HONGOS En biol biolog ogía ía el tér térmi mino no Fungi (latín, literalme literalmente nte "hongos") "hongos") designa a un grupo grupo de organis organismos mos eucario eucariotas tas entre entre los los que que se se encu encuentr entran an los mohos, mohos, las levadur levaduras as y las las seta setas. s. Se Se clas clasiifica fican n en un rein reino o dist distin into to al al de las las plan planta tas, s, anim animal ales es y bact bacter eria ias. s. Esta diferenciaci diferenciación ón se debe, entre otras otras cosas, a que poseen poseen paredes celulares celulares compuest compuestas as por quitin quitina, a, a difere diferencia ncia de las plantas plantas,, que que contiene contienen n celulo celulosa sa y debido debido a que alguno algunoss crecen crecen o actúa actúan n como como parásit parásitos os de otras otras especi especies. es. Actualmente se consideran como un grupo heterogéneo, polifilético, formado por organismos pertenecientes por lo menos a tres líneas evolutivas independientes. Los hongos hongos se encue encuentra ntran n en hábitat hábitatss muy diver diversos: sos: puede pueden n ser pirófil pirófilos os (Pholi (Pholiota ota carbonaria) carbonaria) o coprófilos coprófilos (Psilocybe (Psilocybe coprophila). coprophila). pueden n clasi clasifica ficarr en cuatr cuatro o grupos grupos:: saprofit saprofitos, os, Segú egún su ec eco ología, se puede lique liqueni niza zados dos,, mico micorri rrizó zóge genos nos y parási parásitos tos.. Los Los hong hongos os sapr saprofi ofito toss pued pueden en ser ser sust sustra rato to esp espec ecíf ífic icos os:: Mara Marasm smiu iuss buxi buxi o no espe especí cífi fico cos: s: Myce Mycena na pur pura. a. Los Los simbi simbion ontes tes pued pueden en ser: ser: hong hongos os liqu liqueni eniza zados dos Basi Basidi diol olic iche hene nes: s: Ompha Omphalilina na ericetorum ericetorum y ascolichenes: ascolichenes: Cladonia Cladonia coccifera coccifera y hongos micorrízicos: micorrízicos: específicos: específicos: Lactari Lactarius us tormi torminosu nosuss (solo (solo micorr micorriza iza con abed abedules ules)) y no específi específicos: cos: Hebelo Hebeloma ma mesophaeum. En la mayoría de los casos, sus representantes son poco conspic conspicuos uos debi debido do a su su diminut diminuto o tamaño tamaño;; suelen suelen vivi vivirr en suelos suelos y juntos juntos a material materiales es en en desco descompo mposic sición ión y como como simbio simbiontes ntes de plan plantas, tas, animal animales es u otros otros hongos. Cuando fructifican, fructifican, no obstante, obstante, producen producen esporocarpos esporocarpos llamativos llamativos (las setas son un ejemplo de ello). Realizan una digestión externa de sus alimentos, secretando secretando enzimas, enzimas, y que absorben absorben luego las moléculas moléculas disueltas resultantes resultantes de la digestión. A esta forma de alimentación se le llama osmotrofia, la cual es similar a la que se da en las plantas, plantas, pero, a diferencia diferencia de aquéllas, aquéllas, los nutrientes nutrientes que toman son orgánicos. orgánicos. Los hongos hongos son los los descomponedor descomponedores es primarios primarios de la la materia muerta de plantas y de animales en muchos ecosistemas, y como tales poseen un papel papel ecológico ecológico muy muy relevante relevante en los los ciclos ciclos biogeoquími biogeoquímicos. cos. Los hongo hongoss tienen tienen una gran gran impor importanc tancia ia económ económica ica:: las las levadur levaduras as son las respon responsa sabl bles es de de la la ferme fermenta ntaci ción ón de la la cerv cervez eza a y el el pan, pan, y se da da la recol recolecc ecció ión n y el el cultivo cultivo de setas setas como como las las trufas. trufas. Desde Desde 1940 se han emplead empleado o para para produ producir cir indu indust stri rial alm mente ente anti antibi biót ótiicos, cos, así así como como enz enzimas imas (esp (espec ecia ialm lmen ente te prot protea easa sas) s).. Algunas especies son agentes de biocontrol de plagas. Otras producen micotoxinas, micotoxinas, compuestos compuestos bioactivos bioactivos (como (como los alcaloides) alcaloides) que son tóxicos tóxicos para humanos y otros animales. Las enfermedades fúngicas afectan a humanos, otros animales animales y planta plantas; s; en estas estas últimas, últimas, afect afecta a a la seguri seguridad dad alime alimentar ntaria ia y al rendimiento de los cultivos. Los hongos se presentan bajo dos formas principales: hongos filamentosos (antiguamente llamados "mohos") y hongos levaduriformes. El cuerpo de un hongo filamentoso tiene dos porciones, una reproductiva y otra vegetativa.1 La parte vegetat vegetativa iva,, que que es haploid haploide e y general generalment mente e no no presenta presenta colorac coloración ión,, está está
compuesta compuesta por filamentos filamentos llamados llamados hifas (usualmente (usualmente microscópi microscópicas); cas); un conjunto conjunto de hifas hifas confor conforma ma el miceli micelio o (usualm (usualmente ente visi visible ble). ). A menudo menudo las las hifas hifas están están divididas divididas por tabiques tabiques llamados llamados septos. Los hongos levaduriformes levaduriformes o simplemente simplemente levaduras levaduras son siempre siempre unicelulares unicelulares,, de forma casi esférica. No existen en ellos una distinción entre cuerpo vegetativo y reproductivo.
FISIOLOGÍA DE LOS HONGOS En la mayoría de los hongos las paredes de las hifas están compuestas principalmente por quitina y algunas hemicelulosas. La celulosa, que está presente sólo en unos pocos grupos de hongos, es característica de los oomycetes. La proporción de agua de los hongos mucilaginosos generalmente es mayor del 90%. Las esporas pueden tener menos del 50% de agua; otras estructuras de resistencia, tales como los esclerocios, contienen aún menos. Los hongos requieren oxígeno para su crecimiento, así como grandes cantidades de agua y de hidratos de carbono u otras fuentes de carbono. La mayoría de los hongos utilizan azúcares como la glucosa y la levulosa (D-fructosa), pero algunos usan otros compuestos orgánicos como alimento, según su capacidad para sintetizar las enzimas adecuadas. Ciertas micorrizas toman directamente el nitrógeno de la atmósfera; sin embargo, todos los demás hongos lo obtienen de nitratos, sales de amonio u otros compuestos compuestos orgánicos orgánicos o inorgánicos inorgánicos de nitrógeno. nitrógeno. Los hongos, hongos, además, precisan otros elementos como potasio, fósforo, magnesio y azufre. También son necesarios, aunque en muy pequeñas cantidades, hierro, manganeso, cobre, molibdeno, zinc y galio; así como factores de crecimiento. Determinados hongos son deficitarios, al menos en parte, en uno o más factores de crecimiento. Las enzimas de los hongos pueden actuar sobre una gran variedad de sustancias. Un grupo de enzimas, llamado el complejo zimasa, permite a las levaduras llevar a cabo la fermentación alcohólica. Otras enzimas, como la protopectinasa, la pectasa y la pectinasa, hidrolizan los compuestos pectídicos que hay en las capas medias de las paredes celulares de las plantas. La amilasa, celobiasa, citasa, dextrinasa, invertasa, lactasa, maltasa, proteasa y la tanasa son también enzimas producidas por los hongos. El glucógeno, sustancia relacionada con el almidón y con la dextrina, es la reserva de hidratos de carbono más común en los hongos. Además, algunos hongos forman polisacáridos polisacáridos y alcoholes alcoholes polihidroxíl polihidroxílicos, icos, como el manitol y la glicerina. glicerina. Otros producen proteínas y grasas en abundancia. Muchos hongos sintetizan
compuesta compuesta por filamentos filamentos llamados llamados hifas (usualmente (usualmente microscópi microscópicas); cas); un conjunto conjunto de hifas hifas confor conforma ma el miceli micelio o (usualm (usualmente ente visi visible ble). ). A menudo menudo las las hifas hifas están están divididas divididas por tabiques tabiques llamados llamados septos. Los hongos levaduriformes levaduriformes o simplemente simplemente levaduras levaduras son siempre siempre unicelulares unicelulares,, de forma casi esférica. No existen en ellos una distinción entre cuerpo vegetativo y reproductivo.
