METODO PARA LA VALIDAR TECNICAS VOLUMETRICAS EN 5 FASES Omar A Valencia Qco, David Gómez Qco, Programa Programa de Química, Facultad de Ciencias Básicas y Tecnologías, Tecnologías, Universidad del Quindío. Avenida Bolívar Bolívar calle 12 Norte Armenia, Laboratorio ALISCCA Ltda Cr 13 #15-50 Pereira.
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Abstract Abstract In this article we suggest a method for the validation of volumetric tactics based on the use of a five (5) steps method, tests made for a single operator, operator, test of unknown unknown samples, test of true samples, identification of the rudeness of the method and collaboration tests. Resumen En este artículo se propone la metodología para la validación de técnicas volumétricas por medio de cinco (5) fases, fases, análisis realizados realizados por un operador, operador, análisis de muestras muestras desconocidas desconocidas preparadas por otro operador, operador, análisis de matrices reales, identificación identificación de robustez y ensayos de colaboración. Key words: validation, rudeness, accuracy, volumetric method.
INTRODUCCION
(pre (preci cisi sión ón), ),
Un labo laborat ratori orio o químic químico o analí analític tico o debe debe tene ener
como
pro propós pósito ito
prin princi cipa pal, l,
la
prod produc ucci ción ón de resu result ltad ados os de cali calida dad d excelentei. Este propósito, solo se puede lograr lograr media mediante nte el esta estable blecim cimien iento to de métodos
bien
aprop propia iad damente ente desarrollad lados.
definidos
y
documen mentad tados La
validación
es
y la
exac exacti titu tud d
(por (porce cent ntaj aje e
de
recuperac recuperación) ión),, incertidu incertidumbre mbre,, linealid linealidad ad (ran (rango go
diná dinámi mico co
line lineal al)) ivv,
etc.
Este
articulo articulo propone propone un método método compuest compuesto o de cinco (5) fases que se complementan entre si para validar con un alto nivel de complejidad cualquier método de análisis volumétrico.
PROCEDIMIENTO
confirmación por análisis y suministro de evidencia objetiva de que se cumplen los requ requis isit ito os
part partic icul ula ares res
para para
el
uso
Antes de comenzar comenzar la FASE 1, se debe implementar
y
documentar
especi especific fico o de una una metod metodolo ologí gía a ii,iii. Se
apropiadamente las metodologías de las
logra al determinar atributos del método
técn técnic icas as a vali valida dar, r, se debe debe cali calibr brar ar y
como como:: lími límite te de dete detecc cció ión, n, lími límite te de
recalibra recalibrarr el materia materiall volumétr volumétrico ico clase clase
cuantifi ificación,
tipo tipo A, la balan balanza za anal analíti ítica, ca, se deben deben
reproducibi ibilidad
revisar revisar los certific certificados ados de los patrones patrones
primarios a utilizar durante la validación,
diferentes tipos de error inducido por la
la
preparación de los lotes o exceso de
calidad
del
agua
destilada
y/o
desionizada.
confianza del operador al conocer el
FASE 1 CARACTERISTICAS DE UN OPERADOR
volumen a gastar de valorante para cada lote. Es por esta razón que la siguiente fase se centra en muestras desconocidas
Esta parte del procedimiento de la
preparadas por otro operador (el cual
validación requiere la determinación del
llamaremos operador 2).1*
límite de detección, el sesgo del método, el error
sistemático,
y
la precisión
obtenida por el único operador vi. Se usa en un rango de concentraciones que
FASE 2 ANÁLISIS DE MUESTRAS PREPARADAS
POR
OTRO
OPERADOR
debe ser comprendida desde muy bajas
Esta
(importante para determinar el limite de
validación
detección inferior) hasta concentraciones
estándares
altas preferiblemente ligeramente por
concentraciones
encima del limite establecido en normas
donde el valor es desconocido por el
o decretos en caso que exista.
analista.
Esta fase se
desarrolla analizando
diariamente un (1) lote de muestra
fase
del
procedimiento
requiere
el
preparados
Se
por
análisis
de de
a
diferentes
otro
operador,
analiza
cada
lote
desconocido siguiendo el procedimiento estándar para el método.
durante 6 días, obteniendo así como
En
mínimo seis (6) lotes de concentraciones
repeticiones de cada lote, (tres (3) en
escogidas.
caso de obtener diferencias marcadas
Cada
lote
debe
estar
esta
fase
realizan
dos
entre
Para la determinación de la precisión del
operación debe realizarse durante seis
método se recomienda preparar un único
(6) días, el operador 2 que preparo los
lote
lotes
concentración
similar
a
la
no
repeticiones).
(2)
compuesto por siete (7) repeticiones.
de
ambas
se
puede
transmitir
Esta
las
presente en una muestra natural del
concentraciones preparadas al operador
analito determinado con el método, Para
principal hasta finalizado el lote seis (6).
el análisis de este lote se debe hacer 20 repeticiones. 1∗
Al realizar esta fase, el desarrollo del método
puede
verse
sometido
a
La fase uno ( 1), fase dos (2) y robustez fase cuatro (4) de este articulo se basan en lo propuesto en el standar methods 20th Edition.
