PREINFORME DE LABORATORIO DE BIOQUÍMICA BIOQUÍMI CA METABÓLICA
1. ACTIVIDAD ACTIVIDAD UREÁSICA UREÁSICA EN MUESTRA MUESTRAS S DE ORIGEN ORIGEN BIOLÓGIC BIOLÓGICO O 2. CAPACIDAD CAPACIDAD AMORTIGUA AMORTIGUADORA DORA (P
Y POTENCIA POTENCIAL L AMORTIGUA AMORTIGUADOR DOR
DE MUESTRAS RAS BI BIOLÓGICAS CAS
3. DETERMINA DETERMINACIÓN CIÓN DE CARBOHIDRA CARBOHIDRATO TOS S NO ESTRUCTURALES ESTRUCTURALES (CNE), (CNE), EN FORRAJES, POR EL MTODO DE FENOL!ÁCIDO SULF"RICO
ERNESTO CARLOS MARTELO DIA# CODIGO$ %.&2'.'' CCAV$ S*+ B-/0
MARIA GABRIELA ROMERO
ESCUELA ECAPMA MAYO DE 2'1
UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA UNAD
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PREINFORME DE LABORATORIO DE BIOQUÍMICA METABÓLICA
LABORATORIO 1 INTRODUCCIÓN La ureasa (EC 3.5.1.5) es una enzima que cataliza la hidrólisis de urea a dióxido de carbono y amoníaco. La reacción ocurre de la siuiente manera! ("#$)$C% & #$% ' C%$ & $"#3. e encuentra rincialmente en semillas* microranismos e in+ertebrados. La ureasa es esencial en el ciclo del nitróeno ya que la mayoría de las lantas solo ueden utilizar el nitróeno en ,orma de nitrato y amonio MAPA CONCEPTUAL
MENTEFACTO
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PREINFORME DE LABORATORIO DE BIOQUÍMICA METABÓLICA MATERIALES Y MTODOS. CUADRO I$ LISTA DE E4UIPOS UTILI#ADOS -ateriales y equios requeridos
MATERIA 5 E4UIPO
CARACTER6STICA
ubo de ensayo 0radillas /inzas Erlemeyer /ietas raduadas -atraz a,orado a4o termostatado ea7er 9areta oorte :ni+ersal -uestras
/yrex mediano -etlica /ara bureta 1$5 ml 5 a 12 ml 122 ml emeratura 3 6C 822 ml $5 ml -etlico uelo* ,orra;e* harina
CUADRO II$ LISTA DE REACTIVOS UTILI#ADOS
REACTIVOS
FORMULA
CONCENTRACION
Cloruró de mercurio >cido Clorhídrico Cloruró de odio :rea :reasa
#Cl$ #C? "aCl #$"C%"# En u,,er
1= 2*1" 1= 2*$52*5=
PROCEDIMIENTO$ Extracción y solubiliza ion de ureasas en harina suelos o ,orra;e (m@todo saltin out)! eso de la muestra &AB 1* 12ml de "aCl 1 = en un tubo de centri,ua* aitar or 5 minutos* centri,uar a 3522 mr or 5 minutos* el reciitado se descarta* tomar el sobrenadante y medir 9, 9* rotular tubos de
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PREINFORME DE LABORATORIO DE BIOQUÍMICA METABÓLICA ensayo! E#D: (extracto de harina ara acti+idad ureasica)* ED: ( extracto de suelo ara acti+idad ureasica* ED:( extracto de ,orra;e ara acti+idad :reasica).
