahkan suatu volume cairan dari satu tempat ke tempat yang lain. Pipet sangat beragam bentuk dan kegunaanya. Pipet Ukur berfungsi untuk memindahkan larutan atau cairan ke dalam suatu wadah dengan berbagai ukuran volume. Untuk ukuran volume pada Pipet ukur yang paling besar adalah pipet ukur dengan volume 50ml. 10

J. Beaker Glass

Gelas beaker adalah sebuah wadah penampung yang digunakan untuk mengaduk, mencampur, dan memanaskan cairan. Bentuk Gelas Beaker adalah silinder dan tersedia dalam berbagai ukuran, mulai dari 1 mL sampai beberapa liter. Keakuratan ukuran ini sangat bervariasi. Beaker berbeda dengan labu erlenmeyer yang terlihat dari sisinya yang lurus dan bukannya miring. Biasanya beaker lebih sering digunakan dalam percobaan kimia dasar. Beaker dapat ditutup dengan kaca pengamat untuk mencegah kontaminasi dan

6

penyusutan zat. Beaker seringkali dibubuhi dengan ukuran yang terdapat pada sisi beaker yang mengindikasikan volume tertampung.

11

K . Jas Laboratorium

Jas Lab adalah salah satu Alat Pelindung Diri yang wajib digunakan oleh para pekerja di lingkungan laboratorium. Hal ini berarti bahwa jas lab tidak hanya digunakan oleh para analis tapi juga para pekerja lain yang berada di laboratorium. Penggunaan jas lab juga menjadi seragam sederhana bagi para profesiaonal dibidang laboratorium. Sesuai fungsinya penggunaan jas lab ditujukan agar para pemakainya terhindar dari paparan atau percikan bahan kimia yang digunakan. untuk itu sanga t tidak disarankan menggunakan jas lab lengan pendek.

12

L. Bulb

Rubber bulb adalah alat dasar yang harus dimiliki pada suatu laboratorium. Rubber bulb adalah

alat bantu yang berfungsi untuk meneyedot larutan.

Rubber bulb akan sangat dibutuhkan pada saat mengambil larutan pekat atau larutan yang berbahaya / beracun. Rubber bulb akan berguna apabila keberadaannya dikombinasikan dengan alat ukur berupa pipet, baik pipet ukur maupun pipet gondok atau pipet volume. Rubber bulb diapasang pada pangkal pipet ukur maupun pipet volume.

13

Rubber bulb terbuat dari karet yang elastis, karet pembuat filler terbuat dari bahan yang tahan terhadap bahan kimia. Filler mempunya 3 bagian utama, bagian bagian tersebut yang masing masing mempunyai katup. Bagian-bagian Rubber bulp: 1. Katup Aspirate (A) Katup aspirate biasanya terletak dibagian atas dan disimbolkan dengan huruf A. Katup ini berfungsi untuk mengeluarkan udara yang ada didalam filler. 2. Katup Suction (S) Katup Suction biasanya terletak dibagian tengah dan disimbolkan dengan huruf S. Katup ini berfungsi untuk menyedot larutan .

7

3. Katup Exhaust (E) Katup Exhaust biasanya terletak dibagian bawah dan disimbolkan dengan huruf E. Katup ini berfungsi mengeluarkan caairan yang ada didalam pipet

M. Oven

Pada prinsipnya oven adalah alat yang digunakan untuk memanaskan alat atau bahan dengan tujuan tertentu. Berdasarkan tujuan pemakaiannya di laboratorium, oven biasa digunakan untuk tujuan sebagai berikut :

14

1. Mengeringkan alat atau bahan. 2. Mendapatkan bobot konstan, suhu yang digunakan biasanya kurang lebih 105 derajat Celcius 3. Pada pengujian mikrobiologi, oven digunakan untuk sterilisasi alat. Suhu yang biasa digunakan adalah 180 derajat Celcius.

N. Kompor Listrik

Kompor Listrik Pertama Kali ditemukan oleh David Cule dan Istrinya Helen Nora pada tahun 1906 di Australia. Dalam penggunaannya di laboratorium kompor listrik berfungsi untuk memanaskan larutan atau zat kimia. 15

O. Tabung Reaksi

Tabung reaksi di Laboratorium mikrobiologi biasanya digunakan sebagai tempat pengenceran atau digunakan tempat menyimpan media. Sedangkan tabung durham adalah alat bantu yang digunakan sebagai indikator pada pengujian mikrobilogi dengan metode MPN. Bentuk tabung durham sama dengan tabung reaksi akan tetapi ukuran tabung rea ksi lebih kecil dibandingkan dengan tabung reaksi, silahkan lihat gambar disamping. Cara penggunaan tabung reaksi adalah dengan menempatkan Tabung durham pada tabung reaksi dengan posisi terbalik.

16

P. Rak Tabung Reaksi

Rak tabung reaksi terbuar dari kayu dan memeliki 12 lubang untuk penyimpan.

8

Di sebagian sisi terdapat 6 batang kayu yang berfungsi sebagai tempat tabung reaksi ketika di keringkan. Agar tabung reaksi tidak tergelincir ketika di simpan di rak, maka pada alas rak terdapat cekungan sebanyak 12 cekungan, agar posisi tabung reaksi ketika di simpan tidak mudah tergelincir. Fungsi nya untuk menyimpan tabung raksi, mengeringkan tabung reaksi, menjaga agar tabung reaksi tidak berjamur.

17

Q. Pipet Tetes

Pipet tetes adalah jenis pipet yang berupa pipa kecil terbuat dari plastik atau kaca dengan ujung bawahnya agak meruncing dengan ujung atasnya ditutupi karet. Berguna untuk mengambil cairan dalam skala tetesan ke cil, saat melakukan percobaan reaksi kimia di laboratorium, bahan yang kita perlukan jumlahnya tidaklah terlalu besar sehingga tidak bisa diukur dengn alat ukur yang berskala. Untuk keperluan itu maka digunakan pipet tetes. Pipet tetes ini hanya bisa digunakan untuk bahan yang bersifat cair. Jika ada bahan padatan yang harus di ukur menggunakan pipet tetes, maka padatan tersebut harus terlebih dahulu di larutkan. Pipet tetes berfungsi untuk membantu memindahkan cairan dari wadah yang satu ke wadah yang lain dalam jumlah yang sangat kecil yaitu setetes demi tetes. Pemindahan cairan dengan menggunakan pipet tetes memang memakan waktu yang sangat lama jika yang di pindahkan sangat banyak. Tapi sesuai dengan namanya, pipet tetes hanya di gunakan untuk memindahkah cairan dengan kuantitas yang sangat kecil atau sedikit. 17

R. Penjepit

Penjepit Tabung Reaksi adalah alat laboratorium berbahan dasar kayu dengan jepitan pegas yang terbuat dari baja. Alat laboratorium ini berfungsi untuk menjepit atau memindahkan tabung reaksi yang telah atau selama proses pemanasan. Penjepit Tabung Reaksi memiliki panjang kurang lebih 18cm dan dapat digunakan untuk tabung reaksi berdiameter 10-25mm.

18

9

S. Bunsen

Bunsen atau lampu spirtus adalah lampu pemanas api dengan bahan bakar dari spirtus.Pada laboratorium mikrobiologi lampu spirtus mempunyai beberapa fungsi / kegunaan, antara lain : 19 a. Sterilisasi ( memijarkan ose) sebelum inokulasi sample b. Mengkondisikan area dalam kondisi aseptis dengan jarak max dari pijaran lampu spirtus 30 cm

T. Jarum Ose

Jarum ose merupakan alat yang digunakan untuk melakukan inokulasi. Bentuk batang ose mirip dengan batntuk pengaduk hanya saja dibagian ujung terdapat kawat dan ada yang berbentuk kolongan ada juga yang lurus. Bentuk kawat pada ujung ose mempunyai kegunaan yang sedikit berbeda. Pada batang ose ujung kolongan biasanya digunakan untuk inokulasi pada media cair sedangkan ose yang berbentuk lurus biasanya digunakan pada inokulasi dengan cara metode gores pada media agar. 20

U. Mikroskop

Mikroskop adalah sebuah alat untuk melihat objek yang sangat kecil ( tidak bisa dilihat dengan mata telanjang). Kata mikroskopik berarti sangat kecil, tidak mudah dilihat dengan mata.Mikroskop ditemukan oleh Antony Van Leuwenhoek. . Mikroskop adalah suatu alat yang berada didalam laboratorium yang memberikan bayangan dari benda yang diperbesar hingga ukuran tertentu hingga dapat dilihat dengan mata. Mikroskop cahaya memiliki tiga dimensi lensa yaitu lensa objektif, lensa okuler dan lensa kondensor. Lensa objektif dan lensa okuler terletak pada kedua ujung tabung mikroskop.Lensa okuler pada mikroskop bias membentuk bayangan tunggal (monokuler) atau ganda (binikuler). 21

V. Teknik Aseptis

Metode aseptis merupakan salah satu teknik dasar dalam analisa mikrobiologi.Dalam dunia mikrobiologi, metode aseptis penting karena untuk

10

menghindarkan mikroorganisme dari kontaminan yang dapat menghambat pertumbuhan mikroba.Prinsip dasar dari metode aseptis ini adalah langkah kerja untuk memperoleh keadaan steril dengan mencegah kontaminasi mikroogranisme.Mekanismenya adalah dengan melakukan sterilisasi pada semua alat melalui cara sterilisasi yang sesuai dengan jenis,sifat dan bahan dari alat yang akan disterilisasi. 22

W. Sterilisasi

Sterilisasi dalam bidang mikrobiologi dilakukan dengan tujuan untuk menghilangkan

semua jenis mikroorganisme (protozoa, fungi, bakteri,

mycoplasma, virus) yang terdapat pada suatu benda.Proses sterilisasi ini melibatkan aplikasi biocidal agent (proses fisik).Metode-metode yang digunakan

untuk sterilisasi ada bermacam-macam.Penggunaan metode

tersebut dipilih berdasarkan jenis bahan yang digunakan dan jenis mikroba yang terlibat. 23

BAB III METODE PRAKTIKUM A. Waktu Praktikum

Praktikum pengenalan alat, penyiapan, dan penggunaan alat dilakukan hari selasa, 31 Oktober 2017.

B. Tempat Praktikum

Praktikum pengenalan alat dan pengambilan sampel aseptis dilakukan di Laboratorium Kesehatan Lingkungan, Fakultas Kesehatan Masyarakat Universitas Diponegoro.

C. Alat

1. Coloni Counter

13. Jarum ose

2. Vortex

14. Penjepit

3. Masker

15. Cawan petri

4. Kapas

16. Pipet tetes

5. Inkubator

17. Gelas ukur

6. Jas lab

18. Erlenmeyer

7. Oven

19. Beaker glass

8. Kompor listrik

20. Pipet ukur dann bulb

9. Rak tabung

21. Mikroskop

10. Autoclave

22. Objek glass

11. Tabung reaksi

23. Desk glass

12. Bunsen

D. Bahan

1. Sampel permukaan sendok 2. Alkohol 70% 3. Nacl Fisiologis 4. Label

11

12

E. Sampling

Sampel yang digunakan untuk mengambil sampel secara aseptis adalah sendok milik salah satu praktikan atau anggota kelompok praktikum.

F. Skema Kerja

Tangan dan kotak makan disemprot dengan alkohol 70% untuk mencegah terjadinya kontaminasi silang.

Diambil sendok , dimasukan ke dalam kotak makan lalu ditutup

Meja laboratorium dan tangan di sterilkan dengan alkohol 70%, dan dikeluarkan sampel sendok dari kotak makan

Tuangkan clarutan Na-Fisiologis pada permukaan sendok, lal u masukan kembali ke tabung reaksi, kemudian di labeli dengan “sampel”

Gambar 3.1 Skema Kerja pengambilan sampel aseptis

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Hasil

1. Pengenalan Alat Berikut ini merupakan hasil pengamatan dan pengenalan alat-alat yang ada di laboratorium. Tabel 4.1 Hasil Pengenalan Alat-alat Praktikum Nama dan bagian No

Gambar

Fungsi

bagian alat

Untuk menghitung Colony Counter jumlah koloni a. Kaca/ lup mikroba pada 1.

b. Tombol on/off cawan petri dengan c. Tempat cawan bantuan kaca d. Penyangga cawan pembesar Vortex

Untuk

a. Pengatur kecepatan 2.

menghomogenkan larutan dengan

b. Sensor

sistem sensor dan

c. Tempat

bekerja dengan

tabung reaksi d. Kabel

cara memutar. Kecepatan biasanya 5- 12 rpm.

13

14

Untuk melindungi tubuh dari 3.

Masker

kontaminasi atau melindungi tubuh dari bahan kimia.

Untuk menyumbat 4.

Kapas

atau menutup tabung reaksi

Untuk melindungi tubuh dari zat bahan kimia 5.

Jas lab

berbahaya dan sebagai seragam standar laboratorium Untuk

Inkubator

menginkubasi

a. Tombol power

mikroba. Fungsi

b. Tombol sirkulasi bagian-bagian : 6.

udara c. handle

a. Tombol power untuk menyalakan b. Untuk sirkulasi

15

Untuk mensterilisasi Oven a. Tombol power 7.

b. Tombol sirkulasi c. handle

peralatan pada laboratorium . pada oven terdapat bagian yang digunakan untuk pengaturan suhu.

8.

9.

Kompor listrik

Untuk pemanas

a. kabel

dengan sumber

b. tombol on

listrik

Rak tabung reaksi

Untuk meletakan tabung reaksi

16

Untuk mensterilkan alat dan media. Fungsi bagian bagian : a. katup untuk Autoclave a. katup uap b. skrup pengaman 10.

c. pengatur tekanan d. termomter e. timer

mengeluarkan uap b. skrup untuk pengaman c. pengukur tekanan d. termometer untuk pengatur suhu e. timer untuk pengatur waktu

Untuk media 11.

Tabung reaksi

tumbuh mikroba dan meletakan larutan

Untuk mensterilkan 12.

Bunsen

saat proses isolasi dan inokulasi

17

Untuk memindahkan 13.

Jarum ose

mikroba atau penanaman bakteri pada media

14.

15.

Penjepit

Cawan petri

Untuk menjepit tabung reaksi

Untuk penanaman media bakteri

18

Untuk mengambil 16.

Pipet tetess

media cair atau larutan dalam jumlah sedikit

Untuk mengukur 17.

Gelas ukur

cairan secara kualitatif

Untuk tempat 18.

Erlenmeyer

pelarutan dan proses reaksi larutan

19

Untuk tempat 19.

Beaker glass

pelarutan dan proses reaksi larutan

Untuk mengambil Pipet ukur

20

cairan dengan skala maksimal 10ml

Untuk mengambil Bulb

cairan menggunakan pipet ukur

Untuk mengamati miroba atau benda yang sangat kecil. Fungsi bagian21.

Mikroskop

bagian : a. lensa okuler , membentuk bayangan akhir b. revolver, untuk mengatur

20

perputaran lensa objektif a. lensa objektif, untuk membentuk bayangan nyata c. kondensor, untuk mengumpulkan cahaya d. penjepit objek, untuk mengatur pergeseran objek e. vertical feed knob, untuk menaikan atau menurunkan objek glass f. horizontal untuk menggeser ke kanan/kiri

22.

23.

Objek glass

Desk glass

Untuk meletakan objek preparat

Untuk menutup preparat

21

2. Pengambilan sampel secara aseptis

Gambar 4.1. Sendok dimasukkan dalam kotak steril

Gambar 4.2. Tangan praktikan disemprot alkohol 70%

Gambar 4.3. Sampel sendok dalam Na Fisiologis dan dilabeli

B. Pembahasan

1. Pengenalan Alat Praktikum Pengenalan alat dibagi menjadi 5 pos , rincian masing-masing pos sebagai berikut : a. Pos Pertama Alat-alat yang ada di Pos 1 diantaranya Coloni Counter, Masker, kapas, jas lab, kapas. b. Pos Kedua Pada pos ke 2 terdapat alat-alat diantaranya inkubator, oven, kompor listrik. c. Pos ketiga Pada pos ke 3 terdapat alat-alat sebagai berikut diantaranya rak tabung reaksi, bunsen, jarum ose, penjepit, pipet tetes, gelas ukur, erlenmeyer , beaker glass, pipet ukur, bulb d. Pos keempat Pada pos ke empat terdapat alat Vortex, Autoclave, cawan petri. e. Pos kelima Pada pos terakhir terdapat objek glass, desk glass, dan mikroskop.

22

2. Pengambilan Sampel Aseptis Sampel yang digunakan dalam praktikum pengambilan sampel secara aseptis adalah sendok milik salah satu praktikan. Sebelum dibawa ke laboratorium sendok terlebih dahulu ditempatkan di kotak yang sudah di sterilkan dengan alkohol 70%. Kemudian tangan dan tempat juga harus di sterilkan tujuannya agar tidak terjadi kontaminasi silang. Kemudian sendok diambil dari kotak di tetesi larutan Na Fisiologis pada tabung reaksi dan dimasukan kembali ke dalam tabung reaksi, setelah itu ditutup dengan kapas dan dilabeli “sampel” . Na Fisiologis merupakan larutan garam isotonis yang digunakan sebagai pengencer, agar suspensi sampel tidak terkontaminasi, dapat pula digunakan untuk mempertahankan derajat pH, karena bakteri peka terhadap pH maka lebih baik sampel aseptis disimpan dalam larutan garam Nacl dengan pH Normal.

BAB V PENUTUP A. Kesimpulan

1. Praktikum pengenalan alat, penyiapan alat, dilakukan sebagai dasar pengetahuan sebelum melakukan praktikum sanitasi makanan dan minuman. 2. Dalam pelaksanaan praktikum dibentuk pos-pos dimana masing-masing pos terdapat alat-alatlaboratorium yang berbeda. 3. Praktikum pengenalan alat laboratorium dilakukan agar praktikan mampu mengoprasikan alat-alat sesuai prosedur 4. Praktikum pengambilan sampel secara aseptik pada sampel sendok dilakukan untuk mencegah kontaminasi silang.

B.

