PEMERIKSAAN TOTAL PROTEIN DAN ALBUMIN
DASAR TEORI
Protein tersusun dari asam amino yang berikatan satu sama lain dengan ikatan peptida.
R
NH2
O
C
C
Ikatan peptida
OH
α – as amino
Tiga perempat zat padat dari tubuh adalah protein dengan fungsi yang berbeda beda. beda. Sebagian Sebagian besar adalah protein protein jaringan/st jaringan/structura ructural, l, protein protein kontraktil kontraktil dan nucleoprotein. Protein yang diperiksa dalam laboratorium terdapat dalam : darah, urin, saliva, cairan pleural, peritoneal dan feses. Pada praktikum ini yang dibahas terutama protein plasma. Protein plasma yang beredar terdiri atas : 1.
Albumin
2.
Globulin
3.
Fibrinogen
4.
Terdapat sejumlah kecil dalam : enzim, protein structural
dan metabolic (hormon dan protein transfer). Fungsi Protein Plasma : 1.
Keseimbangan osmotic
Hipoal Hipoalbum bumin in menyeb menyebabk abkan an tekana tekanan n osmoti osmoticc plasma plasma menuru menurun n sehing sehingga ga kapiler kapiler tidak mampu melawan tekanan tekanan hidrostatik hidrostatik sehingga sehingga timbul timbul edem (cairan darah menuju ke jaringan interstitial).
2.
Pembentukan dan nurisi jaringan
Enzym, hormon, pembekuan darah (fibrinogen, AT III) dan jaringan tubuh. 3.
Transportasi
-
Umum yaitu albumin
-
Khusus
Hormon
Prealbumin
Vitamin
Prealbumin
Lipid
Lipoprotein
Co
Ceruloplasmin
Hb
Haptoglobin
Heme
Hemopexin
Fe
Transferin
4.
Daya tahan tubuh
Antibodi dan komplemen Perubahan Protein Plasma
-
Hiperalbumin : peningkatan kadar albumin Dijumpai pada dehidrasi terjadi hemokonsentrasi protein plasma.
-
Hipoalbumin Dijumpai pada malnutrisi, malabsorbsi, hepatitis akut, penyakit hati menahun, dan lain-lain.
Pemeriksaan protein plasma berkisar pada pemeriksaan total protein serum, albumin dan globulin.
METODE :
Metode Biuret
PRINSIP
Dilakukan pemeriksaan kuantitatif dengan spektrofotometri. Reaksi berwarna antar tembaga alkali dengan rantai peptida CO—NH akan menghasilkan warna ungu. BAHAN •
Reagen Biuret
•
Reagen Standar Protein
•
Serum atau Plasma
ALAT •
Tabung reaksi ukuran 5 ml
•
Rak tabung reaksi
•
Pipet berukuran 60 μ l dan 1000 μ l
•
Spektrofotometer
CARA KERJA
1.
Disiapkan 3 buah tabung reaksi seukuran 5 ml, masing-masing
diberi label untuk reagen Blanko (RB), Reagen Standard (STD) dan Sampel (SPL) berupa serum darah. 2.
Tabung RB diberi 3.000 μ l Reagen Biuret.
3.
Tabung STD diberi 60 μ l Reagen Standard Protein dan ditambah
dengan 3.000 μ l Reagen Biuret, dicampur supaya homogen. 4.
Tabung SPL diberi 60 μ l Sampel (serum) dan 3.000 μ l Reagen
Biuret, dicampur supaya homogen. 5.
Selanjutnya masing-masing diinkubasi selama 10 menit pada
temperatur kamar. 6.
Diukur absorbsi (ΔA) dari STD dan SPL terhadap RB dengan
spektrofotometer dengan panjang gelombang 546 nm. 7.
Batas lineritas alat adalah 12 g/dl. Apabila didapatkan di atas
angka tersebut, serum harus diencerkan dengan NaCl 1+1, hasil dikalikan 2.
Pengukuran terhadap Blanko reagen Sample (μ l)
RB --
STD --
SPL 60
Standard (STD) Reagen (μ l)
-3000
60 3000
-3000
Campur, inkubasi 10 mnt (20 – 25 oC) Ukur Abs (ΔA), standar A (STD) dan sample A (SPL) terhadap blanko reagen (RB) dalam 10 menit. PERHITUNGAN Kadar Total Protein (g/dl) =
∆ A
SPL X 8 g / dl ∆ A
STD
LINIERITAS
Batas linearitas alat adalah 12 g/dl. Apabila didapatkan nilai di atas angka tersebut, serum harus diencerkan dengan NaCl 1 + 1, hasil dikalikan 2.
NILAI NORMAL
Bayi
4,6 – 7,0 g/dl
3 tahun s.d. dewasa 6,6 – 8,7 g/dl
PERTANYAAN :
1.
Jelaskan mengapa pada penyakit sindroma nefrotik terjadi
hipoalbumin! 2. hipoalbumin!
Jelaskan mengapa pada penyakit sirosis hepatis terjadi
