Universidad de Cuenca Facultad de Ciencias Químicas - Carrera de Bioquímica y Farmacia Cuenca-Ecuador INFORME DE !BOR!"ORIO DE MICOO#I! $R!C"IC! % 4 "EM!: Técnicas de siembra IN"E#R!N"E&' Sofía Sánchez y Anita Quito #RU$O % 9A FEC(!: 16/4/!1" OB)E"I*O&
A#$icar $as técnicas de siembra en diferentes muestras% &bser'ar y diferenciar e$ crecimiento de $e'aduras y mohos en medios de cu$ti'o en ca(a y en tubo% )onocer $as técnicas de siembra a#$icadas en *ico$o+ía )$ínica%
M!RCO "EORICO Siembra de cultvos: cultvos: introducir arfcialmente una porción de muestra (inóculo) en un medio adecuado con el fn de iniciar un culvo y luego el medio de culvo se incuba a una temperatura adecuada para el crecimiento. (Arévalo, (Arévalo, 200) Técnicas de siembra: !ig"ag y por agotamiento empleado para muestras li#uidas y la técnica en varios puntos para muestras secas.($u%a ) Técnica de Agoamieno &s un buen método para el aislamiento de colonias (obtención de colonias aisladas): mediante mediante esta técnica buscamos obtener colonias separadas a parr de un inoculo. 'ara su reali"ación se toma la caa de 'etri en la palma de la mano y ligeramente inclinada: con la mano contraria, se manipula el asa de argolla previamente esterili"ada por ameado directo a la llama y con ella se recoge e l material de culvo, para colocarlo en un *rea peri+érica de la caa aciendo movimientos circulares para omogeni"ar el inoculo- a connuación se reali"a una estr%a parendo de la primera y arrastrando arrastrando los microorganismos presentes en ella acia el etremo contrario de la superfcie del agar. agar. /e debe procurar #ue en cada sección de la caa las estr%as #ueden tra"adas con mayor separación.(oas, separación.(oas, 2011)
Técnica de zig-zag epositamos la muestra lo m*s aleado de nosotros y reali"amos la siembra en +orma de "ig3"ag. e esta +orma vamos descargando la muestra del asa. &s importante no volver a repasar el tro"o de medio de culvo #ue ya emos sembrado. 'ara conseguir #ue al fnal de la estr%a tengamos colonias aisladas es importante #ue al principio agamos la estr%a m*s unta y #ue la candad de muestra tomada en el asa sea la adecuada. (oas, 2011)
Técnica de varios punos &n pro+undidad con asa de punta se pica con el asa el culvo a sembrar y se introduce mediante punción en el medio contenido en la parte in+erior del tubo. (/eeley, 2004)
M!"ERI!E& + ME"ODO& Materiales' Asas )a(as ,etri con S-A 0ram Tubos con S-A y S-A con antibitico *echero
Muestras )u$ti'o en medio $i2uido con $e'aduras 3 1 )u$ti'o en medio $i2uido con bacterias 3 5e+eta$ contaminado con hon+os
M"ODO&' De siem.ra'
Técnica de zi+za+
Siembra en 'arios #untos
Técnica de a+otamiento
De o.servaci/n directa'
Tincin de 0ram
Azu$ de $actofeno$
Reactivos ,ara tinciones : A. y
$ROCEDIMIEN"O MUESTAS
&scamas de lesión de sarna de perro
9uestra
sembrar en:
/2A simple 8. varios puntos
9ycosel
sembrar en:
/2A ; anbióco 8. "ig "ag
8. varios puntos
incubar a 2567
nción de gram. nción de lacto+enol: directa y scotc, tape
observar al microscopio
Procedimieno para eñir las muesras
9uestra a sembrar en:
/2A ; anbióco 8. por agotamiento
8incion de gram
A"ul de lacto+enol
colocamos las muestras tomadas de los culvos en un portaob(etos
ul para los medios con /2A y 9<7=/&>
f(amos la muestra
?na gota de a"ul de lacto+enol en la placa
violeta de cristal 1min y lavar
tomar una asada de la m uestra
solucion yodica 1min y lavar
colocar en la placa
observar con el lente de @0.
alco,ol cetona :0 s lavar y secar
observamoscon el lente de 100.
RE&U"!DO&' &D! 0 anti.i/tico en el tu.o
&D! 0 anti.i/tico en ca1a ,etri
M+CO&E 2en tu.o3
&D! sim,le 2en tu.o3
Colonia Color Reverso $i4men to del medio "ama5o de la colonia
$anco $anco 7o e8iste
$anco $anco 7o e8iste
$anca Amari$$enta 7e+ro
$anca $anca 7e+ro
n todo e$ medio
n todo e$ tubo
n #ocas #artes
-iámetro
1mm de $a co$onia
)recimiento en #artes !mm
!,ariencia
0ranu$oso
0ranu$oso
A$+odonosa
)remosa
C!R!C"ERI&"IC!& M!CRO&CO$IC!&
#r67icos
C!R!C"ER8&"IC!& MICRO&C9$IC!&'
Escamas de sarna de ,erro en Mycosel Características Microsc/,icas Micelio'
Colonia :
Colonia ;
on+o fi$amentoso
on+o fi$amentoso
Se#tado ia$ino -e$+ado )onidias #roducidas #or sim#$e se#aracin de $os tabi2ues; de tama
)ontinuo ia$ino 0rueso 7o se obser'aron conidias%
Producción, Tamaño y Disposición de las conidias
GRAFICOS
Escamas de sarna de ,erro en &D! sim,le Características Microsc/,icas Micelio'
Colonia on+o fi$amentoso )ontinuo ia$ino 0rueso 7o se obser'aron conidias%
Producción, Tamaño y Disposición de las conidias
GRAFICO
Muestra < 2&D! 0 anti.i/tico3 Características Microsc/,icas
GRAFICO
.e'aduras carácter 0ram #ositi'a% aci$os 0ram ne+ati'o% )ocos 0ram #ositi'os
*uestra a >S-A @ antibitico?
Característica s Microsc/,icas
.e'aduras carácter 0ram #ositi'a% aci$os 0ram ne+ati'o en #oca cantidad
GRAFICO
CONCU&IONE& &n esta pr*cca se aprendió las técnicas de siembra con la fnalidad de poder observar microorganismos en los culvos reali"ados. &s importante seguir todos los pasos para lograr un culvo adecuado ya #ue de este depender* ver las caracter%scas microscópicas como macroscópicas. &n las muestras de escamas de sarna de perro en /A simple como en 9ycosel se logró un culvo en ópmas condiciones ya #ue tanto para las caracter%scas macroscópicas como microscópicas ubo un crecimiento grande de colonias en la #ue se pudo observar +*cilmente. &n el caso de las muestras y a en /A ; anbióco a pesar #ue e l medio conene anbióco se presentaron bacterias $ram ; y $ram 3, presencia #ue pudo se r por una contaminación del medio.
ecomendaciones: &sterili"ar correctamente las asas. 8rabaar siempre en un medio asépco.
BIBIO#R!FI! =o(as; A% >!11?%)once#tos y #rácticas de microbio$o+ía +enera$% /eeley . B., (2004). 9icrobios en acción. >aboratorio 9anual de 9icrobiolog%a. 7uarta &d.B Creeman, Dueva aboratorio de 9icrobiolog%a.
0uía de $aboratorio de $a -ra% )armen .ucia .o#ez%