CUANTIFICACIÓN DE LA AU$ mezclar los reacti+os como indica la tabla de la uía en la ina 5. TITULACIÓN$ tara y alistar monta;e y enrazar la ureta con #Cl 2.1 "* tomar 3 ml de en Erlenmeyer con 3 ota de indicador tashiro* color azul +erdoso rueba ositi+a ara ion "#8. itular hasta color rosado +iolaceo (rueba ositi+a ara ion "#8* reistrar en tabla de datos ml de #Cl astados* reetir rocedicmiento anterior con y las muestras. EN LABORATORIO /eso muestras! FmG Extracción con "aCl 1=G Centri,uaciHInG iltraciónG medida sobrenadante! 9sG itulación con #ClG
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I<=<-89 M789:95T7;-9
Fm()
9, (mL)
9 #C?(mL)
uelo #arina orra;e tandar lanco io de muestras analizadas
%rien* ubicación* eora,ía* reión*
RESULTADOS ESPERADOS$ La acti+idad de la enzima ser mayor en el suelo* intermedia en ,orra;es y menor en la harina* iualmente con la cantidad de #Cl 2.1 " astado.
GLOSARIO$ RBE$
NNP$ "itróeno "o roteico! "itrHIeno resente en mol@culas ornicas como la urea e inornicas como Dmonio y el "itrato ("%3B) :rea
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PREINFORME DE LABORATORIO DE BIOQUÍMICA METABÓLICA
LABORATORIO 2 ítulo de la rctica! Carbono ornico* materia ornica y caacidad amortiuadora de suelos
INTRODUCCION El suelo es un mezcla hetero@nea y contiene comonentes ornicos e inornicos* con caacidad amortiuadora* que es el otencial químico que tienen los sistemas ed,icos ara reular y controlar su #* cuando son sometidos a rocesos de acidi,icación y alcalinizaciónG esta reulación se da or la resencia de sistemas amortiuadores biolóicos* de la materia ornica e inornica del suelo.
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MATERIALES Y MTODOS. M:889 > 8?7@-9 8?78<-9
M:8 5 E?7@C=:8/9:=9 E8*88 D8 12*L P@8:9 <7<9 D8 1'*L E9@:7 *8:= P-;8: <7< D8 1''*L B78: D8 2*L S-@-:8 7089 M8:=-, =- @ @ ;78:. B88 D8 2'*L P-:8=+*8:-
M:8 5 E?7@- C=:8/9:=9 Erlenmeyer Je 1$5mL /ietas raduadas Je 12mL Estula metlica /robeta raduada Je 122mL ureta Je $5mL oorte uni+ersal -etlico* con inza ara bureta. ea7er Je $52mL
E?7@- <8 ::7=+ B78: Equio de titulación ureta y un matraz Erlenmeyer. 7 *: E8*88. B /:= E9@8=:--:+*8:C8<9 89@8=:--:-*:=9 E*;7<-9 P@8 :M789:9 <8 978-
alanza analítica ir+e ara medir* en ,unción de la lonitud de onda* la relación entre +alores de una misma manitud ,otom@trica relati+os a dos haces d e radiaciones y la concentración o reacciones químicas que se miden en una muestra El embudo es un material emleado ara canalizar líquidos y materiales aseosos ranulares en reciientes con bocas anostas. /ael que se corta en ,orma circular y se introduce en un embudo de ,iltración* con el ,in de ser ,iltro ara las imurezas insolubles y ermitir el aso a la solución a tra+@s de sus oros racción de suelo
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REACTIVOS A UTILI#AR REACTIVO >cido sul,Krico Jicromato de otacio* 1" >cido ,oso,orico Ji,elinamina #idroxido de odio 2* 1" >cido Clorhidrico 2* 1" enol,taleina Dua destilada olucion u,er ,os,ato
FROMULA #$%8 $Cr$% 1" #3/%8 C1$#11" "a%# 2 1" #CL 2 1" C$2#18%8 #
%$CONCENTRACION Concentrado
PROCEDIMIENTO En Camo
e deben muestrear 522 de suelo
En laboratorio
Carbono %rnico (C%)* -@todo de titulación +olum@trica Carbono %rnico (C%)* -@todo Esectro,otom@trico Caacidad amortiuadora * -@todo /otenciom@trico
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DIAGRAMA DE FLUJO