FISIOLOGÍA DE LOS HONGOS En la mayoría de los hongos las paredes de las hifas están compuestas principalmente por quitina y algunas hemicelulosas. La celulosa, que está presente sólo en unos pocos grupos de hongos, es característica de los oomycetes. La proporción de agua de los hongos mucilaginosos generalmente es mayor del 90%. Las esporas pueden tener menos del 50% de agua; otras estructuras de resistencia, tales como los esclerocios, contienen aún menos. Los hongos requieren oxígeno para su crecimiento, así como grandes cantidades de agua y de hidratos de carbono u otras fuentes de carbono. La mayoría de los hongos utilizan azúcares como la glucosa y la levulosa (D-fructosa), pero algunos usan otros compuestos orgánicos como alimento, según su capacidad para sintetizar las enzimas adecuadas. Ciertas micorrizas toman directamente el nitrógeno de la atmósfera; sin embargo, todos los demás hongos lo obtienen de nitratos, sales de amonio u otros compuestos compuestos orgánicos orgánicos o inorgánicos inorgánicos de nitrógeno. nitrógeno. Los hongos, hongos, además, precisan otros elementos como potasio, fósforo, magnesio y azufre. También son necesarios, aunque en muy pequeñas cantidades, hierro, manganeso, cobre, molibdeno, zinc y galio; así como factores de crecimiento. Determinados hongos son deficitarios, al menos en parte, en uno o más factores de crecimiento. Las enzimas de los hongos pueden actuar sobre una gran variedad de sustancias. Un grupo de enzimas, llamado el complejo zimasa, permite a las levaduras llevar a cabo la fermentación alcohólica. Otras enzimas, como la protopectinasa, la pectasa y la pectinasa, hidrolizan los compuestos pectídicos que hay en las capas medias de las paredes celulares de las plantas. La amilasa, celobiasa, citasa, dextrinasa, invertasa, lactasa, maltasa, proteasa y la tanasa son también enzimas producidas por los hongos. El glucógeno, sustancia relacionada con el almidón y con la dextrina, es la reserva de hidratos de carbono más común en los hongos. Además, algunos hongos forman polisacáridos polisacáridos y alcoholes alcoholes polihidroxíl polihidroxílicos, icos, como el manitol y la glicerina. glicerina. Otros producen proteínas y grasas en abundancia. Muchos hongos sintetizan
ácido oxálico y otros ácidos orgánicos, como cítrico, fórmico, pirúvico, succínico, málico y acético; la producción de ácido láctico sólo la realiza una familia de hongos. Otros productos del metabolismo fúngico son compuestos de azufre, sustancias que contienen cloro y numerosos pigmentos. Unos cuantos hongos tienen la facultad de formar compuestos compuestos volátiles volátiles de arsénico cuando cuando crecen sobre sustratos que lo contienen.
ESTRUCTURA DE LOS HONGOS Los hongos pueden desarrollarse en medios de cultivo especiales formando colonias de dos tipos: Las levaduriformes son pastosas o cremosas, formadas por microorganismos unicelulares que cumplen las funciones vegetativas y reproductivas. Las colonias filamentosas pueden ser algodonosas, aterciopeladas o pulverulentas; pulverulentas; son constituidas constituidas fundamentalmen fundamentalmente te por elementos elementos multicelulares multicelulares en en forma de tubo: las hifas. Las hifas pueden ser contínuas o cenocíticas y tabicadas o septadas. Poseen hifas septadas los hongos de las divisiones Ascomycota , Basidiomycota y Deuteromycota y poseen hifas cenocíticas los de las divisiones Mastigomycota e Zygomycota .
Al conjunto de hifas se da el nombre de micelio. El micelio que se desarrolla en el interior del sustrato, funcionando también como elemento de sustentación y de absorción de nutrientes es llamado micelio vegetativo. El micelio que se protege en la superficie y crece por encima del medio de cultivo es el micelio aéreo.Cuando el micelio aéreo se diferencia para sustentar los cuerpos de fructificación o propágulos, constituye el micelio reproductivo . Los propágulos propágulos u órganos de diseminación diseminación de los hongos, son clasificados, clasificados, según según su origen, en externos e internos, sexuados y asexuados. Más allá que el micelio vegetativo no tenga específicamente funciones de reproducción, algunos fragmentos fragmentos de hifa pueden desprenderse desprenderse del micelio micelio vegetativo vegetativo
y cumplir funciones de propagación, una vez que las células fúngicas son autónomas. Estos elementos son denominados taloconidios y comprenden los:
Blastoconidios o gemulas: Son comunes en las levaduras y se derivan por brote de la célula madre. A veces, permanecen enlazados a la célula madre, formando cadenas, las pseudos hifas, cuyo conjunto es el pseudomicelio.
Artroconidios:For mados por fragmentación de las hifas en segmentos rectangulares. Se encuentran en los hongos del género Geotrichum , en Coccidioides immitis y Dermatófitos .
Clamidoconidios:Tienen función de resistencia, semejantes a la de las esporas bacterianas. Son células, generalmente redondeadas, de volumen aumentado, con paredes dobles y espesas, en las cuales se concentra el citoplasma. Su localización en el micelio, puede ser apical o intercalar. Se forman en condiciones ambientales adversas, en como escasez de nutrientes, agua y temperaturas no favorables al desarrollo fúngico
Entre otras estructuras de resistencia deben ser mencionados los esclerotos, que son corpúsculos duros y parenquimatosos, formados por el conjunto de hifas y que permanecen en estado de hibernación hasta la aparición de condiciones adecuadas para su germinación. Son encontrados en especies de hongos de las divisiones Ascomycota, Basidiomycota y Deuteromycota .
DIVISIONES DEL REINO FUNGI GYMNOMICOTA: •
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Organismos fagotróficos con estructuras somáticas desprovistas de paredes celulares. Son considerados por muchos biólogos como pertenecientes al Reino Protista.
