PRÁCTICA EXTRACCIÓN DE DNA EN PLANTAS

PRÁCTICA EXTRACCIÓN DE DNA EN PLANTAS.

1. REPORTE DE RESULTADOS: 1.1.DIA DE LA PRÁCTICA:05de JUNIO del 2013 1.2. HORA: 11 a.m. 1.3.PRÁCTICA REALIZADA: Extracción de DNA en plantas. 1.4.MUESTRA: Cuatro tipos de plantas diferentes: Se coleccionaron muestras de hojas de plantas del orden Hierba buena. Berros. Habas,   

1.5.FUENTE DE LA MUESTRA: Se obtuvieron dos fuentes de las muestras: Pomachaca-Tarma. 1.6.TIPO DE MUESTREO: El muestreo empleado en este caso fue al azar ya que se recolectaron aleatoriamente de su mismo lugar de crecimiento.

2. RESULTADOS: 2.1.Resultados de la limpieza de laboratorio: Como sabemos es necesario el trabajo en un medio aséptico si se va a trabajar con microorganismos, para esta práctica se evitó cualquier tipo de contaminación, lo cual se pudo cumplir estrictamente.

2.2.Resultados del procedimiento: En el procedimiento se obtuvo un buen resultado ya que los reactivos utilizados se  pesaron de la forma indicada, además se tuvo cuidado con el CTAB, y otros reactivos utilizados. Todos los reactivos utilizados implican romper las membranas de muchas células con lo que liberamos su contenido (orgánulos, núcleos, proteínas, ADN, ARN)

Como sabemos el ADN se encuentra dentro de la célula vegetal y para llegar a el debemos romper la pared celular, la membrana plasmática que posee un bicapa lipídica y además romper la membrana nuclear, el detergente pasa fácilmente por la  pared celular ya que esta no cumple la función de dejar o no pasar sustancias al medio celular, la que sí lo hace es la membrana plasmática, aquí es donde el detergente emulsiona y rompe los lípidos de su capa, entrando al medio intracelular, llegando al núcleo y volver a repetir la misma función. 2.3.Resultado de la extracción del ADN en vegetales. Al realizar el procedimiento adecuadamente, resulto que las fibrillas de ADN comenzaron a salir, de un color blanco precipitado por sobre el alcohol (mezcla Heterogénea). Además pudimos visualizar el ADN. En la figura continuación se muestra las muestras de las cuatro plantas esa extraer el ADN, después de la centrifugación y antes de extraer el alcohol.

Esta fotografía muestra la extracción del ADN de los berros, a diferencia del ADN de la levadura este ADN es menos visible.

ADN

Para obtener el resultado final nos falta realizar el análisis en la cámara electroforética: La capacidad que tiene el ADN de absorber luz a una determinada longitud de onda (260nm) permite el cálculo de la concentración de ácido nucleico en la muestra. Sí la densidad óptica (OD) es 1, corresponde a aproximadamente 50 μg/mL de cadena doble de ADN, entonces calculamos la concentración de ADN que tenemos en nuestras muestras, midiendo simplemente su absorbancia, sin necesidad de realizar una curva patrón.