TUGAS KHUSUS STERILISASI STERILIS ASI AUTOCLAVE AUTOCLAVE
Pengertian autoklaf adalah peralatan sterilisasi panas basah (menggunakan uap) yang biasa digunakan untuk sterilisasi material-material yang diperlukan dalam proses produksi.Peralatan tersebut perlu disterilisasi agar kelak saat kontak dengan produk tidak menyebabkan kontaminasi. Sebelum digunakan otoklaf terlebih dahulu divalidasi untuk membuktikan bahwa otoklaf berfungsi dengan baik dan mampu menghasilkan materi material al yang yang steril steril.. Prinsi Prinsip p autok autoklaf laf,, uap panas panas yang yang dihasi dihasilka lkan n oleh oleh autok autokla laf f bersumber dari uap panas yang dihasilkan oleh api. Autoklaf merupakan alat sterilisasi yang bekerja menggunakan air, tekanan, dan panas untuk menghasilkan uap yang supe superr pana panas s sehi sehing ngga ga dapa dapatt memb membun unuh uh mikr mikroo oorg rgan anis isme me dan dan spor spora. a. Autok utokla laf f digunakan untuk dekontaminasi limbah biologis, dan mensterilisasi media, instrumen dan peralatan laboratorium. Autoklaf dapat dioperasionalkan pada suhu !-!""#$. Sterilisasi efektif bila dilakukan pada lamanya waktu, misalnya pada media nutrisi yang volumenya %!-!"ml disterilisasikan di autoklaf dengan suhu %#$ selama !-%" menit pada tekanan .!kg&'m %. Agar autoklaf dapat difungsikan maka pemeliharaan dan dan peraw perawata atanny nnya a harus harus selalu selalu diper diperhat hatika ikan. n. Autok Autoklaf laf teruta terutama ma dituj ditujuka ukan n untuk untuk membunuh endospora, yaitu sel resisten yang diproduksi oleh bakteri, sel ini tahan terhadap pemanasan, kekeringan, kekeringan, dan antibiotik. Pada spesies yang sama.
ndospora dapat bertahan pada kondisi lingkungan yang dapat membunuh sel vegetatif bakteri tersebut. ndospora dapat dibunuh pada suhu "" $, yang meru merupak pakan an titik titik didih didih air air pada pada tekan tekanan an atmos atmosfer fer norma normal. l. Pada Pada suhu suhu % $, $, endospora dapat dibunuh dalam waktu *-! menit, dimana sel vegetatif bakteri dapat dibunuh hanya dalam waktu +-" detik pada suhu +! $. Perhitungan waktu sterilisasi autoklaf dimulai ketika suhu di dalam autoklaf men'apai % $. ika objek yang disterilisasi 'ukup tebal atau banyak, transfer panas pada bagian dalam autoklaf akan melambat, sehingga terjadi perpanjangan waktu pemanasan total untuk memastikan bahwa semua objek bersuhu % $ untuk waktu "-! menit. Perpanj Perpanjanga angan n waktu waktu juga dibutuh dibutuhkan kan ketika ketika 'airan 'airan dalam dalam volume volume besar besar akan akan diautoklaf karena volume yang besar membutuhkan waktu yang lebih lama untuk men'apai men'apai suhu sterilisasi sterilisasi. erdapat tiga jenis autoklaf, yaitu gravity displacement , prevacuum atau high vacuum , dan steam-flush pressure-pulse pressure-pulse .
Perbedaan ketiga jenis autoklaf ini terletak pada bagaimana udara dihilangkan dari dalam autoklaf selama proses sterilisasi . Gravity displacement autoklaf, udara dalam ruang autoklaf dipindahkan hanya berdasarkan gravitasi. Prinsipnya adalah memanfaatkan keringanan uap dibandingkan dengan udara, sehingga udara terletak di bawah uap. $ara kerjanya dimulai dengan memasukan uap melalui bagian atas autoklaf sehingga udara tertekan ke bawah. Se'ara perlahan, uap mulai semakin banyak sehingga menekan udara semakin turun dan keluar melalui saluran di bagian bawah autoklaf, selanjutnya suhu meningkat dan terjadi sterilisasi .