Saran

1. Mahasiswa harus benar-benar memperhatikan penjelasan dari dosen maupun aisten praktikum untuk menghindari kesalahan pada saat praktikum. 2. Mahasiswa harus memahami fungsi masing-masing alat dan bagiannya dengan baik. 3. Mahasiswa harus menjaga kebersihan dan ketertiban laboratorium

23

DAFTAR PUSTAKA

1. Marasahi. Perhitungan Bakteri pada Cawan. Surakarta : Grafindo Press. 2011 2. Cairn, Donald. Buku Pedoman Praktikum dan Manual Alat Laboratorium Pendidikan Kimia Jakarta : Departemen Pendidikan dan Kebudayaan. 2003. 3. Poedjiadi. Intisari Kimia Farmasi Edisi Kedua. Jakarta : EGC.2013. 4. Dwyana, z dan Nur H. Penuntun Praktikum Mikrobiologi Pangan.Makasar : Universitas Hasanudin.2009. 5. Ali. Mikrobiologi Dasar Jilid I . Makassar : Badan Penerbit Universitas Negeri Makassar. 2009. 6. Prabowo, E . Laporan Praktikum Kimia Dasar . Banjar Baru, : Universitas Lambung Mangkurat. 2009. 7. Sistiawan,

W. Modul

Praktikum

Biokimia.

Sukabumi

:

Universitas

Muhammadiyah Sukabumi. 2011. 8. Soenardi , Analisa Bahan Makanan dan Pertanian. Jakarta : Universitas Muhammadiyah Jakarta . 2008. 9. Kalsum . Penuntun Praktikum Biokimia. Jakarta : Gramedia 2009. 10. Sumardjo, D. Pengantar Praktikum Kimia : Buku Panduan Kuliah Bioeksakta . Jakarta : EGC.2006. 11. Setiadi Andi. Pengenalan Alat Laboratorium. Lampung.: Fakultas Pertanian Universitas Lampung. 2010 12. Prasetya, Tri. Sejarah Penemuan Mikroskop. N/A. 2005. 13. Rusli.. Tuntutan Praktikum Mikrobiologi

Farmasi Dasar . Makassar :

Universitas Musim Indonesia. 2010. 14. Rakhmawati, Ama. Praktik Layanan Kegiatan Praktikum Biologi . Yogyakarta : UNY. 2013 15. Rizki . Alat-alat Laboratorium dan Alat-Alat Optik. Lampung. IAIN Lampung. 2015 16. Balittas Litbang Pertanian. ISSN : 0853-9308.2001 17. Anton. Fungsi Laboratorium. Bandung. 2013 18. Hadietomo. Ratna. Mikrobiologi dalam Praktik . Jakarta. 1990 19. Pelezar. Dasar-dasar Mikrobiologi Jilid II . Jakarta. 1989 20. Entjang Indan. Mikrobiologi dan Parasitologi. Bandung.2003

24

21. Khasani. Prosedur Alat-alat Kimia. Yogyakarta : EGC. 1990 22. Anggraeni, A. Pengelolaan Laboratorium Biologi untuk Menunjang Kinerja Pengguna. 2013 23. Ali, Alimuddin. Mikrobiologi Dasar . Makassar : Jurusan Biologi FMIPA UNM.2005

25

LAMPIRAN A. Dokumentasi Praktikum

1. Pengenalan Alat

Colony Counter

Kapas

oven

vortex

Jas Laboratorium

Rak tabung reaksi

26

masker

Inkubator

Kompor listrik

27

Autoclave

Jarum ose

Beaker glass

Tabung reaksi

Cawan petri

Pipet ukur & bulb

Bunsen

penjepit

erlenmeyer

28

Gelas ukur

Objek glass

Pipet tetes

mikroskop

desk glass

2. Pengambilan Sampel Secara Aseptis

Sendok ditempatkan di kotak yang telah disemprot alkohol 70%

Tangan praktikan dan tempat di bersihkan dengan alkohol 70%

Sendok ditetesi larutan Na Fisiologis dan ditaruh kembali di tabung reaksi

29

B. Laporan Sementara

30

31

32

33

34

35

Isolasi dan Inokulasi Mikroorganisme

36

BAB I PENDAHULUAN A. Latar Belakang

Makanan merupakan sumber energi satu-satunya bagi manusia. Karena jumlah penduduk yang terus berkembang, maka jumlah produksi makananpun harus terus bertambah melebihi jumlah penduduk ini, apabila kecukupan pangan harus tercapai. Permasalahan yang timbul dapat diakibatkan kualitas dan kuantitas bahan pangan. Hal ini tidak boleh terjadi atau tidak dikehendaki karena orang makan itu sebetulnya bermaksud mendapatkan energi tetap dapat bertahan hidup, dan tidak untuk menjadi sakit karenanya. Dengan demikian sanitasi makanan menjadi sangat penting. Sanitasi makanan adalah upaya-upaya yang ditujukan untuk kebersihan dan keamanan makanan agar tidak menimbulkan bahaya keracunan dan penyakit pada manusia. Dengan demikian, tujuan sebenarnya dari upaya sanitasi makanan, antara lain menjamin keamanan dan kebersihan makanan, mencegah penularan wabah penyakit, mencegah beredarnya produk makanan yang merugikan masyarakat, dan mengurangi tingkat kerusakan atau pembususkan pada makanan. Dalam penyehatan makanan dan minuman, kebersihan alat makan merupakan bagian yang sangat penting dan berpengaruh terhadap kualitas makanan dan minuman. Alat makan yang tidak dicuci dengan bersih dapat menyebabkan organisme atau bibit penyakit yang tertinggal akan berkembang biak dan mencemari makanan yang akan diletakkan di atasnya. Kontaminasi makanan dapat terjadi setiap saat, salah satunya dari peralatan makanan yang digunakan tidak memenuhi syarat kesehatan. Di Indonesia peraturan

telah

dibuat

dalam

bentuk

Permenkes

RI

No.

1096/Menkes/Per/VI/2011, bahwa untuk persyaratan peralatan makanan tidak boleh bakteri lebih dari 0 koloni/cm2. Peranan peralatan makanan dalam pedagang makanan merupakan bagian yang tak terpisahkan dari prinsip-prinsip penyehatan makanan ( Food hygiene). Setiap peralatan makan (piring, gelas, sendok) harus selalu dijaga kebersihannya setiap saat digunakan. Alat makan (piring, gelas, sendok) yang kelihatan bersih belum merupakan jaminan telah memenuhi persyaratan kesehatan, karena didalam alat makan (piring, gelas,

37

38

sendok) tersebut tercemar. salah satu cara untuk mengetahui adanya kontaminasi pada alat makan yaitu dengan cara melakukan pengujian laboratorium. Mengisolasi suatu mikroorganisme dilakukan dengan cara yang aseptis untuk menghindari terjadinya kontaminasi dengan mikroorganisme lain. Kebanyakan mikroorganisme dapat diisolasi dan diinokulasi dalam biakan murni dengan memindahkan suatu koloni secara cermat, mensuspensikan kembali dalam cairan dan menanamnya kembali pada medium yang selektif. Isolasi dan inokulasi merupakan percobaan yang sangat penting, karena melihat

kondisi

lingkungan

di

sekitar

kita

yang

banyak

terdapat

mikroorganisme baik yang patogen maupun yang non patogen, sehingga pemisahan dan identifikasi bakteri yang satu dengan lainnya juga dibutuhkan.

B. Tujuan Praktikum

Tujuan dari dilakukannya praktikum isolasi dan inokulasi mikroorganisme adalah sebagai berikut 1. Untuk memahami dan mampu melakukan proses isolasi dan inokulasi mikroorganisme 2. Untuk mengetahui cara identifikasi adanya mikroba pada sampel sendok makan 3. Untuk meningkatkan softskill dan pengetahuan praktikan terkait hal yang berhubungan dengan praktikum isolasi dan inokulasi mikroorganisme


Manfaat dari dilakukannya praktikum isolasi dan inokulasi mikroorganisme adalah sebagai berikut : 1. Dapat mengetahui dan memahami proses isolasi dan inokulasi mikroorganisme 2. Dapat melakukan proses isolasi dan inokulasi mikroorganisme 3. Didapatannya kultur dari mikroorganisme kontaminan pada sampel yang digunakan

BAB II TINJAUAN PUSTAKA A. Mikrobiologi

Mikrobiologi adalah suatu cabang ilmu pengetahuan yang mempelajari tentang organisme yang terlalu kecil untuk diidentifikasi oleh mata manusia tanpa alat bantu, yang disebut mikroorganisme. Salah satu cara yang dapat dilakukan untuk mengidentifikasi adanya mikroorganisme yaitu dengan cara menanamnya di media. Media harus mengandung semua kebutuhan untuk pertumbuhan mikroba, yaitu: sumber energi (contoh: gula), sumber nitrogen, juga ion inorganik essensial dan kebutuhan yang khusus, seperti vitamin.

1

Agar merupakan media yang paling sering digunakan dan terbuat dari rumput laut pilihan, media agar adalah agen pengeras yang bagus sekali karena tidak dapat didegradasi oleh mikroorganisme . 2

B. Isolasi

Secara alami, mikroba di alam ditemukan dalam populasi campuran. Untuk memperoleh biakan murni dapat dilakukan isolasi yang diawali dengan pengenceran bertingkat. Proses isolasi mikroba adalah memisahkan mikroba satu dengan mikroba lain yang berasal dari campuran berbagai mikroba untuk dapat mempelajari sifat biakan, morfologi dan sifat mikroba lainnya. 3 Biakan murni terdiri dari suatu populasi sel yang semuanya berasal darisatu sel induk. 4

Usaha untuk mengeksplorasi spesies baru mikroba dilakukan dengan

penerapan teknik baru perlu dilakukan untuk meneliti meliputi kultivasi, isolasi dan sebagainya.5

C. Inokulasi

Inokulasi merupakan kegiatan pemindahan mikroorganisme baik berupa bakteri maupun jamur dari tempat atau sumber asalnya ke medium baru yang telah dibuat dengan tingkat ketelitian yang sangat tinggi dan aseptis.Sebelum melakukan penapisan aktifitas antibakteri persiapan yang harus dilakukan

39

40

adalah menginokulasi bakteri uji dan bakteri yang akan diuji pada media NB sehingga diperoleh suspensi bakteri uji dan suspensi bakteri yang akan diuji. 6

D. Pengenceran

Tujuan daripengenceran bertingkat yaitu memperkecil atau mengurangi jumlah mikroba yang tersuspensi dalam cairan. Penentuan besarnya atau banyaknya tingkat pengenceran tergantung kepada perkiraan perkira an jumlah mikroba dalam sampel.7 Perhitungan jumlah mikroorganisme ini seringkali digunakan pengenceran. Pada pengenceran dengan menggunakan tabung yang berisi cairan fisiologis dan terlebih dahulu dikocok dengan baik sehingga kelompok sel dapat terpisah. Pengenceran sel dapat membantu untuk memperoleh perhitungan jumlah mikroorganisme yang benar. Namun pengenceran yang terlalu tinggi akan menghasilkan lempengan agar dengan jumlah koloni yang umumnya relatif rendah.

8

E. Dampak Mikroba Pada Makanan

Foodborne disease yang disebabkan oleh adanya cemaran mikrobiologis pada makanan masih banyak terjadi setiap tahun. Cemaran ini dapat berasal dari bahan mentah, pekerja, peralatan dan ruang produksl serta sumber air.

9

Bahan pangan dapat bertindak sebagai perantara atau substrat untuk pertumbuhan mikroorganisme patogenik dan organisme lain penyebab penyakit. Penyakit menular yang cukup berbahaya seperti tifus, kolera, disentri, atau tbc,mudah tersebar melalui bahan makanan.

10

Bahaya biologi

(mikroba) pada pangan perlu mendapat perhatian karena jenis bahaya ini yang sering menjadi agen penyebab kasus keracunan pangan.

11

Akibat yang

ditimbulkan jika konsumen tidak memiliki daya tahan tubuh yang cukup adalah dapat menyebabkan keracunan. 12

F.

Penanggulangan Mikroba Pada Makanan

Pengelola tempat penjualan makanan dan minuman agar meningkatkan higiene dan sanitasi, baik makanan, penjamah, peralatan maupun tempat. Penjamah dianjurkan memeriksakan kesehatan secara teratur dan mengikuti

41

pelatihan penjamah. Air untuk mencuci peralatan agar menggunakan air mengalir .

13

Teknik pencucian piring yang benar menurut Kemenkes (2009),

melalui beberapa tahap yaitu pemisahan kotoran atau sisa makan dari perala tan makan, perendaman, pencucian, pembilasan dengan air bersih dan mengalir, perendaman dengan air ai r kaporit, penirisan, perendaman dengan air panas 82100 ºC, dan pengeringan. 14 Mikroorganisme dapat disingkirkan,dihambat atau dibunuh dengan sarana atau proses fisik atau bahan kimia.

BAB III METODE PRAKTIKUM A. Waktu Praktikum

Praktikum isolasi dan inokulasi mikroorganisme dilaksanakan pada hari senin, 20 November 2017

B. Tempat Praktikum

Praktikum

pengujian

boraks

dilakukan

di

Laboratorium

Kesehatan

Lingkungan, Fakultas Kesehatan Masyarakat Universitas Diponegoro.

C. Alat

1. Tabung reaksi (6 buah) 2. Cawan petri (4 buah) 3. Jarum ose (1 buah) 4. Inkubator (1 buah) 5. Bunsen dan korek api (1 buah) 6. Pipet ukur (6 buah) 7. Bulb (1 buah)

D. Bahan

1. Media Plate Count Agar (PCA) ±15 ml 2. Media Eosin Methylen Blue Agar (EMBA) ) ±15 ml 3. NaCl Fisiologis 0,9% 9 ml 4. Alkohol 70% 5. Larutan suspensi sampelpermukaan sendok makan 1 ml 6. Kapas 6 buah 7. Kertas buram 8. Label dan tissue

E. Sampling

Sampel yang digunakan adalah sampel sendok makan yang dimiliki oleh salah satu praktikan, sebelum sampel digunakan sampel disterilkan terlebih dahulu

42

43

dengan alkohol 70% kemudian dimasukan ke dalam sebuah kotak makan yang sebelumnya juga disterilkan menggunakan alkohol 70%.

F.

Skema Kerja

1. Preparasi suspensi sampel Disemprot tangan dengan alkohol 70% untuk mencegah dengan kontaminasi

Dinyalakan bunsen dengan korek api

Dikeluarkan sampel sendok makan dari kotak makan

dituankan NaCl fisiologis 0,9% pada permukaan sendok secukupnya lalu diratakan sampai semua permukaan sendok makan terkena, dilakukan dekat den an bunsen

Dituangkan kembali NaCL fisiologis 0,9% dari se ndok makan ke tabung reaksi , kemudian dipanaskan degan melalukan bibir tabung reaksi dengan api bunsen kemudian ditutup lalu dihomogenkan

Gambar 3.1. Skema Kerja Preparasi suspensi sampel

44

2. Pengenceran Bertingkat Diambil larutan sampel sebanyak 1 ml dengan pipet steril, dekatkan dengan api bunsen

Dimasukan larutan sampel ke dalam tabung reaksi 1yang berisi Na fisiologis 0,9%, lalu diberi label 10 -1 kemudian ditutup, selalu dekatkan den an bunsen

Diambil 1 ml sampel dari tabung reaksi berlabel 10 -1 ke tabung reaksi 2 diberi label 10-2

dilakukan seterusnya hingga tabung reaksi ke-5. pipet ukur pengenceran 10-3 , 10-4 , 10-5 dilabeli dan ditutup untuk digunakan kembali. Gambar 3.2. Skema Kerja Pengenceran bertingkat

3. Penanaman Pada Media PCA dan EMBA Diambil sebanyak 1 ml larutan pada tabung pengenceran 10-3 , 10-4 , 105 dengan pipet ukur sesuai pengencerannya dimasukan ke dalam 3 cawan petridan diberi label 10 -3 , 10-4 , 10-5, sampel sendok makan dan nama kelompok

ditambahkan larutan media PCA sebanyak 1/3 volume cawan (±15 ml) lalu digoyang searah jarum jam

Didiamkan cawan petri hingga media memadat

Dibungkus cawan petri dengan kertas buram, lalu diinkubasi selama 2x24 jam pada suhu 32ºC

Gambar 3.3. Skema kerja penanaman media pada PCA

45

Disiapkan cawan petri berisi media EMBA, panaskan jarum ose pada api bunsen hingga memijar

Dimasukan jarum ose ke tabung reaksi pengenceran 10-3 , diambil 1 ulasan

Dibuka cawan petri, lalu digoreskan jarum ose secara zigzag perlahanlahan lalu didekatkan api bunsen

Ditutup kembali cawan petri lalu diberi label

Dibungkus cawan petri dengan kertas buram, lalu diinkubasi selama Gambar 3.4. Skema Kerja media pada EMBA 2x24 jam penanaman pada suhu 32ºC

Gambar 3.4. Skema Kerja penanaman media pada EMBA

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN A. Hasil Tabel 4.1. Tabel Hasil Pengujian Sampel

Media

Sampel pengenceran yang digunakan

Sendok makan

sampel 10-3, sampel 10-

PCA

4

EMBA

, sampel 10-5

Sampel 10-5

Dari Proses Inokulasi dan Isolasi mikroorganisme didapatkan 4 cawan hasil penanaman pada media PCA dan EMBA. Pada media PCA dilakukan inokulasi pada 3 sampel pengenceran yaitu sampel 10 -3, sampel 10-4, sampel 10-5 . Sedangkan Pada media EMBA dilakukan penanaman hanya menggunakan 1 sampel yaitu sampel 10 -3. Cawan petri berisi media dan mikroorganisme selanjutnya diinkubasi selama 2 x 24 jam yang kemudian akan diamati pada praktikum hitung cawan dan morfologi mikroorganisme.

