Praktikum Tes Widal

Praktikum Tes Widal Blok 14 Mikrobiologi

TES WIDAL

1. 2. 3. 4. 5.

Tujuan Pembelajaran Dasar teori Langkah Pemeriksaan Widal Tugas Praktikkan Referensi

TES WIDAL 1. TUJUAN PEMBELAJARAN 

Mahasiswa mengetahui dasar pemilihan dan pengambilan specimen untuk Tes widal



Mahasiswa memahami langkah-langkah tes widal



Mahasiswa mampu melakukan interpretasi hasil terhadap tes widal

2. DASAR TEORI Dasar Teori Pemeriksaan Widal Tujuan uji Widal adalah berguna untuk diagnostic penyakit tifoid/typus.Tes widal adalah uji serologi untuk mengetahui adanya antibody terhadap Salmonella typhi beserta titernya. Uji serologi adalah reaksi antara antibody dan antigen. Reaksi serologi dapat berupa aglutinasi, persipitasi, lisis, hemolisis, netralisasi dan fluoresensi. Reaksi serologi tes widal adalah berupa reaksi aglutinasi.

Salmonella typhi ada tiga (3) antigen yaitu :  Antigen O Antigen O merupakan antigen yang terdapat pada somatic bakteri Salmonella Cara pembuatan antigen O : Merusak antigen H dengan menambah alcohol/asam/pemanasan 100°C selama 20 menit pada kuman yang motil berusia muda maka flagel akan rusak dan tinggal badan kuman. Reaksi aglutinasi yang terjadi bila ditambah dengan anti O, antibody berupa endapan seperti pasir yang tidak hilang bila larutan dikocok.  Antigen H Antigen H merupakan antigen yang terdapat pada flagel bakteri Salmonella Cara pembuatan antigen H :

Dengan menambah formalin pada kuman yang motil berusia muda sehingga protein flagel yang labil menjadi stabil. Reaksi aglutinasi yang terjadi bila ditambah dengan anti H antibodi berupa gumpalan seperti kapas yang mudah hilang bila larutan dikocok . 

.

Antigen Vi (Virulen) Antigen Vi merupakan antigen yang terdapat pada kapsul bakteri Salmonella. Antigen ini berperan di dalam patogenesis penyakit tifoid.

3. LANGKAH PEMERIKSAAN WIDAL ALAT DAN BAHAN Bahan, reagen dan peralatan : 1. Antigen Salmonella typhi ada 8 serotype, yaitu : a. Salmonella typhi O b. Salmonella paratyphiAO c. Salmonella paratyphi BO d. Salmonella paratyphi CO e. Salmonella typhi H f. Salmonella paratyphi AH g. Salmonella paratyphi BH h. Sallmonella paratyphi CH

2. Serum 3. Objek glass 4. Pipet ukur 1ml 5. Tusuk gigi

PROSEDUR Terdapat variasi pemeriksaan widal. Pemeriksaan widal dapat dilakukan secara konvensional (tube test) dan pemeriksaa widal secara cepat (rapid test). Dalam praktikum ini akan dilakukan pemeriksaan widal rapid test secra kualitatif maupun kuantitatif.

Pemeriksaan widal secara cepat (rapid test) Secara Kualitatif 1. Teteskan serum pasien 0.02 cc pada objek glass (sebanyak 4 buah) 2. Teteskan 4 antigen sebanyak satu tetes pada masing-masing weil 3. Dicampur dengan tusuk gigi sampai homogen kemudian digoyang selama 2 menit 100 rpm apabila memakai alat regulator, selama 5 menit apabila manual. 4. Diamati hasilnya : Positif (+)

: adanya aglutinasi

Negatif (-) : tidak ada aglutinasi (homogen) 5. Apabila hasil ini positif dilanjutkan pemeriksaan secara kuantitatif.

Secara Kuantitatif 1. Dilakukan penipisan pasien dari 0,02cc

0,01 cc

0,005cc

0,0025cc 2. Ditambah satu tetes antigen (positif tes kualitatif) pada masing-masing objek glass 3. Dicampur dengan tusuk gigi sampai homogen kemudian digoyang selama 2 menit apabila memakai alat regulator, selama 5 menit apabila manual. 4. Diamati adanya aglutinasi (+), titer ditulis pada hasil adalah penipisan terakhir yang masih menunjukkan adanya aglutinasi (+) 5. Jenis-jenis titer, sbb : 1:80

: serum 0.02 cc

(20 ul)

1:160 : serum 0.01 cc

(10 ul)

1:320 : serum 0.005 cc (5 ul) 1:640 : serum 0.0025 cc (2.5ul)

4. TUGAS PRAKTIKKAN  Melakukan pemeriksaan widal dengan metode Rapid slide test secara kualitatif dan kuantitatif  Mengamati hasil pemeriksaan widal dan menginterpretasikan hasilnya  Mengetahui pada keadaan apa saja dapat terjadi false positif dan false negatif pada pemeriksaan widal

LEMBAR KERJA: UJI WIDAL NAMA :……………………………………….. NIM :……………………………………….. KELOMPOK :………………………………………..

1. Tuliskan hasil pemeriksaan kualitatif uji widal yang anda dapatkan No

Ag

Hasil Agglutinasi

2. Tuliskan hasil pemeriksaan kuantitatif uji widal yang anda dapatkan No

Ag

Titer Widal

3. Sebutkan 3 aspek yang dapat menyebabkan terjadinya false positive pada uji Widal

4. Sebutkan 3 aspek yang dapat menyebabkan terjadinya false negative pada uji widal

5. REFERENSI Mayer G. Immunoglobulins-Antingen-Antibody Reactions and Selected Test. 2010 [updated 12 july 2010; cited 1 Novemeber ]. Available from: http://pathmicro.med.sc.edu/mayer/ab-ag-rx.htm.

Olopoenia LA, King AL. Widal Agglutination Test - 100 Years Later: Still Plagued Controversy. Postgrad Med J. 2000; 76.

Rao S. Widal Test. Davanere; 2009 [updated 2 November 2011]. Available from: www.microrao.com.

Serum Analysis Centre. Serology. Kolkata; n.d [updated 2 November ]. Available from: http://www.indiamart.com/serum-analysiscentre-privatelimited/serology.html.