Praktikum Biokimia

PRAKTIKUM BIOKIMIA “Pemeriksaan Gula Darah dan Glukosa dalam Urine”

Oleh: I.A. PADMITA UTAMI (H1A008010) IKA NURFITRIA TAUHIDA (H1A008011) RIRI KUMALA SARI (H1A008026) FAIRUZ SYAFHI’IMAM (H1A008013) ANITA RAHMAN (H1A008014) SRI MARTINI (H1A008015) ZUNURUL HAYATI (H1A008016) DWI PUTRI MIFTAHULHUDA (H1A008017)

FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS MATARAM 2010 PEMERIKSAAN GLUKOSA URINE (METODE BENEDICT) Laporan hasil praktikum biokimia

Page 1

Alat: •

2 tabung

•

1 rak tabung

•

Pipet tetes

•

Pemanas air

Bahan: •

Urine

•

Larutan benedict

Prosedur Kerja 1. Siapkan alat dan bahan. 2. Masukkan 40 cc larutan benedict ke dalam tabung tinggi, lalu masukkan tabung berisi

larutan benedict tersebut ke dalam pemanas air dan panaskan hingga mendidih. 3. Setelah larutan benedict mendidih, teteskan 2 tetes urine ke dalam tabung tersebut,

kemudian dipanaskan kembali hingga mendidih. 4. Jika sudah mendidih, dinginkan 10 menit dan lihatlah perubahan warna yang terjadi.

Interpretasi perubahan warna : •

Biru terang tanpa endapan : ( - )

•

Biru kehijauan dengan endapan tipis : ( + )

•

Biru kehijauan dengan endapan tebal : ( ++ )

•

Biru lembayung (sedikit merah atau oranye) dengan endapan tipis : ( +++ )

•

Merah bata dengan endapan tebal : ( ++++ )

Laporan hasil praktikum biokimia

Page 2

Hasil Praktikum dan Pembahasan

Urin yang digunakan sebagai spesimen dalam pemeriksaan glukosa urin bermacammacam jenisnya. Jika kita melakukan pemeriksaan glukosa urin dengan menggunakan urin kumpulan sepanjang 24 jam pada seseorang, ternyata tidak benyak berbeda dari urin 24 jam berikutnya. Akan tetapi bila kita mengadakan pemeriksaan dengan sampel urin seseorang pada saat-saat yang tidak menentu di waktu siang atau malam sesudah atau sebelum makan, aktivitas fisik dan lain sebagainya, maka akan diperoleh hasil pemeriksaan yang berbeda antara sampel urin tertentu dengan sampel urin lain. Itu sebabnya penting sekali untuk memilih dan menentukan sampel urin sesuai dengan tujuan pemeriksaan. Urin sewaktu merupakan urin yang dikeluarkan pada suatu waktu tanpa ditentukan secara khusus. Spesimen ini cukup baik untuk pemeriksaan glukosa urin secara rutin. Urin postprandial merupakan urin yang pertama kali dikeluarkan 1,5 jam-3 jam setelah makan. Spesimen ini khusus digunakan untuk memantau kadar glukosa urin pasien setelah makan. Urin pagi merupakan urin yang pertama kali setelah bangun tidur. Urin ini lebih pekat dan merupakan kumpulan urin malam hari. Spesimen ini tidak baik untuk pemeriksaan penyaring terhadap adanya glukosuria.