Gambar 4.1. Hasil Penanaman pada media PCA dan EMBA

B. Pembahasan

1. Deskripsi Pengujian Isolasi mikroorganisme dilakukan dengan metode pengenceran bertingkat. Pengenceran dilakukan hingga 10 -5, pengenceran bertingkat bertujuan untuk mengurangi jumlah mikroorganisme yang ada. Tahap

46

47

pertama pengenceran adalam membasuh sampel sendok makan dengan Na fisiologis sebanyak 1 ml kemudian dimasukan kembali ke tabung reaksi sampel. setelah itu diambil 1 ml larutan sampel dengan pipet yang telah disterilkan kemudian ditambahkan ke tabung 2 yang berisi Na fisiologis, kemudian lakukan sampai pada tabung ke-5. Selalu dekatkan dengan api bunsen saat melakukan pengenceran untuk menghindari adanya kontaminasi silang. pipet untuk pengenceran 3, 4, 5 dibungkus kembali agar steril saat digunakan lagi untuk penanaman media. Setelah proses isolasi selesai, dilanjutkan dengan penanaman bakteri (inokulasi) pada media PCA dan media EMBA. Teknik penanaman media PCA dengan menggunakan teknik spread and pour plate. Media PCA menggunakan 3 sampel yaitu sampel 10 -3, sampel 10-4, sampel 10-5. Teknik penanaman menggunakan media PCA pertama-tama ambil larutan sampel pada pengenceran 10-3, 10-4, 10-5 menggunakan masing-masing pipet steri;, kemudian masukan ke dalam cawan petri yang disediakan setinggi 1/3 cawan kemudian ratakan dengan menggoyang searah jarum jam. Teknik inokulasi yang digunakan pada media Emba adalah penggoresan 1-ose mikroorganisme yaitu dengan menggoreskan jarum ose pada media EMBA secara zigzag, pertama ambil sampel menggunakan jarum ose yang telah dipanaskan sampai membara dengan api bunsen kemudian celupkan ke dalam sampel 10-3. Setelah sampel menempel pada jaru,, lakukan penggoresan pada medi EMBA yang telah disediakan secara zig-zag tanpa menekan media. cawan petri baik media PCA maupun EMBA diinkubasi selama 2x24 jam dengan dibungkus kertas buram. 2. Gambaran Umum Sampel Sampel yang digunakan adalah sampel sendok makan yang dimiliki oleh salah satu praktikan, sebelum sampel digunakan sampel disterilkan terlebih dahulu dengan alkohol 70% 3. Hasil Pengujian Hasil dari pengujian isolasi dan inokulasi ini adalah didapatkannya kultur dengan penanaman pada media PCA dan EMBA, pada media PCA dilakukan penanaman sebanyak 3 buah yaitu pada sampel 10 -3, sampel 10-

48

4

, sampel 10-5 sedangkan pada media EMBA hanya dilakukan penanaman

satu sampel yaitu 10-3. Cawan yang sudah dilakukan isolasi dan inokulasi kemudian selanjutnya diinkubasi selama 2x24 jam. 4. Faktor-Faktor Yang Mempengaruhi Hasil Paktikum Adapun faktor-faktor yang mempengaruhi pengujian adalah sebagai berikut : a. Suasana aseptis saat melakukan pengujian kadang masih melangalami kebocoran karena praktikan yang lalai untuk memakai Alkohol 70% sebagai pensteril b. Praktikan yang terkadang lupa melakukan pengujian selalu dekat dengan api bunsen sehingga dimungkinkan adanya kontaminasi silang c. Kurang siapnya praktikan dalam melakukan praktikum sehingga ada tahap-tahap yang sedikit tidak sesuai prosedur misalnya melakukan penanaman pada cawan dengan membuka penuh cawan sehingga memungkinkan adanya kontaminasi

BAB V PENUTUP A. Kesimpulan

1. Dilakukan isolasi dan inokulasi pada sampel sendok makan dengan menggunakan media PCA dan EMBA 2. Inokulasi pada media PCA menggunakan 3 sampel pengenceran yaitu sampel 10-3, sampel 10-4, sampel 10-5 3. Inokulsi pada media EMBA hanya mengguakan 1 sampel pengenceran yaitu sampel 10-3. 4. Hasil praktikum isolasi dan Inokulasi selanjutnya dimasukan inkubator selama 2x24 jam yang kemudian akan dilihat hasilnya pada praktikum hitung cawan dan mikrobiologi.

B. Saran

1.

Sebelum melakukan praktikum, sebaiknya praktikan mempersiapkan diri dan peralatan lebih detail untuk menghindari adanya kekurangan pada saat praktikum berlangsung

2.

Praktikan sebaiknya lebih hati-hati saat melakukan praktikum dalams suasana yang aseptis guna menghindari adanya kontaminasi silang dan kevalidan dalam hasil praktikum

49

DAFTAR PUSTAKA

1.

Jawetz, and Melnick. Mikrobiologi Kedokteran, EGC, J akarta. 1996.

2.

Pratiwi, Sylvia. Mikrobiologi Farmasi. Erlangga. Jakarta.2008.

3.

L.Waluyo, Teknik dan Metode Dasar dalam Mikrobiologi , Malang: UMM Press 180-182. 2008

4.

Michael, dkk. Dasar-Dasar Mikrobiologi, Penerbit Universitas Indonesia. Jakarta. 2008.

5.

Isolasi Mikroba Penghasil Antibiotika dari Tanah Kampus Unsri Indralaya Menggunakan Media Ekstrak Tanah. Jurnal Penelit ian Sains. 2011.

6. Nofiani. R, Nurbetty. S, Sapar. A. Aktifitas Antimikroba Ekstrak Metanol Bakteri Berasosiasi Spons Dari Pulau Lemukutan Kalimantan Barat . Universitas Tanjung Pura: Pontianak. 2009. 7.

Laboratorium

Biologi

dan

Bioteknologi

Tanah.

Petunjuk

Praktikum

Mikrobiologi Pertanian. UNS Surakarta. 2014 8.

Hadioetomo R. Mikrobiologi Dasar-dasar Dalam Praktek . Jakarta : Gramedia. 1996.

9. Nurjanah,Siti. Kajian Sumber Cemaran Mikrobiologis Pangan Pada Beberapa Rumah Makan 01 Lingkar Kampus Ipb Darmaga, Bogor .Jurnal IImu Pertanian Indonesia him. 11(3) 18-24 ISSN 0853 – 4217. 2006. 10. Siagian

,albiner.

Mikroba

Patogen

Pada

Makanandan

Sumber

Pencemarannya. 2002 11. Pasalu, Deviyanti dkk. Analisis total Mikroba dan Jenis Mikroba Patogen pada Jajanan Anak di SDN Kompleks Mangkura kota Makasar . FKM Unhas. 2014 12. Marisdayana, Rara dkk. Teknik Pencucian Alat Makan, Personal Hygiene terhadap Kontaminasi Bakteri pada Alat Makan . Jurnal Endurance. 2017;2(3) 376-382 13. Dijakartasunarno dkk. Survey Kontaminasi Bakteri Patogen Pada Makanan Danminuman Yang Dijual Di Sekitar Gedung Perkantoran . 2012 14. Teknik Pencucian Piring . Kementrian Kesehatan Republik Indonesia. Jakarta; 2009

50


Tangan Praktikan disem rot den an

Sampel sendok dibasuh Na Fisiolo is

Na fisiologis dimasukan la i kedalam tabun

dilakukan pengenceran seban ak 5 kali

dilakukan pengenceran seban ak 5 kali

Dilakukan penanaman ada media PCA

51

52

pengisian media PCA ke dalam cawan

Hasil akhir

Penanaman pada media EMBA

53

B.

Laporan Sementara

54

55

Pengujian Boraks

56

BAB I PENDAHULUAN

A. Latar Belakang Penggunaan Bahan Tambahan Pangan (BTP) dalam makanan terutama

makanan olahan merupakan hal yang tidak dapat dihindari lagi. Sejak pertengahan abad ke-20, BTP khususnya bahan pengawet semakin sering digunakan dalam produksi pangan, yang dimaksud dengan Bahan Tambahan Pangan (BTP) adalah bahan yang ditambahkan ke dalam makanan untuk mempengaruhi sifat ataupun bentuk makanan, bisa memiliki nilai gizi tetapi bisa pula tidak. Adapun jenis-jenis BTP yaitu pengawet, pewarna, penyedap, pemanis, pemutih, pengental, dan lain-lain. Pada umumnya boraks digunakan sebagai antiseptik dan zat pembersih. Selain itu boraks juga digunakan sebagai bahan baku pembuatan detergen, pengawet kayu, antiseptik, pengontrol kecoak dan lainnya, terutama pada industri rumahan. Karena banyak orang yang tidak mengerti efek samping dari penggunaan boraks, maka para pengguna bahan ini mencampurkannya pada makanan yang mereka buat, dengan tujuan agar makanan tersebut menjadi lebih kenyal dan terlihat lebih menarik. Boraks pada saat ini sering digunakan dalam bahan tambahan makanan. Menurut Peraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia 1168/MENKES/PER/X/1999, boraks termasuk dari salah satu bahan kimia yang penggunaannya dilarang untuk ditambahkan ke dalam produk makanan. Boraks memiliki rumus kimia Na2B4O7·10H2O, dengan dua unsur utama yaitu Natrium dan Boron. Cara identifikasi yang paling mudah pada bahan makanan yang mengandung boraks yaitu dengan cara dibakar, dan akan menghasilkan nyala api hijau atau green flame. Boraks merupakan zat toksik yang cepat diabsorbsi oleh tubuh karena boraks memiliki tingkat kelarutan yang tinggi, sehingga distribusinya cepat menyebar ke seluruh jaringan tubuh. Organ tubuh yang paling sering terkena efek samping dari pemberian boraks adalah hepar dan ginjal. Penggunaan boraks juga sering dijumpai pada olahan gendar. Gendar merupakan makanan khas khususnya ada di pulau jawa. Gendar merupakan

57

58

bahan dasar adonan kerupuk atau bisa langsung dikonsumsi dengan keadaan masih basah (berbentuk adonan). Gendar memiliki tekstur yang kenyal yang diperoleh dari penambahan boraks atau yang lebih dikenal dengan isti lah bleng.

B. Tujuan Praktikum

Tujuan dari praktikum pengujian boraks pada sampel gendar adalah sebagai berikut : 1. Untuk mengertahui cara pengujian boraks pada makanan 2. Untuk mengetahui adanya kandungan boraks pada sampel makanan 3. Untuk membandingkan hasil pengujian boraks dengan Peraturan Menteri Kesehatan nomor 33 tahun 2012 tentang Bahan Tambahan Makanan


Manfaat dari praktikum pengujian boraks pada sampel gendar adalah sebagai berikut : 1. Praktikan dapat mengetahui cara pengujian boraks pada sampel makanan 2. Praktikan dapat menetahui adanya kandungan formalin pada sampel makanan 3. Praktikan dapat membandingkan hasil pengujian boraks dengan Peraturan Menteri Kesehatan nomor 33 tahun 2012 tentang Bahan Tambahan Makanan 4. Praktikan dapat mengetahui dampak penggunaan boraks pada makanan

BAB II TINJAUAN PUSTAKA

A. Bahan Tambahan Makanan

Pada umumnya dalam pengelolaan makanan selalu diusahakan untuk menghasilkan produk makanan yang disukai dan berkualitas baik. Untuk mendapatkan makanan seperti yang diinginkan maka sering pada proses pembuatannya dilakukan penambahan “bahan tambahan makanan (BTM)” yang disebut zat aktif kimia ( food additive). 1 Penggunaan bahan tambahan atau zat aditif pada makanan semakin meningkat, terutama setelah adanya penemuanpenemuan termasuk keberhasilan dalam mensintesis bahan kimia baru yang lebih praktis, lebih murah, dan lebih mudah diperoleh. 2 Data Badan Pengawas Obat dan Makanan (BPOM) menunjukkan bahwa sepanjang tahun 2012, insiden keracunan akibat mengkonsumsi makanan menduduki posisi paling tinggi, yaitu 66,7%, dibandingkan dengan keracunan akibat penyebab lain, misalnya obat, kosmetika, dan lain-lain. Salah satu penyebab keracunan makanan adalah adanya cemaran kimia dalam makanan tersebut, seperti boraks, formalin dan rhodamin-B. 3

B. Pengertian Boraks

Boraks adalah senyawa kimia turunan dari logam berat baron (B), boraks merupakan antiseptik dan pembunuh kuman.Boraks adalah senyawa kimia dengan rumus Na2B4O710H2O berbentuk kristal putih, tidak berbau dan stabil pada suhu dan tekanan normal. Dalam air, borks berubah menjadi Natrium hidroksida dan asam berat. 4 Boraks memiliki sifat antiseptik dan biasa digunakan oleh industri farmasi sebagai ramuan obat, misalnya salep, bedak, larutan kompres dan obat pencuci mata. Selain itu, boraks juga digunakan sebagai bahan solder, pembuatan gelas, bahan pembersih/pelicin, pengawet kayu atau antiseptik kayu.5

59

60

C. Fungsi Boraks

Saat ini, boraks umumnya digunakan sebagai pengenyal makanan.

6

Fungsi boraks yang sebenarnya adalah digunakan dalam dunia industri non pangan sebagai bahan solder, bahan pembersih, pengawet kayu, antiseptik, dan pengontrol kecoa. 7 Boraks adalah campuran garam mineral yang memiliki konsentrasi tinggi digunakan dalam pembuatan beberapa makanan tradisional seperti karak dan gendar. Penggunaan boraks dalam ekstraksi emas bisa dilebur dan dipisahkan dengan material lainnya ataupun material pengotor.

D. Peraturan Mengenai Boraks

Boraks memiliki efek racun yang sangat berbahaya pada sistem metabolisme manusia. Dalam Peraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia Nomor 722/Menkes/Per/IX/1998 dan Permenkes Nomor 33 tahun 2012 tentang bahan tambahan makanan, boraks dinyatakan sebagai bahan berbahaya dan dilarang untuk digunakan dalam pembuatan makanan. 8

E. Dampak Boraks Bagi Kesehatan

Boraks yang terdapat pada makanan menyebabkan boraks terserap oleh darah dan tersimpan dalam hati. Karena tidak mudah larut dalam air, boraks bersifat kumulatif. Sering mengkonsumsi makanan mengandung boraks menyebabkan gangguan otak, hati, lemak dan ginjal.

9

Dalam jumlah banyak,

boraks menyebabkan demam, anuria (tidak terbentuknya urin), koma, merangsang sistem saraf pusat, menimbulkan depresi, apatis, sianosis, tekanan darah turun, kerusakan ginjal, pingsan bahkan kematian.

10

Keracunan boraks dapat disebabkan oleh absorbsi dalam waktu yang lama. Akibat yang timbul diantaranya anoreksia, berat badan turun, muntah,diare, ruam kulit, alposia, anemia dan konvulsi. 11 Dalam jumlah serta dosis tertentuboraks bisa mengakibatkan degradasi mental, serta rusaknya saluran pencernaan. Boraks cepat diabsorbsi oleh saluran pernafasan dan pencernaan, kulit yag luka dan membran mukosa. Penggunaan boraks apabila dikonsumsi terus menerus dapat mengganggu gerak pencernaan usus, kelainan pada sususnan syaraf, depresi dan kekacauan mental. 12

BAB III METODE PRAKTIKUM

A. Waktu Praktikum

Praktikum pengujian boraks dilakukan hari hari Rabu, 1 November 2017

B. Tempat Praktikum

Praktikum

pengujian

boraks

dilakukan

di

Laboratorium

Kesehatan

Lingkungan, Fakultas Kesehatan Masyarakat Universitas Diponegoro.

C. Alat

1. Rak tabung reaksi dan tabung reaksi (1 buah) 2. Pipet tetes (1 buah) 3. Beaker glass (1 buah) 4. Gelas ukur 100 ml (1 buah) 5. Spatula (1 buah) 6. Pisau (1 buah) 7. Telenan (1 buah) 8. Mortar dan penggerus (1 buah) 9. Timbangan analitik (1 buah) 10. Corong Kaca (1 buah)

D. Bahan

1.

Tes kit boraks

2.

Kertas pH (lakmus)

3.

HCL

4. NaOH 10% 5.

Aquadest

6.

Air Panas

7.

Sampel makanan gendar

61

62

E. Sampling

Sampel yang digunakan untuk praktikum pengujian boraks adalah sampel gendar dari dari angkringan di daerah Jurang Belimbing yang dibeli pada Rabu, 1 November 2017 pukul 07.25 WIB seharga Rp. 2500,00.

F.

Skema Kerja

Sampel makanan dihaluskan dengan mortar dan penggerus

Dimasukan sampel sebanyak 10 gram yang telah ditimbang kedalam beaker glass dan diberi air panas sebanyak 30 ml, aduk hingga larut

Dimasukan sampel sebanyak 10 gram ke dalam tabung reaksi dan ditambahkan ±4 tetes HCL hingga pH mencapai 1-2 (cek dengan kertas pH)

Dicelupkan kertas tes kit boraks ke dalam sampel, kemudian ambil dan dikeringkan

Jika warna berubah menjadi merah orange, maka positif boraks

Dilakukan uji lanjutan, diteteskan NaOH hingga berubah warna menjadi hijau kehitaman berarti positif mengandung boraks, apabila negatif maka berubah warna menjadi menjadi merah kecoklatan

Gambar 3.1. Skema Kerja Pengujian Boraks

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN A. Hasil

Tabel 4.1. Hasil uji warna tes kit boraks No Sampel

1

Gendar

Warna tes kit

Warna tes kit

sebelum

sesudah

dicelupkan

dicelupkan

Kuning

Kuning, tetapi

angkringan

terdapat

jalan Jurang

perbedaan dari

Belimbing

warna

Hasil

Negatif

sebelumnya

Gambar 4.1. Hasil Pengujian Boraks Hasil pengujian boraks berdasarkan tabel 4.1 dan gambar diatas adalah negatif, setelah tes kit dicelupkan kedalam larutan sampel warna tes kit tetap kuning tetapi warna kuning yang dihasilkan berbeda dengan warna kuning sebelum tes kit dicelupkan. Kemudian dilakukan uji lanjutan meneteskan NaOH pada test kit dan warna berubah menjadi merah kecoklatan yang berarti negatif boraks.

63

64

B. Pembahasan

1. Deskripsi Pengujian Praktikum dilaksanakan di Laboratorium Kesehatan Lingkungan pukul 08.00. Uji boraks menggunakan sampel gendar. Hal pertama yang dilakukan adalah menghaluskan sampel gendar dengan mortar dan penggerus, lalu sampel yang sudah halus ditimbang 10 gram dengan timbangan analitik dan dimasukan ke dalam beaker glass. Kemudian dicampurkan dengan air panas 30 ml dn diaduk hingga larut. Larutan sampel sebanyak 10 ml dimasukan ke dalam tabung reaksi dan ditambahkan ±4 tetes HCL hingga pH menjadi 1-2 dan dicek dengan kertas Ph. Lalu, tes kit dicelupkan kedalam larutan sampel apabila warnanya berubah menjadi orange maka diduga positif mengandung boraks. Selanjutnya, dilakukan uji lanjutan dengan meneteskan NaOH 10% hingga terjadi perubahan warna menjadi hijau kehitaman maka positif, apabila negatif warna menjadi merah kecoklatan. 2. Gambaran Umum Sampel Praktikum kali ini dilakukan untuk melakukan uji boraks pada sampel gendar di angkringan jurang blimbing. Gendar adalah kerupuk yang terbuat dari adonan nasi diberi bumbu remah dan penambah rasa. untuk menambah kekenyaln gendar sering kali ditambahkan bleng, tetapi jika tidak menggunakan bleng bisa ditambahkan tepung tapioka. Sampel gendar yang digunakan dalam pengujian adalah adonan nasi yang biasanya dikonsumsi bersama pecel. Sampel dibeli pada hari H praktikum, yaitu Rabu, 1 November 2017 pukul 07.25 WIB seharga Rp. 2500,00. Sampel yang dibeli langsung digunakan tanpa mengalami peroses penyimpanan terlebih dahulu, sampel diperoleh dari angkringan di daerah Jurang Belimbing. 3. Hasil Pengujian Hasil pengujian kali ini menunjukan bahwa sampel gendar negatif mengandung boraks. Berdasarkan Permenkes nomor 33 tahun 2012 Tentang Bahan Tambahan Makanan yang melarang penggunaan boraks

65

sebagai bahan dalam makanan, sehingga gendar yang diperoleh di angkringan jurang belimbing aman untuk dikonsumsi. 4. Faktor-Faktor Yang Mempengaruhi Hasil Praktikum Faktor yang mempengaruhi hasil praktikum pengujian boraks adalah praktikan yang kurang teliti ketika mengamati perubahan warna saat diteteskan larutan HCL dan NaOH 10%, dan pada saat penimbangan sampel yang telah dihaluskan beratnya kurang sesuai dari yang telah ditetapkan.

