Pembahasan Validasi Validasi LOD dan LOQ
Pada Pada prak prakti tikum kum kali kali ini ini bert bertuj ujuan uan untuk untuk mema memaham hamii kerja kerja alat alat spek spektr trof ofot otom omet eter er ultraviolet- visible, mencari panjang gelombang maksimum dan optimum suatu seyawa obat, serta serta membuat membuat kurva kurva kalibr kalibrasi asi suatu suatu senyawa senyawa parame parameter ter validas validasii (kurva (kurva valida validasi, si, akurasi akurasi,, presisi, LOD LOD,, LO LO!! dan penetapan kadar dalam sediaan" #ampel yang digunakan adalah tablet paracetamol dan menggunakan alat spektrofotometer $%-%&#" $%-%&#" 'a 'aktu ktu praktikum selama kali pertemuan" #pektrofotometer ultraviolet visible merupakan alat dengan teknik spektrofotometer pada daerah ultra-viol ultra-violet et dan sinar tampak" tampak" )lat ini digunakan untuk mengukur mengukur serapan sinar ultra violet atau sinar tampak oleh suatu materi dalam bentuk larutan"Prinsip dasar #pektrofotometri $%-%is adalah serapan cahaya" *ila cahaya jatuh pada senyawa, maka sebagian dari cahaya diserap oleh molekul-molekul sesuai dengan struktur dari molekul senyawa tersebut" #erapan cahaya oleh molekul dalam daerah spektrum $%-%is tergantung pada struktur elektronik dari molekul" #pektra $%-%is dari senyawa-senyawa organik berkaitan erat dengan transisi-transisi diantara tingkatan-tingkatan tenaga elektronik" +adiasi ultraviolet dan sinar tampak diabsorpsi oleh molekul organik aromatik, molekul yang mengandung elektron- terkonjugasi dan atau atom yang mengandung elektron-n, menyebabkan transisi elektron di orbital terluarnya dari tingkat tingkat energi energi elektron elektron tereksitasi tereksitasi lebih tinggi" tinggi" *esarnya *esarnya serapan serapan radiasi radiasi tersebut tersebut sebanding sebanding dengan banyaknya molekul analit yang mengabsorpsi sehingga dapat digunakan untuk analisis kuantitatif" Dalam hal ini, hukum Lamber beer dapat menyatakan hubungan antara serapan cahaya dengan konsentrasi at dalam larutan" #pektrofotom #pektrofotometer eter $%-%&# $%-%&# dapat menganalisa menganalisa secara kualitatif kualitatif dan kuantitatif" kuantitatif" Pada analisa kualitatif karakteristik resapan suatu at dalam pelarut tertentu, yaitu panjang gelombang maksimum maksimum dan daya resapnya" Penentuan panjang gelombang maksimum dengan membuat membuat spektrum dengan cara membuat larutan baku primer.induk" Langkah Langkah awal awal yang yang dilaku dilakukan kan adalah adalah tablet tablet parase parasetam tamol ol sebany sebanyak ak / tablet tablet digeru digeruss menggu menggunaka nakan n mortir mortir dan stampe stamperr hingga hingga halus" halus" 0emudi 0emudian an serbuk serbuk parase parasetam tamol ol ditimb ditimbang ang sebanyak 1/ mg secara seksama, lalu dimasukkan ke dalam labu ukur 1/ ml" 0e dalam labu ditambahkan / ml etanol, dikocok hingga larut lalu di-add etanol hingga tanda batas dan diperoleh konsentrasi 2/// ppm" Larutan tersebut dikocok hingga homogen, kemudian disaring menggunakan kertas saring dan filtratnya diambil" #etelah tahap preparasi sampel, dilakukan tahap pembuatan kurva baku" Parasetamol *P3& ditimbang sebanyak 1 mg secara seksama, kemudian dimasukkan ke dalam labu ukur 1/ ml" 0emudian dilarutkan dengan etanol dan di-add hingga tanda batas" Diperoleh larutan baku stock 2// ppm" Dari larutan baku tersebut dibuat pengenceran hingga diperoleh 1 konsentrasi yang berbeda yaitu 4ppm, 5ppm, 6ppm, 6pp m, 2/ppm, dan 2 ppm" 7asing-masing konsetrasi diukur absorbansinya menggunakan sperktrofotometer $% pada panjang gelombang 41 nm kemudian dibuat kurva bak u" Pipet sejumlah volume larutan induk dan diencerkan kedalam labu hingga diperoleh konsentrasi 2/ um.mL " setelah itu ukur serapannya dengan spektrofotometer untuk menentukan panjang gelombang maksimum" #etelah dianalisis dengan denga n spektrofotometer didapatkan panjang gelomba gelombang ng maksim maksimum um untuk untuk paracet paracetamol amol adalah adalah 48 nm" *erdas *erdasark arkan an litera literatur ture, e, panjan panjang g