MASTIGOMYCOTA
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Hongos con centríolos que intervienen en la división nuclear; es típico que durante el ciclo vital se produzcan células flageladas y es también típico que la nutrición se realice por absorción (digestión externa). El cuerpo fructífero varía desde una sola célula que se convierte en un esporangio, hasta un micelio extenso, filamentoso. Reproducción asexual mediante zoósporas y reproducción sexual de varios tipos.
DEUTEROMYCOTA •
• •
Hongos saprofíticos, simbióticos, parásitos o depredadores, unicelulares o más típicamente con un micelio séptado, de ordinario productor de conidios. Existen unas pocas especies que no producen ningún tipo de esporas. Ciclo de reproducción parasexual o desconocido.
AMASTIGOMYCOTA • • •
Hongos sin centriolos, no producen células flageladas. La nutrición es por absorción. La reproducción sexual por gemación, fragmentación, esporangiosporas o conidios.
REPRODUCCIÓN Y CICLO BIOLÓGICO DE LOS HONGOS Todos los macromicetos o setas tienen dos partes distintas: a. El micelio, formado por una serie de filamentos o hifas, en general de color blanco, que vive bajo tierra entre el humus o rodeando raíces, sobre hojas o madera muerta e incluso sobre otros hongos, plantas o animales. Constituye la parte vegetativa del hongo. Estos filamentos o hifas crecen radial e indefinidamente en todas las direcciones, formado en algunos casos círculos completos que fueron denominados “ corros de brujas o de hadas” debido a su fructificación espontánea y misteriosa. b. El carpóforo o vulgarmente denominado seta. Del extremo de los micelios fructifica el cuerpo fructífero: “seta o carpóforo”, formado, en su mayoría, por un tejido estéril. Solo una pequeña parte de la seta o carpóforo es fértil, la zona conocida como “himenio”, que se corresponde con la láminas, los tubos, los aguijones, y, en ciertos casos, con una superficie lisa o ligeramente arrugada. En el himenio se producen las esporas que permiten la difusión de una especie. Cuando la espora madura cae sobre el sustrato que puede ser el adecuado o no. En la mayoría de los casos las esporas se pierden por no encontrar unas condiciones adecuadas. Si todo le es favorable germina, produciendo un filamento finísimo (filamento primario) que al entrar en contacto con otro producido simultáneamente por otra espora con signo sexual contrario, se fusionan y forman un nuevo filamento (filamento secundario) y el conjunto de filamentos o hifas recibe el nombre de micelio.
Desarrollo del carpóforo de Amanita caesarea De este micelio o cuerpo vegetativo del hongo se desarrolla finalmente el cuerpo fructífero, es decir, la seta que vemos en el exterior y que recogemos. Un solo carpóforo o cuerpo fructífero (seta) produce decenas de millares de esporas y, en algunos casos, hasta billones de esporas ( Langermannia gigantea). Cada vez que estas esporas, cuando están maduras caen al suelo y concurren las condiciones necesarias, comienza un nuevo ciclo.
SOMBRERO La forma más conocida es semejante a un paraguas con pie y sombrero, aunque puede presentar numerosas variaciones según el tipo de himenio. Igualmente
puede presentar una amplia gama de formas y colores: redondo, plano, cóncavo, convexo, con mamelón, embudado, hemisférico, acampanado...
La cutícula: es la membrana exterior que recubre el sombrero. Tiene mucha importancia tanto por la estructura como por el color. Puede ser: viscosa o seca, tener placas o carecer de ellas, separarse fácil o difícilmente de la carne, lisa o escamosa, fibrosa, verrugosa, cuarteada o agrietada, zonada...
El borde: puede ser liso, ondulado, estriado, acanalado, festoneado, delgado o grueso...
HIMENIO Es la zona donde se localizan las esporas y, por tanto, la parte fértil del carpóforo.
Las láminas: son unos delgados tabiques verticales situados en la parte inferior del sombrero. Van desde el borde del sombrero hasta el pie y pueden ser: separadas, distanciadas del pie; libres, se acercan al pie pero sin llegar a tocarlo; escotadas, cuando presentan un entrante en la proximidad del pie; adnatas o adherentes, cuando tocan el pie en una pequeña parte y decurrentes, cuando recubren una parte del pie.
Los poros: son unos pequeños orificios en los que terminan los tubos y se encuentran en la parte inferior del sombrero del orden Boletales y de la familia
Polyporaceae . Los tubos pueden ser de diferente color, más o menos cortos y
difícilmente separables de la carne. Los poros pueden ser redondos, alargados, sencillos, dobles, angulosos... y estar colocados respecto al pie como las láminas, es decir, pueden ser decurrentes, adherentes, libres, escotados y separados.
Los aguijones: son unos pequeños salientes que se encuentran en la parte inferior (himenio) de algunas setas, como en las especies de la familia Hydnaceae . Pueden ser cortos o largos, gruesos o delgados, firmes o gelatinosos.
Poros de Boletus aereus
Pliegues de Cantharellus cibarius
Pliegues de Cantharellus cibarius
PIE Es la parte de la seta que sostiene al sombrero. El color, el tamaño, la forma, su estructura fibrosa o granulosa, si es hueco o macizo, son caracteres indispensables para la taxonomía.
La forma: puede ser, central, lateral o excéntrico, delgado o grueso, curvado, sinuoso, radicante, atenuado, claviforme, bulboso, fibroso, cartilaginoso o granuloso.
La superficie puede ser: reticulada, lisa, fibrilosa, escamosa, granulosa o aterciopelada.
El detalle de la inserción del pie en el sombrero es uno de los caracteres principales a observar en las setas de la subdivisión A g a r i c o m y c e t i d e a e . En algunas se separan difícilmente sombrero y pie, como ocurre en las llamadas homogéneas, en las que la carne del sombrero viene a ser continuación de la del pie (Tricholomatales ). Pero en otras se separa con relativa facilidad, como sucede en las setas llamadas heterogéneas, porque la carne del sombrero es completamente diferente a la del pie ( Agaricales : ejemplo típico son las Macrolepiotas ).
ANILLO Su formación se debe al v e l o h i m e n i a l o parcial. Suele ocurrir que algunas setas, cuando son jóvenes disponen, para proteger el himenio, de una membrana o velo himenial, que une al pie con el sombrero. Cuando el sombrero se extiende al crecer la seta, esta membrana se rompe, quedando en algunos casos parte de ella en el pie, al que le rodea dando lugar al llamado anillo. La existencia o no del anillo en el pie ayuda mucho en la determinación y clasificación de las setas.
El anillo puede ser: sencillo o doble, fijo o móvil, embudado, escamoso, harinoso, granuloso, en forma de faldita o de rueda de carro... También puede ocurrir que el anillo sea persistente o desaparezca fácilmente, lo que complica la taxonomía.
CORTINA
Está constituida por finas fibrillas en forma de tela de araña que unen el borde del sombrero con el pie. Es frecuente en los géneros Cortinarius, Inocybe, Hebeloma, Psathyrella . Esta cortina e s f u g a z , solo visible en ejemplares jóvenes y desaparece en los ejemplares adultos, persistiendo únicamente en la parte alta del pie en forma de restos filamentosos.
