Instituto Politécnico acional
#scuela 6acional de Ciencias +iológicas 7ráctica 81$ 9Determinación de colesterol en la yema de 'ue(o :
;amíre) a)aret' >a)aret' Suáre) "ernánde) ;oberto /!=1 S#CC?@6 / #ntrega AA1-
Introducción
Los lípidos se clasifican en tres grupos de los gual guales es los los princ princip ipal ales es son son simp simple less y complejos. Dentro de la clasificación simple se encuentran los esteroides, en el cual se encuentra encuentra el tan mencionado colesterol, colesterol, que es el ester steroi oide de más más abun abunda dant nte e en los los animales. Se clasifica como esteroide debido a su grup grupo o C3! C3!". ". #l cole colest ster erol ol es un comp compon onen ente te prin princi cipa pall de las las memb membra rana nass pla plasmáticas animales les y const nstituye uye típicamente del 3$ al %$ mol& de los lípidos de la membrana plasmática. #n la yema de 'ue(o 'ay una gran (ariedad de lípi lípido doss pres present entes es,, entr entre e los cuale cualess se quiere determinar la cantidad de colesterol de la yema de 'ue(o, para lo cual se utili)ara un m*todo m*todo colori colorim*t m*tric rico o llamad llamado o Lieber Lieberman man +urc'ard en el cual la reacción tiene lugar en un medio fuertemente acido en el cual el colesterol pasa por una etapa de oidación gradual, la cual dará lugar a una color (erde producto producto de coloraciones coloraciones amarillas amarillas y a)ules, a)ules, para despu*s en un espectrofotómetro leer un máimo de absorbancia de -%$ nm. n m. Objetivo
Determinar la concentración de colesterol en la yema de 'ue(o e(o, por el m*todo de Lieberman+urc'ard Resultados
Dura Durant nte e el desa desarr rrol ollo lo de la prác prácti tica ca se obtu(ieron los resultados siguientes
Tubo 1 2 3 4 5 P1 P2
Cest
$.$/ mg $.$% mg $.$- mg $.$0 mg $.1 mg $.$$ $.$$
g
/$ %$ -$ 0$ 1$$ 1$ /%
Discusión
Se reali)ó la determinació determinación n de colesterol colesterol por medio del m*todo m*todo de Lieberman Lieberman+urc' +urc'ard, ard, en donde a una serie de cinco tubos, se le agrego estándar de colesterol el cual consitio en % mg de colesterol disueltos en 2$ ml de cloroformo es importante mencionar que a los los tubo tuboss test estigo igo y pro problem blema a no se le agregaron ml de estándar de colesterol, esto porque el testigo es par para aju ajustar el espectrofotómetro a cero y el problema no tiene colesterol por que el colesterol (endrá del del etr etrac acto to de lípi lípido doss util utili) i)ad ado o 4solo solo agre agrega gado do al tubo tubo prob proble lema ma55 el cual cual se cuantificara despu*s interpolando en la cur(a tipo reali)ada con la absorbencia medida en el espectrofotómetro a -%$ nm por supuesto que que ante antess los los tubos tubos tu(i tu(ier eron on que que 'abe 'aber r
pasado por una agregación en ml de cloroformo y an'ídrido ac*tico para despu*s agregarles ácido sulfBrico todo esto para cumplir con el m*todo de Lieberman +urc'ard el cual consiste en que la reacción se reali)a en general en un medio acido fuertemente constituido por ácido sulfBrico, ácido ac*tico y an'ídrido ac*tico. #n la reacción, el colesterol sufre una oidación gradual formándose en cada capa una mol*cula de colestapolieno que posee un doble enlace adicional con respecto al compuesto del cual deri(a. La etapa inicial de la reacción consiste en la protonación del grupo !" del colesterol, con la siguiente perdida de agua obteni*ndose el ion carbonio 3,2colestadieno que constituye el primer paso de la reacción de color. La oidación secuencia de este ion carbonio alilico por el S!/ produce un ácido colesta'eano sulfBrico cromoforo con máimos de absorbancia, que en la mayoría de la literatura dice -/$ nm, sin embargo en este caso se reali)ó a -%$nm. #ste máimo de absorción se torna de color (erde, que es el intermediario que medimos, si bien no parece ser el producto final de la reacción. La formación del intermediario tiene un bajo rendimiento en el tiempo que se considera óptimo para la medición espectrom*trica del colesterol. #l (alor de la interpolación del tubo problema fue de 71 1$ g 7/ /% g #n la cur(a tipo se tomó la decisión de omitir dos puntos debido a que en las lecturas el espectrofotómetro estaba fallando sin embargo la cur(a se pudo reali)ar con tres puntos.
Conclusión
Se reali)ó la determinación del colesterol con el m*todo de Lieberman+urc'ard, en donde la cur(a tipo se reali)ó con algunos problemas debido a las lecturas, sin embargo al interpolar los tubos problemas se logró determinar la cantidad de g del etracto de lípidos.
!ibliogra"#a
'ttpAAsisbib.unmsm.edu.peAbib(irtualdataAtesi sAsaludAramire)E(EsAcap/.pdf . Fista 1-A$%A/$1'ttpAAes.slides'are.netAingridjo'anasierrameji aApracticacolesterol. Fista 1-A$%A/$1'ttpsAAprofesoramaribelarnes.files.Gordpress. comA/$$HA11Alab2colesteroltec/$1$.pdf . Fista 1-A$%A/$1Donalt Foet, Iudit' J.F, C'arlotte 7. /$11. Kundamentos de +ioquímica.Segunda edición. =edica panamericana. +uenos
Pregunta e$tra
Los 'ue(os son altamente nutriti(os. 7ro(een una gran cantidad de proteínas completas como lipo(itelina, fosfo(itina y lipoproteínas de baja densidad, (itamina <, ribofla(ina, ácido fólico, (itamina +-, (itamina +1/ además de oligoelementos como 'ierro, calcio, fósforo o potasio.