dr. Agustyas Tjiptaningrum, SpPK
TUJUAN PEMERIKSAAN LABORATORIUM
Pemeriksaan laboratorium pada infeksi bertujuan: 1. Menegakkan diagnosis penyakit 2. Dasar pengobatan penyakit 3. Pemantauan perjalanan penyakit 4. Pemantauan terapi 5. Penentuan prognosis
DEMAM DENGUE DEFINISI DEMAM DENGUE DAN DBD Merupakan penyakit infeksi yang disebabkan oleh virus dengue dengan manifestasi klinik demam, nyeri otot, atau nyeri sendi disertai leukopenia, ruam, limfadenopati, trombositopeni, dan diatesis hemoragik Pada DBD terjadi perembesan plasma yang ditandai hemokonsentrasi (peningkatan hematokrit) atau penumpukan cairan di rongga tubuh Sindroma renjatan dengue (Dengue Shock Syndrome) adalah demam berdarah yang ditandai renjatan atau syok
Suhendro, Nainggolan L, Chen K, Pohan HT. Demam berdarah dengue. In: Sudoyo AW, Setiyohadi B, Alwi I, K MS, Setiati S, editors. Buku ajar ilmu penyakit dalam. IV ed. Jakarta: Pusat Penerbitan Departemen Ilmu Penyakit Dalam; 2006. p. 1731-5.
INFEKSI DENGUE EPIDEMIOLOGI
PEMERIKSAAN LABORATORIUM INFEKSI DENGUE EPIDEMIOLOGI
PEMERIKSAAN LABORATORIUM INFEKSI DENGUE EPIDEMIOLOGI Asia Tenggara sejak th 2000 dengue epidemik menyebar ke beberapa daerah baru dan mengalami peningkatan angka kejadian Negara dimana terdapat kasus dengue adalah Indonesia, Bangladesh, India, Maldives, Myanmar, Sri lanka, Thailand, dan Timor Leste, Bhutan (2004), dan Nepal (2006)
KLASIFIKASI DENGUE KLASIFIKASI INFEKSI DENGUE MENURUT WHO 1997
KRITERIA DIAGNOSIS DEMAM DENGUE MENURUT WHO 1997
KLASIFIKASI DENGUE KLASIFIKASI DENGUE FEVER MENURUT WHO 2009 (REVISI)
WHO. Dengue: Guidelines for Diagnosis, Treatment, Prevention and Control: World Health Organization; 2009.
PERJALANAN PENYAKIT DENGUE MENURUT WHO 2009 (REVISI)
Dibagi menjadi 3 fase: 1. Fase Febris 2. Fase kritis 3. Fase pemulihan (recovery phases)
PEMERIKSAAN LABORATORIUM UNTUK DIAGNOSIS Pemilihan metode diagnosis yang sesuai dengan efisiensi
dan keakuratan tergantung : Tujuan tes Fasilitas tipe laboratorium Tenaga ahli teknis yang tersedia Waktu pengumpulan sampel
Jenis pemeriksaan laboratorium untuk diagnosis: 1. Deteksi virus kultur virus 2. Deteksi asam nukleat virus PCR atau NSBA (Nucleic Acid Sequence Based Amplification) 3. Deteksi antigen atau antibodi virus
PEMERIKSAAN LABORATORIUM UNTUK DIAGNOSIS DETEKSI ANTIGEN Antigen yang dideteksi adalah non structural protein-1 (NS-1) atau antigen envelope/membrane (E/M) Deteksi antigen yang sering digunakan adalah NS-1 NS-1 terdapat dalam jumlah besar dalam darah pasien infeksi primer maupun sekunder sampai hari ke 9 setelah onset sakit DETEKSI ANTIBODI Deteksi total IgM dengan ELISA Bahan pemeriksaan bisa serum, darah pada kertas filter, atau saliva Tidak semua serotipe dengue tercakup dalam satu kit pemeriksaan untuk deteksi IgM dengue Reaksi silang dengan infeksi flavivirus lain seperti Japanese encephalitis dan yellow fever, bahkan ada dilaporkan false positif dengan infeksi malaria dan leptospirosis
PEMERIKSAAN LABORATORIUM UNTUK DIAGNOSIS DETEKSI ANTIBODI Deteksi IgG dengan ELISA Bahan pemeriksaan bisa serum, plasma, atau darah pada kertas filter Digunakan untuk deteksi infeksi saat ini atau infeksi lalu (bila digunakan serum berpasangan) Peningkatan kadar IgG 4x atau lebih pada serum berpasangan yaitu serum fase akut dan penyembuhan mengkonfirmasi adanya infeksi dengue Deteksi ratio IgM/IgG Untuk membedakan antara infeksi primer atau sekunder Ratio > 1,2 dengan pengenceran serum 1/100 atau 1,4 dengan pengenceran serum 1/20 infeksi primer Ratio < 1,2 dengan pengenceran serum 1/100 atau 1,4 dengan pengenceran serum 1/20 infeksi sekunder
