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Práctica 4: Formulación de Inoculantes Biológicos María Alejandra Dugarte Bohórquez 1610753, Leidy Ximena Camargo Uribe 1610740, José Edelberto Díaz Marín 1610705 y Claudia Marcela Alsina 1610765. Abstracto — Este laboratorio se elaboró con el fin de aprender a desarrollan productos de origen biológico, en la cual habrá un combinación de ingredientes que de tal manera sea efectivo, estable y fácil de aplicar. Ín di ce de de té té r m i n os — Control microorganismos, microorganismos, efectividad.
Biológico,
Abstract - This laboratory was developed in order to learn how to develop bio-based products, which will be a combination of ingredients that are so effective, stable and easy to apply. Index terms- Biological Control, microorganisms effectively.
También encontramos regenadores del suelo, Concentrado de diversas cepas de rizobacterias promotoras del crecimiento de la planta (RPCP). Regeneran la flora microbiana del suelo, evitando el crecimiento de organismos perjudiciales, en especial nematodos fitopatógenos ( Meloidogyne Meloidogyne spp., Pratylenchus spp., Helicotylenchus spp., Tylenchulus spp., etc.), ejerciendo así su control biológico. Inducen, a nivel radicular, los mecanismos naturales de defensa de la planta. Aumentan el contenido en materia orgánica del suelo, elevando su fertilidad. Neutralizan sales minerales y favorecen la regulación del complejo arcillo-húmico. Estimulan el crecimiento y activan el metabolismo de la planta. Incrementan el contenido de azúcares en el fruto, mejoran sus propiedades organolépticas y producen un aumento considerable de las cosechas.
I. I NTRODUCCIÓN NTRODUCCIÓN
¿
Que es un inoculante? Un inoculante es un concentrado de bacterias específicas, que aplicado convenientemente a la semilla poco antes de su sembrado, mejora el desarrollo del cultivo. Su empleo es una práctica agronómica reconocida en el mundo por sus beneficios productivos y económicos (principalmente en gramíneas y leguminosas), a tal punto que desde hace algunas décadas se lleva a cabo en países de los cinco continentes (México, Holanda, Brasil, Japón, Bulgaria, Colombia, Australia, Canadá, Estados Unidos, República Checa, Argentina, etc.) [1] Los inoculantes biológicos son formulados a base de microorganismos promotores del crecimiento vegetal. Su utilización proporciona considerables mejoras en el suelo y en la planta. [2] Aumentan la fertilidad y biodiversidad del suelo. Proporcionan nutrientes a la planta. Favorecen el desarrollo del sistema radicular, lo protegen frente a condiciones bióticas y abióticas desfavorable y crean una barrera física y biológica frente a otros organismos no deseables.
Actúan como elicitors, induciendo los sistemas naturales de defensa de la planta. Producen un efecto vigorizante sobre el vegetal. Pueden aplicarse en todo tipo de cultivo: frutales, cítricos, platanera, viña, tropicales, hortícolas, ornamentales, césped, aromáticas, etc.
II. OBJETIVOS
Reconocer los materiales utilizados en las diferentes clases de formulación de inoculantes biológicos y su función dentro del producto formulado. Desarrollar diferentes metodologías de formulación para inoculantes biológicos.
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III. MATERIALES Colador mediano Bandejas de aluminio Talco esteril. 100g Lactosa esteril, 2,5g Harina de trigo 1,2g Aceite vegetal 100ml Tween 80 esteril, 10ml Carboxinetilcelulosa 2g Frascos de agua esteril Papel alumino, 2 Beaker de 250ml 1 plancha de calentamiento 1 Agitador magnético 1 varilla de vidrio Entomopatogenos
o
Enfriar
20 ml H2O
B. Hongos
Bacillus thuringiensis
1) Gránulos dispersables
Antagonistas
o o
Trichoderma sp Candida utilis
IV.
METODOLOGIA
A. Bacterias 1) Polvo mojable 20 ml H2O
Mezclar
50g de talco esteril
15ml sln bacteriana
Mezclar
Dejar secar 24 hras 40 °C
Tamizar
Prueba de humectabi lidad
Calentar, liquido espeso
2g de Almidon
2) Emulsión
50g de talco esteril
100 ml de aceite vegetal
10 ml de Tween 80
Calentar
15ml Trichoderma sp.
25gr Lac
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Secar y realizar prueba de humectabilidad
Mezclar
2) Gel
El tiempo que duró en hacerse las dos fases duró: 27 min B. Hongos 1) Gránulos Dispersables 100 ml H2O
Carboxinetilc elulosa 2g
15ml de levadura, mezclar
Prueba de textura al tacto
V. RESULTADOS A. Bacterias
2) Gel
1) Polvo mojable
Textura: suave VI.