VOLVA Su origen está en el velo general o universal, que es una membrana que envuelve al carpóforo cuando es joven, se rompe cuando la seta crece. Si se desgarra por la parte superior, queda la parte inferior dentro de un estuche o volva. Conviene observar la parte inferior del pie de una manera atenta y detallada para apreciar la volva o sus restos, máxime teniendo en cuenta que puede estar enterrada. En los géneros Amanita y Volvariella la forma de la volva es imprescindible para su determinación correcta .
La volva puede ser : harinosa, membranosa, escamosa, de forma cónica o esférica, bulbosa, cilíndrica, fugaz o persistente.
CARNE Consistencia: puede ser fibrosa, granulosa, cartilaginosa, dura o blanda, compacta o esponjosa, coriácea, viscosa, higrófana... Color : en muchos géneros (Lactarius, Leccinum, Boletus, Cortinarius ...) el color de la carne adquiere diferentes tonos en contacto con el aire por un proceso de oxidación. También varía dependiendo de las circunstancias climatológicas. Olor : conviene oler las setas al ser recolectadas y cuando están bien conservadas. Hay setas que huelen a harina fresca (Calocybe gambosa, Entoloma lividum, Tricholoma pardinum ); con olor a anís ( Agaricus silvicola, Clitocybe odora); con olor a fenol ( Agaricus xanthodermus); con olor a ajo (Lepiota cristata, Marasmius alliaceus ); con olor fétido (Russula foetida ); con olor a almendras amargas (Hygrophorus agathosmus); con olor a cloro ( Mycena alcalina); con olor a rábano (Hebeloma); con olor a patatas crudas ( Amanita citrina ).
Sabor : puede ser dulce, amargo, picante, agradable, desagradable. HIFAS Son las unidades estructurales de la mayoría de los hongos, sobre todo en los filamentos. Presentan tabiques transversales en forma de número regular, con un poro de comunicación en el centro, son hifas septadas. El conjunto de hifas recibe el nombre de micelio, a veces forman cordones duros y resistentes subterráneos que reciben el nombre de rizomorfos. Cuando las hifas carecen de tabique se denominan aseptadas. En el estudio microscópico es conveniente observar el grosor de la pared, el diámetro del filamento, la presencia o no de bucles o fíbulas.
Tipos de hifas
ASCAS Y PARÁFISIS En los Ascomycetes, las esporas se forman en el interior de unos sacos o bolsas que pueden ser esféricos, piriformes, globosos, ovales, cilíndricos, que se llaman ascas. Las esporas allí producidas reciben el nombre de ascosporas. También es importante el número de esporas que contienen (2, 4, 8 ó numerosas), y la disposición de éstas en el interior de las ascas. En algunos casos, es preciso averiguar si el poro apical es o no amiloide, para ello efectuamos la observación del mismo con el reactivo de Melzer (si es positivo se tiñe el ápice de azul). En el himenio de los Ascomycetes se encuentran unos filamentos delgados y estériles que rodean a las ascas que reciben el nombre de paráfisis. Presentan formas muy variables: estrechos en el ápice, capitados.
Estructuras microscópicas de Ascomycetes:
Asca, ascosporas y paráfisis de Helvella atra melanosporum
Ascosporas de Tuber
PELOS Elementos estériles de variada morfología que aparecen tanto en la cutícula como en el himenio o en el pie. Frecuente en ciertos Ascomycetes y en los Gasteromycetidae bajo el nombre de capilicio.
ESPORAS Son los órganos de origen sexual encargados de perpetuar y extender la especie. Desempeñan el papel de las semillas en las planta superiores.
Color de la esporada: el conjunto de esporas que deja caer un carpóforo cuando está maduro es la esporada y tiene una gran importancia para la identificación de las especies. Para recoger la esporada de una seta que presenta pie y sombrero se necesita una cartulina blanca (para hongos con himenio oscuro) o negra (para hongos con himenio claro), se realiza un agujero en la parte central y se introduce el pie del ejemplar para recoger las esporas. Dicho pie se introduce en un vaso con agua y después de 8 ó 10 horas aparecen una impronta del color de la esporada. Atendiendo al color de la esporada se distinguen cinco grandes grupos: El color de la espora en el microscopio difiere del color de la esporada en masa. La esporada blanca bajo el microscopio es hialina.
Forma, ornamentación y tamaño de las esporas : hay esporas esféricas, ovales, globosas, poligonales, estrelladas, cilíndricas, elipsoides, helicoidales, piriformes, amigadaliformes, reniformes, citriformes, alantoides, romboidales. En cuanto a la superficie puede ser lisa, rugosa, reticulada, verrugosa, espinosa y pueden poseer tabiques, tanto longitudinales como transversales. En cuanto al tamaño varía levemente denrto de unas pocas micras. El tamaño esporal suele variar entre 3-20 micras.
Esporas de Lactarius spinosulus.
Esporas de Russula olivacea.
Esporas de Coprinus cinereus.
Esporas de Panaeolus fimicola.
CONSISTENCIA La consistencia de un hongo puede definirse como la resistencia que opone una parte de él a ser roto. Según la consistencia tendremos también diversas formas de producirse la rotura. Distinguimos varios tipos de consistencias: •
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Gelatinosa: fácilmente deformable, más o menos elástica. Ej. Tremella mesenterica, Exidia. Viscosa: sin forma estable, como un agregado mucoso. Ej. Fuligo septica. Granulosa: fácilmente desmenuzable, formada por gránulos. Ej. Russula, Lactarius . Fibrosa: carne no desmenuzable, en la que aparecen fibras en una dirección al partirla. Suele referirse al pie más que al propio carpóforo. Ej. Agaricus, Amanita . Coriácea: carne no desmenuzable, fibrosa en todas las direcciones, con toda la trama resistente. Ej. Polyporus, Trametes, Craterellus.
Tremella mesenterica
VISCOSIDAD Suele referirse al aspecto viscoso o no que presenta la cutícula del sombrero, generalmente tras la lluvia. •
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Cutícula viscosa:
aspecto
mucoso
o
mucilaginoso. Ej. Suillus, Hygrophorus, Lactarius blenius, Hygrocybe, Cortinarius . Cutícula seca: aspecto nunca mucoso o mucilaginoso incluso en tiempo húmedo. Ej. Agaricus. Cutícula semimucosa : aspecto muy brillante en tiempo húmedo, que podría parecer mucoso o mucilaginoso. Ej. Boletus purpureus. Cutícula aterciopelada: aspecto nunca húmedo o viscoso, incluso en condiciones de gran humedad ambiental. Ej. Xerocomus badius, etc.
Típico sombrero viscoso de Suillus luteus
COLOR DE LA CARNE Nos referimos en general a los cambios de color que se producen al cortarla o tocarla, no tanto al color de la carne en sí misma. • •
Inmutable: no cambia de color con el tiempo. Ej. Boletus edulis. Cambio de color : de forma rápida o lenta, debido generalmente a la transformación de ciertas sustancias por enzimas del hongo en presencia de oxígeno. Ej. Paxillus involutus, Agaricus, Leccinum, Agaricus , etc.
Los cambios de color más frecuentes son: •
Ennegrecimiento: Leccinum, Russula .
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Enrojecimiento: Agaricus, Macrolepiota rhacodes, Amanita rubescens, algunos Lactarius. Enverdecimiento: Lactarius.