BAB V PENUTUP

A. Kesimpulan

1. Pada praktikum uji boraks dengan sampel makanan gendar yang dijual angkringan Jurang Belimbing diperoleh hasil uji negatif mengandung boraks 2. Berdasarkan hasil pengujian dan Peraturan Menteri Kesehatan nomor 33 tahun 2012 tentang bahan tambahan makanan yang melarang penggunaan boraks sebagai bahan tambahan makanan

sehingga dapat disimpulkan

bahwa gendar di angkringan jurang belimbing aman untuk dikonsumsi.

B. Saran

1. Dalam melakukan praktikum, sebaiknya praktikan mempelajari terlebih dahulu cara kerja pengujian untuk meminimalisir terjadinya kesalahan. 2. Praktikan harus selalu menjaga kebersihan, kerapian, dan kedisiplinan baik sebelum, saat atau setelah praktikum berlangsung.

66

DAFTAR PUSTAKA

1.

Widyaningsih, T, D, dan Murtini, ES. Alternatif Pengganti Formalin Pada Produk Pangan. Pangan. Trubus agrisarana, Jakarta. 2006.

2.

Siaka,M. Analisis Siaka,M. Analisis Bahan Pngawet Benzoat Pada Saos Saos Tomat yang Beredar di Wilayah kota Denpasar. Jurusan Denpasar. Jurusan kimia FMIPA Udayana. 2015.

3.

Pratamanitya, Yhona dkk . Kandungan Bahan Tambahan Pangan Berbahaya pada Makanan Jajan Anak Sekolah Dasar Dasar di kabupaten Bantul. Jurnal gizi dan dietik Indonesia. 2016.

4.

Cahyadi, W. Analisis W. Analisis dan Aspek Kesehatan Bahan Tambahan Pangan edisi 2 cetakan 1. Jakarta; Bumi Aksara. 2008

5.

Hardinsyah dan Sumali. Pengendalian Mutu dan Keamanan Pangan. Jakarta;Koswara. 2001

6.

Suhanda, Rikky. Higiene Rikky. Higiene Sanitasi Pengolahan dan Analisa Boraks pada pada Bubur Ayam yang yang Dijual di Kecamatan Medan Sunggal Sunggal Tahun Tahun 2012. 2012. Skripsi. Medan: Universitas Sumatera Utara. 2012.

7.

Arsyad,M Yandri dkk. Uji Kualitatif Boraks dan Formalin pada Bakso yang Dijual di Kecamatan Limboto Kabupaten Gorontalo . Jurnal kajian veteriner. 3(1):11-15 ISSN 2356-4113

8.

Depkes RI dan Dirjen POM. Peraturan Menteri Kesehatan nomor 33 tahun 2012 Tentang Bahan Tambahan Makanan. 2012

9.

Depkes RI, Pedoman Penggunan bahan Tambahan Pangan Bagi Industri. Jakarta. 2002

10. Aminah dan Himawan. Bahan-bahan Berbahaya dalam Kehidupan . Bandung;Salamadani. 2009 11. Yuliarti, N. Awas N. Awas Bahaya Dibalik Lezatnya Makanan. Makanan. Yogyakarta;Andi. 2007 12. Syah,O dkk. Manfaat dan Bahaya Bahan Tambahan Pangan. Bogor : Himpunan Alumni Fakultas Teknologi Pertanian. 2001

67

LAMPIRAN A. Dokumentasi Dokumentasi Praktikum

Sampel dihaluskan den den an morta mortarr dan dan

Sampel ditimbang

Sampel dimasukan beaker lass

Sampel ditambahkan air panas

Sampel diaduk sampai larut

Sampel disaring dan diukur dengan gelas ukur 68

69

Sampel dimasukan tabung reaksi

Ditambahkan HCL pada tab tabun ber berisi sam el

Tes kit boraks

pH sampel diukur

Sampel diukur dengan tes kit boraks

Hasil pengujian

70


71

Pengujian Rhodamin B

72

BAB I PENDAHULUAN

A. Latar Belakang

Makanan merupakan salah satu kebutuhan dasar manusia yang terpenting dan juga merupakan faktor yang sangat esensial bagi pertumbuhan dan perkembangan manusia. Tetapi betapapun menariknya penampilan, lezat rasanya dan tinggi nilai gizinya, apabila tidak aman dikonsumsi, maka makanan tersebut tidak ada nilainya sama sekali. Rhodamin B merupakan zat warna sintetik yang umum digunakan sebagai pewarna tekstil. Menurut Peraturan Pemerintah RI No.28, Tahun 2004, rhodamin B merupakan zat warna tambahan yang dilarang penggunaannya dalam produk-produk pangan. Rhodamin B dapat menyebabkan iritasi saluran pernafasan, iritasi kulit, iritasi pada mata, iritasi pada saluran pencernaan, keracunan,gangguan hati dan dapat menyebabkan kanker. Zat warna Rhodamin B walaupun telah dilarang penggunaanya ternyata masih ada produsen yang sengaja menambahkan zat warna rhodamin B untuk produknnya. Pewarna rhodamin B banyak digunakan pada produk makanan dan minuman industri rumah tangga, antara lain terdapat padakerupuk, makanan ringan, permen , sirup, minuman kemasan, es doger, dan manisan. Makanan yang diberi zat pewarna ini biasanya berwarna lebih terang dan ditemukan pada makanan dan minuman jajanan anak Sekolah Dasar (SD). Kelebihan dosis Rhodamin B bisa menyebabkan kanker, keracunan, iritasi paru-paru, mata, tenggorokan, hidung, dan usus.

B. Tujuan Praktikum

1. Untuk mengetahui keberadaan kandungan rhodamin B dalam sampel kolang-kaling merah. 2. Untuk mengetahui indikator-indikator perubahan warna pada hasil akhir pengujian rhodamine B.

73

74

3. Untuk membandingkan hasil pengujian rhodamin B dengan nilai ambang batas pada Peraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia Nomor 1168/MENKES/PER/X/1999 tentang Bahan Tambahan Pangan.


1. Mahasiswa dapat mengetahui cara pengujian rhodamin B dalam makanan. 2. Mahasiswa dapat mengetahui adanya kandungan rhodamin B dalam makanan 3. Mahasiswa dapat mengetahui dampak yang ditimbulkan akibat rhodamin B


A. Pengertian Bahan Tambahan Pangan

Makanan adalah segala sesuatu yang kita makan atau minum untuk menunjang proses kehidupan dan pertumbuhan dalam kondisi yang normal. 1 Pengertian Bahan Tambahan Pangan (BTP) dalam Peraturan Menteri Kesehatan

RI

No.722/Menkes/Per/IX/88

No.1168/Menkes/PER/X/1999

secara umum adalah bahan yang biasanya tidak digunakan sebagai makanan dan biasanya bukan merupakan ingredien khas makanan, mempuyai atau t idak mempunyai nilai gizi,yang dengan sengaja ditambahkan ke dalam makanan untuk maksud teknologi (termasuk organoleptik) pada pembuatan, pengolahan, penyediaan, perlakuan, pewadahan, pembungkusan, penyimpanan atau pengangkutan makanan untuk menghasilkan atau diharapkan menghasilkan (langsung atau tidak langsung) suatu komponan yang mempengaruhi sifat khas makanan.2 Beberapa bahan tambahan yang dilarang digunakan dalam makanan, menurut

Permenkes

RI

No.722/Menkes/Per/IX/88

No.1168/Menkes/PER/X/1999 sebagai berikut 3 : 1. Natrium tetraborat (boraks) 2.

Formalin (formaldehid)

3.

Minyak nabati yang dibrominasi (brominanted vegetable oils)

4.

Kloramfenikol (chloramfenicol)

5.

Dietilpirokarbonat

6. Nitrofuranzon 7.

P-Phenetilkarbamida

8.

Asam salisilat dan garamnya

9.

Rhodamin B (pewarna merah)

10. Methanyl yellow (pewarna kuning) 11. Dulsin(pemanis sintetis) 12. Potassium bromate (pengeras)

75

dan

76

B. Pengertian Rhodamin B

Rhodamin Badalah zat pewarna buatan yang digunakan dalam industri tekstil dan kertas. Rumus molekul dari Rhodamin B adalah C1NC1 dengan berat molekul sebesar 479.000. Zat Rhodamin B berbentuk kristal hijau atau serbuk ungu kemerah – merahan, sangat larut dalam air dan akan menghasilkan warna merah kebiru – biruan dan berfluorensi kuat. Rhodamin B dapat larut dalam alkohol, HCL dan NaOH selain mudah larut dalam air. 4

C. Karakteristik Rhodamin B

Keterangan gambar : Nama Kimia

: N-[9-(carboxyphenil)-6-(diethylamino)-3H-xanten-3 ylidene] Nethylethanaminium clorida

Nama Lazim

: tetraethylrhodamine;D&C Red No. 19;Rhodamin B clorida; C.I. Basic Violet 10; C.I. 45170

Rumus Kimia

: C12H31ClN2O3BM: 479

Pemerian

: Hablur Hijau atau serbuk ungu kemerahan

Kelarutan

:

Sangat mudah larut dalam air menghasilkan larutan merah kebiruan dan berfluoresensi kuat jika diencerkan. Sangat mudah larut dalam alkohol; sukar larut dalam asam encer dan dalam larutan alkali. Larutan dalam asam kuat membentuk senyawa dengan kompleks antimon berwarna merah muda yang larut dalamisopropil eter.5

77

D. Fungsi Rhodamin B

Rhodamin B merupakan pewarna yang dipakai untuk industri cat, teksti, dan kertas. Rhodamin B merupakan zat warna yang berbentuk serbuk kristal, tidak berbau, berwarna merah keunguan, dalam bentuk larutan berwarna merah terang berpendar (berfluorensi).6

E. Peraturan terkait Rhodamin B

Berdasarkan Peraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia RI No.1168/Menkes/PER/X/1999 tentang Bahan Tambahan Pangan yang Dinyatakan sebagai Bahan Berbahaya, memuat sebanyak 30 zat warna yang dilarang digunakan untuk pangan termasuk rhodamin B dan met hanyl yellow. 2 Zat warna rhodamin B walaupun telah dilarang penggunaannya ternyata masih ada produsen yang sengaja menambahkan zat warna rhodamin B untuk produknya.7

F.

Dampak Bagi Kesehatan

Efek negative penggunaan pewarna iniyaitu dapat menyebabkan iritasi lambung, alergi, bersifat karsinogenik (menyebabkan kanker) dan bersifat mutagen (menyebabkan perubahan fungsi sel/jaringan). 8 Jika pewarna ini atau Rhodamin B dikonsumsi dalam jumlah besar dan berulang, maka akan terjadi penumpukan dalam tubuh yang dapat menyebabkan iritasi pada mukosa saluran pencernaan, dan bila terhirup dapat mengiritasi saluran pernafasan, jika terkena kulitdapat mengiritasi kulit, jika terkena mata maka mata menjadi kemerahan dan udem.9 Serta dapat menimbulkan kerusakan pada beberapa organ seperti hepar, ginjal, maupun limpa. 10


A. Waktu Praktikum

Praktikum pengujian rhodamine B pada sample makanan dilakukan di Laboratorium Kesehatan Lingkungan Fakultas Kesehatan Masyarakat UNDIP pada hari Rabu, 1 November 2017 pada pukul 07.30 WIB

B. Tempat Praktikum

Praktikum pengujian rhodamine B pada sample makanan dilakukan di Laboratorium Kesehatan Lingkungan Fakultas Kesehatan Masyarakat UNDIP.

C. Alat

1. Gelas Ukur

1 buah

2. Beaker Glass

1 buah

3. Batang Pengaduk/ Spatula

1 buah

4. Rak Tabung Reaksi

1 buah

5. Tabung Reaksi

2 buah

6. Pipet Tetes

1 buah

7. Pipet Ukur dan Bulb

2 buah

8. Timbangan Analitik

1 buah

9. Mortar dan Penggerus

1 buah

10. Pisau

1 buah

11. Talenan

1 buah

12. Cawan Petri

1 buah

13. Vortex

1 buah

14. Corong Kaca

1 buah

D. Bahan

1. Sampel Arum Arum 2. NaOH 10% 3. HCl 10%

78

79

4. Aquadest 5. Kertas Saring Whatman 6. Ether

E. Sampling

Sampel yang digunakan dalam uji kandungan rhodamine B adalah manisa kolang-kaling berwarna merah. Sampel kolang-kaling merah dibeli sebesar Rp 2000 di Jalan Nirwanasari pada hari Selasa, 31 Oktober 2017 pada pukul 16.00 WIB

F.

Skema Kerja

1. Persiapan Sampel Dimasukkan sampel arum manis sebanyak 10 gram ke dalam beaker glass

Dilarutkan dengan 30 ml aquadest, kemudian diaduk hingga zat warna larut dalam air

Dipisahkan antara larutan zat warna dengan destilat sampel dengan menggunakan kertas saring whatman

Diambil filtrat sebagai larutan uji Gambar 3.1 Skema Kerja Persiapan Sampel

80

2. Reaksi Khusus untuk Rhodamin B Diambil 3 ml larutan uji, dimasukkan ke dalam tabung reaksi

Ditambah NaOH 10% ± 4 tetes, ditambah ether lalu divortex (digojog

Fase ether dipisahkan dengan pipet tetes, kemudian ditambah HCl 10% 8 tetes hingga mengalami perubahan warna

Dilihat Perubahannya

Reaksi khusus untuk rhodamin B: larutan uji mengandung rhodamin B jika terjadi warna merah di lapisan bawah (lapisan asam) Gambar 3.1 Skema Kerja Uji Reaksi Khusus Rhodamin B

BAB IV HASIL

A. Hasil

Hasil pengujian rhodamin B dengan sampel koalang-kaling merah yang dilakukan di Laboratorium Terpadu Fakultas Kesehatan Masyarakat Universitas Diponegoro pada hari Rabu, 4 November 2017 adalah sebagai berikut : Tabel 4.1. Hasil Pengujian Rhodamin B Sampel Uji

Perlakuan Uji

Hasil Uji

Manisan

Larutan

kolang-kaling

ditambahkan

merah

dari NaOH 10%, ether

larutan

merah penjual

uji Negatif (-)

Keterangan

es 2 ml dan HCL

Jalan

Tidak ada warna pada setelah

ditetesi HCl 10%

10%

Nirwanasari Semarang

Gambar 4.1 Hasil Pengujia Rhodamin B Berdasarkan hasil pengujian rhodamine B pada sampel kolang-kaling merah dengan menggunakan uji reaksi khusu didapatkan hasil uji negative atau bebas Rhodamin B. hasil uji dinyatakn negative kare tidak terbentuk warna

81

82

merah di lapisan bawah larutan setelah fase ether dan penambahan HCL 10%. Hasil uji Rhodamin B yang negative pada sampel manisan kolang-kaling merah menandakan bahwa makanan tersebut aman untuk dikonsumsi.

B. Pembahasan

1. Deskripsi Pengujian Praktik pengujian rhodamine B menggunakan uji reaksi khusus untuk rhodamine B. Hal pertama yang dilakukan sebelum pengujian adalah mempersiapkan alat dan bahan. Dilakukan penimbangan sampel kolangkaling merah dengan menggunakan timbangan analitik seberat 10 gram. Sampel sebanyak 10 gram tersebut dimasukkan ke dalam beaker glass, kemudian dilarutkan dengan menggunakan 30 ml aquadest dan diaduk hingga larut dalam air. Sampel dipisahkan antara larutan zat warna dengan destilat sampel menggunakan kertas saring whatman. Diambil filtrat sebanyak 3 ml sebagai larutan uji dan dimasukkan ke dalam tabung reaksi. Selanjutnya ditambahkan NaOH 10% 4 tetes, lalu ditambahkan ether dan digojog menggunakan vortex. Setelah itu dipisahkan fase ethernya menggunakan pipet. Fase ether yang telah dipisahkan ditambahkan HCl 10% sebanyak tetes dan selanjutnya dilihat perubahan yang terjadi. Hasil yang diperloeh yaitu tidak terdapat warna merah dilapisan bawah laruta, dimana hal ini menunjukan sampel tidak mengandung rhodamine B. 2. Gambaran Umum Sampel Sampel yang digunakan dalam uji kandungan rhodamine B adalah manisa kolang-kaling berwarna merah. Sampel kolang-kaling merah dibeli sebesar Rp 2000 di Jalan Nirwanasari pada hari Selasa, 31 Oktober 2017 pada pukul 16.00 WIB. 3. Hasil Pengujian Berdasarkan hasil pengujian kandungan Rhodamin B pada sampel kolang-kaling merah, setelah fase ether dan penambahan HCL 10% tidak terbentuk warna merah di lapisan bawah larutan. Hal tersebut menunjukkan bahwa sampel kolang-kaling merah negatif mengandung rhodamin B, sehingga makanan kolang-kalinh tersebut aman untuk konsumsi.

