Centro de Bachillerato Tecnológico, industrial y de servicios No. 168 Francisco I. Madero
Valoración del metabolismo
Practica No. 1
Determinación de glucosa basal Sección: 3
Mesa: 1
Integrantes: Cesar Aarón Adame López Guadalupe Sánchez López Alejandra Alejandra Tovar Díaz
Profesor: Benjamín Hernández Mejía 11 de Febrero del 2014
Introducción La glucosa es un carbohidrato, y es el azúcar simple más importante en el cuerpo humano. Se obtiene fundamentalmente a través de la alimentación, y se almacena en el hígado, el cual tiene un papel primordial en el mantenimiento de los niveles de glucosa en sangre (glucemia). Para que esos niveles se mantengan y el almacenamiento en el hígado sea adecuado, se precisa la ayuda de la insulina, sustancia producida por el páncreas. Esta hormona hace que la glucosa de la sangre entre en los tejidos y sea utilizada en forma de glucógeno, aminoácidos, y ácidos grasos. Cuando la insulina es insuficiente, la glucosa se acumula en sangre, y si esta situación se mantiene, da lugar a una serie de complicaciones en distintos órganos. Cuando la glucosa en sangre está muy baja, en condiciones normales por el ayuno, se secreta otra hormona llamada glucagón que hace lo contrario y mantiene los niveles de glucosa en sangre. El tejido más sensible a los cambios de la glucemia es el cerebro, en concentraciones muy bajas o muy altas aparecen síntomas de confusión mental e inconsciencia. El mantenimiento de la glucemia, o concentración plasmática de glucosa, en los organismos superiores es fundamental para el funcionamiento de todos los órganos, al ser la glucosa un metabolito energético principal. La coordinación de los procesos metabólicos se lleva a cabo por la relación insulina/glucagón. La ingestión de glucosa o sustancias que la produzcan (almidón, fructosa, galactosa, proteínas, pero no grasas) va seguida, en las personas sanas, por un aumento de la glucosa en sangre. Este aumento origina el mecanismo regulador: aumento de la utilización de glucosa (por glucólisis, entre otras), aceleración de la glucogenogénesis y disminución de la glucogenólisis. ; todo ello ocurre mediante la secreción de insulina, una hormona pancreática de tipo polipeptídico. En el caso de que la producción de insulina esté disminuida, la glucosa no puede ser utilizada por las células, lo cual ocasiona niveles elevados de glucosa en sangre (hiperglucemia); así ocurre en las personas que sufren diabetes del tipo denominado "dependiente de insulina" o "tipo 1"
Fundamento La glucosa presente en la muestra origina, según las reacciones acopladas descritas a continuación, un complejo coloreado que se cuantifica por espectrofotometría.
glucosa oxidasa Glucosa + ½ O2 + H2O
Glucónico + H2O2
peroxidasa 2 H2O2 + 4 – Aminoantipirina + Fenol
Quinonaimina + 4 H2O
Posteriormente a un ayuno de varias horas y en condiciones de reposo la concentración de glucosa en sangre es de 65 a 100 mg por 100 ml. Después de la ingesta de alimentos, los niveles suben hasta de 120 a 140 mg por 100 ml y, unas horas después, regresan a los valores en ayunas. Este es un ejemplo de ajuste fisiológico constante para conservar la concentración de glucosa en los líquidos sin grandes cambios. De una misma manera, las modificaciones producidas por las emociones violentas, el ejercicio intenso y la aún inanición, son equilibradas para así volver a el nivel normal. EL hecho de que la glucosa sanguínea se mantenga dentro del estrecho límite, es porque los fenómenos biológicos que concurren a proporcionar glucosa a la sangre se mantienen equilibrados con los mecanismos que la sustraen de ella. Existen distintos órganos encargados de mantener los niveles de glucosa sanguínea, los cuales son:
* Hígado * Páncreas * Glándula hipófisis o pituitaria * Adrenocorticotropina * Hormona del crecimiento (en su lóbulo anterior) * Hormona tirotropina (estimula la tiroides) * Hipotálamo, con sus respectivas hormonas * Medula suprarrenal. * Adrenalina (epinefrina) * Noradrenalina (norepinefrina) * Corteza suprarrenal * Glucocorticoides (en capa intermedia):
* Cortisol * Corticosterona +Cortisona * * hormona tiroides
Glándula
tiroides
Objetivo Realizar la técnica de “Determinación de glucosa basal” para ver los niveles de glucosa en la sangre, conocer valores de referencia, leer resultados.
Técnica Material y equipo
Baño de agua a 37ºC Analizador, espectrofotómetro o fotómetro para lecturas a 500 ± 20 nm Suero o plasma recogidos mediante procedimientos estándar. El suero o plasma deben separarse de los elementos celulares lo antes posible para evitar la glucolisis. La adición de fluoruro sódico a la muestra de sangre previene l a glucolisis.
Procedimiento l. Atemperar el Reactivo a temperatura ambiente. ll. Pipetear en tubos de ensayo:
Blanco Patrón Patrón (S)
__
Muestra
__
Muestra __
10 μL
__
10 μL
Reactivo 1,0 (A) mL
1,0 mL
1,0 mL
lll. Agitar bien e incubar los tubos durante 10 minutos a temperatura ambiente (16- 25ºC) o durante 5 minutos a 37ºC.
lV. Leer la absorbancia (A) del Patrón y de la Muestra a 500 nm frente al Blanco. El color es estable durante al menos 2 horas.
Valores Normales Neonato, prematuro Neonato, a término 30-90 mg/dL = 1,67-5,00 mmol/L Niños, adultos
25-80 mg/dL = 1,39-4,44 mmol/L 30-90 mg/dL = 1,67-5,00 mmol/L Niños, adultos 70-105 mg/dL = 3,89-5,83 mmol/L
Cálculos La concentración de glucosa en la muestra se calcula a partir de la siguiente fórmula general: A Muestra A Patrón
x C Patrón = C Muestra
Si se utiliza para calibrar el Patrón de Glucosa suministrado (Nota 2):
Resultados
A Muestra
x 100 = mg/dL glucosa
A Patrón
x 5,55 = mmol/L glucosa
Conclusión
Bibliografia Trinder P. Determination of glucose in blood using glucose oxidase with an alternativeoxygen acceptor. Ann Clin Biochem 1969; 6: 24-27 National Diabetes Data Group: Classification and diagnosis of diabetes mellitus and othercategories of glucose intolerance. Diabetes 1979; 28:1039-1057 http://www.buenastareas.com/ensayos/Regulacion-De-Glucosa/109299.html http://hyperphysics.phy-astr.gsu.edu/hbasees/organic/sugar.html http://issuu.com/macagamo/docs/manual_de_practicas_de_bioqu_mica_cl_nica_i
