BAB I TUJUAN PERCOBAAN 1.1
TUJUAN UMUM PERCOBAAN Untu Untuk k meng menget etah ahui ui peri peristi stiwa wa oksid oksidasi asi biol biolog ogis is dan dan memp memper erli lihat hatka kan n efek efek
antioksidan vitamin. 1.2 TUJUAN KH KHUSUS PE PERCOBAAN a. Uji Lakt Laktat at dehid dehidro roe! e!a"e a"e da#a da#a$ $ rai rai : menget mengetahu ahuii perist peristiwa iwa oksida oksidasi-r si-redu eduksi ksi berdas berdasark arkan an aktivi aktivitas tas asam laktat laktat dehidrogenase terhadap substratnya asam laktat %. Uji Uji S&h S&har ardi di! !er er : mengamati mengamati peristiwa peristiwa reduksi reduksi berdasarkan berdasarkan aktivitas enzim laktat dehidrogen dehidrogenase ase dalam susu segar &. Uji Ok"ida Ok"ida"e "e da! da! Pe!a Pe!ar'h r'h (ita$i! ita$i! C : - memp memperl erlih ihat atka kan n pros proses es oksid oksidas asii feno fenoll oleh oleh polif polifen enol ol oksid oksidase ase (PPO) (PPO) di -
dalam bahan memp memperl erlih ihat atka kan n efek efek antio antioks ksid idan an vitami vitamin n terha terhada dap p oksid oksidasi asi fenol fenol oleh oleh
PPO d. Uji Si)at Si)at A!tio A!tiok"ida k"ida! ! (ita$i! (ita$i! C terha terhada* da* +''" +''" ,e!o# ,e!o# : - memp memperl erlih ihat atka kan n pros proses es oksid oksidas asii feno fenoll oleh oleh polif polifen enol ol oksid oksidase ase (PPO) (PPO) di -
dalam bahan memp memperl erlih ihat atka kan n efek efek antio antioks ksid idan an vitami vitamin n terha terhada dap p oksid oksidasi asi fenol fenol oleh oleh
PPO e. Uji Si)at Si)at Red'k"i Red'k"i (ita (ita$i! $i! C terhad terhada* a* Reae! Reae! Be!e Be!edi&t di&t: memp memper erlih lihatk atkan an pros proses es reduk reduksi si vitam vitamin in terha terhada dap p reage reagen n bene benedi di!t !t yang yang mengandung ion u ""
BAB II HASIL -AN PEMBAHASAN 2.1 -ASAR -ASAR TEORI TEORI 2.2 UJI LAKTAT LAKTAT -EHI-RO+ENASE -EHI-RO+ENASE -ALAM RA+I Pe!dah'#'a!
1
#etilen blue akan bertindak sebagai akseptor hidrogen$ sodium laktat sebagai donor hidrogen sedangkan enzim laktat dehidrogenase akan membantu proses pengambilan atom hidrogen dari senyawa donor (sodium laktat) ke senyawa penerima (metilen blue). %nzim laktat dehidrogenase yang berasal dari ragi akan membantu perpindahan atom hidrogen dari sodium laktat ke metilen blue. Ha"i# Praktik'$
&el U'i
asil Pengamatan arna biru setelah
esimpulan
*abung + ( " sodium laktat ,)
dipanaskan men'adi biru
(") *er'adi reduksi
*abung /
pu!at arna biru setelah dipanaskan tetap biru
(-) *idak ter'adi reduksi
Pe$%aha"a! asil praktikum menun'ukkan sampel u'i yang ditambah sodium laktat , (tabung
0) bereaksi positif setelah dipanaskan men'adi biru pu!at sedangkan sampel u'i pada tabung / bereaksi negatif setelah dipanaskan tetap biru . al ini sesuai dengan teori karena pada tabung 0 (yang telah diberi sodium laktat) atom hidrogen mereduksi metilen blue sehingga warna yang akan dihasilkan akan lebih pu!at. &edangkan pada tabung 00 yang tanpa pemberian sodium laktat warna yang dihasilkan lebih tua karena tanpa substrat (sodium laktat)$ metilen blue tidak tereduksi karena tidak ada pemberi donor hidrogen.