Autoklaf ini dapat bekerja dengan 'akupan suhu antara %-* $ dengan waktu "-" menit. Prevacuum atau high vacuum autoclave , autoklaf ini dilengkapi pompa yang mengevakuasi hampir semua udara dari dalam autoklaf. $ara kerjanya dimulai dengan pengeluaran udara. Proses ini berlangsung selama /-" menit. 0etika keadaan vakum ter'ipta, uap dimasukkan ke dalam autoklaf. Akibat kevakuman udara, uap segera berhubungan dengan seluruh permukaan benda, kemudian terjadi peningkatan suhu sehingga proses sterilisasi berlangsung. Autoklaf ini bekerja dengan suhu %-! $ dengan waktu -* menit. Steam flush pressure pulse autoclave, a utoklaf ini menggunakan aliran uap dan dorongan
tekanan di atas tekanan atmosfer dengan rangkaian berulang. 1aktu siklus pada autoklaf ini tergantung pada benda yang disterilisasi. Autoclave adalah alat untuk mensterilkan peralatan dan pasokan menundukkan
mereka untuk uap tekanan tinggi pada % $ atau lebih. 2ni di'iptakan oleh $harles $hamberland pada tahun /34, walaupun prekursor yang dikenal sebagai digester uap di'iptakan oleh 5enis Papin pada tahun +34. 6orge sterilisasi otoklaf. Sterilisasi ini dapat auto'lave dan mensterilkan 7i8uads dan instrumen. 2ni adalah alat sterilisasi sederhana yang bekerja dengan sangat baik. 9uilt-in kontrol mempertahankan suhu operasi pada tingkat yang telah ditetapkan sampai dengan % $ (%!" 6) untuk model standar. Sampai dengan % $ (%!" 6) atau " $ (%" 6) . angka waktu sterilisasi ("-+" min.) 5imulai setelah men'apai suhu operasi. :ang memiliki "kPa (!psi) tekanan operasi di'apai dalam beberapa menit . 5imana pintu auto'lave pada saat proses sterilisasi tidak dapat dibuka sampai tekanan uap benar-benar habis setelah uap panas yang ada didalam 'hamber dihisap pompa va'um. $ara menggunakan auto'lave, sebelum melakukan sterilisasi 'ek dahulu banyaknya air dalam autoklaf. ika air kurang dari batas yang ditentukan, maka dapat ditambah air sampai
batas tersebut. ;unakan air hasil destilasi, untuk menghindari terbentuknya kerak dan
karat.
pengaman agar tidak ada uap yang keluar dari bibir autoklaf. 0lep pengaman jangan diken'angkan terlebih dahulu. =yalakan autoklaf, diatur timer dengan waktu minimal ! menit pada suhu %o$. unggu samapai air mendidih sehingga uapnya memenuhi kompartemen autoklaf dan terdesak keluar dari klep pengaman. 0emudian klep pengaman ditutup (diken'angkan) dan tunggu sampai selesai. Penghitungan waktu !> dimulai sejak tekanan men'apai % atm. ika alarm tanda selesai berbunyi, maka tunggu tekanan dalam kompartemen turun hingga sama
dengan tekanan udara di lingkungan (jarum pada preisure gauge menunjuk ke
angka nol). 0emudian klep-klep pengaman dibuka dan keluarkan isi autoklaf dengan hati-hati. Perawatan autoklaf yaitu sebagai berikut, gunakan autoklaf sesuai dengan prosedur agar tidak terjadi kesalahan. ika autoklaf telah selesai digunakan, 'olokanya di'abut , untuk men'egah terjadinya kontaminasi. Air a8uadest yang ada pada autoklaf sebaiknya dibersihkan atau dikuras bagian dalam menggunakan lap kering, setelah digunakan. Pastikan dibagian dalam autoklaf betul-betul bersih jika belum bersih, masukan lagi air kedalam autoklaf dan kuras lagi menggunakan lap, lakukan kegiatan ini berulang-ulang hingga bagian dalam autoklaf benar-benar bersih. Simpanlah autoklaf di tempat yang kering dan bersih. $ara 0alibrasi 0alibrasi yaitu suatu aspek kritis yang wajib diplementasikan pada instrumen. 0alibrasi autoklaf dilakukan untuk menjamin dan menjaga kinerja dengan benar di tandai dari instrumen. Apabila ingin memastikan apakah autoklaf bekerja dengan baik, kita dapat memastikannya dengan pengujian mikroba yang bersifat termofilik. 6aktor yang mempengaruhi keefektifan sterilisasi yaitu, suhu sterilisasi yang efektif terjadi ketika suhu uap men'apai %!" 6 (% $). ekanan autoklaf setidaknya sebesar %" psi. 1aktu.total waktu yang dibutuhkan untuk mensterilisasi organisme bergantung dengan tekanan dan suhu. Pada %!" 6 (% $) dengan tekanan %" psi, dibutuhkan setidaknya " menit sterilisasi. Panas dari uap autoklaf harus kontak dengan semua permukaan barang yang diautoklaf atau muatan. utup semua botol dengan longggar selama siklus berlangsung sehingga uap yang meningkat dan tersebar selama pemanasan tidak akan menyebabkan ledakan.
setengah dari volume 'hamber autoklaf karena akan memberikan keleluasaan uap untuk bersirkulasi dengan bebas melewati muatan autoklaf . angan mengisi kantung autoklaf terlampau penuh, dan hubungkan se'ara longgar untuk memberi jalan kepada uap untuk masuk ke tengah-tengah kantung autoklaf.