83

Peraturan

Menteri

Kesehatan

RI

Nomor

1168/MENKES/PER/X/1999 tentang perubahan atas Perubahan Mentri Kesehatan Nomor 722/MENKES/PER/IX/1988 tentang Bahan Tambahan Pangan ditegaskan bahwa rhodamine B termasuk bahan tambahan (pewarna makanan) yang dilarang digunakan didalam makanan. J adi dapat disimpulkan bahwa manisan kolang-kaling merah yang digunakan sebagai sampel layak dikonsumsi karena bebas rhodamin B. 4. Faktor-Faktor Yang Mempengaruhi Hasil Praktikum Faktor-faktor yang dapat mempengaruhi hasil praktikum uji rhodamine B pada sampel manisan kolang-kaling merah adalah : a. Sampel yang digunakan cukup sulit dihaluskan karena teksturnya yang keras dan licin. b. Praktikan harus memperhatikan pengambilan fase ether, ambil hanya bagian yang berwarna bening. c. Perlu ketelitian dan kehati-hatian dalam melakukan proses pengujian rhodamine B

BAB V PENUTUP

A. Kesimpulan

1. Pada praktikum uji kandungan rhodamin B dengan sampel makanan manisan kolang-kaling merah yang dijual di Jalan Nirwanasari diperoleh hasil uji negatif rhodamin B. 2. Perubahan warna yang terjadi pada uji rhodamine B terhadap manisan kolang-kaling merah yaitu tidk terbentuk warna pada lapisa bawah setelah fase ether ditambah HCL 10%. 3. Berdasarkan hasil pengujian dan Peraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia Nomor 1168/MENKES/PER/X/1999 tentang Bahan Tambahan Pangan, dapat disimpulkan bahwa arum manis yang dijual di SD sekitar Tembalang aman untuk dikonsumsi.

B. Saran

1. Praktikan harus lebih teliti dan cermat dalam melakukan uji rhodamine B 2. Praktikan harus selalu menjaga kebersihan, kerapian, dan kedisiplinan baik sebelum, saat dan setelah praktikum berlangsung.

84

DAFTAR PUSTAKA

1.

Hughes, C., The Additives Guide. Jhon Wiley and Sons, Chichester . 1987

2.

Menteri

Kesehatan.

Peraturan

Mentri

Kesehatan

RI

Mentri

Kesehatan

RI

No.722/Menkes/Per/IX/88. 1988 3.

Menteri

Kesehatan.

Peraturan

No.1168/Menkes/PER/X/1999. 1999 4.

Wisnu, C.. Analisis dan Aspek Kesehatan Bahan Tambahan Pangan. Jakarta : Bina Aksara. 2008

5.

Budavari, S. Editor. The Merck Index. Edisi 12. Whitehouse. USA : Merck and Co.,Inc. 1996.

6.

Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Dampak dan Penggolongan Bahan Tambahan Pangan. Jakarta : Depatemen Kesehehatan Press. 2007.

7.

Sari, duma. identifikasi rhodamin B pasa syrup berwarna merah yang beredar di kota medan. Fakultas Biologi Universitas Medan. 2014

8.

Judarwanto, D. Waspadai Zat Additif dalam Makanan . Yogyakarta: Buku Biru. 2011

9.

Yulianti,

N.

Awas

!

Bahaya

Dibalik

Lezatnya Makanan.Edisi

Pertama.Yogyakarta : CV. Andi Offset. 2007. 10. Trestiati, M. Analisis Rhodamine B pada Makanan dan Minuman Jajanan Anak Sekolah Dasar (Studi Kasus : Sekolah Dasar di Kecamatan Margaasih).Tesis. Bandung

:

Pascasarjana

Lingkungan. 2003.

85

Fakultas

Kesehatan

LAMPIRAN

A. Dokumentasi Praktikum

Sampel diiris tipis dan dicincang

Larutan sampel air disaring dengan kertas whatman

Sampel ditimbang dengan timbangan analitik

Sampel dicampur dengan aquadest 30ml

Sampel ditambahkan

Sampel ditambah eter 2ml

NAOH 10%

86

87

Laturan dihomogenkan dengan vortex

Larutan sampel membentuk dua lapisan warna

Ditambah HCL 10 %

Diambil fase ethernya

Hasil pengujian rhodamine B

88


89

Pengujian Formalin

90

BAB I PENDAHULUAN

A. Latar Belakang

Dewasa ini, produk pangan semakin baragam bentuknya, baik itu dari segi jenisnya maupun dari segi rasa dan cara pengolahannya. Namun seiring dengan semakin pesatnya teknologi pengolahan pangan, penambahan bahan bahan aditif pada produk pangan sulit s ulit untuk dihindari. Akibatnya keamanan pangan telah menjadi dasar pemilihan suatu produk pangan yang akan dikonsumsi. Keamanan pangan merupakan hal yang sedang banyak dipelajari, karena manusia semakin sadar akan pentingnya sumber makanan dan kandungan yang ada di dalam makanannya. Hal ini terjadi karena adanya kemajuan ilmu pengetahuan serta kemajuan teknologi, sehingga diperlukan suatu cara untuk mengawasi keamanan pangan. Dalam proses keamanan pangan, dikenal pula usaha untuk menjaga daya tahan suatu bahan sehingga banyaklah muncul bahan-bahan pengawet yang bertujuan untuk memperpanjang masa simpan suatu bahan pangan. Namun dalam praktiknya di masyarakat, masih banyak yang belum memahami perbedaan penggunaan bahan pengawet untuk bahan-bahan pangan dan non pangan. Formalin merupakan salah satu pengawet non pangan yang sekarang sekar ang banyak digunakan untuk mengawetkan makanan, namun walau daya awetnya luar biasa, formalin dilarang digunakan pada makanan karena berbahaya untuk kesehatan manusia. Bahaya yang ditimbulkan akibat penggunaan formalin bermacam-macam, misal mual, muntah, bahakan dapat menyebabkan kanker. Hal ini disebabkan oleh bahaya residu yang ditinggalkannya bersifat karsinogenik bagi tubuh manusia. Oleh karena itu perlu dilakukan uji formalin pada berbagai produk pangan seperti bakso, bakso, mie basah, ikan asin dan lain-lain. Hal ini bertujuan agar kita dapat mengetahui produk apa saja yang mengandung pengawet buatan (formalin).

91

92

B. Tujuan Praktikum

1.

Praktikan mengetahui adanya kandungan formalin pada sampel bahan makanan berupa mie kuning basah.

2.

Praktikan dapat mengetahui indikator-indikator perubahan warna pada hasil akhir pengujian formalin.

3.

Praktikan mengetahui perbandingan hasil pengujian formalin berdasarkan Permenkes RI Nomor 1168/MENKES/PER/X/1999 tentang Bahan Tambahan Pangan.


1. Memberikan informasi tentang zat-zat yang dilarang penggunaanya dalam makanan. 2. Membuktikan keamanan pangan yang dikonsumsi sehari-hari. 3. Meningkatkan keterampilan praktikan dalam uji terhadap makanan.


A. Pengertian Bahan Tambahan Pangan

Pengertian Bahan Tambahan Pangan Menurut Peraturan Menteri Kesehatan RI No. 1168/ Menkes/ PER/X/1999 adalah bahan yang biasanya tidak digunakan sebagai makanan dan biasanya bukan merupakan komponen khas makanan, mempunyai atau tidak mempunyai nilai gizi, yang sengaja ditambahkan kedalam makanan untuk maksud teknologi pada pembuatan, pengolahan,

penyiapan,

perlakuan,

pengepakan,

pengemasan

dan

penyimpanan.1 Bahan tambahan pangan yang dilarang adalah semua bahan tambahan yang dapat menipu konsumen, menyembunyikan kesalahan dan teknik penanganan serta penurunan mutu. 2 Berdasarkan

Peraturan

Menteri

Kesehatan

RI

No.

1168/MENKES/PER/X/1999, bahan makanan yang dilarang digunakan dalam makanan terdiri dari :1 1. Asam borat 2. Asam salisilat 3. Dietilpirokarbonat 4. Dulcin 5. Kalium klorat 6. Kloramfenikol 7. Minyak nabati yang dibrominasi 8. Nitrofurazon 9. Formalin 10. Kalium bromat

B. Pengertian Formalin

Formalin adalah nama dagang larutan formaldehid dalam air dengan kadar 30-40%. Formalin merupakan larutan tidak berwarna dan b erbau sangat menusuk. Di dalam formalin terkandung sekitar 37% formaldehida dalam air, dan biasanya ditambahkan methanol hingga 15% sebagai pengawet. 3 Formalin

93

94

merupakan bahan pengawet mayat maupun hewan-hewan untuk keperluan penelitian, formalin juga dikenal sebagai pembunuh hama (desinfektan) dan banyak digunakan dalam berbagai industry. Nama lain dari formalin adalah formol, methylene, aldehyde, methanol, gycols, superlysoform, formaldehide dan formalin itu sendiri.4 Formalin merupakan salah satu bahan kimia bersifat racun yang sering digunakan sebagai bahan pengawet untuk contoh-contoh biologi, akan tetapi faktanya formalin banyak disalahgunakan untuk pengawet makanan. Produk produk pangan yang sering diawetkan dengan formal in seperti ikan asin, ikan segar, mie basah, tahu, bakso dan lain sebagainya. Apabila makanan yang mengandung formalin dikonsumsi maka dapat mengakibatkan gangguan pada organ dan sistem metabolisme tubuh manusia. 5

C. Fungsi Formalin

Formalin sudah sangat umum digunakan dalam kehidupan sehari-hari. Penggunaan formalin dalam kehidupan sehari-hari misalnya sebagai anti bakteri, yakni pembersih lantai, kapal, gudang, pakaian, serta pembersih lalat dan serangga lainnya.6 Formalin juga dapat digunakan untuk berbagai kegiatan sebagai berikut :7 1. Pengeras lapisan gelatin dan kertas foto 2. Bahan pembuatan pupuk urea, parfum, pengeras kuku, dan pengawet produk kosmetik 3. Pencegahan korosi pada sumur minyak 4. Bahan untuk insulasi busai 5. Bahan perekat kayu lapis

D. Karakteristik Formalin

Formalin termasuk senyawa disinfektan kuat yang sering dipakai sebagai pengawet mayat. Senyawa kimia formaldehida (formalin) merupakan aldehida dengan rumus H 2CO yang memiliki bentuk gas atau cair, atau bahkan padatan yang dikenal sebagai paraformaldehyde atau trioxane. Dalam atmosfer bumi, formaldehida dihasilkan dari aksi cahaya matahari dan oksigen terhadap

95

metana dan hidrokarbon lain yang ada di atmosfer. Formaldehida dalam kadar kecil sekali juga dihasilkan sebagai metabolit kebanyakan organisme termasuk manusia.8 Formaldehida mudah larut dalam air, sangat reaktif dalam suasana alkalis, serta bersifat sebagai pereduksi kuat. Secara alami formaldehida dapat ditemui dalam asap pada proses pengasupan makanan yang telah bercampur dengan fenol, keton dan resin. Formalin yang menguap di udara berupa gas tidak berwarna dengan bau yang tajam menyengat. 9 formaldehida bisa dioksidasi oleh oksigen atmosfer menjadi asam format, oleh karena itu l arutan formaldehida harus ditutup serta diisolasi agar tidak ada udara yang masuk.10

E. Peraturan Terkait Formalin

Dasar hukum dalam pelaksanaan kegiatan keamanan pangan adalah sebagai berikut ini: 1. Undang-undang Pangan Nomor 7 Tahun 1996 Tentang Pangan. 2. Peraturan Menteri Kesehatan Nomor 1168 Tahun 1999 tentang Bahan Tambahan Pangan. 3. Peraturan Menteri Kesehatan Nomor 33 Tahun 2012 Tentang Bahan Tambahan Pangan. 4. Peraturan Menteri Perindustrian Nomor 24/M-IND/PER5/2006 Tentang Pengawasan Produk dan Penggunaan Bahan Berbahaya untuk Industri.

F.

Ciri-ciri makanan yang Mengandung Formalin

Untuk mengetahui kandungan formalin dalam bahan makanan secara akurat dapat dilakukan uji laboratorium, akan tetapi kita juga dapat mengetahuinya dengan melihat ciri-ciri, misalnya pada mi kuning basah dapat diketahui dengan ciri-ciri berikut:11 1.

Tidak rusak dampai dua hari pada suhu kamar (25 0C) dan bertahan lebih dari 15 hari dalam lemari es (suhu 10 0C).

2.

Bau formalin agak menyengat.

3.

Mi tampak lebih mengkilap dibandingkan dengan mi normal dan tidak lengket.

96

4.

Tidak dikerubungi lalat.

5.

Tekstur mi lebih kenyal.

G. Dampak Formalin bagi Kesehatan

Menurut Internasional Programme on Chemical Safety (IPCS), ambang batas formalin dalam tubuh adalah 1 mg. dalam pangan, formalin yang boleh masuk dalam tubuh antara 1,4-14 mg. 12 Dalam Permenkes Nomor 1168/Menkes/PER/X1999 ditegaskan bahwa formalin dilarang digunakan dalam makanan, hal ini mengingat bahaya serius yang akan dihadapi bila formalin masuk kedalam tubuh yaitu akan menekan fungsi sel, menyebabkan keracunan dan menyebabkan kematian. 1 Formalin sangat berbahay bila terhirup, mengenai kulit dan tertelan. Akibat yang ditimbulkan berupa luka bakar, iritasi saluran pernafasan hingga memicu kanker. Dampak formalin pada kesehatan manusia bersifat : 1.

Akut Efek kesehatan pada manusia langsung terlihat misalnya alergi, iritasi, muntah, pusing, mata berair dan lain sebagainya.

2.

Kronik Efek kesehatan terlihat setelah terkena dalam jangka waktu yang lama dan berulang. Akumulasi formalin dalam tubuh dapat menyebabkan gangguan pencernaan, hati, ginjal, pancreas, sistem saraf dan pada manusia bersifat karinogenik.

3. Apabila terhirup dalam jangka waktu lama maka dapat menimbulkan gangguan pernafasan, sensitifitas pada paru-paru, kemandulan, efek neuropsikologis (susah tidur, cepat marah, daya ingat berkurang) dan kanker. 4.

Apabila tertelan dalam mulut, dapat menyebabkan mual, diare, pendarahan, dan pusing. Formalin yang tertelah juga dapat memicu kerusakan hati, jantung, otak, pancreas, susunan saraf pusat dan ginjal. 13

97

H. Tindakan Pencegahan

Tindakan pencegahan yang dapat dilakukan apabila terkena formalin, sebagai berikut : 1. Terhirup Untuk mencegah agar tidak terhirup gunakan APD (Alat Pelindung Diri) untuk melindungi saluran pernafasan. APD yang digunakan misalnya masker atau kain yang dapat mencegah masuknya formalin ke dalam hidung atau mulut. 2. Terkena Mata Gunakan pelindung mata atau kacamata, apabila terkena percikan zat-zat yang mengandung formalin segera cuci mata dengan air mengalir. 3. Terkena Kulit Gunakan pakaian pelindung bahan kimua yang cocok, sert a gunakan sarung tangan yang tahan terhadap bahan kimia. 4. Tertelan Hindari makanan, minuman atau merokok selama bekerja, dan cuci tangan sebelum makan.

98


A. Waktu Praktikum

Praktikum pengujian kandungan formalin pada mie kuning basah dilakukan pada hari Rabu, 1 November 2017.

B. Tempat Praktikum

Praktikum pengujian kandungan formalin pada mie kuning basah dilakukan di Laboratorium Kesehatan Lingkungan FKM UNDIP.

C. Alat

1. Tabung reaksi 1 buah 2. Erlenmeyer 1 buah 3. Beaker glass 1 buah 4. Corong 1buah 5. Pipet tetes 1 buah 6. Gelas ukur 1 buah 7. Timbangan 1 buah 8. Mortar dan penggerus 1 buah 9. Spatula 1 buah 10. Pisau 1 buah 11. Talenan 1 buah 12. Pipet ukur dan bulb 1 buah 13. Cawan petri 1 buah

D. Bahan

1. KMnO4 2. Aquadest 3. Sampel (Mie Kuning Basah) 4. Kertas Saring

98

99

E. Sampling

Sampel yang digunakan untuk praktikum pengujian formalin pada sampel makanan mie basah adalah sampel mie basah dari warung bakso “X” di Banjarsari

F.

Skema Kerja

Sampel makanan (mie kuning basah) diiris halus dan dihaluskan dengan mortar. Kemudian ditimbang 10 gr dan dimasukan kedalam beaker glass yang telah ditambahkan air panas 30 ml. diaduk hingga larut.

Sampel disaring dengan kertas saring dan diambil 2ml filtratnya. Dimasukan kedalam tabung reaksi dan diteteskan KMnO 4 sebanyak 1 tetes.

Diamati perubahan warna larutan sampel setelah ditetesi KMnO4, apabila warna pink hilang maka sampel positif mengandung formalin .

Gambar 3.1 Skema Kerja Uji Kandungan Formalin dalam Makanan


A. Hasil

Hasil pengujian kandungan formalin dalam sampel mie kuning basah yang dilakukan di Laboratorium Kesehatan Lingkungan Fakultas Kesehatan Masyarakat Universitas Diponegoro pada hari Rabu, 1 November 2017 adalah sebagai berikut : Tabel 4.1 Hasil Uji Kandungan Formalin pada Mie Kuning Basah Nama

Jenis Uji

Reaksi

Keterangan

Mie Kuning

Uji

Setelah ditetesi Sampel

Basah

ditetesi larutan oleh

Sample dengan

KMnO4

KMnO4 mengandung

sebanyak 1 tetes formalin. dan

di

homogenkan (vortex) selama 1 menit, warna pink larutan

pada sampel

hilang

dan

berubah menjadi kuning kecoklatan (keruh)

100

positif

101

Gambar 4.1 Hasil Pengujian Formalin pada Makanan Berdasarkan hasil pengujian formalin pada sampel mie kuning basah, didapatkan perubahan warna setelah ditetesi KMnO 4 sebanyak 1 tetes. Perubahan warna terjadi dari pink (merah muda) menjadi kuning kecoklatan (keruh), sesuai gambar 4.1. jadi dapat disimpulkan bahwa sampel mie kuning basah yang digunakan positif mengandung formalin.

B. Pembahasan

1. Deskripsi Pengujian Praktikum pengujian kandungan formalin pada mie kuning basah dilakukan pada hari Rabu, 1 November 2017 di Laboratorium Kesehatan Lingkungan FKM UNDIP. Langkah pertama yang dilakukan yaitu memotong mie menjadi ukuran yang lebih pendek dan kemudian dihaluskan dengan mortar dan penggerus, lalu ditimbang 10 gram. Sampel dimasukan kedalam glass beaker dan dicampur dengan aquadest 30 ml dan diaduk hingga larut. Kemudian sampel disaring dengan kertas saring kedalam erlenmeyer dan diambil filtratnya 2 ml. kemudian dimasukan kedalam tabung reaksi dan ditetesi larutan KMnO4 sebanyak 1 tetes dan dihomogenkan selama 1 menit dengan vortex. Jika sampel berubah warna dari pink menjadi pudar (hilang perlahan-lahan), maka sampel dinyatakan positif mengandung formalin.