2. UJI SCHAR-IN+ER Pe!dah'#'a! U'i ini berdasarkan reduksi metilen blue oleh enzim laktat dehidrogenase
membentuk leukometilen blue yang tidak berwarna. idrogen yang diperoleh dari formaldehid digunakan untuk mereduksi. 1tom diikat oleh akseptor metilen blue$ maka ter'adilah leuko metilen blue yang berubah warna men'adi biru pu!at. anya susu murni segar yang akan memberikan hasil positif terhadap reaksi tersebut. Oleh karena itu$ reaksi ini digunakan untuk menemukan kesegaran susu murni. Pada susu yang dipasteurisasi$ enzim dehidrogenase telah rusak sehingga tidak dapat mereduksi metilen blue.
CH3OH CH2O + H2 FormaldehidAldehid asam (donor H) dehidrogenaseformat 2
Mb +H2MbH2 Metilen BlueLeuometilen blue
Ha"i# Praktik'$
&el U'i &usu 23o 4 pasteurized
asil Pengamatan arna biru setelah dipanaskan
milk (tabung +)
tetap biru arna biru setelah dipanaskan
&usu &egar (tabung /)
men'adi biru pu!at
esimpulan (-) tidak ter'adi reduksi (") ter'adi reduksi
Pe$%aha"a! asil praktikum menun'ukkan sampel u'i susu 23 o bereaksi negatif setelah
dipanaskan tetap biru sedangkan sampel u'i susu segar bereaksi positif setelah dipanaskan men'adi biru pu!at. al ini sesuai dengan teori karena pada pasteurized milk $ enzim dehidrogenase telah rusak akibat pemanasan sehingga tidak dapat mengkatalisis reduksi metilen blue oleh karena itu warna larutan tetap biru. 2./ UJI OKSI-ASE -AN PEN+ARUH (ITAMIN C Pe!dah'#'a! Peristiwa perubahan warna !oklat pada buah (browning ) menun'ukkan adanya
reaksi oksidasi fenol yang dikatalisis oleh enzim polifenol oksidase (PPO) pada tumbuhan. 5enol diubah men'adi katekol oleh enzim PPO$ kemudian men'adi 6uinon lalu dipolimerisasi men'adi pigmen melaniadin yang berwarna !oklat. 7itamin (asam askorbat dan vitamin % (alfa tokoferol) akan bereaksi dengan oksigen menghambat ker'a enzim PPO sehingga oksidasi fenol tidak ter'adi. Ha"i# *raktik'$
&el U'i
1nggur
8elimbing
asil Pengamatan
" fenol + " vitamin
oklat 8ening
" fenol + " vitamin %
oklat #uda
" fenol +
oklat *ua
" fenol + " vitamin
uning #uda
" fenol + " vitamin %
uning #uda eruh
esimpulan (") menimbulkan efek antikoksidan (") menimbulkan efek antikoksidan (-) tidak menimbulkan efek antikoksidan (") menimbulkan efek antikoksidan (") menimbulkan efek antikoksidan 3
Pisang
" fenol +
uning *ua
" fenol + " vitamin
uning *erang
" fenol + " vitamin %
oklat #uda
" fenol +
oklat
(-) tidak menimbulkan efek antikoksidan (") menimbulkan efek antikoksidan (") menimbulkan efek antikoksidan (-) tidak menimbulkan efek antikoksidan
Pe$%aha"a! asil praktikum kami menun'ukkan sampel u'i yang diberikan vitamin tidak
menun'ukkan warna yang lebih terang$ sampel u'i yang diberikan vitamin % menun'ukkan warna yang lebih gelap sedangkan sampel u'i yang tidak diberi penambahan apa 9 apa mengalami pen!oklatan. al ini sesuai dengan teori karena vitamin dan % memiliki sifat antioksidan yang menghambat oksidasi fenol sehingga buah tidak mengalami pen!oklatan. amun efek antioksidan vitamin % lebih ke!il dibanding vitamin oleh karena itu warna yang dihasilkan lebih gelap. 2.0 UJI SI,AT ANTIOKSI-AN (ITAMIN C TERHA-AP +U+US ,ENOL Pe!dah'#'a! Peristiwa perubahan warna !oklat pada buah (browning ) menun'ukkan adanya