PEMERIKSAAN LABORATORIUM UNTUK DIAGNOSIS DETEKSI ANTIBODI Deteksi IgA Bahan serum dan saliva Metode ELISA IgA dengue positif 1 hari setelah IgM positif Puncak pada hari ke 8 demam dan menurun cepat sampai tidak terdeteksi pada hari ke-40 Tidak terdapat perbedaan titer antara infeksi primer dan sekunder
PEMERIKSAAN LABORATORIUM UNTUK DIAGNOSIS DETEKSI ANTIBODI Hemaglutinaasi inhibisi (HI) Dilakukan berdasarkan kemampuan antigen dengue untuk mengaglutinasi eritrosit HI mengukur potensi antibodi anti dengue yang terdapat dalam serum pasien untuk menghambat aglutinasi tersebut Dilakukan dengan serum berpasangan yaitu serum fase akut dan konvalescent atau jarak pengambilan serum 1 dan ke 2 adalah 7 hari atau lebih Infeksi primer titer antibodi HI rendah pada fase akut dan meningkat lambat pada fase konvalescent Infeksi sekunder titer antibodi HI meningkat cepat sampai titer 1:1280
PEMERIKSAAN LABORATORIUM UNTUK DIAGNOSIS HEMAGLUTINASI INHIBISI
PEMERIKSAAN LABORATORIUM UNTUK DIAGNOSIS UJI FIKSASI KOMPLEMEN Kurang sensitif Untuk konfirmasi infeksi dengue pada serum berpasangan yang diambil sesudah infeksi Peningkatan 4x pada dari serum akut ke konvalescent menunjukkan infeksi sekunder TES NEUTRALISASI Jarang digunakan
PEMERIKSAAN LABORATORIUM UNTUK DIAGNOSIS WAKTU PEMERIKSAAN Setelah onset sakit virus dapat dideteksi dalam serum/plasma/darah dan jaringan lain dalam 4-5 hari STADIUM AWAL PENYAKIT untuk deteksi antigen berupa isolasi/kultur virus, deteksi asam nukleat atau antigen virus AKHIR FASE AKUT serologi (pemeriksaan antibodi) RESPONS IMUN UNTUK PEMBENTUKAN ANTIBODI Pada infeksi primer, terbentuk IgM : 1. 50% pasien pada hari ke 4-5 2. 80% pasien hari ke-5 3. 99% pasien pada hari ke-10
PEMERIKSAAN LABORATORIUM UNTUK DIAGNOSIS PEMBENTUKAN ANTIBODI PADA INFEKSI PRIMER Pada infeksi primer, terbentuk IgM : 1. 50% pasien pada hari ke 4-5 2. 80% pasien hari ke-5 3. 99% pasien pada hari ke-10 Kadar IgM mencapai puncak sekitar 2 minggu setelah gejala muncul dan menurun sampai tidak terdeteksi setelah 2-3 bulan IgG anti dengue terdeteksi dg kadar rendah pada akhir minggu pertama sakit, kemudian meningkat perlahan dan bertahan beberapa bulan sampai seumur hidup
PEMERIKSAAN LABORATORIUM UNTUK DIAGNOSIS PEMBENTUKAN ANTIBODI PADA INFEKSI SEKUNDER Imunoglobulin yang terdeteksi dg kadar tinggi bahkan pada fase akut adalah IgG (menetap selama 10 bulan) Akhir stadium penyembuhan (konvalescent) IgM terdeteksi dgn kadar rendah pada infeksi sekunder dibandingkan pada infeksi primer Untuk membedakan infeksi primer atau sekunder digunakan: 1. Rasio IgM/IgG lebih sering digunakan 2. Hemagglutinasi inhibisi (HI)
JENIS PEMERIKSAAN LABORATORIUM UNTUK DIAGNOSIS DEMAM DENGUE DAN WAKTU PEMERIKSAANNYA
PERBANDINGAN HASIL PEMERIKSAAN ANTIBODI DENGUE PADA INFEKSI PRIMER DAN SEKUNDER DENGAN ELISA DAN TES HI
PEMILIHAN METODE DIAGNOSIS
PEMILIHAN METODE DIAGNOSIS
INTERPRETASI HASIL PEMERIKSAAN DIAGNOSIS DENGUE
PENGAMBILAN SAMPEL
Volume darah yang diambil 2-5 mL Bila pemeriksaan ditunda keesokan harinya, segera
pisahkan serum dan serum disimpan dalam freezer Darah lengkap tidak boleh disimpan dalam freezer supaya tidak hemolisis
PEMERIKSAAN HEMATOLOGI
PEMERIKSAAN HEMATOLOGI RUTIN 1. Pemeriksaan trombosit dan hematokrit digunakan untuk membantu diagnosis pada stadium akut infeksi 2. Trombosit dibawah 100.000/µL DHF tetapi juga dapat ditemukan pada dengue fever 3. Trombositopenia ditemukan pada hari ke-3 hingga 8 onset sakit 4. Hemokonsentrasi ditandai dengan peningkatan hematokrit >20% atau lebih dibandingkan serum konvalescent menunjukkan adanya hipovolemia akibat peningkatan permeabilitas vaskuler dan terjadi kebocoran plasma