gelombang paracetamol 41 nm" #ehingga hasil dari praktikum tersebut masih sesuai dengan panjang gelombang maksimum sebenarnya karena hasilnya tidak terlalu jauh berbeda" #etelah itu, membuat kurva kalibrasi berdasarkan data panjang gelombang maksimum yang diperoleh, dibuat lima seri konsentrasi larutan yaitu ,4,5,6,2/,2 ppm" #etelah itu ukur serapan masingmasing larutan pada panjang gelombang maksimum " #ehingga didapatkan persamaan regresi linear yaitu y9/,/5:; < /,/: sehingga diperoleh nilai resapan /,::= " Pada pembuatan kurva klaibrasi Paracetamol pada panjang gelombang 435 nm dibuat larutan seri yaitu 20,40,60,80,100, dan 120 ppm setela itu pada masing!masing tabung ditambakan pereaksi "arna tujuannya supaya dapat terdeteksi pada spektro#otometri$ %etela diukur masing!masing tabung diperole persamaan y&4,11$10'() * 0,01+2 dan diperole nilar r&0,((6$
#elanjutnya dihitung parameter validasi" Parameter validasi berguna untuk membuktikan bahwa parameter tersebut memenuhi persyaratan dalam penggunaannya" >ujuan utama validasi parameter adalah untuk menjamin metode analisis yang digunakan mampu memberikan hasil yang cermat dan handal serta dapat dipercaya" Parameter yang diuji dalam validasi meliputi akurasi, presisi, linearitas, rentang, limit deteksi, limit kuantitasi, sepesifikasi, ketangguhan, kekuatan, stabilitas, dan uji kesesuaian sistem" #etelah itu dicari batas deteksi (LOD! dan batas kuantifikasi (LO!" *atas deteksi adalah titik di mana suatu nilai yang terukur lebih besar dari ketidakpastian yang terkait dengannya" &ni adalah konsentrasi terendah dari analit dalam suatu sampel yang dapat dideteksi namun tidak selalu diukur" *atas deteksi sering bingung dengan sensitivitas dari metode ini" #ensitivitas dari metode analisis adalah kemampuan metode ini untuk membedakan perbedaan-perbedaan kecil konsentrasi atau massa analit uji" Dalam istilah praktis, sensitivitas kemiringan kurva kalibrasi yang diperoleh dengan merencanakan respons terhadap konsentrasi analit atau massa" *erdasarkan hasil perhitungan tersebut, didapat yaitu nilai pada panjang gelombang 48 nm LOD /"65/ bpj dan nilai LO yaitu ,65: bpj, sedangkan pada panjang gelombang 481 nm nila LOD :,5/1 bpj dan nilai LO yaitu 8,/ bpj " LOD merupakan konsentrasi analit terendah dalam sampel yang masih dapat dideteksi meskipun tidak selalu dapat dikuantifikasi" #edangkan nilai LO merupakan konsentrasi analit terendah dalam sampel yang masih dapat ditentukan dengan presisi dan akurasi yang dapat diterima pada kondisi operasional metode yang digunakan"
VIII.
Kesimpulan
LOD merupakan konsentrasi analit terendah dalam sampel yang masih dapat dideteksi meskipun tidak selalu dapat dikuantifikasi" #edangkan nilai LO merupakan konsentrasi analit terendah dalam sampel yang masih dapat ditentukan" Pada panjang gelombang 48 nm ?ilai LOD yaitu /"65/ dan nilai LO yaitu "65: sedangkan pada panjang gelombang 481nm LOD :,5/1 bpj dan LO sebesar 8,/ bpj"
DAFTAR PUSTAKA
)ssociation of Official )nalytical @hemists" 2::6" )O)@ Perr- %erified 7ethods Program" )rlington A )O)@ &nternational" @han, @" @," Lam, Berman" Lee, C" @" and hang, Eue-7ing" //4" )nalytical 7ethod %alidation and &nstrument Performance %erification" Fohn 'iley G #ons" @anada" Dachriyanus" //4" )nalisis #truktur #enyawa Organik #ecara #pektroskopi Hdisi &" Penerbit )ndalas $niversity Press" Padang" Departemen 0esehatan +&" 2::1" 3armakope &ndonesia Hdisi &%" Depkes +&" Fakarta" Hrmer , F"B" and 7iller, 7c*" //1" 7ethod %alidation in Pharmaceutical )nalysis" ) Iuide to *est Practice" 'iley-%ch" %erlag ImbB G @o" 0Ia)" 'einheim" Iandjar, I"& G +ohman, )" //=" 0imia 3armasi )nalisis" Pustaka *elajar" Cogyakarta" J&@BK &nternational @onference on Barmoniation" //1" %alidation of )nalytical ProceduresA >e;t and 7ethodology (+2!" >ersedia di httpA..www"ich"org" Jdiakses tanggal /5 Funi /28K" 7offat, )"@", dkk" //1" @larkes )nalysis Of Drug )nd Poisons" >hirth edition" Pharmaceutical Press" Hlectronic version" London" +iyadi, 'ahyu" //:" %alidasi 7etode )nalisis" >ersedia di httpA..www"chem-istry"org.artikelMkimia.kimiaManalisis.validasi-metode-analisis. Jdiakses tanggal /5 Funi /28K"
