UNIVERSIDAD AUTÓNOMA CHAPINGO “Enseñar la explotación de la tierra, no la del hombre”
DEPARTAMENTO DE PARASITOLOGIA AGRICOLA
NEMATOLOGÍA AGRÍCOLA Practica # 7 EXTRACCIÓN DE NEMATODOS EN TEJIDO VEGETAL
“
”
Fecha de practica: 04-SEP-2015
MC. JUVENTINO CUEVAS OJEDA PresentaN:
SANTOS CONSEPCIÓN ESTELA MARTHA ZAMORA PATIÑO HORTENSIA
CHAPINGO, MÉX., A 11 DE SEPTIEMBRE DE 2015.
INTRODUCCIÓN El nematodo al alimentarse del tejido vegetal produce daños mecánicos que en contados casos son de importancia. Sin embargo la secreción de sustancias inyectadas al vegetal contenidas en la saliva, son la principal causa de daño debido a las reacciones que desencadenan en la célula. Esta secreción de enzimas produce en algunos casos una lesión necrótica al matar el tejido que lo rodea, esta mancha es pequeña, en otras ocaciones puede detener el crecimiento al evitar la división celular. La reacción de los tejidos vecinos al lugar de donde se alimenta puede producir, en algunos casos un alargamiento excesivo de células (hipertrofia), en otros casos una proliferación de células (hiperplasia), produciendo síntomas tales como agallas, nódulos, vesículas, deformaciones, retorcimientos, excesiva ramificación de raíces, desarrollo anormal de verticilos florales. Para el estudio de estos nemátodos es necesario hacer la extracción utilizando la técnica que más se adecue a las condiciones. Para la extracción de nematodos fitoparasíticos de tejido vegetal, hay que considerar que se refiere a nematodos endoparasíticos específicamente. Algunos de los métodos descritos para la extracción de nematodos del suelo, son usados también para tejido vegetal con algunas modificaciones. La maceración de tejidos con ayuda de una licuadora es otra técnica adecuada para la obtención de nematodos endoparásitos. Se pesa el tejido vegetal y se cortan en trozos de 2 a 3 cm de longitud colocándolos dentro de una licuadora. Se agrega cierta cantidad de agua y dependiendo de la dureza del material, se hace la maceración. La suspensión resultante se vierte sobre un juego de tamices. Los nematodos junto con los desechos vegetales retenidos en el tamíz más fino son transladados al embudo de Baerman, en donde se logra la separación final. Una vez macerado el tejido en la licuadora, otra opción es extraer los nematodos con la técnica de centrifugación en solución azucarada, similar a las técnicas para las muestras de suelo. Ya que se pueden hacer como métodos complementarios a esté.
JUSTIFICACIÓN La importancia de conocer las diferentes técnicas de extracción de nematodos proviene por el hecho de que se debe saber cuál usar dependiendo de l objetivo que se pretenda y en el momento que se quiera realizar, puesto que la técnica que se usa para extraer nematodos del suelo es diferente a la técnica para extracción de nematodos en tejido vegetal, además de combinarlo con otra técnica para que los resultados se obtengan en un tiempo más corto.
OBJETIVOS
Conocer la técnica de extracción de nematodos por maceración de tejido vegetal.
Extraer nematodos en tejido vegetal por la técnica de maceración combinándolo con el tamizado.
Colectar los nematodos en el tamiz de 60 y en el de 325, esperando encontrar hembras en la primera colecta y nematodos filiformes en el segundo tamiz.
MATERIALES Y METODOLOGÍA Materiales Ajo Cebolla Zanahoría Papa Licuadora Tamices de 16, 60, 100, 200, 325. Agua
Metodología
Se nos proporcionó el material adecuado para la extracción de nematodos en tejido vegetal.
Fig 2.- Báscula para el pesado del material vegetal.
Fig 1.- Material para la técnica de maceración de tejido vegetal.
Fig 3.Material vegetal para extracción de nematodos.
Cortamos todo el material vegetal en pedacitos.
Fig 4.- Picado de papas. Fig 5.- Picado de cebolla.
Fig 6.- Picado de zanahoria.
Fig Picado ajo.
7.de
Pesamos cada uno de los materiales vegetales obteniendo su peso en gramos. Fig 8.- Pesamos cada uno de los materiales vegetales. (Cebolla, papa, zanahoria y ajo.)
