RANGKUMAN SEL DIFUSI FRANZ
1.
SEL DIFUSI FRANZ
Studi penetrasi kulit secara in vitro dilakukan dengan mengukur kecepatan dan jumlah komponen yang menembus kulit dan jumlah komponen yang tertahan pada kulit. Sel difusi Franz adalah suatu sel difusi tipe vertikal untuk mengetahui penetrasi zat secara in vitro.
2.
KOMPONEN SEL DIFUSI FRANZ
Sel difusi Franz mempunyai komponen berupa: a.
Kompartemen Donor. Berisi zat yang akan diuji penetrasinya.
b.
Kompartemen Reseptor. Kompartemen reseptor diisi dengan larutan penerima. Berisi cairan berupa air atau dapar fosfat pH 7,4 yang mengandung albumin. Fungsi albumin yaitu untuk meningkatkan kelarutan zat yang sukar larut dalam cairan kompartemen reseptor yang digunakan.
Cairan di kompartemen reseptor perlu diaduk secara optimal dan efisien untuk menjamin cairan dalam kompartemen reseptor homogen. Volume kompartemen reseptor 2-10 ml dan luas yang terpapar membran sebesar 0,2-2 cm 2. Dimensi sel difusi harus diukur secara akurat karena berkaitan dengan perhitungan kadar zat.
Kondisi di kompertemen reseptor yang ideal harus bisa untuk memfasilitasi penetrasi zat seperti pada keadaan in vivo. vivo. Konsentrasi zat di kompartemen reseptor seharusnya tidak boleh melebihi 10% konsentrasi zat untuk mencapai kejenuhan. Konsentrasi zat di kompartemen reseptor yang tinggi dapat menyebabkan penurunan laju penetrasi. Suhu pada sel dijaga dengan sirkulasi air menggunakan water jacket disekeliling kompartemen reseptor.
c.
Tempat Pengambilan Sampel. Tempat pada sel difusi Franz untuk mengambil cairan dari kompartemen reseptor dengan volume tertentu.
d.
Cincin O. Diantara kompartemen donor dan kompartemen reseptor diletakkan membran yang digunakan untuk sel difusi Franz. Cincin O menjaga posisi membran supaya tidak berubah.
Membran yang digunakan dapat berupa membran sintesis, membran kulit manusia atau membran kulit hewan (dihilangkan bulu dan lapisan lemak subkutannya).
e.
Water Jacket. Berfungsi untuk menjaga temperatur tetap konstan selama sel difusi Franz dioperasikan.
3.
PROSEDUR PENGGUNAAN Secara Umum
Cara melakukan uji penetrasi dengan sel difusi Franz adalah:
1.
Sejumlah tertentu zat diaplikasikan pada membran.
2.
Dibiarkan berpenetrasi secara difusi pasif melalui membran.
3.
Untuk mengetahui jumlah zat yang berpenetrasi dan laju penetrasi zat, dilakukan sampling cairan di kompartemen reseptor selama waktu tertentu sampai keadaan menjadi tunak.
4.
Cairan dari kompartemen reseptor yang diambil digantikan dengan cairan awal sesuai volume yang diambil. (Bertujuan untuk menjaga volume dalam cairan reseptor tetap konstan dan untuk menjaga supaya cairan di kompartemen reseptor tetap dalam keadaan tunak)
Contoh Prosedur Penetrasi Mikroemulsi Natrium Diklofenak 1. Membran kulit tikus dihidrasi dengan dapat fosfat pH 7,4 selama 30 menit. 2. Pasangkan membran kulit tikus pada sel difusi Franz. 3. Dapar fosfat pH 7,4 dan pengaduk magnetik ke kompartemen reseptor ad batas. 4. Sebanyak ± 1 gram mikroemulsi dimasukkan ke kompartemen donor. 5. Operasikan sel difusi Franz, water jacket suhu konstan 37 ± 0,5 o dan magnetic stirrer pada 250 rpm. 6. Pengambilan sampel sebanyak 0,5 ml dari larutan kompartemen reseptor pada menit ke 30,60,90,120,180,240,300, 360, 420 dan 480. 7. Masukan sampel pada labu ukur 5 ml. 8. Ukur absorbansi pada panjang gelombang maksimum dengan spektrofotometer UV-Vis. 9. Hitung jumlah kumulatif natrium diklofenak yang terdapat dalam cairan reseptor setiap waktu pengambilan sampel. 10. Larutan yang disampling, segera diganti dengan dapar fosfat pH 7,4 untuk mempertahankan volume cairan tetap konstan.
4.
PERHITUNGAN
a.
Jumlah Kumulatif Zat Terpenetrasi per Luas Area: Jumlah kumulatif zat terpenetrasi per luas area dapat dihitung dari data absorbansi hasil pengukuran menggunakan spektrofotometri UV-Vis.
Contoh Perhitungan Jumlah Natrium Diklofenak yang Terpenetrasi dari Sediaan Mikroemulsi pada Menit Ke-30
Serapan (y) = 0,0341
y = 0,02734x - 0,00169 x = 1,3092 ppm
Faktor Pengenceran (FP) = volume labu terukur : volume sampling =
5 ml : 0,5
= 10 kali
Faktor Koreksi Baku Pembanding Natrium Diklofenak (FK) = 1,2158 Konsentrasi Terpenetrasi = x. FP. FK = 1,3092 ppm x 10 x 1,2158 = 15,9171 ppm
Rumus Jumlah Kumulatif Zat Aktif Ter penetrasi Per Luas Area :
Cn
= Konsentrasi terpenetrasi pada menit ke 10
V
= Volume sel difusi (13 ml)
∑− =
Jumlah konsentrasi zat pada sampling pertama
S
= Volume sampling (0,5 mL)
A
= Luas area membran (1,65 cm2)
15,917
=
μg 13 + 0 0,5 mL 1,65 2
125, 4071 μg/cm2
%
b.
. + ∑− = .
Perhitungan Fluks (kecepatan penetrasi tiap satuan waktu) obat berdasarkan Hukum Fick I :
J = laju penetrasi zat (fluks) (μg cm-2 jam-1) Q = jumlah kumulatif zat yang melalui membran (μg cm-2) t = waktu (jam)
Setelah itu dibuat grafik jumlah kumulatif yang terpenetrasi (μg) perluas area difusi (cm2) terhadap waktu (jam) (Ramadon, 2012).