Foto de Leccinum croccipodium, se puede observar como ennegrece la carne al corte. •
Azuleamiento: es una reacción de cambio de color muy típica en los “boletales”, que se manifiesta al cortar o tocar los tubos, la carne del píleo o del pie. Puede ser instantánea (Boletus purpureus) o bien producirse poco a poco (B. erythropus, Gyroporus cyanescens). En ciertas especies se produce sólo en ciertas zonas del corte (Xerocomus badius). Las sustancias responsables se denominan boletoles, que reaccionan con el oxígeno por medio de ciertas enzimas llamadas boletasas dando colores azulados.
Foto de Boletus erythropus, su carne azulea al corte.
OLOR
Sin duda es uno de los caracteres organolépticos más subjetivos, tanto por la agudeza personal como por la identificación y denominación particular de cada olor. Debe procurarse percibir el olor en fresco, al poco de recoger el ejemplar, pero a veces conviene repetir la prueba pasadas unas horas. No ha de haber otras fuentes de olores cercanas (hongos muy olorosos, cebollas, pescado, etc.). Se distinguen diversos olores: • • • • • • • • • • • • • •
Nulo: Amanita rubescens, Amanita caesarea. Harinoso: Calocybe gambosa, Clitopilus prunulus, Clitocybe . Aliáceo: Marasmius aliaceus, M. scorodinus. Anisado: Clitocybe odora, Agaricus arvensis, A. sylvicola . Putrefacto: Phallus impudicus, Boletus satanas . Desagradable, no putrefacto: Sarcodon imbricatum. A rábano: Hebeloma. A cloro: Mycena alcalina. A patata: Amanita spissa, A. citrina . Acido, fúngico desagradable : Paxillus involutus., Boletus calopus . Fúngico agradable: Boletus edulis. Afrutado: Cantharellus cibarius, Lepista nuda . Amargo: Boletus radicans. A yodo, tinta o fenol : Boletus impolitus, A. xanthoderma . SABOR
Es la sensación particular que percibimos al poner en contacto un cuerpo con la mucosa de la boca y la superficie de la lengua. Se relaciona frecuentemente con el olor, pero no necesariamente. Hay que tener en cuenta que sabor y toxicidad no significan lo mismo : Amanita phalloides , tóxica mortal, tiene un sabor suavemente dulce, y Lactarius deliciosus , comestible, un poco acre. Como ocurre con los olores, al cocer una seta el sabor puede potenciarse ( Agaricus xanthoderma, Lepista nebularis) o reducirse. • • • • • • •
Nulo: Auricularia auricula-judeae, Tremella mesenterica . Dulce: Boletus regius, Boletus edulis . Picante: Lactarius piperatus. Amargo: Tylopillus phelleus . Acre: Lactarius controversus, muchas Russula. Aromático, agradable: Agaricus campestris . Salado: Fistulina hepatica .
FORMAS DE VIDA La ecología de los hongos trata de analizar y estudiar la relación compleja y las influencias recíprocas existentes entre los hongos y los medios donde ellos se desarrollan. Los hongos como organismos vivos que son no pueden existir fuera de un medio y no pueden nacer “ex nihilo”. Al contrario, requieren unas condiciones mínimas (climáticas, de alimento,...) y la ecología es la ciencia que trata de las relaciones de los seres vivos entre si y con el medio ambiente que les rodea. No debemos olvidar que los hongos, debido a la carencia de clorofila y de pigmentos foto o quimiosintéticos, tienen que relacionarse con otros seres vivos para obtener la supervivencia buscando los nutrientes orgánicos. Los hongos deben obtener el carbono necesario para constituir sus tejidos a partir de sustancias orgánicas, ya sean vivas o muertas . Los hongos se han adaptado a todos o casi todos los medios y a todas las formas posibles de vida, tanto acuáticas como terrestres. Viven bajo la nieve, en aguas dulces y saladas, en tierra, en las arenas tórridas del desierto, sobre madera, sobre excrementos, en las dunas y arenas de las playas, sobre briófitos, formando parte de la unidad liquénica, sobre residuos quemados.
SAPRÓFITOS Un hongo saprófito (del griego sapros = putrefacto y fyton = planta) es el que se alimenta de materia orgánica muerta o en descomposición. Son los más frecuentes en determinados ecosistemas e intervienen en la mineralización de los restos vegetales para que puedan posteriormente formar parte del humus. Las bacterias y los hongos atacan y destruyen todo tipo de materia orgánica que procede de la naturaleza y, gracias a la intervención de los microorganismos heterótrofos, retornan a ella en el ciclo de la economía natural.
Kuehneromyces mutabilis Si los hongos parásitos atacan a los organismos vivos causándoles más o menos perjuicio, los hongos saprófitos contribuyen a degradar las materias muertas . A veces la distinción entre hongos parásitos y saprófitos no es muy evidente. Un
ejemplo es Kuehneromyces mutabilis que es un hongo saprófito muy eficaz que se transforma en parásito cuando encuentra un organismo (un tronco de árbol) débil. Uno de los hongos más peligrosos para los bosques de coníferas y de caducifolios es Armillaria mellea que se podría considerar un saprófito de troncos. Sin embargo, es un terrible parásito: su micelio se desarrolla desde el sustrato de materias muertas en dirección a los árboles vivos y se infiltra entre el tronco y la corteza matando al árbol.
Armillaria mellea
Sapro-parásitos, pues en principio son parásitos y después saprófitos, continuado la destrucción del árbol. Es el caso de Daedalea quercina y de Gloeophyllum sepiarum, Piptoporus betulinus o el conocido Pleutorus ostreatus.
Piptoporus betulinus
Pleurotus ostreatus
Daedalea quercina
HÁBITATS MICOLÓGICOS 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9.
Hayedos Bosques mixtos de frondosas Encinares Castañares Pinares mediterráneos Bosques de píceas Bosques ribereños Prados y pastizales Turberas
10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. 17.
Abedulares Robledales Alcornocales Pinares eurosiberianos Abetales Bosques de coníferas Sabinales y enebrales Vegetación alpina y ártica
INFECCIONES MICÓTICAS DE LA PIEL ¿QUÉ ES? Las infecciones micóticas o fúngicas están provocadas por hongos que infectan la piel. Son enfermedades frecuentes, contagiosas y curables con un tratamiento correcto.