Page 3

Seperti halnya dengan darah maka urin harus diperiksa sewaktu masih segar. Jika urin disimpan mungkin terjadi perubahan susunan kimia oleh kuman. Untuk mengecilkan kemungkinan perubahan ini pada keadaan terpaksa pemeriksaan tertunda. Selain itu apabila akan digunakan urin 24 jam dapat digunakan bahan pengawet urin untuk menghambat pertumbuhan kuman. Toluena sebanyak 2-5 ml untuk mengawetkan urin 24 jam merupakan bahan pengawet yang baik untuk pemeriksaan glukosa. Tujuan pemeriksaan glukosa urin tidak untuk memastikan diagnosis DM, karena pemeriksaan ini tidak selalu dapat mencerminkan konsentrasi glukosa dalam darah. Pemeriksaan urin ini yang paling sering diminta oleh pasien. Terdapat batas ambang ginjal untuk glukosa yang merupakan batas konsentrasi glukosa dalam darah yang masih dapat ditahan oleh glomerulus ginjal. Apabila konsentrasi glukosa dalam darah > 180 mg/dL ( batas ambang ginjal untuk glukosa), glukosa akan keluar ke urin dan pada pemeriksaan glukosa urin hasilnya akan positif. Urin yang dikeluarkan tidak secara langsung berkorelasi dengan konsentrasi glukosa dalam darah pada saat yang sama. Hal ini disebabkan urin yang dikeluarkan oleh ginjal akan ditampung sementara di kandung kemih kemudian setelah penuh baru dkeluarkan. Dengan demikian apabila ingin diperiksa glukosa urin puasa, maka setelah pasien puasa semalam , pasien pada pagi hari harus mengosongkan kandung kemih dan membuang urinnya dahulu, kemudian kencing yang berikutnya baru diperiksa. Dengan keterbatasan tersebut pemeriksaan glukosa dalam urin masih bermanfaat sebagai penyaring, bila hasilnya positif kemungkinan besar DM yang kada glukosanya tinggi melebihi nilai ambang ginjal dan sebagai pemantau pengendalian DM. Metode pemeriksaan glukosa urin yang berdasarkan reaksi reduksi banyak macamnya, tetapi metode benedict dengan menggunakan reagen kuprisulfat yang sampai saat ini masih banyak dipakai di laboratorium sederhana untuk memeriksa glukosa urin. CuSO4 + zat (red)  Cu2O + zat (oks) Hasil pemeriksaan bersifat kualitatif sehingga hanya digunakan untuk pemeriksaan penyaring saja. Yang hanya bisa dinilai hanyalah dari segi warna dan adanya endapan glukosa atau tidak. Dari hasil pengamatan yang didapatkan terjadi perubahan warna benedict yang dicampur 2 tetes urin menjadi warna biru bening dan terdapat sedikit endapan. Hasil ini bila Laporan hasil praktikum biokimia

Page 4

dinilai memiliki nilai ( + ). Jadi pada sample urin terdapat glukosa. Sensitivitas tes benedict urin ini sangat rendah dan hanya dapat mendeteksi gula > 250 mg/dL , sehingga kandungan glukosa pada sample urin lebih dari > 250 mg/dL.

PEMERIKSAAN GLUKOSA DARAH


Page 5

1. Enzimatik (DIPSTICK)

Merek : Gluko DR Tes glukosa darah dilakukan untuk mengukur jumlah glukosa dalam darah pada saat mengambil sampel. Glukosa darah terutama diukur pada dasar puasa, sampel dikumpulkan 8 jam setelah asupan makanan. Tes ini digunakan untuk mendeteksi kejadian diabetes dalam individu. Hal ini juga digunakan untuk memantau tingkat glukosa dalam diabetes pasien untuk kontrol yang efektif dan pengelolaan kesehatan umum mereka. Tes darah adalah alat yang digunakan untuk mengevaluasi status kesehatan individu. Hal ini diperlukan untuk memahami bahwa hasilnya mungkin berada di luar 'normal' seperti yang telah ditetapkan karena berbagai alasan. Variasi dapat disebabkan oleh faktor-faktor seperti ras, usia, jenis kelamin, siklus menstruasi, aktivitas fisik, diet, obat-obatan, minuman beralkohol, dan merokok. Rentang normal untuk tes tertentu tiba di didasarkan pada hasil tes selama 95 persen dari individu yang sehat. Itu berarti ada 5 persen orang yang sehat hasil tes yang berada di luar kisaran normal ditentukan sementara tidak ada yang salah dengan mereka. Dalam tes gula darah puasa, jumlah gula atau glukosa dalam darah setelah seseorang telah berpuasa selama delapan jam atau semalam yang diukur. Sebuah kisaran normal adalah 60-100 miligram glukosa per desiliter darah. A level of 100-125 mg/dL mengindikasikan kelainan dalam glukosa puasa. Kondisi ini dikenal sebagai pradiabetes. Tes ini mungkin harus diulangi setelah jeda seminggu untuk untuk konfirmasi. A level of 126 mg/dL atau lebih tinggi menunjukkan kemungkinan tipe 1 atau diabetes tipe 2. Sekali lagi, tes ini mungkin harus diulangi setelah satu minggu untuk konfirmasi. Sedangkan untuk pasien yang tidak puasa, jika hasilnya lebih dari 200 mg/dl maka dikatakan DM. Alat dan bahan •