102

2. Gambaran Umum Sampel Sampel yang digunakan untuk praktikum pengujian formalin pada sampel makanan mie basah adalah sampel mie basah dari warung bakso “X” di Banjarsari yang diambil pada hari Selasa, 31 Oktober 2017 pukul 19.00 WIB. 3. Hasil Pengujian Berdasarkan hasil pengujian kandungan formalin pada sampel mie kuning, warna sampel mula-mula putih kemudian setelah ditetesi dengan KMnO4 sebanyak 1 tetes terjadi perubahan warna menjadi pink, namun secara perlahan menghilang dan menjadi warna kuning kecoklatan (menetap). Jadi dapat disimpulkan bahwa sampel mie kuning basah ini positif mengandung formalin. Pada analisis kuantitatif, perubahan warna terjadi karena aldehid mereduksi KMnO4 sehingga warna larutan kembali menjadi kuning kecoklatan. Berdasarkan

Peraturan

Menteri

Kesehatan

RI

Nomor

1168/MENKES/PER/X/1999 tentang Perubahan atas Peraturan Menteri Kesehatan Nomor 722/MENKES/PER/IX/1988 tentang Tambahan yang Dilarang Digunakan dalam Makanan, jadi dapat disimpulkan bahwa mie kuning di Warung Bakso X tidak layak di konsumsi karena mengandung bahan yang berbahaya bagi kesehatan. 4. Faktor-Faktor Yang Mempengaruhi Hasil Praktikum a. Praktikan kurang tetili dan berhati-hati dalam melakukan praktikum b. Sampel mie basah yang kenyal sehingga susah untuk dihaluskan c. Praktikan kurang berhati-hati dalam melakukan penyaringan larutan sampel mie basah sehingga merobek kertas saring yangdigunakan untuk menyaring

BAB V PENUTUP

A. Kesimpulan

1. Hasil pengujian formalin pada sampel mie kuning basah yang berasal dari Warung Bakso X di Banjarsari adalah positif mengandung formalin. 2. Perubahan warna yang terjadi pada uji formalin terhadap sampel mie kuning basah yaitu hilangnya warna pink perlahan-lahan dan warna sampel berubah menjadi kuning kecoklatan setelah ditetesi KMnO 4. 3. Berdasarkan Permenkes RI Nomor 1168/MENKES/PER/1999 tentang Bahan Tambahan Pangan, formalin termasuk bahan tambahan yang dilarang dalam makanan dan sampel mie kuning basah yang diuji positif mengandung formalin sehingga tidak layak konsumsi.

B. Saran

1. Praktikan harus lebih teliti dan cermat dalam setiap pengujian. 2. Pemerintah diharapkan meningkatkan pengawasan dan penyuluhan kepada masyarakat mengenai bahaya formalin.

103

DAFTAR PUSTAKA

1.

Peraturan Menteri Kesehatan RI Nomor 1168/MENKES/PER/X/1999 Tentang Perubahan atas Peraturan Kesehatan Nomor 722/MENKES/PER/IX/1988 tentang Bahan Tambahan Makanan. 1999.

2.

Cahyadi, W. Analisis dan Aspek Kesehatan Bahan Tambahan Pangan. Edisi 2. Cetakan 1. Jakarta : Bumi Aksara, 2008.

3.

Handayani. Bahaya Kandungan Formalin pada Manusia. Jakarta : PT. Aksara Internasional TBK-Head office Klinik, 2006.

4.

Sujaya, I. Nengah, dkk. Pembinaan Pedagang Makanan Kaki Lima untuk Meningkatkan Higiene dan Sanitasi Pengolahan Makanan di Desa Penatih, Denpasar Timur. Jurnal Udayana Mengabdi. 2012, 9 (1).

5.

Murtini E.S dan Widyaningsih. Alternatif Pengganti Formalin pada Produk Pangan. Surabaya : Trubus Agrisarana, 2006.

6.

Yuliarti, N. Awas Bahaya di Balik Lezatnya Makanan. Yogyakarta : Andi Offset, 2007.

7.

Elis Nur Hanifah, dkk. Laporan Praktikum Kesehatan dan Keamanan Pangan : Mengidentifikasi dan Menentukan Kadar Kandungan Formalin pada Bahan Pangan. 2014.

8.

Singgih, Hariyadi. Uji Kandungan Formalin pada Ikan Asin Menggunakan Sensor Warna dengan Bantuan FMR (Formalin Main Reagent). Jurnal Eltek. 2013; 1 (1) : 55-70.

9.

Marks, Dawn, dkk. Biokimia Kedokteran Dasar. Jakarta : Buku Kedokteran EGC, 2000.

10. Anwar, F. Keamanan Pangan dalam Pengantar Pangan dan Gizi. Jakarta : PT. Penebar Swadaya, 2004. 11. Tatriatmadja, Silvana dan Taty Rusliati. Uji Formalin pada Makanan Mie di Sekitar Universitas Tarumanegara. Jakarta : Fakultas Kedokteran Universitas Tarumanegara, 2016. 12. Mardi, Chanif. Mengenal Bahaya Formalin dalam Makanan. Malang : Jurusan Kimia FMIPA Universitas Brawijaya, 2014. 13. Pringgoutomo, S dan Hirmawan. Buku Ajar Patologi 1. Edisi 1. Jakarta : EGC, 2002.

104


Sampel dihaluskan

Sampel dimasukkan kedalam beaker glass berisi a uadest

Sampel ditimbang

Larutan sampel disaring

105

Aquadest dimasukan

Larutan ditetesi KMnO4

106


107

Metode Hitung Cawan

108

BAB I PENDAHULUAN

A. Latar belakang

Undang-undang no. 36 tahun 2009 pasal 48 menyatakan bahwa penyelenggaraan upaya kesehatan dalam bentuk kegiatan dengan pendekatan promotif, preventif, kuratif, dan rehabilitatif yang dilaksanakan secara terpadu, menyeluruh, dan berkesinambungan, dilaksanakan melalui kegiatan yang salah satunya adalah pengamanan makanan dan minuman yang didukung oleh sumber daya kesehatan.1 Prinsip hygiene dan sanitasi makanan merupakan upaya untuk mengendalikan 4 (empat) faktor penyehatan makanan yang dapat atau mungkin dapat menimbulkan gangguan kesehatan atau keracunan makanan yaitu tempat/bangunan, peralatan, orang dan makanan. 2 Alat makan merupakan salah satu faktor yang memegang peranan di dalam menularkan penyakit, sebab alat makan yang tidak bersih dan mengandung mikroorganisme dapat menularkan penyakit lewat makanan ( foodborne disease). Sampel peralatan makan yang digunakan untuk pengujian adalah sendok makan. Menurut Peraturan Menteri Kesehatan RI Nomor 1096 Tahun 2011 Tentang Higiene Sanitasi Jasa Boga, angka kuman pada perala tan makan adalah 0 koloni dan peralatan makan yang kontak langsung dengan makanan yang siap disajikan tidak boleh mengandung angka kuman yang melebihi 100 koloni/cm² permukaan. 3 Salah satu cara untuk mendeteksi atau menganalisis jumlah mikroba yang ada didalam peralatan makan yaitu dengan cara uji TPC (Total Plate Count) di laboratorium. Pengujian Total Plate Count (TPC) dimaksudkan untuk menunjukkan jumlah mikroba yang terdapat dalam alat makan dengan cara menghitung koloni bakteri yang ditumbuhkan pada media agar. . Prinsip utama dari metode hitung cawan adalah menanamkan mikroorganisme dalam media agar, sehingga sel mikroorganisme dapat tumbuh dan dapat dihitung secara langsung dengan mata tanpa bantuan mikroskop. Satuan yang

109

110

digunakan untuk menyatakan jumlah koloni pada bakteri adalah cfu/mL (cfu= colony forming units).4

B. Tujuan Praktikum

1. Untuk mengetahui prosedur dan cara perhitungan cawan dengan metode hitung cawan atau Total Plate Count (TPC) pada sampel sendok makan 2. Untuk mengetahui jumlah mikroba pada media penanaman PCA dan media EMBA 3. Untuk membandingkan hasil perhitungan jumlah mikroba pada media PCA dan media EMBA dengan Peraturan Menteri Kesehatan RI Nomor 1096 Tahun 2011 Tentang Higiene Sanitasi Jasa Boga


1. Praktikan mampu mengetahui prosedur dan cara perhitungan cawan dengan metode hitung cawan atau Total Plate Count (TPC) pada sampel sendok makan 2. Praktikan mampu mengetahui jumlah mikroba pada media penanaman PCA dan media EMBA 3. Praktikan mampu membandingkan hasil perhitungan jumlah mikroba pada media PCA dan media EMBA dengan Peraturan Menteri Kesehatan RI Nomor 1096 Tahun 2011 Tentang Higiene Sanitasi Jasa Boga


A. Pengertian Mikroorganisme

Mikroorganisme merupakan semua makhluk yang berukuran beberapa mikron atau lebih kecil lagi. Yang termasuk golongan ini adalah bakteri, cendawan atau jamur tingkat rendah, ragi yang menurut sistematik masuk golongan jamur, ganggang, hewan bersel satu atau protozoa, dan virus yang hanya nampak dengan mikroskop elektron. 5 Populasi dari mikroba yang ada di lingkungan ini sangatlah beranekaragam. Jenis mikroorganisme dapat berupa bakteri, kamir, kapang, dan sebagainya. Sehingga untuk mengisolasi mikroba diperlukan beberapa tahap penanaman sehingga berhasil diperoleh koloni mikroba yang tunggal. Koloni tunggal yang diperoleh dapat diperbanyak untuk suatu tujuan penelitian misalnya untuk mengisolasi DNA mikroba yang dapat menghasilkan enzim tertentu atau untuk mengetahui mikroba yang digunakan untuk bioremediasi. 6 Bakteri adalah organisme bersel satu yang terlalu kecil untuk dapat dilihat kecuali dengan bantuan mikroskop, dengan struktur sel yang relatif sederhana tanpa nukleus/inti sel, sitoskeleton, dan organel lain seperti mitokondria dan kloroplas. Mereka berukuran micron (1/1000 mm). Seperti juga makhluk hidup lain, bakteri membutuhkan makanan, air dan suhu yang sesuai untuk hidup dan berkembang biak. Untuk mendapatkan bakteri yang potensial dilakukan dengan penapisan mikroorganisme dari lingkungan.7 Bakteri bereproduksi dengan cara membelah diri secara biner, yang didahului oleh replikasi kromosom bakteri. Dari satu titik awal replikasi, penggandaan DNA berlangsung dalam dua arah di sekeliling kromosom sirkular. Bakteri dapat berproliferasi sangat cepat apabila lingkungannya cocok, baik di habitat alami atau di kultur di laboratorium. Karena pembelahan merupakan proses aseksual-produksi keturunan dari 1 induk tunggal- sebagian besar bakteri di dalam koloni identik secara genetis dengan sel induknya.8

111

112

B. Pengertian Koloni Bakteri

Koloni bakteri adalah sekumpulan dari bakteri-bakteri yang sejenis yang mengelompok menjadi satu dan membentuk suatu colony-colony. Untuk mengetahui pertumbuhan suatu bakteri dapat dilakukan dengan menghitung jumlah koloni bakteri, salah satu metode yang digunakan adalah metode pour plate. Bakteri dapat ditumbuhkan dalam suatu medium agar dan akan membentuk penampakan berupa koloni. Koloni sel bakteri merupakan sekelompok masa sel yang dapat dilihat dengan mata langsung. Semua sel dalam koloni itu sama dan dianggap semua sel itu merupakan keturunan (progeny) satu mikroorganisme dan karena itu mewakili sebagai biakan murni.9 Penampakan koloni bakteri dalam media lempeng agar menunjukkan bentuk dan ukuran koloni yang khas, dapat dilihat dari bentuk keseluruhan penampakan koloni, tepi dan permukaan koloni. Koloni bakteri dapat berbentuk bulat, tak beraturan dengan permukaan cembung, cekung atau datar serta tepi koloni rata atau bergelombang dsb. Pada medium agar miring penampakan koloni bakteri ada yang serupa benang (filamen), menyebar, serupa akar dan sebagainya.10

C. Pengertian Metode Hitung Cawan

Metode pour plate atau metode hitung cawan adalah suatu teknik di dalam menumbuhkan mikroorganisme di dalam media agar-agar dengan cara mencampurkan media agar-agar yang masih cair dengan stok kultur bakteri sehingga sel-sel tersebut tersebar merata dan diam baik di permukaan agar-agar atau di dalam agar-agar.11 Dalam metode ini memerlukan perlakuan pengenceran sebelum ditumbuhkan pada medium agar-agar di dalam cawan petri, sehingga setelah di inkubasi akan terbentuk colony pada cawan tersebut dalam jumlah yang dapat dihitung. Pengenceran biasanya dilakukan secara desimal yaitu 1:10, 1:100, 1:1000, dan seterusnya, atau 1:100, 1:10000, 1:1000000 dan seterusnya (Dwidjoseputro,D, 2005). 12

113

Prinsip dari metode hitungan cawan adalah menumbuhkan sel-sel mikroba yang masih hidup pada suatu atau beberapa media sehingga sel tersebut berkembang biak dan membentuk koloni-koloni yang dapat dilihat langsung dengan mata telanjang tanpa menggunakan mikroskop, dan koloni dapat dihitung menggunakan colony counter. 13 Konsekuensi menggunakan metode ini adalah tidak semua jenis mikroorganisme dapat tumbuh di dalam agar-agar (bersifat mikroaerofilik). Volume yang dipakai pada umumnya adalah 1-2 ml pada cawan dengan diameter 9 cm dan dengan penambahan media 5- 10 ml. Sebaiknya sampel yang dipakai untuk teknik ini memiliki 11 densitas sel > 30 sel/ml sehingga didapatkan kisaran 30-300 koloni/cawan. 12

D. Peraturan Terkait Praktikum

Berdasarkan Peraturan Menteri Kesehatan RI Nomor 1096 Tahun 2011 Tentang Higiene Sanitasi Jasa Boga menyatakan bahwa per alatan makan yang kontak langsung dengan makanan tidak boleh mengandung jumlah kuman >100 koloni/cm 2 dan tidak boleh mengandung E.coli. Kebersihan peralatan makan merupakan salah satu aspek dalam higiene sanitasi sehinggaangka kuman dalam peralatan makan harus 0 koloni agar tidak menimbulkan masalah kesehatan.14

E. Dampak Kontaminasi Mikroba Bagi Kesehatan

Kontaminasi mikroba pada peralatan makan dan dampak yang ditimbulkan bagi kesehatan yaitu seperti:15 1. E.coli, merupakan bakteri berbentuk batang pendek bersifat gram negatif yang menyebabkan diare, infeksi saluran urin dan disentri 2. Bacillus cereus, merupakan bakteri berbentuk batang berspora bersifat gram positif yang mengakibatkan diare dan muntah 3. Campylobacter jejuni, merupakan bakteri berbentuk batang bengkok bersifat gram negatif yang menyebabkan diare berlendir dan mengandung darah

114

4. Clostridium perfingens, merupakan bakteri berbentuk batang bersifat gram positif yang menyebabkan kejang perut dan diare 5. Salmonella typhi, merupakan bakteri berbentuk batang dan bersifat gram negatif yang menyebabkan demam typhoid 6. Staphylococcus aureus, merupakan bakteri berbentuk bola berpasang pasangan seperti buah anggur dan bersifat gram positif yang menyebabkan keracunan makanan, mual, muntah, kejang perut dan lesu. 7. Vibrio cholerae, merupakan bakteri berbentuk koma bersifat gram negatif yang menyebabkan penyakit kholera 8. Enterobakter, menyebabkan infeksi saluran pencernaan

F.

Pengendalian Kontaminasi Mikroba

Pengendalian kontaminasi mikroba pada peralatan makan dan makanan dapat dilakukan dengan cara yaitu : 14 1. Tersedia tempat pencucian peralatan, jika memungkinkan terpisah dari tempat pencucian bahan pangan 2. Pencucian peralatan harus menggunakan bahan pembersih/deterjen 3. Pencucian bahan makanan yang tidak dimasak atau dimakan mentah harus dicuci dengan menggunakan larutan Kalium Permanganat (KMnO4) dengan konsentrasi 0,02% selama 2 menit atau larutan kaporit dengan konsentrasi 70% selama 2 menit atau dicelupkan ke dalam air mendidih (suhu 80°C - 100°C) selama 1 – 5 detik 4. Peralatan bersih yang siap pakai tidak boleh dipegang di bagian yang kontak langsung dengan makanan atau yang menempel di mulut 5. Keadaan peralatan harus utuh, tidak cacat, tidak retak, tidak gompal dan mudah dibersihkan. 6. Peralatan dan bahan makanan yang telah dibersihkan disimpan dalam tempat yang terlindung dari pencemaran serangga, tikus dan hewan lainnya


A. Waktu Praktikum

Praktikum perhitungan mikroorganisme dengan mengguanakan metode hitung cawan atau Total Plate Count (TPC) dilaksanakan pada hari Rabu, 22 November 2017 Pukul 07.30 WIB.

B. Tempat Praktikum

Praktikum perhitungan mikroorganisme dengan menggunakan metode hitung cawan atau Total Plate Count (TPC) dilaksanakan di Laboratorium Kesehatan Lingkungan Fakultas Kesehatan Masyarakat Universitas Diponogero.

C. Alat

1. Cawan petri 2. Lampu yang menyala 3. Spidol 4. Logbook 5. Penggaris

D. Bahan

Sampel sendok makan yang telah di inkubasi pada suhu 32 derajat Celcius -3

-4

-5

Selama 1x24 jam pada media PCA dengan pengenceran 10 , 10 , dan 10 .

E. Sampling

Sampel yang digunakan untuk praktikum perhitungan mikroorganisme dengan metode hitung cawan atau Total Plate Count (TPC) adalah sampel sendok makan milik Dhea berasal dari rak peralatan makan Rusunawa yang diambil pada hari Senin, 20 November 2017 Pukul 11.30 WIB.

115

116

F.