Jatos ara determinación de carbono ornico* m@todos +olum@tricos y esectro,otom@tricos
M789:9
P89- (*)
VF8SO
A;9-;= (A)
M1 M2 B=- (B)
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Jatos ontenciom@tricos ara caacidad amortiuadora de suelos -uestras
/eso (Fm)
9olumen(mL)
#1
#$
uelo 1 uelo $ Dua Jestilada olución u,,er
RESULTADOS ESPERADOS$
#allar los +alores de carbono ornico* materia ornica y "itróeno total
en las muestras estudiadas. #allar los +alores de caacidad y otencial amortiuador de las muestras analizadas
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LABORATORIO 3 ítulo de la rctica! Jeterminación de carbohidratos no estructurales* en ,orra;es* or el m@todo de ,enolBcido sul,Krico
INTRODUCCIÓN La catalasa en una enzima que la odemos encontrar en muchos oranismos +i+os* y cataliza la reacción de descomosición del eróxido de hidróeno en aua y oxíeno. En esta rctica* la acti+idad de catalasa se determinar or el m@todo ermananom@trico* en el cual se titula el eróxido residual* es decir* el que no artició en la <E* con una solución de ermananato de otasio (-n%8) de concentración conocida
MENTEFACTO Ó DIAGRAMA CONCEPTUAL
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MATERIALES Y E4UIPOS
MATERIA 5 E4UIPO
CARACTER6STICA
oorte uni+ersal /ieta 0raduada /robeta 0raduada ea7er ubos de ensayo Erlemeyer ureta
-etlico con inzas ara bureta Je 5 y 12 ml Je 122 ml Je 822 ml Con radilla Je 1$5 ml Je $5 ml
REACTIVOS A UTILI#AR REACTIVO u,,er ,os,ato >cido sul,Krico /ermananato de ,os,ato
FROMULA #$%$ #$%8 -n%8
CONCENTRACION 2*23 $" 2*21 -
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PREINFORME DE LABORATORIO DE BIOQUÍMICA METABÓLICA PROCEDEMIENTO E" CD-/%!
e toman ,rutas* +erduras y suelos concentrados en muestras icadas o ul+erizada ($) ara determinar los extractos de las mismas ara la catalasa.
E" LD%
Fm* centri,uación* ,iltración* 9,* aitación* rotulación y determinación de extracto ara catalasa.
EM:E-D 3. Filtrar & medir volumen del mismo
2. LLevar la al ea!er
1. Pesar la muestra
4. Agitar mezcla
5. Tapar y rotular
M789:9 5:7;-9 I<=<-89
* ()
V (*L)
VMO (*L)
S78-
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H F-8 V8<7 B=T@- <8 *789:9 A<9
%rien* ubicación eor,ica* reión* aro climatoloía
RESULTADOS ESPERADOS$ Jetermina la cantidad de carbohidratos totales "o estructurales* basndose en su contenido de almidones hidrolizables y azKcares solubles.
GLOSARIO ESPECTROFOTÓMETRO$ ?nstrumento usado en el anlisis químico que sir+e ara medir* en ,unción de la lonitud de onda* la relación entre +alores de una misma manitud ,otom@trica relati+os a dos haces de radiaciones y la concentración o reacciones químicas que se miden en una muestra. TRANSMITENCIA$ Es una manitud que exresa la cantidad de enería que atra+iesa un cuero en la unidad de tiemo (otencia). ABSORBENCIA$ Es la cantidad de intensidad de luz que absorbe la muestra.
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PREINFORME DE LABORATORIO DE BIOQUÍMICA METABÓLICA
BIBLIOGRAFIA 0ranados* N.*($212)*-odulo ioquímica -etabólica* :nidad $*ca $G ECD/-DG :"DJ 0ranados* N.*($212)*/rotocolo rcticas de laboratorio* /ainas 3BOG ECD/-DG :"DJ 0ranados.* NG 0arcía* N.*($222)*ísicoBMuímica DlicadaG Ca 11* Ed Dntroos* oot* Colombia htt!AAamortiuadoresbioloicos.blosot.comA es.Pi7iedia.orAPi7iAComuestoQornico ERNESTO CARLOS MARTELO DIAZ – CCAV: SIMON BOLIVAR, CARTAGENA emartelo@unad!rtual"edu"#o
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