Material
Peso
vegetal
gramos
Cebolla
88
Papa
128
Zanahoria
163
Ajo
36
en
Se maceró cada material vegetal en un tiempo de 3-5 segundos, después vaciamos el macerado en una bandeja. Seguidamente vertimos el macerado de la bandeja a los tamices de 16, 60, 100, 200 y 325. El tamiz de 16 sólo sirvió para retener todos los restos vegetales, y la que colecta mos primero es la del tamiz de 60, ya que se pretendió encontrar hembras de algún género de nematodos, luego colectamos la muestra en el tamiz de 325 con el fin de observar nematodos filiformes.
Fig 10.- Vertimos el macerado en una bandeja.
Fig 9.- Maceración de la cebolla.
Fig 11.- Vertimos el macerado en los tamices de 16, 60, 100, 200 y 325.
Fig 12.- Recogimos la primera muestra del tamiz de 60.
Fig 14.-Muestras del tamiz de 60 y 325 en cajas petri.
Fig 13.- Colectamos la segunda muestra del tamiz de 325.
Fig 15.- Maceración de la papa.
Fig 16.- Vertimos el macerado de papa en una bandeja.
Fig 18.- -Colectamos la muestra de papa del tamiz de 325.
Fig 17.- Colecta de la muestra de papa del tamiz de 60.
Fig 19.- Colecta de muestras del tamiz de 60 y 325.
Fig 20.- Después del macerado de zanahoria vertimos éste en los tamices.
Fig 21.- Colectamos muestra de zanahoria del tamiz de 60.
Fig 23.- Colecta de muestras de zanahoria de los tamices de 60 y 325.
Fig 22.- Colectamos la segunda muestra de zanahoria del tamiz de 325.
Fig 24.- Después de macerar el ajo vertimos la muestra en los tamices.
Fig 25.- Colecta de muestra de ajo del tamiz de 60.
Fig 26.- Colecta de muestra de ajo del tamiz de 325.
Fig 27.- Muestras de ajo de los tamices de 60 y 325.
Luego de obtener las muestras del tamiz de 60 y del tamiz de 325, proseguimos a observarlas.
RESULTADOS
Fig 28.- Muestras de los tamices de 60 y 325 de los 4 vegetales.
Cebolla
Fig 29.- Hembra de Meloidogyne observada en el tamiz de 60.
Fig 30. -Muestra de cebolla del tamiz de 325 sin observar algún nematodo filiforme.
Papa
Fig 31.- Muestra de papa del tamiz de 60 sin observar algún nematodo.
Fig 32.- Muestra de papa del tamiz de 325 sin observar algún nematodo.
Zanahoria
Fig 33.- Muestra de zanahoria del tamiz de 60 sin observar algún nematodo.
Fig 34.- Muestra de zanahoria del tamiz de 325 con dos nematodos filiformes.
Ajo
Fig 35.- Muestra de ajo del tamiz de 60 sin nematodos.
Fig 35.- Muestra de ajo del tamiz de 325 sin nematodos.
DISCUSIÓN En esta práctica de maceración de tejido vegetal para extracción de nematodos pudimos darnos cuenta cuál es la diferencia entre macerar y licuar, y esto es el tiempo, ya que si no cuidamos éste podríamos obtener un resultado nulo de nematodos porque al licuarlo tendemos a romper los organismos. También comprendimos la importancia de diagnosticar los tejidos vegetales, esto para darnos cuenta que no solo en el suelo existen nematodos sino también dentro de frutos, tubérculos, etc, lo que nos conlleva a conocer bien las técnicas de extracción de nematodos según sean los objetivos que pretendemos.
CONCLUSIÓN Con el proceso de la práctica pudimos conocer la técnica de maceración y el principio que sigue, además de complementarlo con el tamizado y así obtuvimos las muestras del tamiz de 60 y 325, lo que nos dio como resultado la observación de una hembra de Meloidogyne en cebolla en la muestra del tamiz de 60, lo que anteriormente no se había observado en este vegetal y dos nematodos filiformes en zanahoria en la muestra del tamiz de 325. Esto y más contraen la importancia de estudiar los tejidos vegetales para conocer que organismos pudieran estar perjudicando su calidad y rendimiento.
BIBLIOGRAFÍA MEMORIA CURSO SOBRE MANEJO INTEGRADO D EPLAGAS DEL CAFETO CON ÉNFASIS EN BROCA DEL FRUTO. 1985. INSTITUTO INTERAMERICANO DE COOPERACION PARA LA AGRICULTURA, OFICINA EN GUATEMALA. Pág. 88. http://plpnemweb.ucdavis.edu/nemaplex/Courseinfo/Curso%20en%20Espanol/LAB%201%20%20 Extracci%C3%B3n%202013.pdf