Kapas alkohol

•

Alat uji yaitu dipstick

•

Darah pasien

Cara pemeriksaan Laporan hasil praktikum biokimia

Page 6

1. Nyalakan alatnya, lalu kemudian aktifkan dan atur 2. Masukkan strepnya pada tempatnya dengan ujung yang ada lubangnya disebelah luar 3. Ambil kapas alkohol untuk mensterilkan daerah yang akan diambil darahnya 4. Tusuk dengan jarum di bagian ujung jari manis yang sudah disterilkan 5. Jika darahnya sudah keluar 6. Teteskan darahnya ke dalam lubang yang ada pada strep yang sudah disediakan tadi 7. Baru kita start alatnya dan tunggu sampai nilainya berhenti bergerak, maka itulah kadar gula darah pasien saat itu. Data Dari hasil praktikum kemarin dengan probandus Dwi Putri Miftahulhuda didapatkan data bahwa pasien tersebut dalam keadaan puasa. Dimana pasien tersebut terakhir makan yaitu pada sekitar pukul 20. 00 sedangkan pemeriksaan dilakukan pada pukul 15.00 wita sehingga rentang waktunya sekitar 18 jam maka bisa dikatakan pasien sedang puasa. Kisaran waktu untuk pasien yang bisa dikatakan puasa yaitu tidak makan selama 8 jam. Dari pemeriksaan tersebut untuk pasien ini kadar glukosa darah pada saat itu adalah 90 mg/dl. Maka kadar glukosa darah Dwi Putri Miftahulhuda masih dalam batas normal. Tetapi untuk lebih memastikan lagi perlu pemeriksaan ulang kembali.

2. Metode O-Toluidin Alat : •

3 tabung sentrifuge

•

2 rak tabung

•

Pipet tetes

•

Pemanas air

•

Spektrofotometer

Bahan : Laporan hasil praktikum biokimia

Page 7

•

Serum

•

Standar glukosa

•

Aquadest

•

TCA 10%

•

Larutan O-Toluidin

Prosedur Kerja : 1. Siapkan 3 tabung sentrifuge dan beri label A, B dan C a. Tabung A : masukkan 0,2 mL plasma/serum b. Tabung B : masukkan 0,2 mL glukosa standar c. Tabung C : masukkan 0,2 mL aquadest

2. Pada tabung A, B dan C, tambahkan 1 mL TCA 10 % 3. Sentrifuge tabung A, B dan C selama 5 menit. 4. Setelah disentrifuge, ambillah 1 mL cairan dalam tabung A, B dan C dengan pipet tetes,

namun tanpa endapan. Lalu masukkan ke dalam tabung lain yang diberi label a, b, dan c. a. Tabung a : 1 mL cairan tabung A, tanpa endapan. b. Tabung b : 1 mL cairan tabung B, tanpa endapan. c. Tabung c : 1 mL cairan tabung C, tanpa endapan.

5. Pada tabung a, b dan c, tambahkan 3 mL larutan O-Toluidin, lalu panaskan 8 menit dalam pemanas air. Setelah 8 menit, dinginkan tabung-tabung tersebut selama 20 menit. 6. Setelah dingin, bacalah hasilnya dengan spektrofotometer ( λ = 625 nm )

Hasil Praktikum

Tabung a : 0,394 A Tabung b : 0,384 A Tabung c : 0 A Kadar Glukosa Darah (mg/100 mL) = (A sampel – A blanko) x 0,2 x 100 (A standar – A blanko) 0,2 = (0,394 – 0) x 0,2 x 100 (0,384 – 0) 0,2


Page 8

= 102,6 mg/dL Kadar normal : 60-100 mg/dL


Page 9

Praktikum Biokimia

Recommend Documents