Skema Kerja

Dikeluarkan cawan hasil biakan PCA yang telah disimpan dalam 0

inkubakor pada suhu 32 C kemudian dinyalakan lampu dan disiapkan spidol

Di amati dan dihitung koloni bakteri yang terlihat dibawah lampu dan di tandai dengan spidol untuk mempermudah menghitung

Beberapa koloni yang membentuk kumpulan koloni besar dengan jumlah yang diragukan dihitung 1 koloni. Deretan koloni garis tebal dihitung sebagai 1 koloni

Dicatat hasil penghitungan pada lembar hasil

Gambar 3.1. Skema Kerja Metode Hitung Cawan


A. Hasil

Setelah dilakukan pengujian metode hitung cawan (TPC) pada sampel sendok makan, maka didapatkanlah hasil pengamatan sebagai berikut: Tabel 4.1. Hasil Perhitungan Mikroba Pada Media PCA Jumalah Koloni Per

Standard Plate Count

Keterangan

TBUD

Terlalu Banyak Untuk

Pengenceran 10-3

10-4

TBUD TBUD

10-5 TBUD

Dihitung Berdasarkan tabel diatas, hasil pengamatan perhitungan mikroba pada media PCA pengenceran 10 -3,10-4, 10-5 dengan metode hitung cawan atau Total Plate Count (TPC) pada sampel sendok makan diperoleh jumlah koloni per pengenceran Terlalu Banyak Untuk Dihitung (TBUD) karena jumlah koloni bakteri yang tumbuh pada media PCA pengenceran 10 -3,10-4, 10-5 sangat banyak dan menyebar. Sedangkan pada media EMBA pengenceran 10 -3 tidak terdapat koloni bakteri yang tumbuh pada media tersebut.

Gambar 4.1. Koloni Bakteri Pada Media PCA 10-3


117


118

Gambar 4.4. Koloni Bakteri Pada Media EMBA 10 -3

B. Pembahasan 1. Deskripsi Pengujian

Praktikum metode hitung cawan ini dilaksanakan pada Rabu, 22 November 2017 Pukul 07.30 WIB bertempat di Laboratorium Kesehatan Lingkungan FKM UNDIP. Pada praktikum kali sebelum dilakukan metode hitung cawan, perlu dilakukan pengenceran dan yang digunakan adalah pada media PCA adalah pengenceran 10-3, 10-4, 10-5 dan media EMBA pengenceran 10-3. Suspensi tersebut diinkubasi selama 1 x 24 jam pada suhu 32oC untuk menumbuhkan mikroba yang ada pada sampel. Setelah itu cawan petri diambil dari dalam inkubator, langkah awalnya ialah mengambil sampel yang telah di inkubasi pada suhu 32 oC selama 1 x 24 jam didalam inkubator. Lalu cawan petri diamati dibwah lampu yang menyala dan dihitung jumlah koloni bakteri pada cawan petri dengan menandai menggunakan spidol agar dapat memudahkan penghitungan, lalu diambil hasil penghitungan pada lembar hasil. 2. Gambaran Umum Sampel Praktikum metode hitung cawan ini menggunakan sampel sendok makan dari sendok milik Dhea yang berasal dari rak peralatan makan Rusunawa. Sendok adalah alat makan yang memiliki cekungan berbentuk oval atau bulat lonjong disatu ujung dan ganggang diujung lai nnya, sendok berfungsi untuk mengambil makanan, dipakai untuk mengoles selai, mentega dan lain-lain. Sampel yang digunakan untuk praktikum

119

perhitungan mikroorganisme dengan metode hitung cawan atau Total Plate Count (TPC) adalah sampel sendok makan yang terbuat dari logam anti karat atau stainless steel

milik Dhea berasal dari rak peralatan makan

Rusunawa yang diambil pada Senin, 20 November 2017 pukul 11.30 yang disimpan dalam kotak makan yang telah disemprot dengan alkohol 70%. 3. Hasil Pengujian Hasil perhitungan mikroba pada media Plate Count Agar (PCA) pengenceran 10-3, 10-4, 10-5 dengan sampel sendok makan diperoleh hasil TBUD (Terlalu Banyak Untuk Dihitung) karena bakteri yang muncul berupa koloni dan bakteri yang menyebar kecil-kecil. Pada media Eosin Methylen Blue Agar (EMBA) tidak ditemukan koloni bakteri yang tumbuh. Standar menurut Peraturan Menteri Kesehatan Nomor 1096 Tahun 2011 tentang Higiene Sanitasi Jasa Boga bahwa peralatan makan mengandung angka koloni bakteri 0 per cm 2, sehingga dapat disimpulkan bahwa sampel sendok makan tersebut tidak memenuhi syarat yang ditentukan dalam Peraturan Menteri Kesehatan Nomor 1096 Tahun 2011 tentang Higiene Sanitasi Jasa Boga. 4. Faktor-Faktor Yang Mempengaruhi Hasil Praktikum a. Praktikan kurang teliti dan kurang cermat saat melakukan perhitungan koloni dalam cawan b. Praktikan sulit membedakan antara koloni yang terpisah dengan koloni yang bergabung membentuk koloni bakteri yang besar c. Pada media pertumbuhan bakteri EMBA, praktikan sulit membedakan antara media dengan bakteri, karena warna media EMBA yang gelap

BAB V PENUTUP

A. Kesimpulan

1. Metode hitung cawan atau Total Plate Count (TPC) dilakukan dengan cara melihat hasil biakan mikroba selama 1x24 jam dalam suhu inkubator 32 oC pada media PCA pengenceran 10-3,10-4, 10-5

dan media EMBA

pengenceran 10-3 yang diamati dibawah lampu yang menyala dan di tandai dengan spidol agar mempermudah perhitungan koloni bakteri. 2. Hasil perhitungan dengan metode hitung cawan yaitu perhitungan mikroba pada media PCA pengenceran 10 -3,10-4, 10-5 diperoleh jumlah koloni per pengenceran Terlalu Banyak Untuk Dihitung (TBUD) karena jumlah koloni bakteri yang tumbuh pada media PCA pengenceran 10 -3,10-4, 10-5 sangat banyak dan menyebar. Sedangkan pada media EMBA pengenceran 10-3 tidak terdapat koloni bakteri yang tumbuh pada media tersebut. 3. Berdasarkan Peraturan Menteri Kesehatan Nomor 1096 Tahun 2011 tentang Higiene Sanitasi Jasa Boga bahwa peralatan makan mengandung angka koloni bakteri 0 per cm 2, sehingga dapat disimpulkan bahwa sampel sendok makan tersebut tidak memenuhi syarat yang ditentukan dalam Peraturan Menteri Kesehatan Nomor 1096 Tahun 2011 tentang Higiene Sanitasi Jasa Boga.

B. Saran

1. Praktikan sebaiknya lebih teliti dan berhati-hati selama melakukan praktikum 2. Praktikan sebaiknya selalu menjaga kebersihan laboratorium selama dan sesudah praktikum 3. Praktikan sebaiknya selalu dalam keadaan aseptik agar saat melakukan penanaman

bakteri

tidak

terjadi

kontaminasi

perkembangbiakan dan mendapatkan hasil yang akurat

120

pada

media

DAFTAR PUSTAKA

1.

Undang-Undang No.36 tahun 2009 tentang Kesehatan. 2009.

2.

Depkes RI. Prinsip-Prinsip Higiene Sanitasi Makanan. Jakarta : Dirjen PPM & PLP, 1999.

3.

Tumelap H.J. Kondisi Bakteriologik Peralatan Makan di Rumah Makan Jombang Tikala Manado. Manado : Jurusan Kesehatan Lingkungan Kemenkes Manado, 2011, Vol. Volume 1 no.1 Oktober 2011.

4.

Fadhila, Mayvika Farah, Nur Endah Wahyuningsih dan Yusniar Hanani D. Hubungan Higiene Sanitasi dengan Kualitas Bakteriologis Pada Alat Makan Pedagang Di Wilayah Sekitar Kampus UNDIP Tembalang. Jurnal Kesehatan Masyarakat, volume 3, nomor 3 Tahun 2015. Semarang :Bagian Kesehatan Lingkungan FKM UNDIP. 2015.

5.

Dwidjoseputro, D. Dasar – Dasar Mikrobiologi. Jakarta: Djambatan. 1990.

6.

Fardiaz, S. Mikrobiologi Pangan I . Jakarta : Gramedia Pustaka Utama . 1992.

7.

Sylvia, T Pratiwi. Mikrobiologi Farmasi. Jakarta: Erlangga. 2008.

8.

Oetami, Dwi Hajoeningtyas. Mikrobiologi Pertanian. Yogyakarta: Graha Ilmu. 2012.

9.

Fitri, Lenni dan Yekki Yasmin. Isolasi dan Pengamatan Morfologi Koloni Bakteri Kitinolitik . Banda Aceh : Jurusan Biologi FMIPA Unsyiah Darussalam. 2011.

10. Lay, W.B. Analisis Mikroba di Laboratorium. Jakarta : PT. Raja Grafindo Persada. 1994. 11. Irianto, K. Mikrobiologi. Bandung : Yrama Widya. 2006. 12. Brooks. G, Butel. J, dan Morse. S. Mikrobiologi Kedokteran. Jakarta : Salemba Medika. 2005. 13. Yunita, Merisa, Yusuf Hendrawan dan Rini Yulianingsih. Analisis Kuantitatif Mikrobiologi Pada Makanan Penerbangan (Aerofood ACS) Garuda Indonesia Berdasarkan TPC (Total Plate Count) Dengan Metode Pour Plate. Jurnal Keteknikan Pertanian Tropis dan Biosistem. Malang : Fakultas Teknologi Pertanian Universitas Brawijaya. 14. Peraturan Pemerintah Nomor 1096 Tahun 2011 Tentang Higiene Sanitasi Jasa Boga. 2011.

121

15. Badan Standardisasi Nasional. SNI 7388:2009 Tentang Batas Cemaran Mikroba dalam Pangan. 2009.

122

LAMPIRAN

A. Dokumentasi Praktikum

Diambil media PCA 10-3 yang telah diinkubasi 1x24 jam lalu diamati koloni bakteri dibawah lampu menyala

Diambil media PCA 10-4 lalu yang telah diinkubasi 1x24 jam lalu diamati koloni bakteri dibawah lampu menyala

Diambil media PCA 10-5 yang telah diinkubasi 1x24 jam lalu diamati koloni bakteri dibawah lampu menyala

Diambil media EMBA 10-3 yang telah diinkubasi 1x24 jam lalu diamati koloni bakteri dibawah lampu men ala

123

124


125

Morfologi Bakteri

126

BAB I PENDAHULUAN

A. Latar Belakang

Bakteri adalah organisme bersel satu yang terlalu kecil untuk dapat dilihat kecuali dengan bantuan mikroskop, dengan struktur sel yang relatif sederhana tanpa nukleus/inti sel, sitoskeleton, dan organel lain seperti mitokondria dan kloroplas. Mereka berukuran micron (1/1000 mm). Seperti juga makhluk hidup lain, bakteri membutuhkan makanan, air dan suhu yang sesuai untuk hidup dan berkembang biak. Untuk mendapatkan bakteri yang potensial dilakukan dengan penapisan mikroorganisme dari lingkungan.1 Bakteri memiliki beberapa bentuk yaitu basil (tongkat), coccus, spirilum. Bakteri yang berbentuk tongkat maupun kokus dibagi menjadi beberapa macam. Pada bentuk basil pembagiannya yaitu basil tunggal, diplobasil, dan tripobasil.Sedangkan pada coccus dibagi menjadi monococcus, diplococcus, sampai stophylococcus. Khusus pada spirilum hanya dibagi dua yaitu setengah melengkung dan melengkung. 2 Melihat dan mengamati bakteri dalam kedaan hidup sangat sulit, karena selain bakteri itu tidak berwarna juga transparan dan sangat kecil. Untuk mengatasi hal tersebut maka dikembangkan suatu teknik pewarnaan sel bakteri yang merupakan salah satu cara yang paling utama dalam penelitian-penelitian mikrobiologi.3 Teknik yang digunakan adalah teknik pewarnaan gram. Teknik pewarnaan tersebut dapat menghasilkan warna merah atau ungu. Bakteri gram negatif ditandai dengan pewarnaan ungu, sedangkan yang positif berwarna merah. Hal ini bertujuan untuk memberikan warna pada bakteri pada akhirnya dapat diidentifikasi dengan mudah. Teknik pewarnaan gram haruslah sesuai prosedur karena dapat mengakibatkan kesalahan identifikasi data apakah gram positif atau gram negatif, sehingga diperlukan ketelitian agar mengetahui mekanisme pewarnaanya.4

127

128

B. Tujuan Praktikum

1. Untuk mengetahui metode yang digunakan dalam pengamatan morfologi bakteri 2. Untuk mengetahui morfologi bakteri pada sampel sendok makan secara mikroskopis 3. Untuk membandingkan hasil pengamatan morfologi bakteri pada sampel sendok makan dengan Peraturan Menteri Kesehatan RI Nomor 1096 Tahun 2011 Tentang Higiene Sanitasi Jasa Boga


1. Praktikan mampu mengetahui metode yang digunakan dalam pengamatan morfologi bakteri 2. Praktikan mampu mengetahui morfologi bakteri pada sampel s endok makan secara mikroskopis 3. Praktikan mampu membandingkan hasil pengamatan morfologi bakteri pada sampel sendok makan dengan Peraturan Menteri Kesehatan RI Nomor 1096 Tahun 2011 Tentang Higiene Sanitasi Jasa Boga


A. Pengertian Bakteri

Bakteri pertama ditemukan oleh Anthony van Leeuwenhoek pada 1674 dengan menggunakan mikroskop buatannya sendiri. 5 Nama bakteri berasal dari bahasa Yunani, yaitu yaitu bacterion bacterion yang berarti tongkat atau batang. Sekarang nama itu dipakai untuk menyebut sekelompok mikroorganisme yang bersel satu, tidak berklorofil (meskipun ada kecualinya), berbiak dengan pembelahan diri serta demikian kecilnya sehingga hanya tampak dengan mikroskop. Berbagai jenis bakteri dapat dibedakan menurut bentuknya yang kadang tercermin pada namanya.6 Bakteri bereproduksi dengan cara membelah diri secara biner, yang didahului oleh replikasi kromosom bakteri. Dari satu titik awal replikasi, penggandaan DNA berlangsung dalam dua arah di sekeliling kromosom sirkular. Bakteri dapat berproliferasi sangat cepat apabila lingkungannya cocok, baik di habitat alami atau di kultur di laboratorium. Karena pembelahan merupakan proses aseksual-produksi keturunan dari 1 induk tunggal- sebagian besar bakteri di dalam koloni identik secara genetis dengan sel induknya. induknya.7

B. Morfologi Bakteri

Ukuran bakteri bervariasi baik penampang maupun panjangnya, tetapi pada umumnya penampang bakteri adalah sekitar 0,7-1,5 µm dan panjangnya sekitar 1- 6 µm. Bakteri memiliki 3 bentuk, yaitu :8 1. Kokus (Coccus) adalah bakteri yang berbentuk bulat seperti bola dan mempunyai beberapa variasi sebagai berikut : a. Mikrococcus, jika kecil dan tunggal b. Diplococcus, jika bergandanya dua-dua c. Tetracoccus, jika bergandengan empat dan membentuk bujursangkar d. Sarcina, jika bergerombol membentuk kubus e. Staphylococcus, jika bergerombol f.

Streptococcus, jika bergandengan membentuk rantai

129

130

2. Basil (Bacillus) adalah kelompok bakteri yang berbentuk batang atau silinder dan mempunyai variasi sebagai berikut : a. Diplobacillus, jika bergandengan dua-dua b. Streptobacillus, jika bergandengan membentuk rantai 3. Spiril (Spirilium) adalah bakteri yang berbentuk lengkung dan mempunyai variasi sebagai berikut : a. Vibrio (bentuk koma), jika lengkung kurang dari setengah lingkaran b. Spiral, jika lengkung lebih dari setengah lingkaran Bentuk tubuh/morfologi bakteri dipengaruhi oleh keadaan lingkungan, medium dan usia. Oleh karena itu untuk membandingkan bentuk serta ukuran bakteri, kondisinya kondisinya terus sama. Pada umumnya umumnya bakteri dan usianya lebih muda ukurannya relatif lebih besar daripada yang sudah tua. 5

C. Struktur Bakteri

Struktur bakteri terdiri dari beberapa bagian yaitu :9 1. Dinding sel Lapisan selubung sel yang terletak antara membran sitoplasma dan kapsul disebut dinding sel. Dinding sel bakteri bisa begitu kuat karena lapisannya yang tersusun atas suatu bahan yang disebut murein, mukopeptida, atau peptidoglikan (semuanya merupakan suatu bahan yang sama). Berdasarkan perbedaan respons terhadap prosedur pewarnaan gram (klasifikasi ini dilakukan oleh ahli histology Hans Christian Gram) dan struktur dinding bakteri, bakteri diklasifikasikan menjadi bakteri gram negatif dan bakteri bakte ri gram positif. Bakteri Gram Positif : a. Dinding sel mengandung peptidoglikan yang tebal serta diikuti pula dengan adanya ikatan benang-benang teichoic acid dan teichoronic acid, yang merupakan 50 % dari berat kering dinding sel dan 10% dari berat kering keseluruhan sel b. Pada umumnya berbentuk bulat (coccus)

131

c. Pada pewarnaan Gram, bakteri jenis ini berikatan dengan zat warna utama (primary Strain) yaitu Gentian Violet dan tidak luntur (decolorized) bila dicelupkan ke dalam larutan alkohol d. Di bawah mikroskop tampak berwarna ungu

Bakteri Gram Negatif : a. Mengandung “sedikit sekali” ikatan peptidoglikan dan tidak terdapat ikatan benang-benang teichoic acid dan teichoronic acid b. Pada umumnya berbentuk batang (basil), kecuali Bacillus anthrasis dan Bacillus sereus c. Pada pewarnaan Gram, bakteri jenis ini tidak mampu berikatan dengan zat warna utama yaitu Gentian Violet dan luntur bila dicelupkan ke dalam larutan alkohol d. Di bawah mikroskop tampak berwarna merah, apabila diberi zat warna safranin/fusin Komponen-komponen dinding sel bakteri gram negatif (yang terletak di luar lapisan peptidoglikan) : -

Lipoprotein yang berfungsi untuk menstabilkan membran luar dan merekatkannya ke lapisan peptidoglikan

-

Membran luar yaitu struktur berlapis ganda; lapisan sebelah dalamnya memiliki komposisi yang serupa dengan membran sitoplasma, sedangkan fosfolipid pada lapisan sebelah luar digantikan oleh molekul lipopolisakarida

-

Lipopolisakarida

2. Membran sitoplasma 3. Flagel a. Monotrik yaitu flagela pada satu ujung b. Lopotrik yaitu flagel pada banyak ujung c. Peritrik yaitu flagel pada seluruh permukaan sel 4. Kapsul dan Glikokaliks Kapsul adalah polimer yang membentuk selubung padat menyelimuti sel. Glikokaliks adalah polimer membentuk jaringan longgar berupa fibril-

132

fibril yang meluas ke arah luar sel. Pada beberapa kasus, sejumlah masa polimer yang terbentuk tampak seluruhnya terlepas dari sel dan mengurung sel tersebut. Polimer ekstraselular seperti itu biasa disebut “selubung lender” (slime layer). Kapsul berperan dalam tingkat keinvasifan bakteri patogenik (sel yang berkapsul terlindung dari fagositosis kecuali jika mereka diselubungi oleh antibodi antikapsuler). Glikokaliks berperan dalam proses melekatnya sel bakteri ke lingkungannya, termasuk ke permukaan sel pejamu hewan dan tumbuhan. 5. Fili (Fimbria) Berdasarkan fungsinya, fili dibedakan menjadi 2: a. Fili biasa, yang berperan dalam pelekatan bakteri simbiotik atau pathogen ke sel host b. Fili seksual, yang berperan dalam perlekatan sel donor (sel yang memberikan kromosom) ke resipien (sel yang menerima kromosom dari sel donor) pada proses konyugasi bakteri.