¿CÓMO SE PRODUCE? En general, los hongos son microorganismos que crecen mejor en condiciones de humedad y calor. Por ello, muchas micosis suelen contraerse en lugares públicos como piscinas, duchas o vestuarios, lugares frecuentados por mucha gente y donde se dan las condiciones requeridas de humedad y calor. Además, los hongos pueden comportarse como gérmenes oportunistas, es decir, que se aprovechan de una situación en la que el paciente tiene una disminución de sus defensas. Esto ocurre, por ejemplo, en los pacientes de edad avanzada, en los diabéticos o en los pacientes tratados con medicamentos para el cáncer (quimioterapia) entre otros. Síntomas Según la zona de la piel afectada, las principales micosis son:
. Tinea pedis o pie de atleta: Ocurre cuando los hongos infectan los pies. La forma más habitual se manifiesta con picor, descamación y en ocasiones mal olor entre los dedos de los pies. En otras formas el aspecto es de sequedad y descamación en toda la planta del pie. . Tinea de las uñas u onicomicosis: Su frecuencia aumenta a partir de los 50 años. Cuando afecta a los pies, los primeros dedos son los más frecuentemente infectados. La forma más frecuente se manifiesta como una mancha marrón o amarillenta en el extremo de la uña, que va creciendo y progresando lentamente hacia la base de la uña. Es frecuente que la uña se haga gruesa, y que se forme un material pulverulento en su interior. En las manos, la forma más frecuente afecta a los laterales de la uña, y es típico que ocurra en personas que mojan mucho las manos. Suele acompañarse de inflamación y supuración en la piel de alrededor (paroniquia o "uñero"). . Tinea corporis o herpes circinado: Infección que afecta a cualquier área del cuerpo. Se manifiesta por placas en forma de anillo que descaman en el borde y se curan por el centro. Pueden ser únicas o múltiples. Es frecuente contraerla a partir de animales infectados (gatos, conejos, etc.). . Tinea manuum o tiña de las manos: Denominada así cuando afecta a las manos. . Tinea capitis o querion: La infección por hongos del cuero cabelludo suele manifestarse con placas muy inflamadas y supurativas. Pueden causar destrucción irreversible del cabello y zonas de alopecia (calvas) si no es tratada a tiempo.
DIAGNÓSTICO En la mayoría de los casos el dermatólogo diagnostica estas infecciones sólo con la exploración. Si existen dudas con otros diagnósticos, puede realizarse un raspado de la descamación que producen para practicar un cultivo o un examen al microscopio. En otras ocasiones puede practicarse una pequeña biopsia.
TRATAMIENTO Existen diversos antibióticos activos frente a los hongos (antifúngicos) que pueden emplearse por vía tópica (en crema) o vía oral (en pastillas). El tipo de infección y su extensión indicará una u otra vía. En general, los antifúngicos suelen tomarse durante más tiempo que los antibióticos frente a otros gérmenes como las bacterias.
MEDIDAS PREVENTIVAS Con respecto a las infecciones del los pies (pie de atleta) la prevención está dirigida al uso de chancletas en lugares públicos como duchas, piscinas, vestuarios, etc., en especial en deportistas que los frecuentan habitualmente. Además, es fácil que el hongo crezca si existen condiciones de humedad y calor, por lo que es recomendable tomarse un tiempo después de la ducha para secarse bien los pies, y debe usarse un calzado que facilite la transpiración. TIÑAS, CANDIDOSIS Y PITIRIASIS VERSICOLOR Tiña de las manos (tinea manuum). Aunque para muchos es simplemente una forma de tinea corporis, esto sólo sería aceptable para el dorso de la mano, puesto que en la palma y en los dedos, tiene caracteres clínicos propios. Los dermatofitos antropofílicos T. rubrumy T. mentagrophytes son los implicados con mayor frecuencia. En la práctica, es difícil precisar formas tan definidas como en la tiña de los pies. Aquí puede ocurrir desde una lesión anular circinada, perfecta-mente redonda, en el centro de la palma, con su periferia vesiculosa y centro descamativo; a una forma semilunar alrededor del tercer y cuarto espacio interdigital, con invasión de lascaras laterales de los tres últimos dedos, con o sin borde activo y predominio de la descamación sobre fondo eritematoso. Otras veces, aparece como una descamación difusa, irregular, tanto de la palma, dedos y dorso, muy semejante a la dermatitis irritativa, aunque con tendencia a ser unilateral. •
Casi siempre relacionada con la tinea pedís, creemos que se diagnostica con poca frecuencia porque las dermatitis irritativa y alérgica de contacto, que están omnipresentes en nuestra sociedad, hacen olvidar la posibilidad de tiña de las manos y no se lleva a cabo estudio micológico, que es obligatorio dada la dificultad del diagnóstico clínico, en todos los procesos con los que se puede establecer diagnóstico diferencial
.La dermatitis irritativa presenta sequedad e incluso descamación, es más difusa, bilateral y mejora en vacaciones. La dermatitis alérgica de contacto es pruriginosa, está en relación directa con sustancias de contacto y es casi siempre profesional. La psoriasis palmar es más seca, amiantácea y se acompaña de otras localizaciones. La forma pustulosa palmo plantar puede dar pústulas engastadas, formando placas, pero sin borde activo y con preferencia por la eminencia tenar. El eczema dishidrosiforme: ES muy frecuente y posee una clínica típica:vesículas en cara laterales de dedos, que se pueden extender a toda la palma, prurito intenso al comienzo. Es necesario precisar que este eczema, muchas veces "endógeno" y tenaz-mente crónico, es en ocasiones una autentica reacción "ide", o sea una reacción de hipersen-sibilidad a distancia de un foco micótico primitivo en otra zona del cuerpo, casi siempre unatiña de los pies. Insistimos, que en sus vesículas no hay dermatofitos, y que para considerar-lo una auténtica "ide" debe desaparecer al curar la tiña, presuntamente, responsable.
TAXONOMÍA DE LOS HONGOS Los hongos no son un grupo monofilético natural. La conclusión de que han tenido un origen evolutivo separado, está basado en muchas observaciones. Se los agrupa solo con finalidades prácticas hasta tener suficiente información de sus verdaderas relaciones evolutivas. Las características usadas para agruparlos, como su heterotrofismo, formación de esporas, presencia de quitina en sus paredes y la falta de cuerpos complejos con órganos, pueden ser el resultado de una evolución convergente y no de tener un antecesor común. El estudio de la secuencia de ácidos nucleicos, mantiene la promesa de proveer la información definitiva de su filogenia. En las plantas se trata de seguir un orden natural, agrupándolas según las estructuras involucradas en la reproducción sexual. En los hongos también, para identificarlos y clasificarlos, es necesario contar con este tipo de estructuras; en caso contrario, al hallarse solamente estructuras relacionadas con la reproducción asexual, tradicionalmente se los clasificaba como Deuteromycetes. Por razones prácticas, como se hace aún en la bibliografía básica, se siguen considerando a "todos" los grupos tradicionales de "hongos", con su clasificación apenas modificada. También al referirse a los grandes grupos, es común que se continúe utilizando la terminología de Clase (v.gr. Ascomycetes, Basidiomycetes, Zygomycetes) incluyendo lo que ahora corresponde a los distintos Phylum. Quizá el grupo que más se aleja de los hongos, cuya posición taxonómica es aun muy discutida, es el de los hongos mucilaginosos (Myxomycetes). Caracterizados por un ciclo de vida con una fase móvil y amorfa (mixameba). Según las condiciones de hidratación del medio pueden interconvertirse con una fase flagelada (1 ó 2 flagelos) formando células en enjambre. Cuando las condiciones son óptimas pueden reunirse de a dos para formar un zigoto, que puede ser primero flagelado y luego ameboide. Luego este produce un plasmodio plurinucleado. Al llegar a la madurez se convierte en uno o más esporóforos típicos.