reaksi oksidasi fenol yang dikatalisis oleh enzim polifenol oksidase (PPO) pada tumbuhan. 5enol diubah men'adi katekol oleh enzim PPO$ kemudian men'adi 6uinon lalu dipolimerisasi men'adi pigmen melaniadin yang berwarna !oklat. 7itamin (asam askorbat dan vitamin % (alfa tokoferol) akan bereaksi dengan oksigen menghambat ker'a enzim PPO sehingga oksidasi fenol tidak ter'adi. Ha"i# Praktik'$
&el U'i " vitamin " vitamin %
asil Pengamatan arna buah tidak
esimpulan (") menimbulkan efek
berubah &ebagian buah
antikoksidan
berubah men'adi
Pisang " air suling
!oklat &emua bagian buah berubah men'adi
8elimbing
" vitamin
!oklat arna buah tidak
(") menimbulkan efek antikoksidan (-) tidak menimbulkan efek antikoksidan (") menimbulkan efek "
" vitamin %
berubah &ebagian buah berubah men'adi
"air suling
!oklat &emua bagian buah berubah men'adi !oklat
antikoksidan (") menimbulkan efek antikoksidan (-) tidak menimbulkan efek antikoksidan
Pe$%aha"a! asil praktikum kami menun'ukkan sampel u'i yang diberikan vitamin tidak
menun'ukkan perubahan warna$ sampel u'i yang diberikan vitamin % sebagian mengalami pen!oklatan sedangkan sampel u'i yang diberikan air suling seluruhnya mengalami pen!oklatan. al ini sesuai dengan teori karena vitamin dan % memiliki sifat antioksidan yang menghambat oksidasi fenol sehingga buah tidak mengalami pen!oklatan. amun efek antioksidan vitamin % lebih ke!il dibanding vitamin oleh karena itu masih ada bagian yang mengalami pen!oklatan. &edangkan penambahan air suling akan menyebabkan sampel teroksidasi karena adanya ikatan O/ di dalam air suling. 2. UJI SI,AT RE-UKSI (ITAMIN C TERHA-AP REA+EN BENE-ICT Pe!dah'#'a! Pereaksi benedi!t berupa larutan yang mengandung kuprisulfat$ natrium karbonat
dan natrium sitrat. 7itamin merupakan reduktor kuat sehingga dapat mereduksi ion u"" dari kuprisulfat men'adi ion u " yang kemudian mengendap sebagai u /O yang berwarna merah bata. Ha"i# Praktik'$
&el U'i 7itamin ;lukosa
asil Pengamatan arna berubah dari warna biru men'adi merah bata arna berubah dari warna biru men'adi merah
esimpulan (") *er'adi reduksi (") *er'adi reduksi
Pe$%aha"a! asil praktikum menun'ukkan sampel u'i vitamin setelah diberi pereaksi
benedi!t berubah warna dari biru men'adi merah bata dan sampel u'i glukosa berubah warna dari biru men'adi merah. al ini sesuai dengan teori karena glukosa merupakan gula pereduksi dan vitamin 'uga merupakan reduktor kuat sehingga #
kedua sama 9 sama menun'ukkan hasil positif ter'adi reduksi ion u/" pada pereaksi benedi!t.
BAB III KESIMPULAN
$
-A,TAR PUSTAKA +. #uray$ =obert . /33>. 8iokimia arper edisi /2. %; : ?akarta /. @azid$ %stien$ ursati$ Ainda. /33B. Penuntun Praktikum 8iokimia untuk #ahasiswa 1nalis. @ogyakarta : 1ndi. C. @ulia$ =ika. /3+D. #odul Praktikum 8iokimia. &urabaya : Aaboratorium 8iokimia 5akultas 5armasi Universitas &urabaya.
LAMPIRAN
%
+AMBAR +AMBAR HASIL PRAKTIKUM
&