D. Faktor-Faktor Yang Mempengaruhi Pertumbuhan Bakteri

Faktor-faktor yang mempengaruhi pertumbuhan bakteri yaitu : 10 1. Suhu Suhu mempengaruhi laju pertumbuhan, mempengaruhi jumlah total pertumbuhan, merubah proses-proses metabolik tertentu serta morfologi (bentuk luar) sel. Kisaran suhu bagi mikroba terbagi 3 tahap yaitu suhu minimum, suhu maksimum dan suhu optimum. Suhu pertumbuhan optimum adalah suhu inkubasi yang memungkinkan pertumbuhan tercepat selama periode waktu yang singkat, yaitu antara 12 s/d 24 jam. Berdasarkan suhu inkubasi bakteri ini, bakteri terkelompok ke dalam: Psi krofil (suhu 0 0 C-300C), Mesofil (suhu 25 0C -400C), Termofil fakultatif (250C -550C) dan Termofil obligat (450C-750C). 2. pH pH optimum bagi pertumbuhan bakteri berkisar antara 6,5-7,5. Beberapa spesies bakteri ada yang mempunyai pH minimum 0,5 dan pH maksimumnya 9,5. Pergeseran pH dalam suatu medium dapat terjadi

133

sedemikian besar, karena akibat adanya senyawa-senyawa asam atau basa selama pertumbuhan. Pergeseran ini dapat dicegah dengan menggunakan larutan penyangga yang disebut Buffer (kombinasi garam-garam KH 2PO4 dan K 2HPO4). Garam-garam anorganik diperlukan oleh mikroba untuk keperluan mempertahankan keadaan koloidal, mempertahankan tekanan osmose di dalam sel, memelihara keseimbangan pH serta sebagai aktivator enzim. 3. Pencahayaan Bakteri biasanya tumbuh dalam gelap, walaupun ini bukan suatu keharusan. Tetapi sinar ultraviolet mematikan mereka dan ini dapat digunakan untuk prosedur sterilisasi Beberapa bakteri memerlukan persyaratan

yang

( fotosintetik ),

khusus.

yaitu

bakteri

Diantaranya, dalam

bakteri

Fotoautotrofik

pertumbuhannya

harus

ada

pencahayaan.11 4. Waktu Jika bakteri menemukan kondisi yang cocok, pertumbuhan dan reproduksi terlaksana. Bakteri berkembang biak dengan membelah diri . Dari satu sel tunggal menjadi dua, dua menjadi empat, empat menjadi delapan dan seterusnya. Dalam lingkungan dan suhu yang cocok, bakteri membelah diri setiap 20-30 menit. Dalam kondisi yang mereka sukai itu, maka dalam 8 jam satu sel bakteri telah berkembang menjadi 17 juta sel dan menjadi satu milyar dalam 10 jam.11 5. Oksigen Berdasarkan akan kebutuhan terhadap oksigen, bakteri dapat digolongkan menjadi bakteri aerob mutlak (bakteri yang untuk pertumbuhannya memerlukan adanya oksigen, misalnya M. tuberculosis), bakteri anaerob fakultatif (bakteri yang dapat tumbuh, baik ada oksigen maupun tanpa adanya oksigen), bakteri anaerob aerotoleran (bakteri yang tidak mati dengan adanya oksigen), bakteri anaerob mutlak (bakteri yang hidup bila tidak ada oksigen, misalnya Clostridium tetani) dan bakteri mikroaerofilik (bakteri yang dapat hidup bila tekanan oksigennya rendah, misalnya Neisseria gonorrhoeae).

134

E. Pengertian Pewarnaan Gram

Pewarnaan Gram merupakan salah satu teknik pengecatan yang dikerjakan di laboratorium mikrobiologi untuk kepentingan identifikasi mikroorganisme. Morfologi mikroskopik mikroorganisme yang diperiksa dan sifatnya yang khas terhadap pewarnaan gram tertentu (pewarnaan Gram) dapat digunakan untuk identifikasi awal. Pemeriksaan ini dapat dilakukan dengan cepat dan biaya murah serta, dalam kasus tertentu, dapat membantu dokter untuk memulai terapi suatu penyakit tanpa menunggu hasil kultur. 12 Metode pewarnaan gram tersebut pertama kali ditemukan oleh Christian Gram pada tahun 1884. Dengan metode pewarnaan Gram, bakteri dapat dikelompokkan menjadi dua, yaitu bakteri Gram positif dan Gram negatif berdasarkan reaksi atau sifat bakteri terhadap cat tersebut. Reaksi atau sifat bakteri tersebut ditentukan oleh komposisi dinding selnya. Oleh karena itu, pewarnaan Gram tidak bisa dilakukan pada mikroorganisme yang tidak mempunyai dinding sel seperti Mycoplasma sp.13

F.

Peraturan Terkait Praktikum

Berdasarkan Peraturan Menteri Kesehatan RI Nomor 1096 Tahun 2011 Tentang Higiene Sanitasi Jasa Boga menyatakan bahwa per alatan makan yang kontak langsung dengan makanan tidak boleh mengandung jumlah kuman >100 koloni/cm 2 dan tidak boleh mengandung E.coli. Kebersihan peralatan makan merupakan salah satu aspek dalam higiene sanitasi sehinggaangka kuman dalam peralatan makan harus 0 koloni agar tidak menimbulkan masalah kesehatan.14

G. Dampak Kontaminasi Bakteri Bagi Kesehatan

Kontaminasi mikroba pada peralatan makan dan dampak yang ditimbulkan bagi kesehatan yaitu seperti:15 9. E.coli, merupakan bakteri berbentuk batang pendek bersifat gram negatif yang menyebabkan diare, infeksi saluran urin dan disentri 10. Bacillus cereus, merupakan bakteri berbentuk batang berspora bersifat gram positif yang mengakibatkan diare dan muntah

135

11. Campylobacter jejuni, merupakan bakteri berbentuk batang bengkok bersifat gram negatif yang menyebabkan diare berlendir dan mengandung darah 12. Clostridium perfingens, merupakan bakteri berbentuk batang bersifat gram positif yang menyebabkan kejang perut dan diare 13. Salmonella typhi, merupakan bakteri berbentuk batang dan bersifat gram negatif yang menyebabkan demam typhoid 14. Staphylococcus aureus, merupakan bakteri berbentuk bola berpasang pasangan seperti buah anggur dan bersifat gram positif yang menyebabkan keracunan makanan, mual, muntah, kejang perut dan lesu. 15. Vibrio cholerae, merupakan bakteri berbentuk koma bersifat gram negatif yang menyebabkan penyakit kholera 16. Enterobakter, menyebabkan infeksi saluran pencernaan

H. Pengendalian Kontaminasi Bakteri

Pengendalian kontaminasi mikroba pada peralatan makan dan makanan dapat dilakukan dengan cara yaitu : 14 7. Tersedia tempat pencucian peralatan, jika memungkinkan terpisah dari tempat pencucian bahan pangan 8. Pencucian peralatan harus menggunakan bahan pembersih/deterjen 9. Pencucian bahan makanan yang tidak dimasak atau dimakan mentah harus dicuci dengan menggunakan larutan Kalium Permanganat (KMnO4) dengan konsentrasi 0,02% selama 2 menit atau larutan kaporit dengan konsentrasi 70% selama 2 menit atau dicelupkan ke dalam air mendidih (suhu 80°C - 100°C) selama 1 – 5 detik 10. Peralatan bersih yang siap pakai tidak boleh dipegang di bagian yang kontak langsung dengan makanan atau yang menempel di mulut 11. Keadaan peralatan harus utuh, tidak cacat, tidak retak, tidak gompal dan mudah dibersihkan. 12. Peralatan dan bahan makanan yang telah dibersihkan disimpan dalam tempat yang terlindung dari pencemaran serangga, tikus dan hewan lainn ya


A. Waktu Praktikum

Praktikum pengamatan morfologi bakteri dilaksanakan pada hari Rabu, 22 November 2017 Pukul 07.30 WIB.

B. Tempat Praktikum

Praktikum morfologi bakteri dilaksanakan di Laboratorium Kesehatan Lingkungan Fakultas Kesehatan Masyarakat Universitas Diponogero.

C. Alat

1. Mikroskop 2. Object glass 3. Desk glass 4. Jarum ose 5. Penjepit 6. Spidol 7. Bunsen 8. Hair dryer 9. Pipet tetes 10. Korek api 11. Tissue

D. Bahan

1. Biakan bakteri dari media PCA pengenceran 10 -4 2. Pewarnaan gram Gram A

: Kristal Violet

Gram B

: Iodium

Gram C

: Alkohol

Gram D

: Sofranin

3. NaCl Fisiologis

136

137

4. Alkohol 70% 5. Aquadest 6. Immersion oil

E. Sampling

Sampel yang digunakan untuk praktikum pengamatan morfologi bakteri adal ah sampel sendok makan milik Dhea berasal dari rak peralatan makan Rusunawa yang diambil pada hari Senin, 20 November 2017 Pukul 11.30 WIB yang telah ditumbuhkan pada media PCA pengenceran 10 -4.

F.

Skema Kerja

1. Pembuatan film Dibilas objek glass dengan alkohol 70% lalu diberi tanda bulatan dengan spidol

Ditetesi objek glass dengan NaCl fisiologis sebanyak 1 tetes

1 ose bakteri diletakkan pada objek glass yang telah ditetesi NaCl fisiologis 1

Dikeringkan dengan cara melewatkan objek glass diatas api bunsen hingga kering (fiksasi)

Gambar 3.1. Skema Kerja Pembuatan Film

138

2. Pewarnaan gram Film diberi 1 tetes gram A, kemudian ditunggu selama 30 detik, kemudian dibilas dengan aquadest dan dikeringkan.

Film diberi 1 tetes gram B, kemudian ditunggu selama 30 detik, kemudian dibilas dengan aquadest dan dikeringkan.

Film diberi 1 tetes gram C, kemudian ditunggu selama 30 detik, kemudian dibilas dengan aquadest dan dikeringkan.

Film diberi 1 tetes gram D, kemudian ditunggu selama 30 detik, kemudian dibilas dengan aquadest dan dikeringkan.

Preparat ditetesi dengan minyak immersi kemudian amati menggunakan miroskop dengan perbesaran 100x. Lalu identifikasi bakteri yang terlihat Gambar 3.2. Skema Kerja Pewarnaan Gram


A. Hasil

Berikut merupakan hasil pengamatan morfologi bakteri pada sampel sendok makan yang diambil dari media pertumbuhan PCA pengenceran 10 -4:

Gambar 4.1. Hasil Pengamatan Morfologi Bakteri dengan Mikroskop Berdasarkan hasil pengamatan morfologi bakteri dengan menggunakan mikroskop perbesaran 100x, bakteri yang diamati adalah bakteri berbentuk batang, bewarna merah dan bersifat gram negatif (-).

B. Pembahasan

1. Deskripsi Pengujian Pada praktikum morfologi bakteri, langkah perama yaitu memilih media PCA dengan koloni paling banyak yaitu media PCA pengenceran 10-4. Setelah itu dilakukan pembuatan film, object glass dibilas dengan alkohol 70% lalu dikeringkan dengan hair dryer. Object glass diberi tanda bulatan dengan spidol kemudian ditetesi dengan Na fisiologis 1 tetes, jarum ose dipanaskan diatas bunsen lalu diambil 1 ulasan bakteri pada media PCA pengenceran 10 -4. Bakteri yang telah diambil diletakkan pada object glass lalu di keringkan dengan difiksasi diatas api bunsen. Setelah pembuatan film, film diberi 1 tetes gram A kemudian ditunggu selama 30 detik dan dibilas dengan aquadest lalu dikeringkan.

139

140

Film ditetesi 1 tetes gram B kemudian ditunggu selama 30 detik dan dibilas dengan aquadest lalu dikeringkan. Selanjutnya film diberi 1 tetes gram C kemudian ditunggu selama 30 detik dan dibilas dengan aquadest lalu dikeringkan, film diberi 1 tetes gram D kemudian ditunggu selama 30 detik dan dibilas dengan aquadest lalu dikeringkan. Setelah dilakukan pewarnaan gram pada preparat, kemudian ditetesi 1 tetes minyak imersi lalu diamati dengan mikroskop perbesaran 100x. 2. Gambaran Umum Sampel Sampel yang digunakan untuk praktikum morfologi bakteri adalah sampel sendok makan yang terbuat dari logam anti karat atau stainless steel milik Dhea berasal dari rak peralatan makan Rusunawa yang diambil pada Senin, 20 November 2017 pukul 11.30 yang disimpan dalam kotak makan yang telah disemprot dengan alkohol 70%. 3. Hasil Pengujian Hasil

pengujian

pengamatan

morfologi

bakteri

dengan

menggunakan mikroskop perbesaran 100x, bakteri yang diamati adalah bakteri berbentuk batang, bewarna merah dan bersifat gram negatif (-). Peraturan Menteri Kesehatan Nomor 1096 Tahun 2011 tentang Higiene Sanitasi Jasa Boga bahwa peralatan makan mengandung angka koloni bakteri 0 per cm2, sehingga dapat disimpulkan bahwa sampel sendok makan tersebut tidak memenuhi syarat yang ditentukan dalam Peraturan Menteri Kesehatan Nomor 1096 Tahun 2011 tentang Higiene Sanitasi Jasa Boga. 4. Faktor-Faktor Yang Mempengaruhi Hasil Praktikum Faktor-faktor yang mempengaruhi hasil praktikum: a. Pada saat pengambilan ose bakteri, kurang dilaksanakan dengan tepat sehingga mempengaruhi jumlah bakteri yang akan diamati b. Praktikan kurang berhati-hati dalam melakukan fiksasi pengeringan preparat sehingga menyebabkan preparat retak karena terlalu panas

BAB V PENUTUP

A. Kesimpulan

1. Metode yang digunakan dalam pengamatan morfologi bakteri adalah metode pewarnaan gram 2. Hasil pengamatan morfologi bakteri menunjukkan bahwa bakteri yang diamati dengan mikroskop perbesaran 100x berbentuk batang, bewarna merah dan bersifat gram negatif 3. Berdasarkan Peraturan Menteri Kesehatan Nomor 1096 Tahun 2011 tentang Higiene Sanitasi Jasa Boga bahwa peralatan makan mengandung angka koloni bakteri 0 per cm 2, sehingga dapat disimpulkan bahwa sampel sendok makan tersebut tidak memenuhi syarat yang ditentukan dalam Peraturan Menteri Kesehatan Nomor 1096 Tahun 2011 tentang Higiene Sanitasi Jasa Boga.

B. Saran

1. Praktikan sebaiknya lebih teliti dan berhati-hati selama melakukan praktikum 2. Praktikan sebaiknya selalu menjaga kebersihan laboratorium selama dan sesudah praktikum 3. Praktikan sebaiknya selalu dalam keadaan aseptik agar saat melakukan penanaman

bakteri

tidak

terjadi

kontaminasi

perkembangbiakan dan mendapatkan hasil yang akurat

141

pada

media

DAFTAR PUSTAKA

1.

Sylvia, T Pratiwi. Mikrobiologi Farmasi. Jakarta: Erlangga. 2008.

2.

Dwidjoseputro. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Jakarta: Penerbit Djambatan. 1998.

3.

Fardiaz, S. Analisis Mikrobiologi Pangan. Jakarta: Penerbit PT. Raja Grafindo Persada. 1993.

4.

Radji, M. Buku Ajar Mikrobiologi Panduan Mahasiswa Farmasi dan Kedokteran. Surabaya : Universitas Airlangga. 2011.

5.

Tamher, S. Mikrobiologi Untuk Mahasiswa Keperawatan. Jakarta : Trans Info Media. 2008.

6.

Purnawijayanti, Hiasinta, A. Sanitasi, Hygiene dan Keselamatan Kerja dalam Pengolahan Makanan. Yogyakarta : Kanisius. 2001.

7.

Oetami, Dwi Hajoeningtyas. Mikrobiologi Pertanian. Yogyakarta: Graha Ilmu. 2012.

8.

Tim Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya. Bakteriologi Medik . Malang : Bayumedia Publishing. 2003.

9. Nasution, M. Pengantar Mikrobiologi. Medan: USU Press. 2014. 10. Hasyimi,

H.

M. Mikrobiologi

dan

Parasitologi

Untuk

Mahasiswa

Keperawatan. Jakarta: CV. Trans Info Media. 2010. 11. Suhartini, E. Analisa Kandungan Bakteri pada Daging Sapi yang Telah Dibekukan di Pusat Pasar Medan. Medan : Skripsi, Fakultas Kesehatan Masyarakat Universitas Sumatera Utara. 2003. 12. Triyana, Sofyatul Yumna. Pengecetan Gram. Yogyakarta : Fakultas Kedokteran Universitas Islam Indonesia. 2002. 13. Nirwati, Hera. Pembuatan Preparat dan Pengecatan dalam Petunjuk Praktikum Mikrobiologi. Yogyakarta : Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas Gadjah Mada. 2001. 14. Peraturan Pemerintah Nomor 1096 Tahun 2011 Tentang Higiene Sanitasi Jasa Boga. 2011. 15. Badan Standardisasi Nasional. SNI 7388:2009 Tentang Batas Cemaran Mikroba dalam Pangan. 2009.

142


Dibilas object glass dengan alkohol 70% lalu diberi tanda bulatan

Dikeringkan object glass dengan hair dryer, lalu ditetesi Na fisiologis pada bulatan sebanyak 1 tetes

Diratakan pada object glass lalu di fiksasi diatas api bunsen

Dilakukan penetesan pewarnaan gram secara bertahap

143

Diambil 1 ose bakteri dari media PCA pengenceran 10-4 menggunakan ose steril yang telah dipanaskan.

Setelah itu di keringkan dengan hair dryer. Preparat sia diamati

144

Hasil pengamatan morfologi bakteri pada mikroskop erbesaran 100x

145


417003_LAPORAN AKHIR PRAKTIKUM MAMIN KELOMPOK 4 FIXX.docx

Recommend Documents