angan membuka autoklaf selama siklus @slow ehaustB hingga siklusnya selesai. Panas dari 'airan yang mendidih dapat membahayakan autoklaf dan operatornya. angan gunakan siklus @fast ehaustB untuk larutan atau 'airan, karena material tersebut dapat menguap. 9uka penutup autoklaf dengan hati-hati. 9erdirilah disebelah penutup autuklaf dan buka dengan perlahan. 9iarkan uap keluar hingga kira-kira " detik sebelum Anda mengambil muatan dari dalam autoklaf. 9iarkan 'airan&air dalam autoklaf selama %" C " menit setelah autoklaf dibuka untuk menghindari 'ipratan yang dapat menyebabkan terpaparnya air panas&mendidih. 7aporkan segala malfungsi atau ke'elakan yang tiba-tiba terjadi kepada pengawas laboratorium Anda. 9eritahu manajer fasilitas lab atau vendor jika terjadi kerusakan atau saat membut uhkan perbaikan dari autoklaf Anda. Pengguna autoklaf bertanggungjawab untuk melakukan tes bulanan pada autoklaf dan melaporkannya kepada manajer lab.
vendor dari autoklaf yang Anda miliki. Ada pula indikator untuk siklus panas kering yang dapat digunakan untuk menguji keefektifan autoklaf yaitu 9a'illus atrophaeus. ombol pengatur waktu (timer), auto'lave tertentu dilengkapi dengan timer yang berfungsi untuk mengatur waktu lama atau sebentarnya proses sterilisasi, sesuai dengan kebutuhan&penggunaan yang dibutuhkan. 9erbeda dengan auto'lave sederhana yang masih menggunakan bantuan pemanasan air dengan kompor bukan listrik. Auto'lave sederhana tersebut tidak dilengkapi dengan timer. 0atup uap, meskipun termasuk bagian ke'il dari keseluruhan bagian autoklaf, namun katup uap merupakan salah satu komponen yang penting dan berfungsi sebagai tempat keluarnya uap air. Pengukur tekanan, jika ingin mengetahui nilai tekanan uap yang berada dalam autoklaf, Anda dapat melihat pada bagian ini. Pengukur tekanan berfungsi untuk mengetahui besar tekanan uap yang ada dalam auto'lave saat proses sterilisasi tengah berlangsung. 0atup pengaman berfungsi sebagai penahan atau pengun'i penutup autoklaf. ika Anda menggunakan autoklaf yang menggunakan sumber energi listrik, maka keberadaan tombol ini sangat berandil besar. 0arena tombol ini berfungsi untuk menghidupkan atau mematikan mesin autoklaf. 9iasanya, pada proses sterilisasi membutuhkan suhu yang berbeda bergantung pada bahan atau alat yang anda sterilkan.
ermometer merupakan komponen yang berfungsi untuk mengetahui dan mengamati suhu yang dibutuhkan. Apakah sudah sesuai dengan suhu yang Anda butuhkan atau belum. 7empeng sumber panas adalah komponen yang akan membantu perubahan energi listrik menjadi energi kalor . 7empeng sumber panas atau heater ini terbuat dari kumparan&lilitan kawat tembaga yang jika dialiri arus listrik akan menghasilkan energi panas. Skrup pengaman sangat dibutuhkan untuk menjaga besaran dan tekanan uap yang ada dalam autoklaf . Pastikan skrup pengaman ini terpasang dengan baik dan rapat. Angsa, pada auto'lave yang menggunakan energi listrik , Anda akan menemukan angsa yang berfungsi
sebagai
batas
penambahan
air.
Sedangkan
pada
autoklaf
yang
menggunakan energi panas dari kompor atau pemanas konvensional lainnya, Anda akan menemukan almunium 'ontainer yang berfungsi untuk meletakan berbagai bahan atau alat yang hendak Anda sterilisasikan. Selain keterangan komponen di atas, autoklaf juga memiliki komponen lain seperti pompa va'um yang berfungsi untuk menghisap udara atau uap 'ampuran dari ruang sterilisasi ('hamber) autoklaf .
0alibrasi merupakan suatu aspek kritis yang wajib diplementasikan pada instrumen. 0alibrasi autoklah dilakukan untuk menjamin , memastikan dan menjaga kinerja yang benar dan memadai dari instrument . ika ingin memastikan autoklaf bekerja dengan baik atau sempurna, kita dapat memastikannyan dengan melakukan pengujian mikroba yang bersifat termofilik dan memiliki endospora yaitu 9a'illus Stearothermophilus. 5alam bentuk kertas spora strip dimasukan kedalam autoklaf dan disterilkan, setelah proses sterilisasi kemudian ditumbuhkan pada media . ika media tetap bening maka autoklaf bekerja se'ara baik. Salah satu media yang digunakan untuk kalibrasi internal adalah auto'lave adalah menggunakan 9ios 2ndikator