En
esta
fase
se
eliminan
los
inconvenientes presentados en la fase 1 (errores en la preparación de estándares y exceso de confianza), y se conoce la certeza que tiene el método por medio del % de recuperación de estándares.
bajas y cuatro (4) de concentraciones altas. En
esta
fase
las
observaciones
realizadas por el operador ayudan a encontrar posibles debilidades en la técnica. Lo cual hace necesario la fase
Sin embargo una matriz real del analito
cuatro (4) para determinar la robustez de
puede
muchos
la técnica, y así conocer como pequeños
factores, que pueden alterar o no la
cambios en el procedimiento pueden
respuesta del método como el resultado,
afectar los resultados.
verse
afectada
por
es por esta razón que la fase tres (3) se basa en el análisis de matrices reales de
FASE CUATRO (4) ROBUSTEZ
alta y baja concentración del analito
En esta fase se estudia la capacidad del
determinado por el método.
procedimiento
FASE
TRES
(3)
ANALISIS
DE
MATRICES REALES
inafectado
para por
deliberadas
permanecer
pequeñas,
variaciones
pero
en
los
parámetros del método. Estos datos
En esta fase el operador debe analizar
proporcionaran una indicación de su
matrices
fiabilidad durante su uso normal.
reales
de
baja
y
alta
concentración del analito vii, teniendo en cuenta los puntos críticos donde el método elimina interferencias, ya que al analizar muestras de alta concentración es
posible
que
estas
presenten
alteraciones en el punto final de la técnica **.
lote
y debe
ser
analizada
por
duplicado, en total se recomiendan ocho (8) lotes, cuatro (4) de concentraciones *
recomienda
seleccionar
los
puntos
críticos del procedimiento, estos puntos comúnmente son: adición de soluciones buffers, ajustes de pH, cantidad de indicador
adicionada,
adición
de
eliminadores de interferencias.
En esta fase cada matriz equivale a un (1)
Para la realización de esta fase se
* La Fase tres (3) se basa en lo propuesto en el Protocolo estandarización métodos analíticos del IDEAM 1999
Una vez se seleccionan los pasos a variar se analiza un (1) lote en donde cada volumen o según sea el caso, será alterado levemente mientras el resto del procedimiento
permanece
constante.
Esta información se analiza por medio de matrices.
Una robustez apropiadamente conducida
matrices reales, el operador no debe
puede
del
conocer cuales lotes son de estándares y
procedimiento en los cuales el rigor es
cuales son muestras reales durante los
crítico,
del
análisis. Comparando los resultados del
pequeñas
laboratorio externo con los del operador
probar
así
los
como
procedimiento
pasos
los
pasos
donde
variaciones son permisibles.
se
Tanto en la fase 1 como 2, el método que se esta validando se encuentra sujeto a errores
sistemáticos
propios
del
ambiente de trabajo. En la fase cinco (5)
determina
concordancia
el
entre
porcentaje la
precisión
de del
método para estándares preparados y la precisión
del
método para matrices
reales.
ensayos de colaboración, se eliminan
Con esta ultima fase se conoce la
estos errores por medio de un operador
magnitud
externo.
sistemático que tienden a propagarse y
FASE
CINCO
(5)
ENSAYOS
DE
COLABORACION Consiste
en
estándares
analizar
preparados
muestras a
de
diferentes
de
los
errores
de
tipo
afectar la fase uno (1) y la fase dos (2) de la validación.
DISCUSION DEL METODO Es imprescindible resaltar la importancia
concentraciones dentro de los límites de
de realizar la fase 1, la fase 2 y
detección hallados en la fase 1, en otros
ensayos de colaboración. En la fase uno
laboratorios en donde la técnica ya fue
el
validada.
estándares y esto puede llevar a errores
Y
conjuntamente
analizar
analista
prepara
de concentración.
inconscientemente el analista al conocer
lote, a cada lote se le debe realizar dos (2) repeticiones, (tres (3) en caso de obtener
diferencias
marcadas
entre
ambas repeticiones). Se deben realizar un total de 12 lotes en días diferentes, donde seis (6) lotes deben provenir de estándares preparados, y (6) deben ser
dado
los
de
laboratorio externo es considerada un
tipos,
analiza
muestras naturales de diferentes rangos
En esta fase cada matriz enviada por el
varios
y
los
que
la concentración del estándar puede tender a buscar el valor del volumen que esta gastando en la valoración perdiendo así objetividad e imparcialidad en el análisis.
Situación que
la fase dos
corrige, ya que cuando otro analista prepara el estándar y no revela su concentración principal
ya
hasta ha
que
el analista
terminado
las
valoraciones, se evita el exceso de
confianza y se recupera la imparcialidad
Este
y objetividad del análisis así como su
compuesto de cinco (5) fases que se
capacidad
complementan entre si para validar con
de tomar
decisiones.
Sin
articulo
propone
un
método
embargo puede que exista una fuente de
un alto nivel de complejidad cualquier
error
método de análisis volumétrico.
desconocida
por
ejemplo
un
porcentaje de pureza del estándar menor al óptimo, con este tipo de situaciones la
RECOMENDACIONES
fase uno no podría determinar la causa
Se recomienda utilizar este método para
del problema
las
y
la preparación
del
estándar por otro analista tampoco. Es por esto que se realizan ensayos de colaboración
con
otros
permitiendo
conocer
y
laboratorios, evaluar
el
validaciones
de
métodos
volumétricos.
AGRADECIMIENTOS Agradecimientos
al
Ms
Gonzalo
funcionamiento del método estudiando la
Hernández del laboratorio de aguas de la
precisión, nivel de sesgo y porcentaje de
Universidad del Quindío.
concordancia con otros validados.
métodos
ya Agradecimientos a la Unidad operativa de salud publica seccional Risaralda el señor Hernando Osorio.
CONCLUSION
BIBLIOGRAFIA
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http://web.usach.cl/ima/ngras.htm visitada el día 16 de octubre de 2008, 8:56 pm (hora Colombia). ii
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