El otro grupo grande que también siempre resultó complejo para incluirlo en el grupo, es el de los Oomycetes, que tenían como principal diferencia, la presencia de celulosa en sus paredes. Además en su ciclo (también atípico), aparecían esporas sexuales móviles con un par de flagelos: uno anterior en forma de cepillo y otro posterior en forma de látigo. La taxonomía en hongos mantiene categorías, niveles o jerarquías, las cuales agrupan a los especímenes desde grupos que comparten características desde muy generales a nivel de Reino, hasta aquellos que comparten características muy específicas, las cuales suben hasta el nivel de género, especie, variedad, etc. Cuando la muestra está identificada solo a nivel de género y no se conoce la especie, generalmente se usa: Marasmius sp. De acuerdo a la clasificación utilizada en el Diccionario de Hongos (Hawksworth et al, 1995), algunos de los niveles que más se utilizan son: REINO: GRUPO ó CLASE:
FUNGI PHYLA: BASIDIOMYCOTA ASCOMYCOTA BASIDIOMYCETES
SUBCLASE:
PHRAGMOBASIDIOMYCETIDAE HOLOBASIDIOMYCETIDAE ORDENES: Agaricostilbales Atractiellales (Terminación “LES” ) AuricularialesHeterogastridiales Tremellales SUBCLASE: HOLOBASIDIOMYCETIDAE ORDENES: Agaricales Boletales Bondarzewiales Cantharellales Cortinariales Dacrymycetales Fistulinales Ganodermatales Gomphales Hericiales Hymenochaetales Hymenogastrales Lycoperdales Melanogastrales Nidulariales Phallales Poriales Russulales Schizophyllales Sclerodermatales Stereales Thelephorales Tulanellales Tulostamatales Cada ORDEN está formado por una cantidad de FAMILIAS, por ejemplo: ORDEN: AGARICALES FAMILIA: Agaricaceae Amanitaceae Bolbitiaceae (Terminación Coprinaceae “ACEAE”) EntolomataceaeHydnangiaceaeHygrophoraceae
Pluteaceae Podaxaceae Secotiaceae Strophariaceae Tricholomataceae Los géneros, las especies y las variedades y otros niveles intermedios entre estos, no guardan ninguna terminación en común como en los niveles o categorías descritos anteriormente. Después de las últimas modificaciones hechas en el Congreso Internacional de Micología de 1994, donde se han introducido muchos cambios, el reino queda:
REINO FUNGI: Phylum Chytridiomycota Dentro de los que ahora consideramos reino Hongos, los Chytridiomycetes son los únicos que producen células móviles en su ciclo de vida, aunque con un solo flagelo posterior en forma de látigo.
Phylum Zygomycota Entre los Zygomycetes quizá los más conocidos sean algunos representantes del orden Mucorales como Mucor o Rhizopus, pero en realidad el grupo tiene integrantes que representan líneas evolutivas muy dispares. Están caracterizados por un micelio aceptado, cenocítico, con septos en la base de las estructuras reproductoras o septos secundarios. El nombre del grupo proviene de la presencia en parte de su ciclo de una zigospora característica. Pero en todo el grupo también es muy importante la reproducción asexual, incluso algunos sistemas clasificación de partes del grupo, están basados en ésto. Dentro de este grupo tenemos a un orden muy importante agronómicamente, el de las Glomales, que serán tratadas en el tema micorrizas.
Phylum Ascomycota Los Ascomycetes están caracterizados por la presencia en su ciclo de vida, de una célula fértil, llamada célula ascógena, denominada asco, que producirá endógenamente 8 ascosporas (típicamente). Esta célula ascógena proviene de un ascogonio y en general está dispuesta en una capa de células similares y en estructuras características denominadas cleistotecio, peritecio o apotecio.
Deuteromycetes (Hongos Mitospóricos) Los más conocidos quiza sean los principales degradadores de celulosa: Trichoderma y Chaetomium . Aunque ampliamente conocidos son también: Aspergillus y Penicillium .Las conidiosporas :Son más conocidas como conidios, término utilizado para describir esporas asexuales producidas especialmente por Ascomycetes, Basidiomycetes y algunos Zygomycetes. Su morfología es diversa. Se distinguen dos tipos básicos: El conidio tálico proviene directamente de la segmentación de los segmentos preexistentes de hifas (por partición). En el conidio blástico hay un alargamiento del conidio inicial antes de separarse por un septo.
Phylum Basidiomycota Los Basidiomycetes están caracterizados por la presencia de una célula fértil en su ciclo de vida, llamada basidio, que produce exógenamente 4 basidiosporas (típicamente).Normalmente originadas en tétrada, desde un basidio por medio de un esterigma que es una prolongación del ápice del basidio, desde donde, generalmente, son violentamente expulsadas, por lo que reciben el nombre de balistosporas aunque en Gasteromycetes las basidiosporas no son expulsadas violentamente, por lo que se denominan estatismosporas.Para asegurar la manutención del estado dicariótico heterocigótico del micelio secundario, una buena parte de los Basidiomycetes presentan una estructura peculiar denominada fíbula, la cual asegura que cada célula hija resultante, tenga la combinación original de núcleos distintos y compatibles. También aquí encontramos organismos que pueden habitar los más variados ambientes y vivir como saprófitos, parásitos y simbiontes.
Los otros ex integrantes del grupo fueron distribuidos en:
REINO STRAMENOPILA • • •
Phylum Oomycota Phylum Hyphochytriomycota Phylum Labyrinthulomycota
REINO PROTISTAS: •
•
Phylum Plasmodiophoromycota -Phylum Dictyosteliomycota Phylum Myxomycota -Phylum Acrasiomycota
MEDIOS DE CULTIVO En líneas generales, todos los medios de cultivo utilizados en micología han de contener los nutrientes suficientes para asegurar el desarrollo de los hongos (carbono, nitrógeno, vitaminas, oligoelementos, etc.). El pH ha de ser ligeramente ácido para facilitar el crecimiento de los hongos e inhibir al mismo tiempo el desarrollo de otros microorganismos. Se añadirán antibióticos antibacterianos para inhibir el crecimiento de las bacterias saprofitas que suelen contaminar las muestras. Los más usados son el Cloranfenicol y la Gentamicina. Se añade también actidiona (Cicloheximida) que inhibe el desarrollo de hongos saprofitos ambientales (aunque tiene el inconveniente de que inhibe también el crecimiento de Cryptococcus neoformans). Generalmente utilizaremos varios medios de cultivo diferentes, ya sea en en placa o en tubo. LOS MEDIOS EN PLACA: Tienen la ventaja de ofrecer una gran superficie para el aislamiento pero, para soportar la deshidratación durante el largo período de incubación a que van a ser sometidos (un mes o más), has de contener una gruesa capa de medio (25 a 40 ml). Son más peligrosos a la hora de su manipulación y fáciles de contaminar. LOS MEDIOS EN TUBO : Tienen una superficie de trabajo mucho más pequeña, pero ofrecen máxima seguridad en su manipulación y buena resistencia a la deshidratación y a la contaminación. •
•
En el momento de la siembra, y aun sabiendo que ninguna combinación de medios de cultivo va a cubrir totalmente el abanico de posibilidades, han de seleccionarse adecuadamente los medios a utilizar en función del tipo de muestra y de los microorganismos fúngicos sospechados. Si la muestra procede de zonas presuntamente contaminadas, es fundamental incluir, junto a los medios normales, medios que contengan sustancias inhibitorias de bacterias y hongos saprofitos (cloranfenicol, gentamicina, cicloheximida).
