METODOS COPROP COPROPARASITOSCOPICOS ARASITOSCOPICOS Para establecer en el laboratorio clínico el diagnostico etiológico de las parasitosis de cavidades se puede recurrir a métodos parasitoscopicos a partir del estudio de materia fecal o exudado vaginal. Los primeros se conocen como métodos coproparasitoscopicos y se utilizan ampliamente. Algunas consideraciones generales sobre la obtención y manejo de la muestra de materia fecal son de utilidad, ya que lo más obvio frecuentemente resulta que se desconoce o se maneja en forma incorrecta. La mayoría de las ocasiones, la obtención de materia fecal se realiza con una evacuación emitida espontáneamente, debe recogerse en un envase limpio, teniendo cuidad de que las heces no estén mezcladas con orina, tierra y hojas vegetales. Una vez obtenida la muestra, lo recomendable es que se entregue al laboratorio en el transcurso del mismo día, y que en el tiempo antes de su traslado se mantenga a temperatura ambiente. Si por algún motivo la muestra no se puede trasladar al laboratorio el mismo día de ser emitida, se deberá conservar en refrigeración a 4°C. Pero si se guardara por varios días, entonces lo más recomendable es el uso de conservadores como el formol, para lo cual se mezclan 10 ml de formol al 10% por cada 3 a 5 gramos de materia fecal. Por último, en relación con el manejo y obtención de materia fecal para estudio parasitoscopico, se debe recordar que no está indicado usar laxantes, solamente en casos de constipación, y si se utilizan, preferentemente que sean productos de origen natural como el plantago. Los enemas en términos generales, están contraindicados, ya que los acuosos diluyen las heces, y si son de tipo hipertónico, destruyen formas parasitarias frágiles, como los trofozoitos; y los enemas aceitosos dificultan la observación microscópica. Los métodos coproparasitoscopicos se dividen en cualitativos, que son aquellos que solo nos informan si hay o no formas parasitarias en el producto estudiado, y cuantitativos que nos dan a conocer numéricamente cuantas formas parasitarias están presentes, las cuales se reportan por gramo o mililitro de heces, según la técnica que se utilice. Entre los métodos cualitativos tenemos el examen directo en fresco, fresco, el frotis fecal estandarizado de Kato, Kato, el de concentración por flotación de Faust, Faust, el Willis y el Sheater. Sheater. Los de concentración por sedimentación son: el de Ritchie, Ritchie, de sedimentación en copa o de sedimentación gravitación simple simple.. Los métodos cuantitativos son de concentración por centrifugación, flotación de Ferreira, Ferreira, por dilución de Stoll, Stoll, técnica de Beaver, Beaver , método modificado de Kato-Miura y la técnica de Kato-Katz.
La prueba de Beal o prueba enteral se utiliza en la obtención de contenido duodenal, para la búsqueda de protozoarios y helmintos de localización en duodeno. Para ello por vía bucal se hace llegar la capsula de beal, la cual posee un hilo trenzado de nylon y algodón con un extremo libre que se fija a la mejilla del paciente. La capsula permanece en el duodeno durante un tiempo, para posteriormente extraer y exprimir el hilo, a fin de colectar el material impregnado, mismo que se observa microscópicamente. El método de la cinta adhesiva de celulosa engomada, o técnica de Graham, consiste en utilizar cinta adhesiva transparente para tomar muestras de la región anal y perianal, misma que se coloca posteriormente sobre un portaobjetos para buscar formas parasitarias microscópicas. El tamizado de heces es un procedimiento de utilidad para recuperar formas parasitarias macroscópicas; se recomienda especialmente para búsqueda de proglotides de Taenia. Para su realización se colocan os tamices uno sobre otro, de tal manera que el de malla más abierta quede hasta arriba y el de malla más cerrada hasta abajo. A continuación, las heces de 24 horas de un paciente se tamizan al chorro de agua, para ayudar al paso por las mallas, y las formas parasitarias son retenidas, se colectan y se observan detalladamente para establecer el diagnóstico correcto. El de Faust es un excelente método, pero no detecta formas parasitarias pesadas, por ser un método de concentración por flotación. Coproparasitoscopico directo en fresco: se realiza con heces recién emitidas, está indicado para identificar trofozoito y larvas. Se utilizan promedio 50 mg de materia fecal que se diluyen un una gota de solución salina isotónica, se coloca un porta objetos y se procede con la observación al microscopio, se agrega lugol. Coproparasitoscopico de concentración por flotación con salmuera: técnica cualitativa, denominada método de Willis, se realiza con una solución saturada de cloruro de socio. La materia fecal se homogeniza en una pequeña cantidad de salmuera, y a continuación se aplica suficiente solución de salmuera, hasta el borde del frasco. Se deja reposar 30 min, se coloca el porta objetos y se colecta el material flotante, luego se procede a la lectura microscópica. Coproparasitoscopico de concentración por flotación simple en solución saturada de sacarosa: esta técnica también es cualitativa y se realiza de la misma forma que la de Willis, pero se utiliza solución de sacarosa de 1200 °Be. Coproparasitoscopico de concentración por centrifugación flotación, técnica de Faust: técnica cualitativa, muy utilizada en base al uso de sulfato de zinc con una densidad de
1180 °Be. Se combina la concentración por flotación con la solución hipertónica más el uso de centrifugación. Se homogeniza la muestra con agua, se procede a centrifugar y lavar dos veces, y finalmente se homogeniza con la solución de sulfato, y se colecta el material a observar del sobrenadante con un asa de alambre. Método de Ritchie: técnica cualitativa que se realiza con formol éter. Se utiliza una solución de formalina al 10% para fijar a los parásitos y el éter, para facilitar la liberación de las formas parasitarias de la materia fecal. Se homogeniza la muestra con solución salina isotónica y se centrifuga, se lava y se obtiene el sedimento. Método de Stoll: técnica cuantitativa, con la aplicación de solución de hidróxido de sodio 0.1N. Se realiza utilizando probetas y pipetas calibradas y haciendo una suspensión de materia fecal con solución de hidróxido de sodio 1:15. Se toma el material para observación de la parte media de la probeta, se coloca en el portaobjetos, se cubre, se lee toda la preparación, se cuentan todas las formas parasitarias y se obtiene el factor de la técnica, para luego multiplicar el número de formas parasitarias de la preparación por el Factory se reporta número de huevos por mililitro de heces. Coproparasitoscopico por frotis grueso de Kato-Miura: técnica cuantitativa, se realiza con cubreobjetos de celofán impregnado con solución de verde de malaquita y glicerina. Con la glicerina se aclaran las formas parasitarias y el verde de malaquita se usa como contraste. El frotis de heces se lleva a cabo con 50 mg de materia fecal, previo filtrado a raves de una malla de alambre. Para el reporte se hace un regla de tres para llevar a un gramo y se reporta el número de formas parasitarias por gramo de heces. Kato-Katz: técnica cuantitativa que se realiza exactamente igual que la anterior, la variante es que se utiliza un cartón de 3 mm de grosor, con un orificio de 6 mm de diámetro, para colectar una muestra de heces ya tamizada, llenando el orificio del cartón.
Juan Romario Martínez Cervantes