PEMERIKSAAN LABORATORIUM UNTUK MONITORING DAN PENATALAKSANAAN PASIEN Hematologi lengkap harus dilakukan pada saat pasien datang Nilai hematokrit yang didapat merupakan baseline nilai
hematokrit pasien Hasil pemeriksaan hematologi lengkap : 1. Eritrosit normal 2. Leukosit leukopeni, tetapi bisa dijumpai normal atau leukositosis. Pada fase akhir demam terjadi limfositosis relatif, terdapat limfosit plasma biru (4%) pada hari ke-3 s/d ke-7 3. Trombosti trombositopenia pada fase kritis, trombosit<100.000/µL dapat ditemukan pada hari ke-3 s/d 8 sakit 4. Hematokrit meningkat
PEMERIKSAAN LABORATORIUM UNTUK MONITORING DAN PENATALAKSANAAN PASIEN Pemeriksaan laboratorium lain bila terdapat indikasi : 1. Fungsi hati ALT dan AST, PT, dan bilirubin 2. Pemeriksaan kadar protein total dan albumin bila terdapat tanda2 kebocoran masif seperti asites atau efusi pleura 3. Elektrolit dan analisis gas darah syok 4. Ureum dan kreatinin bila terdapat tanda2 gagal ginjal akut akibat syok hipovolemik 5. Pemeriksaan koagulasi (PT, aPTT, fibrinogen, dan Ddimer) untuk melihat kelainan koagulasi, koagulopati, ataupun adanya tanda DIC pada pasien
PEMERIKSAAN LABORATORIUM UNTUK INFEKSI VIRUS INFEKSI EBV Infeksi mononukleosis merupakan syndroma klinis akut akibat infeksi primer Epstein Barr Virus (EBV) Pemeriksaan laboratorium penunjang diagnosis antara lain: Pemeriksaan hematologi Pemeriksaan mikrobiologi Pemeriksaan serologi Pemeriksaan Hematologi: Leukositosis dan limfositosis (ditemukan limfosit atipik) Jumlah limfosit meningkat hingga 50% dari jumlah leukosit dan limfosit atipik 10% dari jumlah limfosit Neutropenia (jml neutrofil <1000/µL Beberapa pasien trombositopenia Sedikit yang Hb rendah (anemia normositik normokrom)
PEMERIKSAAN LABORATORIUM UNTUK INFEKSI VIRUS EBV Pemeriksaan Hematologi: Bila terjadi neutrofilia maka gambaran neutrofil adalah granulasi
toksik, shift to the left, dan dohle bodies
Limfosit atipik
Limfosit normal
PEMERIKSAAN LABORATORIUM UNTUK INFEKSI VIRUS INFEKSI VIRUS LAIN Pemeriksaan yang dilakukan: 1. Pemeriksaan hematologi 2. Pemeriksaan serologi deteksi antigen-antibodi untuk menegakkan diagnosis 3. Pemeriksaan mikrobiologi kultur atau isolasi virus untuk diagnosis 4. Pemeriksaan kimia sesuai indikasi , untuk memantu perjalanan penyakit, komplikasi, dan penatalaksanaan Pemeriksaan hematologi Biasanya limfositosis tetapi beberapa infeksi virus terdapat neutrofilia Terdapat limfosit atipik Hitung eosinofil menurun pada akut infeksi virus dan meningkat kembali pada fase pemulihan
PEMERIKSAAN LABORATORIUM UNTUK INFEKSI VIRUS INFEKSI VIRUS LAIN Pemeriksaan hematologi Trombositopenia dapat terjadi pada beberapa infeksi virus akibat pemakaian trombosit selama infeksi virus aktif Pada infeksi rubella pada fase penyembuhan (recovery phase) terjadi trombositopenia akibat interaksi kompleks imun dengan platelet Hemolisis akut dapat terjadi pada infeksi measles (cacar) Infeksi Parvovirus dapat menyebabkan aplasia eritrosit akut dan transient dengan sedikit penurunan Hb dan tidak ditemukannya retikulosit Neutropenia atau trombositopenia Anemia berat tetapi transient
PEMERIKSAAN LABORATORIUM UNTUK INFEKSI VIRUS INFEKSI VIRUS LAIN Pemeriksaan hematologi Infeksi Herpesvirus dapat menyebabkan Syndroma hemofagositik pansitopenia Infeksi virus kroni HTLV-1 limfositosis dengan limfosit atipik (+)
Neutrofilia didapat akibat infeksi virus