Tanto la muestra como las placas y tubos que se van a sembrar deben manipularse, para mayor seguridad del técnico y para evitar contaminaciones ambientales, en campana de flujo laminar. Han de rotularse adecuadamente, con el nº de la muestra y la fecha en que se realiza la siembra. Las placas se precintan con cinta de Parafilm, en la que se realizan un par de aberturas, y los tubos se dejan con el tapón de rosca a medio cerrar (para mantener la aerobiosis).
MEDIOS PARA AISLAMIENTOS PRIMARIOS: Medio Sabouraud dextrosa (SAB): El ágar Sabouraud dextrosa, modificado por Emmons, contiene un 2% de glucosa y es ligeramente ácido (pH=6.9), se considera el medio estándar para recuperar y mantener una amplia variedad de hongos que pueden aislarse en el laboratorio de micología clínica. Es el medio estándar para observar la morfología típica de los hongos, pero no es el medio ideal de crecimiento o para estudiar la esporulación. Este medio permite el crecimiento de actinomicetos aerobios, pero el SAB original (4% de glucosa), dificulta la recuperación de algunos hongos, sobre todo de Blastomyces dermatitidis .Se utiliza indistintamente en tubo o en placa. Medio Sabouraud con Cloranfenicol y Gentamicina (SAB G+C / SABHI G+C)): Es el medio SAB clásico con la incorporación de los antibióticos Gentamicina y Cloranfenicol, que permiten el crecimiento de casi todos los hongos filamentosos y levaduras al mismo tiempo que inhiben a una gran mayoría de bacterias.Se utiliza en tubo o en placa. Medio BHI y 10% de sangre de carnero (BHI sangre): El ágar BHI (Brain-Heart infusión) es un medio enriquecido que facilita la recuperación de Criptococcus neoformans (sobre todo en muestras estériles como LCR) y que se utiliza para la conversión hongo-levadura de hongos como Sporothrix sp y Paracoccidioides sp . Medio BHI con Cloranfenicol, Gentamicina, Cicloheximida y 10% de sangre de carnero (BHI sangre C+G+C): Los antibióticos añadidos inhiben el crecimiento de la mayoría de las bacterias y hongos saprofitos (aunque también de algunos hongos patógenos). La incorporación de sangre de carnero mejora el crecimiento de hongos di mórficos medios para aislamientos especiales: Medio de patata: Se prepara con pulpa de patata como base y, al ser un medio muy pobre, se utiliza para estimular el desarrollo in vitro de las estructuras de reproducción sexual de la mayor parte de los hongos. También estimula la producción de pigmentos en hongos como por ejemplo, T. rubrum. Se puede añadir zanahoria y bilis (para favorecer la obtención de clamidosporas de Candida albicans) o glucosa/dextrosa (para diferenciar Trichophyton rubrum)
Medio de arroz: Medio a base de granos de arroz blanco que se utiliza para diferencia Microsporum auduinii (que no se desarrolla en este medio) de otras especies de Microsporum Medio de Czapek: Se utiliza para estimular las características diferenciales de Aspergillus spp y para estimular la filamentación de Sporothrix schenckii. Medio de Alpiste: Es el medio indicado para detección de Criptococcus neoformans. Esta levadura es la única conocida actualmente, de interés clínico, que produce la enzima fenoloxidasa. El ágar de Alpiste contiene sustratos para esta enzima por lo que el crecimiento de Criptocco se detecta por la formación de colonias de color pardo. Medio Chromagar Candida: Es un medio diferencial que permite la identificación presuntiva de algunas especies habituales de Candida en función del color y morfología que adoptan cuando crecen en este medio. Puede utilizarse como medio para aislamiento primario.
ANTIBIOGRAMAS Sirve para registrar la susceptibilidad de un determinado germen a los ATB. Se define como el conjunto de procedimientos que permiten determinar la sensibilidad in vitro de un microorganismo frente a un determinado ATB.
HONGOS Sólo se dispone de métodos estandarizados para levaduras. Aun no para hongos filamentosos. Son sistemas de micro dilución en los que el crecimiento de la levadura se detecta por turbidez. Las técnicas de difusión tienen dificultades porque los anti fúngicos difunden mal por el agar. METODOS DIRECTOS RAPIDOS: A.- TÉCNICAS DE INMUNOMARCADO: Conjunto de técnicas utilizadas para la detección de antígenos del germen. Puede realizarse a partir de las muestras donde se eliminan los antígenos como por Ej. Las tomadas del foco de infección (es la muestra que ofrece mayor rendimiento), del suero, del LCR o de la orina (esta última es una muestra alternativa dada la facilidad de obtención y la posibilidad de su concentración). Las técnicas más utilizadas son: -Inmunofluorescencia Directa (IFD)
Consiste en la unión de un Anticuerpo marcado con Isotiocinato de fluoresceína a su Antígeno correspondiente, y la posterior detección mediante microscopía de fluorescencia. Las principales ventajas de esta técnica son su sencillez, rapidez y la posibilidad de efectuar un diagnóstico etiológico en pacientes previamente tratados con ATB En el Diagnóstico. En líneas generales esta técnica se aplica en detección de : - Estreptococo Pyogenes, - Haemophilus Influenzae, - Chlamydia Trachomatis, - Pneumocystis Carinii, - Cryptosporidium, etc. � Enzimoinmunoanálisis (EIA) = Es ampliamente utilizada en el Diagnóstico virológico por ejemplo: - Antígeno p24 del HIV; - Antigeno del VSR, - Antígeno del Rotavirus, etc. También resulta útil en el diagnóstico de otras enfermedades infecciosas causadas por: - Chlamydia Trachomatis, - Streptococo Pyogenes, - Neisseria Gonorhoeae, - Cryptococcus Neoformans, - Cryptosporidium, etc. � Aglutinación en Látex (AL) Algunas de estas Pruebas resultan útiles en el diagnóstico de Meningitis Bacteriana en niños parcialmente tratados o en aquellos donde la respuesta inflamatoria y diversos índices bioquímicos del LCR no permiten diferenciar claramente entre una Meningitis Bacteriana y una Viral. Sin embargo su uso cuantitativo es limitado en la identificación de Agentes Etiológicos. Actualmente la AL tiene un empleo importante en muestras como LCR y Suero, donde se la utiliza para la detección de antígenos fúngicos del Cryptococcus Neoformans (hongo responsable de meningitis). Dicha Prueba tiene una sensibilidad mayor a la dela Tinta China en LCR; mientras que su especificidad se ve disminuida ante la presencia de factor reumatoideo u otras proteínas de interferencia que inducen resultados de falsos positivos, los cuales pueden eliminarse tratando las muestras con una proteasa. También hay pruebas de AL diseñadas para los Estreptococos del Grupo A, las cuales, si bien son muy específicas son relativamente Sensibles, de manera que las pruebas que resultaren negativas deben ser respaldadas por un cultivo. Actualmente, en los inmunodeprimidos, tiene mucha importancia en la búsqueda de Antígenos Fúngicos la prueba de Aglutinación de Partículas de Látex (APL)
�Coaglutinación También estas Pruebas resultan útiles en el diagnóstico de Meningitis Bacteriana en niños parcialmente tratados o en aquellos donde la respuesta inflamatoria y diversos índices bioquímicos del LCR no permiten diferenciar claramente entre
