Descripción: datos generales acerca del cultivo in vitro
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Producción de plantas haploides a partir del cultivo in vitro de anteras y granos de polen de cucarda ( Hibiscus rosa-si rosa-sinensis nensis)) Arboleda 0ario >oada
Resumen Palabras clave Abstract Key Words I.
Introducción
Habiscus rosa-sinensis es rosa-sinensis es un arbusto leñoso en la base perenne y muy rami!icado con ho"as simples alternas dentadas y pecioladas. Posee !lores solitarias con !orma de embudo son pediceladas actinomor!as y herma!roditas tienen cinco p#talos de colores carmes$ rosado blanco. %us anteras son de color amarillo y sus estambres ro"os a la cucarda se la considera una planta &til desde el punto de vista ornamental por su !acilidad de !loración y tambi#n se conoce 'ue posee propiedades medicinales este arbusto es de clima tropical (Rueda *). +l cultivo de anteras es una t#cnica por medio de la cual es posible producir l$neas homocigotas a partir de poblaciones segregantes mediante el doblamiento cromosómico del polen haploide y la regeneración de plantas en un ciclo de cultivo in vitro. vitro. +n contraste por los m#todos est,ndar de !itome"oram !itome"oramiento iento normalmente normalmente se re'uieren re'uieren seis generacion generaciones es de auto!ecund auto!ecundación ación para alcan-ar la completa homocigosis en plantas autogamas (astillo /). 0ediante esta t#cnica las anteras inmaduras 'ue contienen polen en una etapa espec$!ica de desarrollo se colocan en medios donde el polen inmaduro se divide para !ormar embriones o callo. 1rans!eridos #stos a medios de regeneración se !orman plantas. +n la mayor$a de los casos se producen plantas haploides est#riles pero en algunas especies ocurre una duplicación espont,nea de los cromosomas en las etapas de desarrollo del callo y de regeneración de la planta. 2esde 'ue 3uha y 0ahesh4ari lo descubrieron en 5678 el cultivo de anteras se ha e9tendido a m,s de 5/ especies (P#re- et al. 566:).
II.
0ateriales y m#todos
%e recolectó recolectó muestras de la planta planta madre Hibiscus rosa-sinensis rosa-sinensis ubicada en el campus de la +%P+ matri- en %angol'u$;+cuador % angol'u$;+cuador..
toalla est#ril !rascos de medio botellas de agua est#ril y vasos de precipitación vac$os !ueron rociados con alcohol al *=. +n el ,rea de limpie-a de e9plantes a estos se en"uagó minuciosamente con agua corriente para retirar tierra luego se colocó los e9plantes en un vaso de precipitación con / m< de detergente al = manteniendo la solución en agitación durante 5/ minutos posteriormente se reali-ó dos lavados con agua destilada y uno con agua est#ril hasta eliminar todo el detergente. %eguidamente se sometió a los e9plantes a una inmersión de / m< de hipoclorito de sodio al = m,s tres gotas de 14een durante 5 minutos en agitación. %iembra del material %e llevó los e9plantes a c,mara de siembra previamente desin!ectada y en condiciones as#pticas en donde se reali-ó tres en"uagues con agua est#ril con un tiempo de duración de / minutos terminado el proceso de desin!ección se colocó los e9plantes sobre servilletas est#riles se reali-aron cortes con el bistur$ y pin-as previamente !lameadas retirando los p#talos de la !lor y con el bistur$s delicadamente se retiraron lo granos de polen. Por <imo se inoculó los granos de polen en dos !rascos de medio de cultivo de 0urashinge B %Coog enri'uecido con ./mgD< de 8;2 se los almacenó en lu- ligera de lu9 con un !otoperiodo de 58 horas y una temperatura de :E.
III.
Resultados
Figura 1. Resultados de siembra de polen !rasco 5 Foto Tomada por: Anah$ >oada
Figura 2. Resultados de siembra de polen frasco 2 Foto Tomada por: 2avid %algado Tabla 1. 2escripción resultados .
Fecha de Siembra: 5:D*D57
Fecha de evaluación:
/D*D57
E s t r u c t u r a s
Explante: Habiscus rosa sinensis
Frasco 1
Frasco 2
Frasco "
IF.
;
Presencia de raicillas.
;
Presencia de raicillas.
;
Presencia de raicillas.
a r a c e s t r ! s i t i c a
+l polen se encorvó y aumentó de tamaño su colór se hi-o m,s oscuro las raicillas son largas y gruesas. +l polen se encorvó y aumentó de tamaño su colór se hi-o m,s oscuro las raicillas son cortas y delgadas. +l polen se encorvó y aumentó de tamaño su colór se hi-o m,s oscuro las raicillas son cortas y delgadas.