2) Emulsión
DISCUSIONES
Los inoculantes biológicos son productos a base de microorganismos: hongos y/o bacterias, talco estéril, harina de trigo, agua estéril,etc que aplicados a la siembra de la semilla, facilitan el crecimiento vegetal y aumentan o mantienen su rendimiento, para evitar así la utilización de fertilizantes químicos; la acción ejercida por los inoculantes
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microbianos es gracias a la función que realiza el principio activo (microorganismo y sus toxinas), el diluyente o vehículo y los adyuvantes sirven como dispersantes o adherentes según el tipo de inoculante biológico que se prepare; en la práctica desarrollada en el laboratorio se realizaron las formulaciones de cuatro tipos de inoculantes biológicos como fueron el polvo mojable, gránulos dispersables, la emulsión y el gel, en los cuales pudimos observar cuál de estos el principio activo se mantenía más estable y sencillo de manejar para su rápida aplicación y obtención de resultados. El polvo mojable es un tipo de inoculante biológico el cual se aplica como suspensión después de ser dispersado en agua, sirve como activador del crecimiento radicular de las plantas, y también sirve para que la planta desarrolle cierta resistencia al ataque de patógenos debido a los microorganismos utilizados para la elaboración de dicho producto, en el caso del polvo mojable realizado en la práctica de laboratorio el microorganismo utilizado fue Bacillus thuringiensis el cual es un bacilo flagelado, esporulado y gram positivo que produce, durante la esporulación, un cristal de proteína tóxico para los insectos, conocido como delta endotoxina. Los gránulos dispersables son un tipo de inoculante biológico que se aplican en forma de suspensión luego de su desintegración y dispersión en el agua; actúan como protector de hongos y bacterias patógenas para la planta, gracias a la acción del principio activo en este caso Trichoderma sp el cual fue utilizado en la elaboración de los granulos dispersables realizados durante la práctica de laboratorio; Trichoderma sp debido a que establece una simbiosis entre las raíces de la planta El hongo se alimenta y vive del exudado que producen las raíces, el hongo al colonizar las raíces les confiere una protección ya que el Trichoderma es un hongo antagonista pro lo cual cualquier hongo patógeno que intente atacar la planta es destruido al ser consumido y usado como alimento; también protege la planta al actuar como exclusor ya que ocupa todos los espacios cercanos a
la planta creando una barrera en las raíces de la planta no permitiendo así el paso de ningún organismo patógeno. La emulsión es un inoculante biológico el cual es formado a partir de una base oleosa (aceite vegetal estéril y Tween 80 estéril) y el ingrediente activo en este caso para la emulsión preparada en el laboratorio fue Candida utilis con agua, para formar la emulsión la cual se caracteriza por poseer una consistencia espesa; el principio activo Candida utilis sirve como sintetizador de sustancias antimicrobiales y útiles para el crecimiento de la planta a partir de los aminoácidos y azúcares secretados por bacterias fototróficas. El gel es un inoculante biológico formado por agua estéril y carboximetil celulosa el cual actúa como un espesante y el principio activo Candida utilis; el gel es una formulación gelatinizada para ser aplicada como una emulsión en agua; principalmente el principio activo Candida utilis actúa en la síntesis de sustancias útiles para la planta debido a su capacidad de síntesis a partir de aminoácidos y azúcares secretados por otros microorganismos. VII. CONCLUSIONES En la formulación del inoculante biológico polvo mojable podemos afirmar que es un producto de bajo costo ya que sus ingredientes son talco estéril (Vehículo/ diluente) y Bacillus thuringiensis (ingrediente activo), los cuales poseen unos módicos precios y son de fácil acceso; el polvo mojable es un inoculante biológico de fácil aplicación ya que puede ser dispersado como suspensión al ser disuelto el polvo en agua ,actúa como controlador biológico de insectos, posee un índice de baja toxicidad, en la prueba de humectabilidad realizada al polvo se observó que el tiempo que tarda en disolverse el polvo en el agua es aproximadamente 1 minuto, para formar así una suspensión. En la formulación del inoculante biológico gránulos dispersables se puede reconocer que posee una preparación más compleja en comparación con el polvo mojable y una aplicación muy similar a la
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del polvo ya que al final se disuelven lo gránulos en una cantidad determinada de agua hasta homogenizar; los ingredientes utilizados para la preparación de este inoculante son principalmente agua estéril, harina de trigo, talco estéril, lactosa estéril y el ingrediente activo (Trichoderma sp) los cuales son de fácil acceso y economía ; este inoculante biológico permite a la planta una mejor absorción de nutrientes debido la simbiosis que forma Trichoderma con la planta; en la prueba de humectabilidad realizada a los gránulos se observó que estos tardan aproximadamente 2 minutos para disolverse en agua y formar la suspensión como producto final. En la formulación del inoculante biológico de la emulsión se puede concluir que la para la preparación de dicho producto se utilizan ingredientes como son Tween 80 estéril (tensoactivo/emulsionante), aceite vegetal estéril (vehículo/diluente) y el ingrediente activo Candida utilis (principio activo) ; la mezcla de estos ingredientes con agua forma la emulsión; la cual se observa después de dejar reposar la preparación 15 minutos al cabo de este tiempo se formó dos fases una más pequeña que la otra ; una media 5 cm y la otra 2 cm; después el producto se homogenizo tomando una coloración marrón clara, el producto final la emulsión posee una consistencia gruesa; y el principio activo sirve como sinetetizante de sustancias benéficas para la planta; su aplicación es más compleja que el polvo y los gránulos debido a la consistencia que posee la emulsión. En la formulación de inoculante biológico gel se pudo reconocer que es un producto que requiere pocos ingredientes para su preparación ya que solo se utilizan agua estéril, carboximetil celulosa (espesante/gelificante) y el ingrediente activo Candida utilis; el producto final el gel presentaba una coloración grisácea, una fase homogénea y una consistencia gelatinosa, el lapso de preparación del gel es muy corto ya que no necesita ser llevado al horno para ser secado, y su aplicación no genera presencia de partículas libres. VIII. REFERENCIAS [1]. ¿Qué es un inoculante?, http://www.labza.com.ar/descargas/inoculantes.pdf [2]. Biotecnologia del mediterraneo, inoculante biológico.
http://biotecme.com/home/project/inoculantes biologicos/ [3]. INOCULANTES BIOLOGICOS Disponible en la web: www.infojardin.net/glosario/podado/polvomojable.htm www.monografias.com/trabajos50/inoculantes biologicos/inoculantes-biologicos DE HONGOS.Artículo [4]. FORMULACIÓN disponible en sitio Web: http://www.monografias.com/trabajos17/formulacio n-de-hongos/formulacion-de-hongos.shtml
